Diagnostikk av HIV-infeksjon

Anne-Marte Bakken Kran Førsteamanuensis, konst. overlege

Mikrobiologisk avd.

OUS, Ullevål

https://no.wikipedia.org/wiki/R%C3%B8de_sl%C3%B8yfe

HIV diagnostikk

• Primærdiagnostikk: Hvilke tester har vi og når skal de brukes?

• Analysestrategier

• Hva bør almenpraktikere kunne om HIV-diagnostikk – og hvorfor?

Hva bør almenpraktikere kunne om HIV-diagnostikk – og hvorfor?

• Husk å teste for HIV!

• Hva når en prøve ikke er negativ?

• Ha en plan for informasjon og henvisning

• Kjenne til tilgjengelig test-tilbud

HIV diagnostikk i Norge

• Ca 130 000 HIV tester/år på klinisk indikasjon

• Screening av ca 65 000 gravide/år

• Screening av ca 100 000 blodgivere/år

• Av ca 300 000 analyserte primærprøver:

– 200-300 nye tilfeller pr år

– Falske negative

– Falske positive: Uspesifikke reaksjoner

Hensiktsmessig diagnostikk

• Trinn 1: Screeningtest

– Høyt antall analyser (rask, rimelig, lite arbeidskrevende)

– Hovedmål: Få falske negative

– «Bivirkning»: En del falske reaktive

• Trinn 2: Konfirmasjonstest

– God spesifisitet

– Kan være dyrere og mer arbeidskrevende

Antall analyser pr år (Ullevål): Ca 70 000 Antall reaktive: ca 300 (ca 0.4%)

HIV diagnostikk

Hvilke tester har vi og når skal de brukes?

Klinisk forløp ubehandlet HIV-infeksjon

Fauci, A. S. et. al., Ann Intern Med 1996;124:654-663

Diagnostikk: tidslinje for antigen og antistoff

www,depts.washington.edu: University of Washington 2007

Aktuelle analyser

• Diagnostikk av ny infeksjon – EIA/CMIA (Ag/As påvisning)

– Antistoff konfirmasjonstester (Western Blot, rekombinante

immunoblot assay el.l.) – ELISA antigenpåvisning med nøytralisasjon – Nukleinsyrepåvisning (kvalitativ), for eksempel provirus – Hurtigtester

• Erkjent HIV-infeksjon (klinisk oppfølging)

– HIV-1 RNA RT-PCR (kvantitativ) – Resistensundersøkelse – Kvantitering av CD4+ T celler

Virusantigen bundet til overflate

Antistoffpåvisning

HIV kombinasjonstest (EIA/CMIA): Påviser antigen OG antistoff

HIV-1 og HIV-2 antigener HIV-1 antistoff

EIA/ELISA/CMIA

• Kombinasjonstester (Ag / As)

– p24 Ag

– IgM og IgG mot ulike env Ag, både HIV-1 og HIV-2

• Prøvemateriale: Serum (evt plasma)

Reaktiv etter smitte (tidligst) ca:

10 dager -3 uker (kan gå opptil 2-3 mnd)

•”Frikjent”: Negativ Ag/As-undersøkelse 3 mnd etter eksponering

Aktuelle analyser

• Diagnostikk av ny infeksjon – EIA/CMIA (Ag/As påvisning)

– Antistoff konfirmasjonstester (Western Blot)

– Nukleinsyrepåvisning (kvalitativ), for eksempel provirus

– Hurtigtester?

• Erkjent HIV-infeksjon (klinisk oppfølging) – HIV-1 RNA RT-PCR (kvantitativ)

– Resistensundersøkelse

– Kvantitering av CD4+ T celler

BioRad

Western blot

Utvikling av viruskomponenter og antistoffer

Diagnostikk av HIV-infeksjon

• >2-3 mnd etter smitteeksponering – HIV Combo-test (Ag/As): REAKTIV – Konfirmasjonstest (Western Blot): POSITIV

• Tidlig diagnostikk:

– HIV Combo-test (Ag/As): REAKTIV • Kan bli reaktiv allerede 2-3 uker etter smitte

– Konfirmasjonstest (Western Blot): INKONKLUSIV/NEGATIV

– MÅ AVKLARES! HIV ELLER USPESIFIKK REAKSJON?

Avklare inkonklusiv WB • Rene Ag tester (med nøytralisasjon)

– Påviser p24

– Prøvemateriale: Serum (evt plasma)

– Kan gjøres i samme serumprøve som WB

• Provirus – Bedre sensitivitet

– Prøvemateriale EDTA fullblod (Må ta ny prøve)

• Kontrollprøve (WB) etter 2-3 uker vil alltid* avklare!

* Nesten alltid Kan ikke utelukke HIV-infeksjon

Avklare inkonklusiv WB • Rene Ag tester (med nøytralisasjon)

– Påviser p24

– Prøvemateriale: Serum (evt plasma)

– Kan gjøres i samme serumprøve som WB

• Provirus – Bedre sensitivitet

– Prøvemateriale EDTA fullblod (Må ta ny prøve)

• Kontrollprøve etter 2-3 uker vil alltid* avklare!

* Nesten alltid

HVA ER HIV PROVIRUS?

HIV-1 DNA PCR (Provirus)

• Påvise HIV integrert i infiserte celler (proviralt DNA )

• Prøvemateriale: EDTA blod (holdbar 3 døgn)

• Indikasjoner:

– Avklare inkonklusive western blot

– Tidlig diagnostikk

– Kan påvises selv ved ikke påvisbart HIV RNA i plasma

– Avklare vertikal smitte

KUN SPESIELLE INDIKASJONER

HIV-1 RNA kvantitering

• Oppfølging av erkjent HIV-infeksjon

• Måler virusmengde i plasma

• Verktøy i klinisk oppfølging

IKKE PRIMÆRDIAGNOSTIKK!!

Hurtigtester

• Svar med en gang – Må være forberedt på å håndtere svaret der og da

• Dårligere sensitivitet enn serologi – NB vindusfase! • Ta alltid serumprøve i tillegg!

• Best prediktiv verdi når testene anvendes på risikogrupper

• Prosjekter i gang: Olafiaklinikken, Brynsenglegene

(kveldstilbudet), Sjekkpunkt (tilbud utenfor ordinært helsevesen)

Hva bør almenpraktikere kunne om HIV-diagnostikk – og hvorfor?

• Husk å teste for HIV!

• Hva når en prøve ikke er negativ?

• Ha en plan for informasjon og henvisning

•

Risikogrupper Gravide Symptomer Alminneliggjøring Lav terskel – redusere stigma? Test and treat

Hva bør almenpraktikere kunne om HIV-diagnostikk – og hvorfor?

• Husk å teste for HIV!

• Hva når en prøve ikke er negativ?

•

•

De fleste reaktive viser seg å være uspesifikke! Utvidet testing - som regel også kontrollprøve Endelig avklaring kan ta 3 uker (etter ny prøve) Telefonkontakt med laboratoriet er nyttig Forklare! Forklare! Forklare! Pasienten blir engstelig.

Hva bør almenpraktikere kunne om HIV-diagnostikk – og hvorfor?

• Husk å teste for HIV!

• Hva når en prøve ikke er negativ?

• Ha en plan for informasjon og henvisning

•

Hva hvis prøven er positiv?

• Vi ringer dere om svaret!

• Innkalle pasienten, informere

• Henvise infeksjonsmedisinsk avd.

– Ring og avtal tid. Får time veldig raskt!

• Smitteoppsporing

• Ny serumprøve (utelukke prøveforbytting)

• Prøve til resistens (MSIS overvåkning)

Oppsummert:

• Serumprøve for diagnostikk

• EIA (Ag/As) kombinasjonstest • Høy sensitivitet (NB! Diagnostisk vindu) • Mange uspesifikke reaksjoner

• Hvis reaktiv: Konfirmasjonstest

• Hvis inkonklusiv: Kontrollprøve etter 2-3 uker avklarer!

• Ring laboratoriet ved spørsmål!

Bokanbefaling:

Forfatter: Overlege Åse Haugstvedt ved Olafiaklinikken