Método de la biología molecular que permite detectar la presencia de una secuencia de ADN.

Los fragmentos fraccionados de DNA se desnaturalizan y transfieren a una membrana de nitrocelulosa, que se incuba con sondas de DNA (o RNA) con marca radioactiva. La localización de los fragmentos híbridos se identifica mediante autoradiografía. Durante el procedimiento de manchado, la acción capilar atrae el amortiguador hacia arriba a las toallas de papel. Conforme el amortiguador se mueve por el gel electroforético, disuelve los fragmentos de DNA y los transfiere a la superficie de la membrana adyacente

Con el método de Southern pueden identificarse uno o unos cuantos fragmentos de restricción de DNA que contiene una secuencia particular de nucleótidos, aun si contiene miles de fragmentos no relacionados.

Gel electroforético

Placa de vidrio

Membrana de nitrocelulosa

Amortiguador de transferencia

Pesas

Pila de toallas de papel

Esponja

Fragmento de DNA

Gel electroforético

1.- Gel de electroforesis que contiene segmentos

fraccionados de DNA. El DNA es de una sola

cadena(desnaturalizado) por tratamiento alcalino 2.-Procedimiento de manchado para

transferencia del DNA del gel a la membrana de nitrocelulosa. 3.-Membrana

nitrocelulosa con fragmentos de DNA adsorbidos después del tratamiento calórico que fue en la membrana

4.- Incubar la membrana con sondas marcadas de DNA o RNA para permitir la hibridación, luego lavar y preparar la autoradiografía

5.- Autoradiografía que muestra la localización de los fragmentos de DNA complementarios de la sonda marcada