Práctica de Cromatografía Sólida:

Equipo Kriptonita:

• Karen Palacios

• Israel Pérez

• Katheryne Sánchez

• Katia Matus

• Ana Ballado

Cromatografía en Papel

¿Que es?

Es la técnica de separación e identificación de sustancias químicas mediante un disolvente que se mueve sobre hojas o tiras de papel filtro.

Tipos de cromatografía en papel:

Cromatografía ascendente:

El disolvente se encuentra en el fondo del recipiente que sostiene al papel y va subiendo atreves de el por capilaridad.

Cromatografía descendente:

El disolvente esta en un recipiente del que cuelga el papel, fluye por el hacia abajo con una combinación de capilaridad y gravedad.

En ambos casos el disolvente avanza a lo largo del papel pasando por encima de la mancha, al avanzar disuelve y arrastra las sustancias de la mancha, cada una de ellas se mueve, por lo general a distinta velocidad que las otras. Se deja actuar el disolvente, se seca el papel y se observa las sustancias separadas.

A esta técnica se le conoce

como cromatografía monodi-

mencional y el papel resultan-

te como cromatograma mono-

dimensional.

Conceptos:

Fuerzas resultantes:

Al pasar el disolvente sobre la mancha, actúan dos tipos de fuerzas opuestas: una que arrastra y otra que retarda.

La fuerza propulsora actúa apartando las sustancias de su punto de origen y desplazándolas en dirección del flujo de origen.

Las fuerzas retardantes tratan de impedir el movimiento de las sustancias, llevándolas fuera del disolvente que fluye y hacia atrás en el papel.

La distancia recorrida por

cada sustancia a partir del

origen, en un tiempo, es la

resultante de estas dos cla-

ses de fuerzas.

Tipos de fuerzas retardantes:

Adsorción:

Es otra fuerza diferenciales, esto significa que unas sustancias son adsorbidas mas que otras y por consiguiente la liberación de las sustancias de la mancha varían de una sustancia a otra.

Constante RF:

Es un punto de referencia que sirve para expresar la distancia recorrida de la sustancia en una cromatografía.

Práctica: CROMATOGRAFIA EN PAPEL

TECNICA

OBJETIVO

Que al realizar esta practica podamos identificar los componentes de los reactivos o materiales a utilizar que se desean analizar y aprender a emplear la cromatografía de papel.

MATERIALES Y REACTIVOS

Materiales Reactivos

Papel filtro

ALCOHOL ETILICO

5 vasos de precipitado de 100 ml

1 pipeta de 10 ml

tijeras

regla

Papel filtro de cafetera

ACETONA PURA

Plumones permanentes

Plumoness de agua

COMO PREPARAR NUESTRA CROMATOGRAFIA

PASO POR PASO:

PASO 1

SELECCIONAMOS NUESTRO COLORES A ULTILIZAR PARA HACER LA CROMATOGRIA

PASO 2

EN EL CASO DEL PAPEL FILTRO DE CAFETERA LAS CORTAMOS EN FORMA DE UN CUADRADO Y DE AHÍ SE PARTEN EN 2

PASO 3

PASO 4

LUEGO DE YA TENERLAS CORTADAS LAS ENROLLAMOS EN FORMA DE TUBITOS

UNAVEZ ENROLLADAS NUESTROS TUBOS DE PAPEL FILTRO DE CAFETERA LOS JUNTAMOS PARA VER CUANTAS CROMATOGRAFIAS IBAMOS HACER

PASO 5

PROCEDIMOS A MARCAR EL CENTRO DE NUESTRO PAPEL FILTRO NORMAL PARA PODER MARCAR CON EL PLUMON

TECNICA

UNA VEZ MARCADAS NUESTROS CIRCULOS DE PAPEL FILTRO LOS MARCAMOS CON LA TINTA DEL PLUMONES QUE DESEABAMOS CONOCER SUS COMPONENTES

CON LA AYUDA DE LA PUNTA DE HIERRO DEL COMPAZ ATRAVEZAMOS EL CENTRO DEL PAPEL

LAVAMOS NUESTRO MATERIAL CORRECTAMENTE

LUEGO DE HABER HECHO EL HUECO A CADA UNO LOS ATRAVEZAMOS CON LOS TUBOS DE PAPEL FILTRO

DESPUES DE HABER TERMINADO PROCEDIMOS A LLENAR NUESTROS VASOS DE PRECIPITADO CON EL REACTIVO A UNTILIZAR LLENAMOS 3 CON ACETONA PURA Y LOS OTROS 3 CON ALCOHOL ETILICO ( 2OML)

MEDIMOS 2.5 CM DEL TUBO QUE ES A LA ALTURA EN LA CUAL PAPEL FILTRO NO TOCABA AL REACTIVO YA SEA DE ACETONA O ALCOHOL

DESPUES DE HABER MARCADO Y MEDIDO NUESTROS TUBOS TAMBIEN MARCAMOS NUESTRO VASOS DE PRECIPITADO CON EL REACTIVO QUE UTILIZAMOS

DESPUES DE HABER TRANSCURRIDO VARIOS MINUTOS:

Como preparar las tiras

Cromatografía en tiras de papel

Una tira de papel poroso. Se puede utilizar el papel de filtro de una cafetera o incluso recortar el extremo (sin tinta) de una hoja de periódico.

Rotuladores o bolígrafos de distintos colores.

Un vaso

Un poco de alcohol

Materiales:

Recorta una tira del papel poroso que tenga unos 4 cm de ancho y que sea un poco mas larga que la altura del vaso.

Técnica:

Enrolla un extremo en un bolígrafo (puedes ayudarte de cinta adhesiva) de tal manera que el otro extremo llegue al fondo del vaso. (ver dibujo).

Dibuja una mancha con un rotulador negro, o de clores en el extremo libre de la tira, a unos 2 cm del borde. Procura que sea intensa y que no ocupe mucho.

Echa en el fondo del vaso alcohol, hasta una altura de 1 cm aproximadamente.

Sitúa la tira dentro del vaso de tal manera que el extremo quede sumergido en el alcohol pero la mancha que has hecho sobre ella quede fuera de él.

Puedes tapar el vaso para evitar que el alcohol se evapore.

Observa lo que ocurre: a medida que el alcohol va ascendiendo a lo largo de la tira, arrastra consigo los diversos pigmentos que contiene la mancha de tinta. Como no todos son arrastrados con la misma velocidad, al cabo de un rato se ven franjas de colores.

Repite la experiencia utilizando diferentes tintas.

Práctica 3: Tiras de papel filtro

en botes

OBJETIVO:

El objetivo de esta práctica es poder separar los componentes de nuestra muestra, en este caso se utilizaron tintas de diferentes marcas y colores, con diferentes eluyentes, y poder identificar cada uno de ellos.

Materiales & Reactivos:

Materiales Reactivos

Papel Filtro Agua Destilada

Tarros largos de conserva

Alcohol

Plumones de Colores

PROCEDIMIENTO:

Cortar una tira de papel de filtro.

A unos 4 o 5 centímetros del final de la tira dibujar con lápiz una línea horizontal

También con lápiz, dibujar pequeños círculos suficientemente separados entre sí (3 a 4 cm) y escribir a un lado con qué tinta los vamos a pintar.

Escribir en la parte superior del papel el disolvente en el que vamos a meter el papel de filtro

Pintar los círculos con las tintas correspondientes

Repetir con el resto del papel de filtro, para usar las mismas tintas en distintos disolventes

Llenar tarros largos de conservas -muy limpios- (o vasos de tubo, pueden ser de plástico desechables) con los disolventes (agua destilada -de planchar-, alcohol, o una disolución de alcohol 50% en volumen). Es importante que sólo hayan 2 o 3 cm de altura de disolvente.

Poner los papeles de filtro en los tarros: el papel no debe tocar las paredes ni el fondo del tarro. La parte inferior del papel debe estar sumergida en el disolvente. Sin embargo, los círculos que hemos pintado deben estar por encima del disolvente: es muy importante que no queden sumergidos.

Observar cómo la fase móvil (el disolvente) sube por capilaridad, arrastrando los distintos componentes de las tintas.

Parar la cromatografía antes de que el disolvente alcance el otro extremo del papel (a 2 cm aprox. del final del tarro), sacando los papeles de los tarros, y poniéndolos a secar.

En ciencia es muy importante analizar los resultados de las investigaciones, y sacar alguna conclusión de ellas. Así que lo más importante viene ahora: se deben analizar los resultados

Práctica 4: Extracción y

Separación de Pigmentos

Fotosintéticos

Karen Palacios

ObjetivoEn esta práctica queremos

extraer los pigmentos que se encuentran en los hojas de espinaca y conseguir separarlos utilizando una técnica sencilla, que es la cromatografía en papel

Clorofila

La clorofila es un pigmento de las plantas, que les proporciona su color verde y que absorbe la luz necesaria para la fotosíntesis.

¿Qué es?:

¿Qué causa?:

La abundancia de clorofila en hojas y su ocasional presencia en otros tejidos vegetales es la causa de que esas partes de las plantas aparezcan verdes, pero en algunas hojas la clorofila es enmascarada por otros pigmentos.

ClorofilaPor cromatografía se pueden separar cuatro clorofilas distintas:

Clorofila B

Constituye de manera aproximada el 75% de toda la clorofila de las plantas verdes, estando presente también en las algas verdeazuladas y en células fotosintéticas más complejas.

Clorofila A

Es un pigmento accesorio presente en vegetales y otras células fotosintéticas complejas; absorbe luz de una longitud de onda diferente y transfiere la energía a la clorofila A, que se encarga de transformarla en energía química.

Pigmentos Vegetales

¿Qué son?:Son moléculas químicas que reflejan o transmiten la luz visible, o hacen ambas cosas a la vez. El color de un pigmento depende de la absorción selectiva de ciertas longitudes de onda de la luz y de la reflexión de otras.

¿Dónde se encuentran?:

Estos pigmentos se encuentran en el interior de la células vegetales específicamente en una organelo llamada cloroplasto .

Pigmentos VegetalesPor cromatografía se pueden separar 2 pigmentos diferentes:

XantofilaSon compuestos químicos pertenecientes al grupo de los carotenoides que poseen uno o más átomos de oxígeno en su estructura..

Carotenos

Son pigmentos de color no verde y que poseen un alto contenido en vitamina A, poseen una cadena hidrocarbonada menor que la clorofila y tienen una coloración roja o anaranjada

¿Por qué ocuparemos esta planta?

Todas los pigmentos presentes en esta planta presentan un grado diferente de solubilidad, lo cual permite su separación cuando una solución asciende por capilaridad por una tira de papel poroso (papel filtro), ya que las más solubles se desplazarán a mayor velocidad, pues acompañarán fácilmente al disolvente a medida que éste va ascendiendo.

Forma de las Bandas Coloreadas

Mas desplazadas o con mayor longitud cuando:

Cuanto mas solubles sean los pigmentos a los que pertenecen

Mas anchas o con mayor grosor cuando:

Cuanto mayor sea la abundancia de esos en la muestra

Lo que se espera encontrar

Esperamos que al realizar nuestra práctica nos quede mas o menos como la siguiente fotografía

Materiales

Materiales Sustancias

Mortero con Pistilo

Alcohol EtilicoPapel Filtro

Matraz Aforado

Caja Petri

Hojas de EspinacaEmbudo de Vidrio

Agitador

Procedimiento

Se trocean hojas de vegetales sobre un mortero

Se cubren con alcohol y con una cucharada de arena y se trituran hasta lograr una buen homogenización. De esta forma se rompen las células y los pigmentos que se hallaban encerrados en los cloroplastos dentro de ellas pasan al alcohol.

Se filtra el contenido del mortero sobre un matraz.

Paso No.1

Paso No.2

Paso No.3

Procedimiento

Se vierte el filtrado en una placa Petri y se coloca sobre ella un rectángulo de papel de filtro doblada por la mitad formando un ángulo.

Esperamos hasta que el alcohol y los pigmentos vayan ascendiendo por el papel produciéndose la separación cromatográfica.

En la disolución extraída del vegetal tendremos tantos pigmentos como bandas coloreadas aparezcan en la cromatografía.

Paso No.4

Paso No.5

Paso No.6

Finalmente:

Obtuvimos:

Xantófilas

Clorofila B

Clorofila A