EXPLORAREA TULBURARILOR ECHILIBRULUI LEUCOCITAR

-

-

-elementele seriei albe se clasifica in:-polimorfonucleare (neutrofile, eozinofile, bazofile)-mononucleare (limfocite, monocite)

DIFERENTELE MORFOLOGICE SE REFLECTA SI PE PLAN FUNCTIONAL

-

NEUTROFILELE -fagocitoza (PMN neutrofile fagociteaza in 3 etape:leucotaxia, ingestia, etapa bactericida) -secretie (transcobalamina, alfa-globulina)EOZINOFILELE –fagocitoza; factori activi chemotactic : complexe antigen-anticorp, fibrina, histamina; mai putin active decat neutrofilele pe bacterii si fungiBAZOFILELE - se degranuleaza eliberand heparina, histamina, serotoninaLIMFOCITELE –recunosc antigenele (receptori specifici); dupa interactiunea cu acesta secreta substante efectoare ce duc la distrugerea lui; recunosc antigenele tisulare proprii-self-nu reactioneaza(toleranta); 2 populatii de limfocite: T (raspuns celular) si B (raspuns umoral)MONOCITELE devin active in tesuturi; indeparteaza celule lezate, regleaza functiile limfocitelor

TESTE SCREENING

A. LEUCOGRAMA – cuprinde NUMARAREA LEUCOCITELOR si FORMULA LEUCOCITARA

1. NUMARAREA LEUCOCITELOR-pipeta Potain cu bila alba (diviz. 0.5-sg, 11 lichid dilutie),

dilutie 1:20, camera de numarare Burker-Turck, se numara pe 4 patrate de 1mm2, se face media, se face corectia de inaltime si dilutie: nr. Leucocite=Mx10x20

-valori normale: 4000-9000/mm3 la adult

-

VARIATIILE NUMARULUI DE LEUCOCITE

a. Leucocitoza – nr. Peste 10000/mm3-fiziologica-hemoconcentratie, efort muscular intens-patologica-inflamatii, in special infectioaseb. Reactia leucemoida- crestere masiva sugerand

leucemia; determinata de stimularea maduvei de toxine bacteriene, chimice, virusuri

c. Leucopenia – sub 3500/mm3-fiziologica-batrani, surmenaj-patologica-inhibitie medulara(radiatii, citostatice, virusuri)

sau distrugere exgerata(boli autoimune, hipersplenism)

-

2. FORMULA LEUCOCITARA-raportul procentual al leucocitelor pe frotiul de sange periferic dupa numararea a cel putin 100 elemente.-coloratia May-Grunwald-GiemsaNUMAR LEUCOCITE ADULT(4-9000) 0/0 VALOARE ABSOLUTA

NEUTROFILE NESEGMENTATE

1-4 0-300

NEUTROFILE SEGMENTATE

50-70 2500-6000

EOZINOFILE 1-4 50-300

BAZOFILE 0-1 0-80

LIMFOCITE 20-40 1200-2400

MONOCITE 4-8 240-600

-

VARIATII PATOLOGICE ALE FL

-neutrofilia-infectii bacteriene, boli inflamatorii, tumori, stres, arsuri-neutropenia-sub 1500/mm3; sub 500/mm3 = agranulocitoza (severa); medicamente, splenomegalie-eozinofilie-boli alergice, iradiere, boli dermatologice, parazitare-eozinopenia-stres, exces de ACTH, cortizon-bazofilia-leucemie mieloida cronica, splenectomie, Hodgkin, colita ulceroasa, varicela

-

-limfocitoza-relativa(nr. limfocitelor e neschimbat dar scade nr. neutrofile); acompaniaza situatiile cu neutropenie; sau absoluta (creste nr. de limfocite), in leucemie limfocitara cronica, mononucleoza infectioasa, pertusis, infectii virale(rubeola, rujeola), bacteriene(tbc, bruceloza, sifilis)-limfopenie-falsa(cresterea granulocitelor) sau reala(imunodeficiente, Hodgkin)-monocitoza-leucemie cu monocite, mononucleoza infectioasa, endocardita bacteriana-monocitopenie-infectii masive, aplazii medulare

TESTE ANALITICE

A. FROTIU DE MADUVA OSOASA – punctie sternala (creasta iliaca, platou tibial, calcaneu); frotiu, numarare sau fixare la parafina cu sectiuni

Normal-50-80000/mm3;

2/3 seria granulocitara, 1/3 seria eritrocitara

-

Aspecte patologice

-hiperplazie medulara=crestere, predominant pe o serie-hipoplazie medulara=scadere-aplazie=scadere marcata/absenta-limfoblasti=L.A. limfoblastica-mieloblasti=L.A. mieloblastica-maduva plasmocitara=mielom multiplu(plasmocitom)-epuizarea activitatii leucopoietice=agranulocitoza-infiltratii cu neutrofile nesegmentate=infectii acute

-

B. METODE CITOCHIMICE SI ENZIMATICE

1. Cercetarea fosfatazei alcaline (FAL)=enzima prezenta in 10-50 % din granulatiile neutrofilelor adulte si normale. Alte celule(limfocite, monocite, eozinofile) nu contin FAL

PATOLOGIC: FAL +++ in reactii leucemoide, FAL – sau absenta in leucemii granulocitare cronice (granulocite adulte dar anormale, maligne)

-

2. Cercetarea peroxidazelor (POX)=enzime prezente in celulele seriei granulocitare normale

POX + =leucemie acuta mieloblastica (LAM)POX - =leucemie acuta limfoblastica (LAL)

3. Cercetarea prezentei polizaharidelor: coloratia PAS=in prezenta acidului periodic Schiff glicogenul si alti hidrati de carbon se coloreaza rosu-aprins; normal glicogenul e redus in limfocitele adulte si normale, in leucemii limfocitare creste

-reactie PAS+ =leucemie acuta limfoblastica(LAL)-reactie PAS- =leucemie acuta mieloblastica(LAM)

TESTE DE DIAGNOSTIC IN LEUCEMII

LEUCEMII - BOLI MALIGNE ALE ORGANELOR HEMATOFORMATOARE-poate apare o inmultire excesiva pe linia mieloida sau limfoida ce poate interesa numai pool-ul de celule tinere(blasti), sau pool-ul anumitor varste diferentiate pe linia mieloida, limfoida, eritrocitara sau megacariocitara-neoplazia incepe in organul leucopoietic apoi se intinde si in alte tesuturi cu potential hematopoietic (in LLC incepe in noduri limfatice si se extinde in maduva, splina, alte tesuturi.

-

Diagnostic de laborator:

-examen sange periferic

-examen maduva osoasa

-punctie splenica, ganglionara, hepatica

-examene citochimice

-examene citogenetice

-examene imunologice

-

Leucemii acute = proliferare maligna a celulelor tinere, blastice, cu blocarea maturatiei. Apare la varste tinere, poate fi rapid fatala.Clinic: sindrom infectios, hemoragic, anemic, debut brusc sau insidios, usoara splenomegalie, hepatomegalie, polimicroadenopatie-poate fi leucemie acuta limfoblastica (LAL) sau leucemie acuta mieloblastica (LAM)Diagnostic1.Numararea leucocitelor in sange periferic:-80-100000 forme leucenice-50-60000 forme subleucemice-10-15000 forme aleucemice

-

2. Formula leucocitara = sange periferic colorat May-Grunwald-Giemsa; apare ‘hiatusul leucemic’=70-80 % blasti si 20-30% celule mature fara forme intermediare3. Frotiu de maduva = monoton cu celule tinere, rar apar cuiburi hematoformatoare normale (exista hiatus leucemic)

4. Examene citochimice si citoenzimatice = POX pozitiva in LAM, negativa in LAL; PAS pozitiva in LAL, negativa in LAM

5. Alte explorari = anemie, scaderea trombocitelor

6. Biopsie ganglionara, splenica, hepatica

-

Leucemii cronice = proliferare de celule mature si in stadii intermediare de maturatie.-leucemie limfocitara cronica -LLC-leucemie granulocitara(mieloida) cronica –LGC

-LGC = afecteaza ambele sexe, prdomina intre 30-50 de ani; splenomegalie dura, nedureroasa, insotita de hepatomegalie, rar adenomegalii. Proliferarea e lenta si progresiva.-LLC = dupa 50 de ani, predomina la barbati. Evolutie fatala, este totusi cea mai blanda. Clinic gasim adenopatii simetrice nedureroase, hepatomegalie moderata, manifestari asociate.

-

Diagnostic 1. Numar de leucocite = peste 100000 in forme leucemice, 50-60000 in forme subleucemice (frecvent 100-300000/mm3)2. Formula leucocitara = 80-90% celule mature si in diferite stadii de maturatie ale seriei maligne, 10-20% celule din celelalte serii.3. Frotiu de maduva = hiperplazie granulocitara cu putine granulatii sau agranulate4. Examene citochimice si citoenzimatice: FAL +++ in reactii leucemoide (celule normale) si FAL – in LGC (celule canceroase)5. Splenograma, adenograma, eritrocite, plachete