GENETICA FORENSE

•La información genética proviene la

mitad del padre y la otra mitad de la

madre Los caracteres se expresan en las

nuevas generaciones según el Principio

de Segregación

•Conceptos de: Alelo, dominancia y

recesividad

Análisis del cromosoma Y

Se han creado cebadores específicos para regiones del cromosoma

Y que amplifican secuencias solo heredadas por parte paterna. Por

ello, este tipo de análisis sólo sirve para comparar familiares por parte

del padre y varones.

Análisis mitocondrial

Se usa en muestras muy degradadas, ya que el DNA mitocondrial

posee más copias que el nuclear. Se amplifican las regiones HV1 y

HV2 y se comparan siempre con familiares por parte materna ya que

las mitocondrias son herencia exclusiva de la madre. Los científicos

forenses amplían la región HV1 y HV2 del ADNmt y luego cada

región es secuenciada en un único nucleótido y se compara las

diferencias con la referencia.

DNA no Codificante y Regiones

Hipervariables:

Se denomina también “no esencial”, pero para la

investigación forense es “esencial” por sus características y

particularidades que lo convierten en un instrumento para la

individualización de los seres humanos.

•GENOTIPO

•El ADN de cada persona

proviene, mitad de su

padre y mitad de su

madre.

•Cada persona tiene dos

alelos para cada locus

(Marcador), uno en la

región D5S818 del

cromosoma de la madre y

otro en esa misma región

pero del cromosoma del

padre.

•POLIMORFISMO

•Variabilidad dentro de un fragmento de

ADN.

•A mayor cantidad de alelos, mayor

polimorfismo y mayor poder de

discriminación.

Variaciones de la longitud del alelo VNTR en seis

individuos

RFLP: variación en la secuencia de DNA entre individuos en que

se conoce por la distinta longitud de los fragmentos de restricción

VNTR: número variable de repeticiones en tandem. Locus

cromosómico en el que el número de repeticiones de una

determinada secuencia difiere en individuos distintos o en los dos

cromosomas homólogos de un individuo diploide

SSLP: polimorfismo de longitud de secuencia simple. Existencia

en una población de individuos que presentan diferente número

de copias de una secuencia de DNA simple y corta en un locus

cromosómico

SNP: polimorfismo de un único nucleótido. Variación natural en un

único par de nucleótidos en una posición determinada del

genoma de dos o mas individuos

Polimorfismos de tamaño:

Teniendo en cuenta la alta variabilidad de

estos sistemas Jeffreys sostuvo que la

probabilidad de encontrar dos individuos con

el mismo perfil multilocus de ADN, en el

planeta era casi nula por lo que se denomino

al sistema el “DNA fingerprinting” o huellas

de ADN y lo propuso como una marca

individual que podría ser utilizado con fines

de identificación de personas.

DNA fingerprinting

Marker

Suspect A

Semen

(clothing)

Suspect B

Marker

Vaginal swab

VictimControl DNA

Marker

No DNA

PORQUE USAR STRs?

• 1. Gran número de STRs existentes (3-4n).

• 2. Gran variabilidad: Por el gran número de alelos y la alta heterocigocidad.

• 3. Loci de STRs están distribuidos en todo el genoma.

• 4. Fácil interpretación de resultados. No dudosos.

• 5. Uso de PCR.

• 6. Muestras degradadas y antiguas.

SISTEMA O LOCUS UNIDAD REPETIDA LOCALIZACIÓN

CROMOSÓMICA

FGA (TTTC) n 4q28

TPOX (AATG) n 2p23-pter

ACPP (AAAT) n 3q21-qter

F13B AAAT Iq31-q32.1

CSF1PO (AGAT) n 5q 33.3-q34

F13A1 (AAAT) n 6p24-p25

LPL (AAA) n 8p22

THO1 (AATG) n 11p 15.5

D16S539 AGAT 16q24-qter

D3S1744 AGTT 3q24

VWA (AGAT) n 12q 13.3-q13.2

D12S1090 (TAAT) n 12q 12

FPS (AAAT) n 15q25-ter

MICROSATÉLITES MÁS UTILIZADOS COMO

MARCADORES GENÉTICOS

GENOMA MITOCONDRIAL

Secuenciado por Anderson ycols. en 1981

Representa el 1-2% del DNAcelular.

Localizado en la matrizmitocondrial.

Presente en múltiples copiaspor organela.

Constituido por un solocromosoma.

Molécula circular de doblecadena.

No se encuentra asociado ahistonas.

No es genéticamente

autosuficiente.

Mide 5 um de longitud.

Tamaño: 16569 pb.

Codifica 37 genes.

Posee código genético

propio.

10% de genoma no

codificante.

Varía en longitud en

las diferentes especies.

GENOMA MITOCONDRIAL

Características Nuclear Mitocondrial

Tamaño 6x109 pb 16569 pb

Nro moléculas distintas 23 mujer

24 hombre

1 crs circular

Nro copias x cel. 2 1000 0 mas

Organización lineal Circular

Nucleosoma si No

Nro de genes 50000 a 100000 37

Densidad 1gen cada 30 a

60Kb.

1 gen cada 0.45 Kb

% DNA codif. 2% 95%

Presencia de intrones si No

Secuencias rep. Mayor de 1 por

crs sufre meiosis

No

Herencia mendeliana Vía materna

Conclusión DNAmt

análisis antropológico como genético

forense.

Se presenta en grandes cantidades.

menor riesgo de degradación

mayor tasa de mutación.

Herencia matrilineal

Permite estudios de evolución y patrones de

migración a lo largo de la historia.

La heteroplasmia se debe tener en cuenta a

la hora de emitir un dictamen.

Cromosoma Y

-Estructura: Cromosoma pequeño

-Parte del brazo largo: Heterocromatina

-Eucromatina: 30Mb, mayor interés genético

(Región NRY: non-recombinant Y)

-Hereda de padre a hijo varón en bloque

-Partes distales (PAR1 y PAR2) homólogas con

el X y recombinan (1 cada meiosis)

-6 x 107 pares de bases

Cromosoma Y

DYS19=14, DYS390=24,

DYS391=10, DYS393=13

DYS19=14, DYS390=24,

DYS391=10, DYS393=13

DYS19=14, DYS390=24,

DYS391=10, DYS393=13

DYS19=14, DYS390=24,

DYS391=10, DYS393=13

DYS19=14, DYS390=24,

DYS391=10, DYS393=13

DYS19=14, DYS390=24,

DYS391=10, DYS393=13

Técnica o Procedimiento por

medio del cual se fabrican

copias de fragmentos de ADN

(Generalmente hasta 108 veces).

Concebido por Kary Mullis en

1983.

• Tres pasos:

• 1. Desnaturalización del DNA

• 2. Alineamiento de los Primers o

cebadores

• 3. Extensión de los primers por la

Polimerasa

Reacción en cadena de la

polimerasa.

• VENTAJAS

• 1. Amplificación de ADN en indicios muy pequeños y afectados por procesos degradativos y contaminantes.

• 2. Facilidad de interpretación de resultados

• 3 Rapidez

• 4. Disminución probabilidad de error

Electroforesis.

Analisis de ADN

ANÁLISIS DE ADN MINISATÉLITES

Coincidencia de las bandas del hijo con el padre que nohubieran sido detectadas en la madre.

Madre Hijo P.padre 1 P.padre 2 -__ __

__ __

__ __

__

Desventaja: los cálculos de probabilidad de paternidad serealizan sobre supuestos genéticos no comprobados en cadauno de los diferentes loci detectados.

ANÁLISIS DE PATERNIDAD POR MICROSATÉLITES

SISTEMAS P. PADRE MADRE HIJO

STRs

D16S539 9-11 5-10 9-10

D7S820 10-11 10-10 10-10

D13S317 8-12 11-12 11-12

FESPS 10-10 10-11 10-10

TPOX 9-11 8-11 11-11

TH01 7-7 6-7 6-7

FGA 13-13 7-8 7-13

INCLUSIÓN de la paternidad con un 99.999999% de confiabilidad.