skripsieprints.umm.ac.id/32891/1/jiptummpp-gdl-nenihartin-44517-1-pendahul-n.pdfskripsi sehingga...
TRANSCRIPT
SKRIPSI
NENI HARTINAH DWITATI
PENGARUH DOSIS KOMBINASI EKSTRAK
ETANOL DAUN Annona squamosa Linn. dan
Persea americana Mill. TERHADAP KADAR
KOLESTEROL TOTAL
(Pada Tikus Rattus novergicus Hiperkolesterol yang
Diinduksi Pakan Aterogenik)
PROGRAM STUDI FARMASI
FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG
2016
ii
iii
iv
KATA PENGANTAR
Bismillahirrohmanirrohim
Assalamualaikum warohmatullahi wabaraokatuh
Puji syukur tercurahkan kepada Allah SWT, Tuhan semesta alam karena
berkat rahmat dan hidayahnya, penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul
“Pengaruh Dosis Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Annona Squamosa linn.
dan Persea americana mill. Terhadap Profil Lipid (Pada Kadar Kolesterol
Total Tikus Rattus novergicus Hiperkolestremia)”.
Skripsi ini diajukan untuk memenuhi persyaratan dalam mencapai gelar
Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas
Muhammadiyah Malang. Dalam penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari
peranan pembimbing dan bantuan dari seluruh pihak. Oleh karena itu, dengan
segala kerendahan hati, penulis ingin mengucapkan banyak terima kasih kepada:
1. Allah SWT, Tuhan semesta alam yang memberikan rahmat, nikmat dan
hidayahnya kepada umatnya, Rasulullah SAW, yang sudah menuntun kita
menuju jalan yang lurus.
2. Ibu Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt., selaku Dosen Pembimbing I, dan bapak
Ahmad Shobrun Jamil, S.Si., MP selaku Dosen Pembimbing II disela
kesibukan beliau masih bisa meluangkan waktu untuk membimbing
danmemberi pengarahan dan dorongan moril sampai terselesaikannya skripsi
ini.
3. Ibu Uswatun Chasanah., Apt.,M.Kes. dan Ibu Engrid Juni Apt., S.Farm selaku
Dosen Penguji yang telah banyak memberikan saran dan masukan serta
motivasi demi kesempurnaan skripsi ini.
4. Bapak Yoyok Bekti Prasetyo, S.Kep., M.Kep., Sp.Kom. selaku Dekan Fakultas
Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan
kesempatan penulis belajar di Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas
Muhammadiyah Malang.
5. Ibu Nailis Syifa’, S.Farm.,M.Sc.,Apt. selaku Ketua Program Studi Farmasi
Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan motivasi dan
v
kesempatan penulis belajar di Program Studi Farmasi Universitas
Muhammadiyah Malang.
6. Ibu Sovia Aprina Basuki, M.Si., Apt. selaku Kepala Laboratorium Program
Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang telah membantu,
mengarahkan dan memberikan kemudahan sarana dan prasarana sehingga
skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik.
7. Mbak Bunga selaku laboran yang telah banyak membantu serta memberikan
sarana dan prasarana sehingga penelitian skripsi ini dapat terselesaikan dengan
baik.
8. Staff dan Laboran Laboratorium Klinik Rumah Sakit Pendidikan Universitas
Muhammadiyah Malang yang telah berkenan membantu penelitian sehingga
skripsi ini terselesaikan dengan baik.
9. UPT. Materia Medika Batu yang telah membantu kelancaran penelitian
sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik.
10. Dian Ernawati., S.Farm., M.Farm., Apt. selaku dosen wali yang telah berkenan
membimbing, berdiskusi serta memberikan masukan sampai terselesaikannya
skripsi ini.
11. Untuk semua para bapak dan ibu dosen Program Studi Farmasi Universitas
Muhammadiyah Malang, yang telah memberikan waktunya untuk
mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat bermanfaat. Terutama Ibu Sendi Lia
Yunita, S.Farm.,Apt. yang telah bersusah payah membantu jalannya ujian
skripsi sehingga kami dapat melaksanakan ujian skripsi dengan baik.
12. Staf Tata Usaha Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang
terima kasih karena telah banyak membantu dalam hal administrasi.
13. Orang tua tercinta, Bapak Tamsi, S.Pd dan Ibu Sri Murwati S.Pd , yang tiada
hentinya memotivasi dalam segala hal, dengan sabar mendoakan untuk
kesuksesan putrinya. Terima kasih banyak atas didikan, kerja keras, dan kasih
sayangnya untuk membuat anak-anaknya bahagia serta mendapatkan ilmu
yang bermanfaat.
14. Saudara dan keluarga besar yang selalu menjadi alasan utama untuk terus
semangat mengerjakan skripsi ini.
vi
15. Buat sahabat kelompok skripsi, Ratna Yulia, Kartika Puspa, dan Alfy Afifa
sebagai partner kerjasama yang mau saling membantu dan selalu kompak
menyelesaikan tiap tahapan penelitian ini.
16. Teman-teman angkatan 2012 yang tiada hentinya memberikan motivasi, dan
pecutan semangat untuk terus berjuang.
17. Teman-teman farmasi F yang selalu jadi penyemangat ketika penulis
mengalami kejenuhan mengerjakan skripsi, terimakasih atas kebaikan kalian.
18. Seluruh warga kantin dan jajanannya yang selalu dijadikan tempat favorit
penulis untuk mengerjakan skripsi.
19. Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya, penulis mohon maaf dan
terima kasih yang sebesar-besarnya. Semua keberhasilam ini tak luput dari
bantuan, doa yang telah kalian semua berikan
Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini, penulis tidak
mampu membalas dengan apapun. Semoga amal baik semua pihak mendapat
imbalan dari Allah SWT. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi pembaca dan
menambah ilmu pengetahuan. Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari
kesempurnaan, oleh karena itu penulis mengharapkan kritik dan sarannya demi
kesempurnaan skrispsi dan dapat digunakan untuk penelitian selanjutnya.
Malang, 01 Juni 2016
Peneliti,
Neni Hartinah Dwitati
vii
RINGKASAN
Dislipidemia merupakan penyebab penyakit jantung koroner dan stroke
iskemik utama dimana terjadi peningkatan kadar kolesterol total >200 mg/dL,
pengingkatan low-density lipoprotein (LDL) >100 mg/dL dan penurunan high-
density lipoprotein (HDL) ≤60 mg/dL. American Association of Clinical
Endocrinologist (AACE) mengusulkan resiko penyakit jantung dapat turun apabila
kadar kolesterol total dibawah 200 mg/dL.
Upaya penurunan kadar kolesterol salah satunya yaitu dengan terapi
farmakologis menggunakan obat antihiperlipidemia. Simvastatin merupakan drug
of choice obat antihiperlipidemia golongan statin yang paling sering di gunakan
karena paling poten dalam menurunkan LDL.
Penggunaan bahan tanaman sebagai penurun kolesterol pun sudah lama di
lakukan oleh masyarakat sejak dulu. Saat ini, produk-produk bahan alam dalam
bentuk multi compound lebih dipilih karena efektifitasnya dapat meningkat apabila
bekerja secara potensiasi dalam bentuk kombinasi dibandingkan dengan pemberian
ekstrak tunggal. Ekstrak etanol daun P. americana yang mengandung beberapa
fitokonstituen diantaranya luteolin, rutin, kuersetin dan apigenin yang merupakan
golongan senyawa flavonoid dapat bekerja sebagai antioksidan yang berperan
dalam pencegahan atherogenesis dengan menghambat pembentukan ox-LDL,
sedangkan ekstrak etanol A. squamosa yang mengandung acetogenin dapat
berperan dalam menghabat uptake kolesterol di intestin dan mencegah interaksi
antara reseptor CD36 dengan ox-LDL yang dapat mencetuskan sinyal pro-
atherogenik. Ekstrak etanol daun P. americana dan A. squamosa dengan berbagai
fitokonstituennya dapat bekerja sinergis sehingga efektifitas penurunan kadar
kolesterol total dapat meningkat.
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian dosis
kombinasi ekstrak etnol daun P. americana dan A. squamosa terhadap penurunan
kadar kolesterol total tikus putih jantan Rattus norvegicus hiperkolestremia serta
memperoleh dosis optimum kombinasi ekstrak yang dapat menurunkan kadar
kolesterol total pada R. Norvegicus hiperkolestremia.
Dalam penelitian ini digunakan metode posttest only control group design,
dimana tiap kelompok perlakuan mendapatkan dosis P. americana : A. squamosa
masing-masing 125 mg/KgBB : 125 mg/KgBB (P1) ; 125 mg/KgBB : 250
mg/KgBB (P2) ; 250mg/KgBB : 125 mg/KgBB (P3) selama 21 hari ; sedangkan
kelompok kontrol positif mendapatkan simvastatin 0,018 mg/200gBB selama 21
hari ; kelompok kontrol negatif mendapatkan larutan pembawa CMC-Na 0,5%
selama 21 hari ; kelompok hewan sehat diberi minum dan pakan standar ad libitum
selama masa penelitian.
Hasil analisis statistik menggunakan one way anova menunjukkan adanya
penurunan kadar kolesterol total pada tikus putih R. Norvegicus, namun tidak
signifikan secara statistik. P=0,062 (P>0,05). Sedangkan hasil skrining fitokimia
pada ekstrak etanol daun P. americana dan A. squamosa menunjukkan adanya
senyawa golongan flavonoid, saponin triterpenoid, antrakuinon dan alkaloid.
Pada penelitian ini peneliti menyarankan perlunya tambahan waktu induksi
pakan aterogenik dan menambah waktu masa terapi kombinasi ekstrak, serta
perlunya mengantisipasi kemungkinan kematian hewan coba selama masa
penelitian berlangsung dengan cara melebihkan jumlah hewan coba.
viii
DAFTAR ISI
Halaman
KATA PENGANTAR ........................................................................... iv
RINGKASAN ........................................................................................ vii
ABSTRAK .............................................................................................. viii
ABSTRACT ............................................................................................ ix
DAFTAR ISI .......................................................................................... x
DAFTAR TABEL .................................................................................. xiii
DAFTAR GAMBAR ............................................................................. xiv
DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................... xv
DAFTAR SINGKATAN ........................................................................ xvi
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................. 67
BAB I PENDAHULUAN ...................................................................... 1
DAFTAR ISI
BAB I PENDAHULUAN ....................................................................... 1
1.1 Latar Belakang Masalah ................................................................... 1
1.2 Rumusan Masalah .............................................................................. 3
1.3 Tujuan Penelitian ............................................................................... 4
1.3.1 Tujuan Umum ........................................................................... 4
1.3.2 Tujuan Khusus .......................................................................... 4
1.4 Manfaat ............................................................................................. 4
1.4.1 Manfaat akademik ................................................................... 4
1.4.2 Manfaat praktis ........................................................................ 4
1.4.3 Manfaat masyarakat ................................................................. 4
1.4.4 Manfaat jangka panjang .......................................................... 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................. 5
2.1. Tinjauan Tentang Tanaman .............................................................. 5
2.1.1 Tinjauan tentang Persea americana ......................................... 5
2.1.2 Tinjauan Tentang Annona squamosa ....................................... 9
2.2 Tinjauan Tentang Ekstraksi ............................................................... 13
2.2.1 Maserasi ................................................................................... 15
ix
2.2.2 Perkolasi .................................................................................. 16
2.2.3 Soxhletasi ................................................................................ 16
2.3. Tinjauan Tentang Lipid .................................................................... 16
2.4. Tinjauan tentang Biosintesis Kolesterol ............................................ 17
2.5. Tinjauan Tentang Lipoprotein ........................................................... 19
2.6. Tinjauan Tentang Jalur Metabolisme Lipoprotein ............................. 22
2.7. Tinjauan Tentang Hiperkolestremia .................................................. 23
2.8. Tinjauan Tentang Metode Pengukuran Kadar Kolesterol ................. 24
2.9. Tinjauan Tentang Hewan Coba Rattus norvegicus ............................ 26
2.10 Aklimatisasi Hewan Coba................................................................. 27
BAB III KERANGKA KONSEPTUAL .................................................. 29
3.1 Kerangka Konsep ............................................................................... 29
3.2 Uraian Kerangka Konsep ................................................................... 30
BAB IV METODOLOGI PENELITIAN ................................................. 33
4.1 Jenis Penelitian .................................................................................. 33
4.2 Tempat dan Waktu Penelitian ............................................................ 33
4.2.1 Ekstraksi Tanaman ................................................................... 33
4.2.2 Pengujian aktivitas .................................................................. 33
4.3 Populasi Sampel ................................................................................. 33
4.3.1 Populasi ................................................................................... 33
4.3.2 Sampel dan Besar Sampel ........................................................ 33
4.4 Alat dan Bahan .................................................................................. 34
4.4.1 Alat .......................................................................................... 34
4.4.2 Bahan ........................................................................................ 34
4.5 Pengumpulan Data ............................................................................. 35
4.5.1 Ekstraksi .................................................................................. 35
1. Ekstraksi daun A. squamosa ................................................... 35
2. Ekstraksi daun P. americana ................................................. 36
4.5.2 Persiapan Hewan Coba ............................................................ 37
4.5.3 Persiapan Bahan Uji ................................................................ 38
4.5.4 Penetapan Dosis Simvastatatin ................................................. 38
4.5.5 Penetapan Dosis Kombinasi Ekstrak P. americana dan
x
A. squamosa ....................................................................................... 38
4.6.Prosedur kerja ..................................................................................... 40
4.7 Pengukuran kadar kolesterol Total .................................................... 40
4.8 Analisis Data ....................................................................................... 41
4.9 Alur Penelitian .................................................................................... 42
BAB V HASIL PENELITIAN ................................................................. 44
5.1 Pembuatan Simplisia Kering Daun P. americana dan A. squamosa .. 44
5.2 Hasil Pembuatan Ekstrak ................................................................... 44
5.2.1 Hasil Pembuatan Ekstrak Etanol daun P. americana ............ 44
5.2.2 Hasil Pembuatan Ekstrak Etanol Daun A. squamosa .............. 45
5.3 Penetapan Komposisi Eluen .............................................................. 46
5.4 Hasil Skrining Fitokonstituen Ekstrak Etanol Daun P. americana
dan A. squamosa ................................................................................
....................................................................................................... 47
5.4.1 Identifikasi Senyawa Golongan Flavonoid ............................. 48
5.4.2 Indentifikasi Senyawa Golongan Triterpenoid ......................... 49
5.4.3 Indentifikasi Senyawa Golongan Antrakuinon ........................ 50
5.4.4 Indentifikasi Senyawa Golongan Alkaloid ............................... 51
5.5 Hasil Penimbangan Sisa Pakan Atherogenik Pada Hewan Coba ...... 52
5.6 Pengambilan Sampel Darah ............................................................... 54
5.7 Pengaruh Pemberian Dosis Kombinasi Ekstrak Terhadap
Penurunan Kadar Kolesterol Total ................................................... 54
5.8 Hasil Analisis Statistik ...................................................................... 56
BAB VI PEMBAHASAN ........................................................................ 57
BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ................................................ 66
DAFTAR PUSTAKA ............................................................................... 67
xi
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
II.1 Jumlah komponen fitokimia yang terkandung dalam ogan daun,
buah dan biji P. americana .............................................................. 8
II.2 Fitokonstituen daun srikaya ............................................................. 12
II.3 Indeks polaritas pelarut untuk ekstraksi .......................................... 14
II.4 Tipe lipoprotein pada plasma normal .............................................. 19
II.5 Klasifikasi kadar kolesterol pada orang dewasa menurut
American Heart Association (AHA) ............................................... 24
II.6 Parameter normal tikus dewasa ....................................................... 26
IV.1 Alat .................................................................................................. 34
IV.2 Bahan ............................................................................................... 34
IV.3 Perhitungan dosis kombinasi ekstrak P. americana dan
A. Squamosa .................................................................................... 39
V.1 Hasil pembuatan ekstrak etanol daun P. americana dan A. squamosa 45
V.2 Hasil skrining fitokimia ekstrak daun P. americana dan A. squamosa 48
V.3 Profil rata-rata dan SD berat badan hewan coba sebelum dan
Sesudah induksi pakan aterogenik dan perlakuan ........................... 53
V.4 Kadar kolesterol total pada tikus jantan Rattus norvegicus ............ 55
xii
DAFTAR GAMBAR
Gambar Halaman
2.1 Daun Persea americana Mill. ........................................................ 5
2.2 Daun Annona squamosa ................................................................. 10
2.3 Garis besar jalur biosintesis kolesterol .......................................... 18
2.4 Mekanisme yang mendasari pengaruh penyakit kardiovaskuler ..... 21
2.5 Jalur eksogen dan endogen metabolisme lipid ................................ 22
2.6 Mekanisme reaksi metode pengukuran kadar kolesterol ................ 25
3.1 Kerangka konseptual ....................................................................... 29
4.1 Bagan ekstraksi daun Annona squamosa......................................... 36
4.2 Bagan ekstraksi daun Persea americana ......................................... 37
4.3 Persamaan persen rendemen ekstrak .............................................. 37
4.4 Persamaan perhitungan dosis simvastatin ....................................... 38
4.5 Bagan alur penelitian ....................................................................... 42
5.1 Ekstrak kental daun P. americana ................................................... 46
5.2 Ekstrak kental daun A. squamosa .................................................... 46
5.3 Pola pemisahan noda ekstkrak daun A. squamosa .......................... 47
5.4 Pola pemisahan noda ekstkrak daun P. americana ......................... 47
5.5 Noda pada uji senyawa golongan flavonoid daun P. americana ... 48
5.6 Noda pada uji senyawa golongan flavonoid daun A. squamosa...... 49
5.7 Noda pada uji senyawa golongan triterpenoid daun P. americana . 49
5.8 Noda pada uji senyawa golongan triterpenoid daun A. squamosa .. 50
5.9 Noda pada uji senyawa golongan antrakuinon daun P. americana . 51
5.10 Noda pada uji senyawa golongan antrakuinon daun A. squamosa .. 51
5.11 Hasil reaksi pengendapan ekstrak P. americana ............................. 52
5.12 Hasil reaksi pengendapan ekstrak A. squamosa .............................. 52
5.13 Grafik berat badan hewan coba ................................................................. 53
5.14 Proses pengambilan sampel darah ................................................... 54
5.15 Kadar kolesterol total pada tikus jantan Rattus norvegicus ............. 55
xiii
LAMPIRAN
Lampiran Halaman
1. Daftar riwayat hidup ........................................................................ 71
2. Surat pernyataan ............................................................................. 72
3. Lampiran surat determinasi tanaman Alpukat ................................. 73
4. Lampiran surat determinasi tanaman Srikaya .................................. 74
5. Perhitungan dosis ............................................................................. 75
6. Data sisa pakan atherogenik ........................................................... 78
7. Data berat badan hewan coba .......................................................... 79
8. Hasil pengukuran kadar kolesterol total .......................................... 80
9. Hasil pengolahan data SPSS 18.0 uji One Way Anova ................... 81
10. Dokumentasi penelitian ................................................................... 82
xiv
DAFTAR SINGKATAN
AACE : Americam Association of Clinical Endocrinologist
AAP : 4-aminoantipyrin
ABTS : 2,2-azinobia-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphate)
ACAT : acyl-CoA cholesterol acyltransferase
AHA : American Heart Association
ALB : Asam Lemak Bebas
APO : Apolipoprotein
AS : Annona squamosa
BPOM : Balai Pengawasan Obat dan Makanan
CE : Cholesteryl ester
Ch : Cholesterol
CHOD : Cholesterol oxidation
CPPSEA : Control and Supervision of Experiments on Animal
DPPH : diphenyl, 2-picryl hydrazil
EC : Endothelial Cell
FAT/CD36 : Fatty acid translocase
HDL : High-Density Lipoprotein
HMG-CoA : 3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA
HS : Kontrol hewan sehat
IDL : Intermediete-Density Lipoprotein
K+ : Kontrol positif
K- : Kontrol negatif
LCAT : Lecitin Cholesteryl Acyltransferase
LDL : Low- Density Lipoprotein
LPL : Lipoprotein Lipase
LRP : Receptor-Related Protein
NHANES : National Health and Nutrition Examination Survey
OxLDL : oxidized LDL
P1 : Kelompok perlakuan 1
P2 : Kelompok perlakuan 2
xv
P3 : Kelompok perlakuan 3
PA : Persea americana
PJK : Penyakit Jantung Koroner
Pl : Phospolipid
Pr : Protein
POD : Peroxidase
SMC : Smooth Muscle Cell
SPSS : Statistic Program for Social Science
STZ : Streptozotosin
TG : Triglyceride
TGF : Transforming Growth Factor
VLDL : Very Low-Density Lipoprotein
WHF : World Heart Federation
WHO : World Health Organisation
xvi
DAFTAR PUSTAKA
Adnan, J.M., Zearah, S.A., 2013. Total Antioxidant Capacity And
Antihyperlipidemic Activity Of Alkaloid Extract From Aerial Part Of
Anethum graveolens L. Plant. European Scientific Journal., Vo. 9, No.33,
pp. 413-23.
Anggiawan, R., 2014. Efektifitas Ekstrak Etanol Daun Srikaya (Annona squamosa
L.) Terhadap Penurunan Kadar Kolesterol Total Tikus Putih (Rattus
norvegicus L.) Hiperlipidemia. Malang : Skripsi Program Sarjana.
Anonim, 2013. Penyajian Pokok-Pokok Hasil Riset Kesehatan Dasar 2013,
Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Kementerian Kesehatan RI
Arukwe, U., Amadi, B.A., Duru, M. K.C., Agomuo,E.N., Adindu, E. A., Odika,
P.C., Lele, K.C., Egejuru, L., and Anudike, J., 2012. Chemical Compotition
of Persea Americana Leaf, Fruit and Seed. IJRRAS., Vol. 11 No.02, pp. 1-4.
Archbold, R.A., Timmis A.D., 1998. Cholesterol lowering and coronary artery
disease: mechanisms of risk reduction. Heart, Vol. 80, pp. 543–47.
Brai, B.I.C., Odetola, A.A., Agomo, P.U., 2007. Hypoglycemic and
Hypocholesterolemic Potential of Persea americanaLeaf Extracts. J Med
Food., Vol. 10 No. 02, pp. 356-59.
Dipiro, J.T., Talbert, L R., Yee, G.C., Matzke, G. R., Wells, B. G., Posey, L. M.,
2008. Pharmacotherapy A Pathophysiologic Approach, Ed. 7th, USA :
MC Graw Hill Medical., pp. 385-403.
Fox, J.G., Anderson L.C., Loew F.M,. Quimby F.D., 2002. Laboratory Animal
Medicine. Second Edition. USA: American College of Laboratory Animal
Medicine Series. Pp. 121-133.
Gani, N., Momuat, L., I., Pitoi, M., M., 2013. Profil Lipida Plasma Tikus Wistar
yang Hiperkolestremia Pada Pemberian Gedi Merah (Albelmoschus manihot
L.). Jurnal MIPA UNSRAT Online., Vol.02, No.1, pp. 44-49.
Gasserro, P., Proto, M.C., Gangemi, G., Malfitano, A.M., Pisanti, S., Santoro, A.,
Laezza, C., and Bifulco, M., 2012. Pharmacological Actions of Statins : A
Critical Appraisal in the Management of Cancer. Pharmacological Review.
Vol.64, No.1, pp.102-46.
Gokaraju et al., 2012. Extract, Fractions and Composition Comprising Acetogenins
and Their Application , United States : Patent Applications Publication.
Haeckel, B. A., Sonntag, O., Külpmann, W.R., and Feldmann, U., 1979.
Comparison of 9 Methods for the Determination of Cholesterol.
J.Clin.Chem.Clin.Bioohem. Vol.17, pp.553-563.
Handa, S.S., Khanuja, S.P.S., Longo, G., and Rakesh D. D., 2008. Extraction
Technology of Medical and Aromatic Plants, Ed. 1st, Trieste, Italy : ICS-
UNIDO (United Nations Industrial Development Organization and the
International Centre for Science and High Technology), pp. 22-31.
xvii
Himesh, S., Sarvesh, S., Sharan, P.S., Mishra, K., Singhai, A.K., 2011. Preliminary
Phytochemical Screening and HPLC Analysys of Flavonoid From
Methanolic Extract of Leaves of Annona Squamosa. IRJP ( International
Research Journal of Pharmacy), Vol. 2 No. 5, pp. 242-46
Istyana, R. D. N., 2014. Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Alpukat (Persea americana
Mill.) Terhadap Kadar LDL Pada Tikus (Rattus novergicus). Malang :
Skripsi Program Sarjana.
Frostegård, J., 2013. Immunity, atherosclerosis and cardiovascular disease. BMC
Medicine, Vol. 11 N0. 117, pp. 1-13.
Kaminskas, A., Mažeikienė, A., 2012. Biochemistry Laboratory Manual.
Vilnius : Vilnius University, pp. 28-30.
Kolawole, O. T., Kolawole, S. O., Ayankunle, A. A., and Olaniran I. O., 2012.
Methanol Leaf Extract of Persea americana Protects Rats against Cholesterol-
Induced Hyperlipidemia. British Journal of Medicine & Medical
Research., Vol. 2 No. 2, pp. 235-242.
Kusumastuty, I. 2014. Sari Buah Markisa Ungu Mencegah Peningkatan MDA
Serum Tikus Dengan Diet Aterogenik. Indonesian Journal of Human
Nutrition. Vol. 1, No.1, pp. 50-56.
Kwan, B. C. H., Kronenberg, F., Beddhu, S. and Cheung, A.K., 2007. Lipoprotein
Metabolism and Lipid Management in Chronic Kidney Disease. J Am Soc
Nephrol., Vol. 18, pp. 1246-61.
Kwang, B., H., Kang, S., C., Sharma, A., Bajpai, V.,K., 2014. Antioxidant, Lipid
Peroxidation Inhibition and Free Radical Scavenging Efficacy of A
Diterpenoid Compound Sugiol Isolated From Metasequoia glyptostroboides.
Asian Pacific Journal of Tropical Medicine, Vol 9, No. 15.
Lakhanpal, P., and Rai., D. K., 2007. Quercetin : A Versatile Flavonoid. Internet
Journal of Medical Update., Vol 2, No.02, pp. 22-37.
Malaguarnera, M., Vacante, M., Russo, C., Malaguarnera, G., Antic, T.,
Malaguarnera, L., Bella, R., Pennisi, G., Galvano, F., and Frigiola, A., 2013.
Lipoprotein(a) in Cardiovascular Diseases. BioMed Research
International., Vol. 10 No. 11, pp. 1-9.
Mariod, A.A., Abdelwahab, S.I., Elkheir, S., Ahmed,Y.M., Fauzi, P.N.M., and
Chuen C.S., 2012. Antioxidant Activity of Different Parts from Annona
Squamosa, and Catunaregam Nilotica Methanolic Extract. Acta Sci. Pol.,
Technol. Aliment., Vol. 11 No.3, pp: 249-257.
Mazur, A.W., Pikul, S., Daggy, P. B., 1997. Cholesterol Lowering Compounds.
United States Patent., No. 5,591,836.
Mishra, S. K., Tiwari, S., Shrivastava, A., Shrivastava, S., Boudh, G.K., Chourasia,
S.K., Chaturvedi, U., Mir, S.S., and Saxena, A.K., 2013. Antidyslipidemic
Effect and Antioxidant Activity of Antrhaquinone Derivatives From Rheum
xviii
emodi Rhizomes In Dyslipidemic Rats. Journal of Natural Medicine, Vol.
68, pp. 363-71.
Mizoguchi, T., Edano, T., and Koshi, T., 2004. A method of direct measurement
for the enzymatic determination of cholesteryl esters. Journal of Lipid
Research, Vol. 45 , pp. 396-01.
Murray, K. R., Granner, D. K., Rodwell, V. W., 2006. Biokimia Harper (Harper’s
Illustrated Biochemistry), Ed. 27th, Toronto : Penerbit Buku Kedokteran.,
pp.225-249.
Mustafa, M.R., Leong, X.F., Ng, C.Y., and Jaarin, K. 2015. Effects of Repeated
Heating of Cooking Oils on Antioxidant Content and Endotheliat Function.
Austin J Pharmacol Ther. Vol.03, No.2, pp.1068.
Narwal, S. S., Sampietro, D.A., Catalan, C. A. N., Vattuone, M.A, 2009. Isolation,
Identification and Characterization of Allelochemicals/Natural
Products, Ed. 1st, Enfield, NH, USA : Science Publishers., pp. 31-34.
Nwodo, N.J., Nnadi, C.O., Ibezim, A., and Mbah C.J., 2014. Plants with
Hypolipidaemic Effects from Nigerian Flora, INTECH,
http://creativecommons.org/licenses/by/3.0. Diakses tanggal 23 September
2015
Orwa C., Mutua, A., Kindt, R., Jamnadass, R., and Anthony., 2009. Agroforestree
Database: a tree reference and selection guide version 4.0,
http://www.worldagroforestry.org/sites/treedbs/treedatabases.asp, Diakses
tanggal 14 Oktober 2015.
Oteiza, P. i., Erlejman, A. G., Verstraeten, S., V., Keen, C.,L., Fraga, C., G., 2005.
Flavonoid-Membrane Interactions : A Protective Role Of Flavonoids At the
Membrane Suerface?. Clinical & Developmental Immunology, Vol. 12,
No. 01, pp. 19-25.
Page, I. H., and Brown, H.B., 1952. Induced Hypercholesterolemia and
Atherogenesis. Circulation, Vol. 11, pp. 681-86.
Pal, D., Verma, P., 2013. Flavonoid : A Powerful and Abundant Source of
Antioxidants. Academic Science, Vol. 5 No. 3, pp. 95-98.
Pamela, C.C., Richard, A. H., 2009. Farmakologi Ulasan Bergambar. Edisi ke-
4, USA : Penerbit Buku Kedokteran EGC, hal 293-304.
Pandey, N., Barve, D., 2011. Phytochemical and Pharmacological Review on
Annona squamosa Linn. International Journal of Research in
Pharmaceutical and Biomedical Sciences, Vol. 2 No. 4, pp. 1404-10
Parameswaran, I., Murthi, V.K., 2014. Comparative study on Physico & Phyto-
Chemical analysis of Persea americana & Actinidia deliciosa. IJSRP., Vol. 4
No. 5, pp. 1-3.
Pietta, P.,G., 2000. Flavonoids As Antioxidants. Journal Of Natural Products,
Vol. 7 No.63, pp.1035-42
xix
Pusparini, 2006. Low density lipoproteinpadat kecil sebagai faktor risiko
aterosklerosis. Universa Medicina, Vol. 25 No. 1, pp. 22-32.
Qiao, L., Zou, C., Shao, P., Schaack, J., Johnson, P.F., and Shao, J., 2008.
Transcriptional Regulation of Fatty Acid Expression by CCAAT/Enhancher-
Binding Protein α. The Journal of Biological Chem., Vol. 283, No. 14,
pp.8788-95.
Riahi, S., Mohammadi, M.T., Sobhani, V., and Soleimany M., 2015. Chronic
Effects of Aerobic Excercise on Gene Expression of LOX-1 in the Heart of
Rats Fed With High Fat Diet. Iran J Basic Med Sci., Vol. 18, p. 805-12.
Saha, R., 2011. Pharmacognosy and pharmacology of Annona squamosa: A review.
International Journal of Pharmacy & Life Sciences, Vol. 2 No.10, pp.
1183-89.
Sahebkar, A., Simental-Mendia, L. E., Pedone, C., Ferretti, G., Nachtigal, P., Bo,
S., Derosa, G., Maffioli, P., and Watts, G.F. 2015. Statin Therapy and Plasma
Free Fatty Acid : A Systematic Review and Meta-analysis of Controlled
Clinical Trials. British Journal of Clinical Pharmacology., Vol. 81, No.5,
pp.807-18.
Sarker, S.D., 2006. Natural Products Isolation, Ed. 2nd, Totowa, New Jersey :
Humana Press Inc., pp. 323-346
Sasidharan, S., Chen, Y., Saravanan. D., Sundram, D.K., Yoga, L., 2011.
Extraction, Isolation and Characterization of Bioactive Compounds from
Plant’s Extracts. Afr J Tradit Complement Altern Med., Vol. 8 No. 1, pp.
1-10.
Saxena, M., Saxena, J., Nema, R., Singhand, D., and Gupta, A., 2013. Journal of
Pharmacognosy and Phytochemistry. Phytochemistry of Medicinal Plants.
Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry, Vol. 1 No.6, pp. 174-75.
Sen, S., Raghavendra, H.G., Reddy, S.R., Sridhar, C., Chakraborty, R., Suchitra,
B., Nagaiah, B., Jyothi, B. A., Babu, K. A., Babu, P.M., Viswanadhan, T.,
Sujatha, D. 2012. Synergistic Activiti of Tribulus Terrestris and Annona
Squamosa Extracts Againts Alloxan Induced Diabetes and Hyperlipidemia in
Rats. An International Journal of Pharmaceutical Science. Vol. 2, No.2,
pp. 12-23.
Shastry, C. S., Ambalal, P. N., Himanshu, J., and Aswanthanarayana, B.J., 2011.
Evaluation of Effect of Reused Edible Oils on Vital Organs of Wistar Rats.
Nitte University Journal of Health Sciense., Vol.01, No.4, pp 10-15.
Silverstein, R. L., Lee, W., Park, Y.M., and Rahaman, S.O., 2010. Mechanisms of
Cell Signaling by the Scavenger Receptor CD36 : Implications in
Atherosclerosis and Thrombosis. Transactions of the American Clinical
and Climatological Association., Vol. 121, pp. 206-217.
Srisawasdi, P., Kroll, M.H., and Lolekha, P. H., 2007. Advantages and
Disadvantages of Serum Cholesterol Determination by the Kinetic vs the End
Point Method. Am J Clin Pathol., Vol. 127, pp. 906-918.
xx
Stapleton, P.A., Goodwill, A.G., James, M.E., Brock, R.W., Frisbee. J.C., 2010.
Hypercholesterolemia and microvascular dysfunction: interventional
strategies. Journal of Inflammation, Vol. 7 No. 54, pp. 3-10.
Sundari. N., 2014. Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Alpukat (Persea americana
Mill.) Terhadap Kadar Kolesterol Total Pada Tikus (Rattus novergicus).
Malang : Skripsi Program Sarjana.
Tidarria, W. A., 2014. Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Annona squamosa
Linn. Terhadap Peningkatan Kadar HDL Pada Tikus Rattus norvegicus
Malang : Skripsi Program Sarjana.
Tsalisavrina, I., Handayani, D., Wahono, D., 2006. Pengaruh Pemberian Diet
Tinggi Karbohidrat Dibandingkan Diet Tinggi Lemak Terhadap Kadar
Trigliserida dan HDL Darah Pada Rattus norvegicus Galur Wistar. Jurnal
Kedokteran Brawijaya., Vol. 22, No.02.
Usunobun U., Okolie N. P., Anyanwu O. G. and Adegbegi A.J., 2014.
Phytochemical Screening and Proximate Composition of Annona muricata
Leaves. European Journal of Botany Plant Science and Pathology, Vol.2
No.1, pp. 18-28
Vance, D.E., and Vance, J. E. Biochemistry of Lipids, Lipoproteins and
Membranes, Ed. 4th. USA: Elsevier Science B.V., pp. 1-23.