COLORACIONES

id21438796 pdfMachine by Broadgun Software - a great PDF writer! - a great PDF creator! - http://www.pdfmachine.com http://www.broadgun.com

ClAmClAm + + ProtenaProtena--COOK COOK ClCl-- + K+ K++ + + ProtenaProtena--COOAmCOOAm

Los Los colorantescolorantes puedenpueden ser:ser:

a)a)-- BsicosBsicos: El : El cromforocromforo eses el el catincatin. . EjEj.: .: azulazul de de metilenometileno, ,

cristalcristal violetavioleta, , safraninasafranina, , fucsinafucsina..

b)b)-- AcidosAcidos: El : El cromforocromforo eses el el aninanin. . EjEj.: .: eosinaeosina, , cidocido pcricopcrico. .

SafraninaSafraninaCristal VioletaCristal Violeta

Coloracin simpleColoracin simple

PROCEDIMIENTO PROCEDIMIENTO

Preparar los frotis bacterianosPreparar los frotis bacterianos

Teir con cristal violeta Teir con cristal violeta 1min. 1min.

Lavar con abundante Lavar con abundante agua el exceso de agua el exceso de

colorantecolorante

Lavar con abundante Lavar con abundante agua el exceso de agua el exceso de

colorantecolorante

Teir con Teir con safraninasafranina1min. 1min.

Fijar el extendido Fijar el extendido con calorcon calor

Secar con papel secanteSecar con papel secante

Observacin microscpica con aceite de inmersin

(X1000)

Coloracin indirecta con Coloracin indirecta con NigrosinaNigrosina

ColoracinColoracin indirectaindirecta de de Micrococcus Micrococcus luteusluteus

Observacin microscpica con aceite de inmersin

(X1000)

EstructuraEstructura de pared de pared celularcelular Gram+Gram+ EstructuraEstructura de pared de pared celularcelular GramGram--

Coloracin de Coloracin de GramGram

PROCEDIMIENTO PROCEDIMIENTO

Preparar el frotis bacterianoPreparar el frotis bacteriano

Teir con cristal violeta Teir con cristal violeta 1min. 1min.

Lavar con abundante Lavar con abundante agua el exceso de agua el exceso de

colorantecolorante

Lavar con abundante Lavar con abundante agua el exceso de agua el exceso de

colorantecolorante

Lavar con abundante Lavar con abundante agua el exceso de agua el exceso de

colorantecolorante

Cubrir con Cubrir con LugolLugol 1min1min

Decolorar con alcoholDecolorar con alcohol--acetona o alcohol acetona o alcohol

(30seg)(30seg)

Teir con Teir con safraninasafranina1min. 1min.

Fijar el extendido Fijar el extendido con calorcon calor

Lavar con abundante Lavar con abundante agua el exceso de agua el exceso de

colorantecolorante

Observacin microscpica Observacin microscpica con aceite de inmersin con aceite de inmersin

(X1000)(X1000)

Secar con papel secanteSecar con papel secante

coloracicoloracinn rosadarosadapermanecepermanecevioletavioleta

safraninasafranina1 1 minutominuto

ColoranteColorante de de contrastecontraste

quedaqueda incoloroincoloropermanecepermanecevioletavioleta

alcoholalcohol20 20 segundossegundos

DecoloraciDecoloracinn

permanecepermanecevioletavioleta

permanecepermanecevioletavioleta

lugollugol1 1 minutominuto

MordentadoMordentado

coloracicoloracinn violetavioletacoloracicoloracinnvioletavioleta

cristalcristal violetavioleta1 1 minutominuto

TinciTincinn inicialinicialGram Gram --Gram +Gram +ReactivosReactivosEtapasEtapas

ResultadosResultadosProcedimientoProcedimiento

ColoracinColoracin GramGram-- de de Escherichia coliEscherichia coli ColoracinColoracin Gram+ de Gram+ de Staphylococcus Staphylococcus aureusaureus

ColoracinColoracin Gram+ de Gram+ de Bacillus Bacillus anthracisanthracis

Coloracin Coloracin GramGram mixtamixta

Tincin de esporas Tincin de esporas Preparar el frotis bacteriano. Preparar el frotis bacteriano. 1.1.Teir con Teir con verde malaquitaverde malaquita. Con unas pinzas de . Con unas pinzas de

madera colocar la muestra cerca de la llama del madera colocar la muestra cerca de la llama del mechero para que el colorante humee, pero sin que mechero para que el colorante humee, pero sin que hierva, durante 5 minutos. Aadir ms colorante si hierva, durante 5 minutos. Aadir ms colorante si la muestra se seca. la muestra se seca. Esperar que se Esperar que se enfrieenfrie. .

2.2.Lavar con agua el resto de colorante. Lavar con agua el resto de colorante. 3.3.Teir con Teir con safraninasafranina durante 1 minuto. durante 1 minuto. 4.4.Lavar con agua el resto de colorante. Lavar con agua el resto de colorante. 5.5.Secar la preparacin. Secar la preparacin. 6.6.Observar la preparacin al microscopio con aceite Observar la preparacin al microscopio con aceite

de inmersin (X1000).de inmersin (X1000).

EndoesporasEndoesporas dede Bacillus Bacillus megateriummegaterium

Tincin de cpsula Tincin de cpsula PROCEDIMIENTO PROCEDIMIENTO

1.1. AgitarAgitar el el caldocaldo lecheleche descremadadescremada con el con el ansaansa y y colocarcolocar 22--3 3 ansadasansadasdel del microorganismomicroorganismo sobresobre el el portaobjetosportaobjetos. . 2.2. Con el Con el ansaansa, , cubrircubrir todotodo el el portaobjetosportaobjetos, , obteniendoobteniendo unauna capacapa delgadadelgadade material. de material. 3.3. SecarSecar al al aireaire. No . No secarsecar con con calorcalor. Las . Las cpsulascpsulas se se peganpegan bienbien al al vidriovidrioy el y el calorcalor podrapodra destruirlasdestruirlas. . 4.4. ColorearColorear con con cristalcristal violetavioleta porpor 1 1 minutominuto. . 5.5. LavarLavar el el excesoexceso de de colorantecolorante con con solucinsolucin de de sulfatosulfato de de cobrecobre. . No No usarusar aguaagua! ! 6.6. SecarSecar con con papelpapel secantesecante y y observarobservar al al microscopiomicroscopio con con aceiteaceite de de inmersininmersin. El . El microorganismomicroorganismo y la y la lecheleche secaseca sobresobre el el portaobjetosportaobjetos tomantomanla la coloracincoloracin purpreapurprea mientrasmientras queque la la cpsulacpsula permanecepermanece incoloraincolora..

El El caldocaldo lecheleche descremadadescremada brindabrinda nutrientesnutrientes esencialesesenciales parapara la la formacinformacinde la de la cpsulacpsula y y tambintambin ayudaayuda a la a la fijacinfijacin del del colorantecolorante. .

ColoracinColoracin de de cpsulacpsula de de EnterobacterEnterobacter aerogenesaerogenes..