j. clin. microbiol. 1988 taylor 1362 6

8/16/2019 J. Clin. Microbiol. 1988 Taylor 1362 6

1/6

1988, 26(7):1362.J. Clin. Microbiol.

Leksomboon, N R Blacklow, B Rowe, R Gross and J Cross

D N Taylor, P Echeverria, O Sethabutr, C Pitarangsi, U detected by DNA hybridization.and enteroinvasive Escherichia coli infectionsClinical and microbiologic features of Shigella

http://jcm.asm.org/content/26/7/1362Updated information and services can be found at:

These include:

CONTENT ALERTS

more»cite this article),

Receive: RSS Feeds, eTOCs, free email alerts (when new articles

http://journals.asm.org/site/misc/reprints.xhtmlInformation about commercial reprint orders: http://journals.asm.org/site/subscriptions/To subscribe to to another ASM Journal go to:

http://http//jcm.asm.org/content/26/7/1362http://http//jcm.asm.org/content/26/7/1362http://jcm.asm.org/cgi/alertshttp://jcm.asm.org/cgi/alertshttp://journals.asm.org/site/misc/reprints.xhtmlhttp://journals.asm.org/site/subscriptions/http://journals.asm.org/site/misc/reprints.xhtmlhttp://journals.asm.org/site/misc/reprints.xhtmlhttp://journals.asm.org/site/subscriptions/http://journals.asm.org/site/subscriptions/http://journals.asm.org/site/misc/reprints.xhtmlhttp://jcm.asm.org/cgi/alertshttp://http//jcm.asm.org/content/26/7/1362


2/6

J O U R N A L O F

C L I N I C A L

M I C R O B I O L O G Y ,

J U l Y

1 9 8 8 ,

p .

1 3 6 2 - 1 3 6 6

V o l .

2 6 , N o .

7

0 0 9 5 - 1 1 3 7 / 8 8 / 0 7 1 3 6 2 - 0 5 0 2 . 0 0 / 0

C o p y r i g h t

©

1 9 8 8 , A m e r i c a n

S o c i e t y

f o r

M i c r o b i o l o g y

C l i n i c a l

a n d

M i c r o b i o l o g i c

F e a t u r e s

o f

S h i g e l l a

a n d

E n t e r o i n v a s i v e

E s c h e r i c h i a

c o l i I n f e c t i o n s

D e t e c t e d

b y

DNA

H y b r i d i z a t i o n

DAVID

N .

T A Y L O R , l t *

PETER

E C H E V E R R I A , 1

ORNTHIPA

S E T H A B U T R , 1

CHITTIMA

P I T A R A N G S I ,

UDOM

LEKSOMBOON,2

NEIL

R .

BLACKLOW,3

BERNARD

ROWE,4

ROGER

G R O S S , 4

AND

JOHN

C R O S S 5

D e p a r t m e n t o f

B a c t e r i o l o g y ,

Armed F o r c e s R e s e a r c h

I n s t i t u t e

o f

M e d i c a l

S c i e n c e s , '

a n d

C h i l d r e n s

H o s p i t a l , 2

B a n g k o k

1 0 4 0 0 ,

T h a i l a n d ;

D i v i s i o n

o f I n f e c t i o u s

D i s e a s e s , U n i v e r s i t y o f

M a s s a c h u s e t t s M e d i c a l

S c h o o l ,

W o r c e s t e r ,

M a s s a c h u s e t t s

0 1 6 0 5 3 ; C e n t r al P u b l i c H e a l t h

L a b o r a t o r y

S e r v i c e , C o l i n d a l e ,

E n g l a n d 4 ;

a n d

D i v i s i o n

o f

T r o p i c a l

H e a l t h ,

U n i f o r m e d

S e r v i c e s

U n i v e r s i t y

o f

t h e H e a l t h

S c i e n c e s ,

B e t h e s d a ,

M a r y l a n d

2 0 8 1 4 5

R e c e i v e d

2 3

D e c e m b e r

1 9 8 7 / A c c e p t e d

3 0 M a r c h

1 9 8 8

To

d e t e r m i n e t h e

c l i n i c a l

a n d

m i c r o b i o l o g i c f e a t u r e s

o f

S h i g e l l a

a n d e n t e r o i n v a s i v e


c o l i

( E I E C )

i n f e c t i o n s , we i n v e s t i g a t e d 4 1 0

c h i l d r e n

w i t h d i a r r h e a a n d 4 1 0

c o n t r o l

c h i l d r e n

w i t h o u t

d i a r r h e a w ho

w e r e

s e e n

a t

C h i l d r e n s

H o s p i t a l ,

B a n g k o k , T h a i l a n d ,

f r o m

J a n u a r y

t o

J u n e

1 9 8 5 .

S h i g e l l a s p p .

w e r e

i s o l a t e d f r o m

9 6

( 2 3 ) a n d EIEC w e r e i s o l a t e d f r o m

1 7

( 4 )

o f 4 1 0

c h i l d r e n w i t h

d i a r r h e a

a n d

f r o m

1 2

( 3 )

a n d

6

( 1 )

o f

4 1 0

c o n t r o l c h i l d r e n , r e s p e c t i v e l y .

T h e i s o l a t i o n r a t e s o f

b o t h

p a t h o g e n s

i n c r e a s e d

w i t h

a g e

a n d

p e a k e d i n

c h i l d r e n 3

t o 5

y e a r s

o l d f r o m w h o m

S h i g e l l a

s p p .

w e r e i s o l a t e d f r o m 38

a n d EIEC w e r e


9 .

S h i g e l l a

s p p .

w e r e

i s o l a t e d

f r o m 52

a n d EIEC

w e r e

i s o l a t e d

f r o m

7

o f

9 1

c h i l d r e n

w i t h

b l o o d y

d i a r r h e a

a n d

f r o m

1 5 a n d 3

o f 3 1 9

c h i l d r e n

w i t h

n o n b l o o d y

d i a r r h e a . F i f t e e n

( 6 5 )

o f

2 3 EIEC

w e r e

l a c t o s e

p o s i t i v e ,

a n d

a l l

b e l o n g e d

t o

r e c o g n i z e d

EIEC

s e r o t y p e s .

Among

c h i l d r e n

w i t h

d i a r r h e a ,

t h e s t o o l b l o t s

o f

76 o f

1 7

c h i l d r e n

i n f e c t e d

w i t h

E I E C ,

45

o f 9 6 c h i l d r e n i n f e c t e d

w i t h

S h i g e l l a s p p . ,

a n d

1

o f

2 9 7

c u l t u r e - n e g a t i v e

c h i l d r e n

h y b r i d i z e d

w i t h

t h e 1 7 - k i l o b a s e E c o R I

d i g e s t i o n f r a g m e n t

o f

p R M 1 7 ,

a

r e c o m b i n a n t

p l a s m i d c o n t a i n i n g DNA

d e r i v e d

f r o m

t h e

1 4 0 - m e g a d a l t o n S h i g e l l a f l e x n e r i p l a s m i d .

A l t h o u g h

EIEC c o l o n i e s

c a n b e

r e l i a b l y

d e t e c t e d

b y

DNA

h y b r i d i z a t i o n , d e t e c t i o n b y

s t o o l b l o t

i s

l e s s s e n s i t i v e .

S h i g e l l a

s p p .

a n d

EIEC

a r e

i m p o r t a n t

c a u s e s

o f

e n d e m i c

d i a r r h e a

among

c h i l d r e n >1

y e a r

o l d

i n

T h a i l a n d .

S h i g e l l a

s p e c i e s

a r e

i m p o r t a n t

c a u s e s o f

d i a r r h e a l d i s e a s e

t h r o u g h o u t

t h e

w o r l d

a n d a r e

p r o b a b l y

t h e m o s t

i m p o r t a n t

c a u s e

o f

b a c t e r i a l

d y s e n t e r y ( 1 5 , 2 3 ) .

S h i g e l l a s p e c i e s

h a v e

d i s t i n c t i v e

b i o c h e m i c a l

a n d

s e r o l o g i c a l

f e a t u r e s t h a t

a l l o w

t h e m

t o b e

e a s i l y

i d e n t i f i e d

b y

s t a n d a r d

m i c r o b i o l o g i c

t e c h -

n i q u e s

8 .

C e r t a i n

s e r o t y p e s

o f E s c h e r i c h i a

c o l i , k n o w n

a s

e n t e r o i n v a s i v e

E .

c o l i

( E I E C ) ,

h a v e

t h e a b i l i t y

t o

i n v a d e

t h e

c o l o n s i m i l a r t o

S h i g e l l a

s p p . ( 4 , 9 .

EIEC

p o s e

a

d i a g n o s t i c

p r o b l e m

b e c a u s e

t h e y

m ay b e c o n f u s e d w i t h

n o n p a t h o g e n i c

E .

c o l i

w h i c h c o m p r i s e t h e m a j o r i t y o f t h e

s t o o l f l o r a .

EIEC

a l s o h a v e b i o ch e mi c al

a n d s e r o l o g i c a l

f e a t u r e s

c o m m o n

t o

b o t h

S h i g e l l a

s p p . a n d E .

c o l i

( 8 , 2 5 ) . EIEC

may b e

l a c t o s e

p o s i t i v e o r

l a c t o s e n e g a t i v e ,

a n d w h i l e

t h e y u s u a l l y

a r e

l y s i n e

d e c a r b o x y l a s e

n e g a t i v e

a n d

n o n m o t i l e ,

n o b i o c h e m i -

c a l

t e s t

i s

e n t i r e l y

s p e c i f i c

i n

i d e n t i f y i n g t h e s e o r g a n i s m s .

EIEC

b e l o n g t o a n u m b e r

o f

E . c o l i

0 s e r o g r o u p s :

0 2 8 , 0 2 9 ,

0 1 2 4 , 0 1 3 6 , 0 1 43 ,

0 1 4 4 , 0 1 4 7 ,

0 1 5 2 , 0 1 6 4,

a n d 1 6 7 ( 8 ,

2 5 ) ;

s o m e , s u c h

a s

E .

c o l i 0 1 2 4 ,

a g g l u t i n a t e

i n

S h i g e l l a d y s e n t e r -

i a e

s e r o t y p e

3

a n t i s e r a ( 8 ) .

A n t i s e r a

t o

i d e n t i f y known EIEC

s e r o g r o u p s

a r e n o t

g e n e r a l l y a v a i l a b l e , a n d

t h e u s e o f s u c h

a n t i s e r a

p r e c l u d e s i d e n t i f y i n g EIEC t h a t

a r e

n o t

among

t h e

r e c o g n i z e d

s e r o g r o u p s .

T h e s e

d i f f i c u l t i e s i n

i d e n t i f y i n g

EIEC h a v e

l i m i t e d

o u r

u n d e r s t a n d i n g o f

t h i s

o r g a n i s m a s

a

c a u s e

o f

d i a r r h e a l d i s e a s e .

V i r u l e n c e o f S h i g e l l a s p p . a n d

EIEC i s d e p e n d e n t o n

t h e

a b i l i t y

o f

t h e s e o r g a n i s m s t o

i n v a d e a n d m u l t i p l y i n

i n t e s t i n a l

e p i t h e l i a l c e l l s ( 4 ,

9 ) .

T h e

d e f i n i t i v e

b i o l o g i c a l

t e s t

f o r e n t e r o -

i n v a s i o n i s

t h e S e r e n y

t e s t

( 2 1 ) .

E n t e r o i n v a s i o n o f

S h i g e l l a

s p p .

a n d

EIEC

i s m e d i a t e d

b y

a

h i g h - m o l e c u l a r - w e i g h t

*

C o r r e s p o n d i n g

a u t h o r .

t

A d d r e s s

f o r

c o r r e s p o n d e n c e

f r o m

t h e

U n i t e d

S t a t e s :

Armed

F o r c e s

R e s e a r c h

I n s t i t u t e o f M e d i c a l S c i e n c e s ,

APO

S a n

F r a n c i s c o ,

CA

9 6 3 4 6 - 5 0 0 0 .

( 1 2 0 , 0 0 0

t o

1 4 0 , 0 0 0 ) p l a s m i d ( 1 1 ,

1 3 ) .

DNA

s e q u e n c e s

e n -

c o d e d

b y t h e s e p l a s m i d s

a r e

n e c e s s a r y

f o r v i r u l e n c e i n b o t h


a n d E I E C . A

1 7 - k i l o b a s e E c o R I

d i g e s t i o n

f r a g m e n t o f

t h e

1 4 0 - m e g a d a l t o n

p l a s m i d

o f

S h i g e l l a

f l e x n e r i

5 h a s b e e n

c l o n e d

( 1 )

a n d h a s b e e n

u s e d

a s

a

p r o b e

t o

i d e n t i f y


a n d

EIEC

( 2 4 , 2 6 ) .

I n

t h i s

s t u d y

w e d e s c r i b e

t h e

c l i n i c a l

a n d

e p i d e m i o l o g i c a l

f e a t u r e s o f S h i g e l l a

a n d

EIEC i n f e c t i o n s i n c h i l d r e n

w i t h

a l l

t y p e s

o f

d i a r r h e a l

d i s e a s e a n d i n c h i l d r e n w i t h o u t

d i a r r h e a .

We a l s o s t u d i e d t h e

m i c r o b i o l o g i c

c h a r a c t e r i s t i c s

o f EIEC

i d e n t i f i e d

b y

DNA

h y b r i d i z a t i o n a n d e v a l u a t e d

t h e

DNA

p r o b e

t o

i d e n t i f y

S h i g e l l a

a n d

EIEC i n f e c t i o n s

b y

d i r e c t

e x a m i n a t i o n

o f u n s el e c t e d

b a c t e r i a l

g r o w t h

f r o m

s t o o l

s p e c -

i m e n s .

MATERIALS

AND

METHODS

P a t i e n t

s e l e c t i o n . Fr om

J a n u a r y

t o

J u n e

1 9 8 5 , w e

o b t a i n e d

s t o o l s p e c i m e n s

f r o m

c h i l d r e n

w ho

w e r e

s e e n

i n t h e

o u t p a -

t i e n t c l i n i c

o f C h i l d r e n ' s

H o s p i t a l ,

B a n g k o k , T h a i l a n d .

S t o o l

s p e c i m e n s

w e r e

o b t a i n e d f r o m


a

h i s t o r y o f

d i a r r h ea o f < 7 2 - h

d u r a t i o n .

D i a r r h e a w a s d e f i n e d

a s t h r e e o r

m o r e l o o s e

s t o o l s i n

2 4

h . D y s e n t e r y w a s

d e f i n e d

a s

d i a r r h e a

a s s o c i a t e d w i t h

b l o o d

o r l e u k o c y t e s i n t h e s t o o l s . T h e

s y m p t o m s

a n d

c l i n i c a l c o u r s e o f e a c h c h i l d w a s

r e c o r d e d .

F o r e a c h c h i l d

w i t h

d i a r r h e a

( c a s e ) , o n e c o n t r o l

c h i l d w a s

c h o s e n f r o m t h e

s a m e

o u t p a t i e n t c l i n i c .

C o n t r o l

c h i l d r e n

w e r e

s e e n

f o r a

v a r i e t y o f

o t h e r

m i n o r

n o n g a s t r o i n t e s t i n a l

i l l n e s s e s .

T h e c o n t r o l c h i l d

w a s

m a t c h e d

w i t h i n 1

y e a r o f a g e

w i t h t h e

c a s e p a t i e n t ,

d i d n o t

h a v e

d i a r r h e a

i n t h e

p r e v i o u s

w e e k ,

a n d

d i d n o t h a v e h o u s e h o l d

c o n t a c t s

w i t h d i a r r h e a

w i t h i n t h e

l a s t

w e e k .

I n f o r m a t i o n

a n d y f e c a l s a m p l e s w e r e

c o l l e c t e d

f r o m a

maximum

o f f i v e

c a s e a n d c o n t r o l

c h i l d r e n

e a c h

d a y . S t o o l s w e r e

e x a m i n e d m i c r o s c o p i c a l l y f o r e r y t h -

r o c y t e s

a n d

l e u k o c y t e s

u s i n g

m e t h y l e n e

b l u e

s t a i n

( 1 2 ) .

A

1 3 6 2


3/6

SHIGELLA

AND ENTEROINVASIVE

E .

COLI

INFECTIONS

1 3 6 3

t w o - t a i l e d c h i - s q u a r e d

t e s t w i t h

Y a t e s c o r r e c t i o n

o r

F i s h e r s

e x a c t t e s t

was u s e d f o r s t a t i s t i c a l

a n a l y s i s .

M i c r o b i o l o g y .

S t o o l s were

c u l t u r e d

on MacConkey,

D e s -

o x y c h o l a t e ,

H e k t o e n , a n d t h i o s u l f a t e - c i t r a t e - b i l e s a l t s - s u -

cro se

m e d i a

( D i fc o L ab o r a t o r i e s ,

D e t r o i t ,

M i c h . )

b e f o r e a n d

a f t e r e n r i c h m e n t

i n

S e l e n i t e - F

E n r i c h m e n t BBL

M i c r o b i o l -

o g y S y s t e m s ,

C o c k e y s v i l l e ,

M d . ) a n d

a l k a l i n e

peptone-water

f o r

t h e

i s o l a t i o n

o f

e n t e r i c b a c t e r i a l

p a t h o g e n s

a s

d e s c r i b e d

p r e v i o u s l y

( 6 , 2 4 ) .

From

e a c h c h i l d

1 0 l a c t o s e - p o s i t i v e

a n d

a l l l a c t o s e - n e g a t i v e

E . c o l i

i s o l a t e d on

MacConkey

m e d i a

were

s a v e d on

n u t r i e n t a g a r s l a n t s .

Te n l a c t o s e - p o s i t i v e

E .

c o l i were t e s t e d f o r e n t e r o t o x i n

p r o d u c t i o n

( 3 , 1 9 ) . R o t a v i r u s

was

d e t e c t e d

b y

a

m o n o c l o n a l a n t i b o d y e n z y m e - l i n k e d

i m -

m u n o s o r b e n t

a s s a y ( E L I S A )

( 1 4 ) .

I n t e s t i n a l p a r a s i t e s ,

i n -

c l u d i n g

C r y p t o s p o r i d i u m s p . ,

were d e t e c t e d

m i c r o s c o p i c a l l y

b y s t a n d a r d

t e c h n i q u e s

( 2 , 1 6 ) .

Fr om

e a c h

p a t i e n t


a n d a l l

l a c t o s e -

n e g a t i v e

c o l o n i e s

were p i c k e d

f r o m

t h e n u t r i e n t

a g a r s l a n t s

a n d

s p o t t e d

o n t o

a n o t h e r

MacConkey

p l a t e .

A f t e r o v e r n i g h t

i n c u b a t i o n , Whatman

n o . 5 4 1 f i l t e r s were

p r e s s ed e v e n l y

o v e r t h e b a c t e r i a l g r o w t h .

B a c t e r i a

on

t h e f i l t e r s

were

l y s e d ,

a n d

t h e

DNA

was

d e n a t u r e d i n

0 . 5

N

NaOH

a n d e x p o s e d t o

1

M

T r i s - 2

M

N a C I

f o r

4

m i n

a n d

t h e n

a i r

d r i e d .

S t o o l

b l o t s

w e r e

p r e p a r e d

b y

i n o c u l a t i o n o f

f e c a l m a t e r i a l

ont o Mac-

C o n k e y agar. A f t e r

o v e r n i g h t

i n c u b a t i o n ,

t h e

r e s u l t a n t

g r o w t h

( a p p r o x i m a t e

a r e a,

1 b y 1 c m )

was

t r a n s f e r r e d t o

Whatman

n o . 5 4 1 f i l t e r s

a n d

p r o c e s s e d

u n d e r

s t r i n g e n t

c o n d i t i o n s as

f o r

c o l o n y h y b r i d i z a t i o n

( 2 2 ) .

T h e

DNA

p r o b e u s e d

t o d e t e c t S h i g e l l a

s p p .

a n d EIEC

was a

1 7 - k i l o b a s e

E c o R I

d i g e s t i o n

f r a g m e n t o f

t h e

1 4 0 -

m e g a d a l t o n

p l a s m i d

o f S .

f l e x n e r i

5 c l o n e d

i n t o pBR325 ( 1 ) .

F o r

DNA h y b r i d i z a t i o n ,

t h e

1 7 - k i l o b a s e

f r a g m e n t

was l a -

b e l e d

b y

n i c k t r a n s l a t i o n

w i t h

[ a - 3 2 P ] d A T P Ne w

E n g l a n d

N u c l e a r

C o r p . , B o s t o n ,

M a s s . )

a n d

h y b r i d i z e d

w i t h s p e c i -

men

DNA

f i x e d

o n t o Whatman

n o .

5 4 1

f i l t e r s a s

d e s c r i b e d

p r e v i o u s l y

( 2 4 ) . C o l o n i e s

t h a t

h y b r i d i z e d

w i t h

t h e

p r o b e

w e r e c o n f i r m e d

i n t h e S e r e n y

t e s t

( 2 1 )

a n d t h e v i r u l e n c e

m a r k e r

a n t i g e n

VMA)

ELISA

( 1 7 )

a n d

s e r o t y p e d

a t

t h e

C en t r a l P u b l i c

H e a l t h L a b o r a t o r y

S e r v i c e ,

C o l i n d a l e ,

E n -

g l a n d

( 1 8 ) .

E . c o l i w e r e d i f f e r e n t i a t e d

f r o m S h i g e l l a

spp.

b y b i o c h e m -

i c a l t e s t s s u c h a s

l a c t o s e , s o d i u m

a c e t a t e , l y s i n e

d e c a r b o x -

y l a s e , m u c a t e ,

o r n i t h i n e

d e c a r b o x y l a s e ,

a n d

g a s

f r o m g l u -

cos e

( 8 ) .

O r g a n i s m s t h à t

h y b r i d i z e d

w i t h t h e

1 7 - k i l o b a s e

p r o b e a n d were b i o c h e m i c a l l y

s i m i l a r

t o

S h i g e l l a

spp., b u t

f a i l e d

t o a g g l u t i n a t e

i n

S h i g e l l a

g r o u p - s p e c i f i c

a n t i s e r a ,

w e r e

a l s o

s e r o t y p e d

w i t h E .

c o l i a n t i s e r a .

RESULTS

I s o l a t i o n r a t e s .

I n

t h i s s t u d y

we e x a m i n e d

4 1 0

c h i l d r e n


a n d 4 1 0 a g e - m a t c h e d

c h i l d r e n

w i t h o u t

d i a r -

r h e a .

S h i g e l l a spp.

w e r e t h e

most

c o m m o n l y

e n c o u n t e r e d

p a t h o g e n ,

i s o l a t e d i n

23 o f c h i l d r e n


( T a b l e 1 .

R o t a v i r u s ,

S a l m o n e l l a

s p . ,

a n d

e n t e r o t o x i g e n i c

E .

c o l i

w e r e

e a c h i s o l a t e d

f r o m

a p p r o x i m a t e l y

10

o f

c h i l d r e n .

EIEC

was

i s o l a t e d

f r o m

4 . 2 o f

t h e 4 1 0 c h i l d r e n

w i t h d i a r r h e a .

T h e r e were

d i f f e r e n c e s

i n i s o l a t i o n

r a t e s b e t w e e n

case

c h i l d r e n a n d

c o n t r o l s

i n

o n l y

h a l f

o f

t h e

p a t h o g e n s .

Th e

g r e a t e s t

d i f f e r e n c e

i n

i s o l a t i o n

r a t e s

was

f o u n d

f o r

S h i g e l l a

spp. ( T a b l e

1 .

EIEC

was

a l s o

i s o l a t e d

more

f r e q u e n t l y

from

c h i l d r e n

w i t h

d i a r r h e a

t h a n

f r o m

t h o s e w i t h o u t

d i a r r h e a ,

P

<

0 . 0 5 . EIEC

was n o t


c h i l d r e n

u n d e r 1

y e a r

o l d

w i t h d i a r r h ea

a n d

was

i s o l a t e d

f r o m 6

( 8 . 6 )

o f

7 0

c h i l d r e n


a n d f r o m

3

( 4 . 3 )

c h i l d r e n

w i t h o u t d i a r r h e a

among

3 - t o

5

year

o l d s .

Th e

t r e n d

i n

a g e - s p e c i f i c

i s o l a t i o n

TABLE 1 . E n t e r o p a t h o g e n s

i s o l a t e d

f r o m 4 1 0 c h i l d r e n w i t h

d i a r r h e a

a n d 4 1 0

c h i l d r e n w i t h o u t

d i a r r h e a

s e e n i n

a n o u t p a t i e n t

c l i n i c , C h i l d r e n ' s

H o s p i t a l ,

B a n g k o k ,

T h a i l a n d ,

J a n u a r y

t o J u n e

1 9 8 5

I s o l a t i o n r a t e s f r o m

c h i l d r e n :

E n t e r o p a t h o g e n

W i t h

W i t h o u t

P v a l u e

N o .

N o .


9 6

2 3 . 4

1 2

2 . 9

< 0 . 0 0 1

R o t a v i r u s

4 1

1 0 . 0

1 0 . 2

< 0 . 0 0 1

S a l m o n e l l a

s p p .

4 0

9 . 8 3 9

9 . 5 NS

E n t e r o t o x i g e n i c

E . c o l i

ST

o r S T / L T b

2 3

5 . 6 3

0 . 7

< 0 . 0 1

L T o n l y

1 4 3 . 4

1 2 2 . 9

NS

P l e s i o m n o n a s s p .

2 3

5 . 6 2 2

5 . 4 NS

C a m p y l o b a c t e r

s p .

2 1 5 . 1

1 2 2 . 9 NS

V i b r i o

s p p .

2 1 5 . 1

3 0 . 7

< 0 . 0 1

G i a r d i a

s p .

1 8

4 . 4 9

2 . 2 NS

EIEC

1 7 4 . 2 6

1 . 4 < 0 . 0 5

A e r o m o n a s s p .

1 6

3 . 9 1 5 3 . 7

NS

C r y p t o s p o r i d i u m

s p .

1 3

3 . 2 1 0 . 2

< 0 . 0 1

No

p a t h o g e n

i s o l a t e d 1 5 5

3 7 . 8 2 9 9

7 2 . 9 < 0 . 0 1

a

C h i - s q u a r e d

t e s t w i t h

Y a t e s

c o r r e c t i o n .

N S , N o n s i g n i f i c a n t ,

P

>

0 . 0 5 .

b

S T ,

H e a t - s t a b l e

e n t e r o t o x i n ; L T ,

h e a t - l a b i l e e n t e r o t o x i n .

r a t e s w a s

s i m i l a r f o r

S h i g e l l a

s e r o t y p e s a n d EIEC

( F i g . 1 .

T h e

i s o l a t i o n

r a t e s a l s o

i n c r e a s e d w i t h

a g e

i n

t h e

c o n t r o l

g r o u p .

C l i n i c a l

f e a t u r e s .


w e r e i s o l a t e d

a s t h e

o n l y

p a t h o g e n

i n 5 9 ( 6 1 )

o f 9 6 c a s e s a n d

EIEC

w a s i s o l a t e d a s

t h e

o n l y p a t h o g e n

i n

1 0

( 5 9 )

o f 1 7 c a s e s .

T h e r e

w a s

n o

c o m b i n a t i o n

o f

p a t h o g e n s t h a t

w a s

m o r e f r e q u e n t

t h a n

e x p e c t e d

b y t h e o v e r a l l i s o l a t i o n

r a t e , e x c e p t t h a t

S h i g e l l a

s p p . ,

t h e m o s t f r e q u e n t l y

i s o l a t e d p a t h o g e n ,

w a s n e v e r

i s o l a t e d

w i t h E I E C .

N i n e t y - o n e ( 2 2 )

o f

4 1 0

p a t i e n t s

h a d

b l o o d y

d i a r r h e a

( d y s e n t e r y ) . S h i g e l l a

s p p .

w e r e

i s o l a t e d

f r o m

4 7

( 5 2 )

c h i l d r e n w i t h b l o o d y

d i a r r h e a

a n d

4 9

( 1 5 )

c h i l d r e n

w i t h

n o n b l o o d y

d i a r r h e a ,

P

<

0 . 0 0 1 .

None

o f

t h e o t h e r

e n t e r o -

p a t h o g e n s ,

i n c l u d i n g

E I E C ,

w h i c h w a s i s o l a t e d f r o m

7 o f

9 1

c h i l d r e n w i t h b l o o d y

d i a r r h e a

a n d

3 o f c h i l d r e n

w i t h

n o n b l o o d y

d i a r r h e a ,

w e r e i s o l a t e d

s i g n i f i c a n t l y

m o r e

o f t e n

f r o m

c h i l d r e n

w i t h b l o o d y

d i a r r h e a .

T h e

c l i n i c a l c h a r a c t e r i s t i c s

w e r e d e t e r m i ne d f o r

p a t i e n t s

i n f e c t e d

w i t h

o n l y

o n e

p a t h o g e n

( T a b l e 2 .

P a t i e n t s i n f e c t e d

w i t h

S h i g e l l a

s p p .

w e r e m o r e l i k e l y

t o come

t o

t h e

c l i n i c

l e s s

t h a n 2 4

h a f t e r t h e

o n s e t

o f

d i a r r h e a t h a n

p a t i e n t s

i n f e c t e d

w i t h E I E C ,

P

0 . 0 4 b y

F i s h e r ' s

e x a c t

t e s t .

T h i s

p a r a m e t e r

may

i n d i c a t e a m o r e s e v e r e

i l l n e s s

among

c h i l d r e n

i n f e c t e d

w i t h S h i g e l l a s p p .

I n o t h e r

r e s p e c t s

EIEC

i n f e c t i o n s

w e r e

s i m i l a r

t o

S h i g e l l a

i n f e c t i o n s .

S h i g e l l a

i n f e c t i o n s

w e r e more

a s s o c i a t e d

w i t h

f e v e r

a n d

l e s s w i t h

v o m i t i n g

t h a n

r o t a v i r u s

i n f e c t i o n s ,

P

0 . 0 0 2

a n d P

=

0 . 0 0 1 ,

r e s p e c t i v e l y .

C h i l d r e n

i n f e c t e d

w i t h


w e r e more

l i k e l y

t o

h a v e f e c a l

l e u k o c y t e s

a n d

e r y t h r o c y t e s

t h a n

p a t i e n t s

i n f e c t e d

w i t h

r o t a v i r u s ,

P

=

0 . 0 0 2 .

P e r s o n s

w i t h

S h i g e l l a

s p p .

were

a l s o

m o r e

l i k e l y

t o

b e

t r e a t e d

w i t h a n t i b i o t i c s

( P

=

0 . 0 0 1 )

a n d l e s s

l i k e l y

t o r e c e i v e

i n t r a v e n o u s

f l u i d s

( P

=

0 . 0 2 )

t h a n

p a t i e n t s

i n f e c t e d

w i t h r o t a v i r u s .

M i c r o b i o l o g i c

f e a t u r e s . A l l

E .

c o l i

t h a t

h y b r i d i z e d

w i t h

t h e

DNA

p r o b e

w e r e

a l s o

p o s i t i v e

i n t h e

VMA ELISA

a n d

S e r e n y

t e s t .

L a c t o s e - p o s i t i v e

EIEC

w e r e

i s o l a t e d

f r o m

1 2

( 3 )

4 1 0 p a t i e n t s

w i t h

l a c t o s e - p o s i t i v e

E .

c o l i .

L a c t o s e -

n e g a t i v e

EIEC

w e r e

i s o l a t e d

f r o m

5

( 1 )

o f t h e

4 1 0

p a t i e n t s ;

h o w e v e r , l a c t o s e - n e g a t i v e

E .

c o l i

were

o n l y

i s o l a t e d

f r o m

5 0

V O L .

2 6 ,

1 9 8 8


4/6

1 3 6 4

TAYLOR

ET

AL.

à

S .

f l e x n e r i

2 5 - *

S . s o n n e i

S . b o y d i i

x EIEC

20-

c a

bo

v

æ

r

< 1 2

( 6 0 )

z

- .

-

.

( 1 0 2 )

3 6 - 5 9

( 7 0 )

> 6 0

( 1 1 7 )

A g e

i n

M o n t h s

( N u m b e r o f

c h i l d r e n

e x a m i n e d )

F I G .

1 .

A g e - s p e c i f i c

i s o l a t i o n

r a t e s o f

S h i g e l l a

s p e c i e s

a n d EIEC

f r o m c h i l d r e n

w i t h

d i a r r h e a ,

T h a i l a n d ,

J a n u a r y

t o J u n e

1 9 8 5 .

p a t i e n t s .

T h u s ,

E I E C ,

i s o l a t e d

f r o m

5

( 1 0 )

o f 5 0

p a t i e n t s

w i t h

l a c t o s e - n e g a t i v e E .

c o l i ,

w e r e f o u n d

i n

h i g h e r

pr op or -

t i o n

among

l a c t o s e - n e g a t i v e

E . c o l i

t h a n

among

l a c t o s e -

p o s i t i v e

E . c o l i ,

P

0 . 0 3 5 .

Among

1 2 c h i l dr e n

w i t h

d i a r r h e a

i n f e c t e d

w i t h


E I E C ,

a

mean

o f

7 . 3

±

0 . 9

( s t a n d a r d

error

o f

t h e

m e a n )

o f 1 0 l a c t o s e - p o s i t i v e

E . c o l i

c o l o n i e s

t e s t e d were e n t e r o i n v a s i v e

c o m p a r e d

w i t h

1 . 3

±

0 . 6

o f


E . c o l i

c o l o n i e s

f r o m

c h i l d r e n

w i t h o u t

d i a r r h e a ,

P

<

0 . 0 2 b y

t

t e s t . Among

f i v e


d i a r r h e a

i n f e c t e d

w i t h l a c t o s e - n e g a t i v e

E I E C , a l l o f

2 2


c o l o n i e s w e r e

e n t e r o i n v a s i v e , a n d among

t h r e e c h i l d r e n

w i t h o u t d i a r r h e a ,

a l l o f

f i v e


c o l o n i e s

w e r e

e n t e r o i n v a s i v e .

A l l EIEC b e l o n g e d t o r e c o g n i z e d

EIEC s e r o t y p e s

( T a b l e

3 ) .

O f

23

E I E C ,

1 5 ( 6 5 ) w e r e l a c t o s e

p o s i t i v e

a n d 8

( 3 5 )

were

l a c t o s e

n e g a t i v e .

Most ( 9 1 ) EIEC

were

l y s i n e d e c a r -

b o x y l a s e n e g a t i v e ;

E . c o l i 0 1 4 4 : H 2 5

i s o l a t e d

f r o m

tw o

p a t i e n t s

w e r e

l a c t o s e n e g a t i v e

a n d l y s i n e


p o s i t i v e .

Among

c h i l d r e n

w i t h

d i a r r h e a ,

t h e s t o o l

b l o t

t e c h n i q u e

d e t e c t e d 1 3

( 7 6 )

o f

1 7

c h i l d r e n

w i t h

E I E C ,

4 3

( 4 5 )

o f 9 6

c h i l d r e n

w i t h


a n d 3

( 1 )

o f

2 9 7

c h i l d r e n

w i t h

n e i t h e r

EIEC

n o r


Among

c h i l d r e n

w i t h o u t

d i a r r h e a ,

t h e

s t o o l b l o t

was

p o s i t i v e

i n

2

( 3 3 )

o f

6

c h i l d r e n

w i t h E I E C ,

2

( 1 7 )

o f

1 2

c h i l d r e n

w i t h S h i g e l l a

s p p . ,

a n d

2

( 0 . 5 )

o f 3 9 2

c h i l d r e n

w i t h n e i t h e r

EIEC n o r


Among

1 7

c h i l d r e n

w i t h

EIEC i n f e c t i o n s a n d

d i a r r h e a ,

t h e

s t o o l

b l o t s

w e r e

p o s i t i v e

i f f i v e

o r

more c o l o n i e s h y b r i d i z e d

w i t h t h e c o l o n y

p r o b e ( 1 0 o f

1 0 )

t h a n i f l e s s t h a n

f i v e c o l o n i e s

h y b r i d i z e d

( 4

o f

7 ) .

B l o t s

were

a l s o more o f t e n

p o s i t i v e

i n

c h i l d r e n i n f e c t e d w i t h l a c t o s e - p o s i t i v e

( 1 1

o f 1 2 )

t h a n

l a c -

t o s e - n e g a t i v e ( 3

o f 5 ) E I E C ,

a n d

t h e

b l o t

was m o r e o f t e n

p o s i t i v e

i f

EIEC

was i s o l a t e d

a s

t h e o n l y p a t h o g e n ( 9

o f 1 0 )

t h a n

i f m o r e

t h a n

o n e

p a t h o g e n

( 4

o f

7 ) was i s o l a t e d . T h e r e

were

n o

d i f f e r e n c e s i n d e t e c t i n g

t h e v a r i o u s

S h i g e l l a

se -

r o t y p e s

i n

t h e s t o o l

b l o t t e c h n i q u e .

S t o o l

b l o t s

were

a s o f t e n

p o s i t i v e

w i t h

S h i g e l l a spp.

a s

w i t h l a c t o s e - n e g a t i v e

E I E C .

TABLE 2 . C l i n i c a l

f e a t u r e s a n d

s t o o l e x a m i n a t i o n

o f


d i a r r h e a i n f e c t e d w i t h

o n l y

o n e p a t h o g e n , B a n g k o k ,

T h a i l a n d ,

J a n u a r y

t o

J u n e

1 9 8 5 e

S y m p t o m s

T r e a t m e n t

r e c e i v e d

S t o o l

e x a m i n a t i o n

P a t h o g e n

( n o . )

D i a r r h e a

B l o o d y

v

L e u k o c y t e s

E r y t h r o c y t e s

< 2 4

h b d i a r r h e a F e v e r

V o m i t i n g

r e h y d r a t i o n

A n t i b i o t i c s

p r e s e n t

p r e s e n t

S h i g e l l a

s p p . ( 5 9 )

5 8

4 7

9 8

4 7

1 0

6 1

6 6

4 9

EIEC

( 1 0 )

2 0

3 0

9 0

4 0 1 0

7 0

8 9

4 4

E n t e r o t o x i g e n i c

E . c o l i ( 1 8 )

3 9

1 7

6 7

6 7

6 6 3 9

3 1

1 3

R o t a v i r u s ( 3 1 )

3 2

6

9 7

9 7 3 2

2 3

2 2

j

a

R e s u l t s a r e e x p r e s s e d a s p e r c e n t a g e s . i . v . ,

I n t r a v e n o u s .

b

D u r a t i o n

o f d i a r r h e a b e f o r e

c o m i n g

t o

t h e

c l i n i c .

J .

C L I N .

M I C R O B I O L .

. P

A b . .

1 P


5/6

SHIGELLA

AND ENTEROINVASIVE

E .

C O L I

INFECTIONS 1 3 6 5

TABLE 3 .

M i c r o b i o l o g i c c h a r a c t e r i s t i c s o f EIEC


c h i l d r e n a t C h i l d r e n s

H o s p i t a l , B a n g k o k , T h ai l a nd , 1 9 8 5

C h a r a c t e r i s t i c s

E .

c o l i N o . o f

s e r o t y p e

p a t i e n t s

L a c t o s e

LDC

M o t i l i t y

ODC

A c e t a t e

M u c a t e

I n d o l e

G l u c o s e

( g a s )

0 2 8 a c : H - 1 3

+ -

-

- - - +

0 1 4 3 : H -

1

+ - -

- + -

+

+

0 1 3 6 : H - 1

+

- - +

+

-

+ +

0 1 6 4 : H - 6

-

-

-

- +

- d

-

0 1 4 4 : H 2 5

2

-

+

+

+ +

- +

+

a

LDC, L y s i n e d e c a r b o x y l a s e ;

ODC, o m i t h i n e

d e c a r b o x y l a s e ; d , v a r i a b l e .

DISCUSSION

I n

t h i s

s t u d y

o f

e n d e m i c d i a r r h e a l

d i s e a s e

i n T h a i l a n d ,

S h i g e l l a

spp.

were

t h e

most f r e q u e n t l y

i s o l a t e d e n t e r i c

p a t h o g e n

a n d were

p a r t i c u l a r l y

i m p o r t a n t i n c h i l d r e n over

1

y e a r o l d . H o w e v e r , S h i g e l l a

spp. were n o t t h e o n l y

c a u s e o f

i n v a s i v e

d i a r r h e a l d i s e a s e . EIEC

may a l s o

b e

a c a u s e o f

e n d e m i c

d i a r r h e a l d i s e a s e

i n t h e t r o p i c s . EIEC

was i s o l a t e d

f r o m 4 o f a l l c as e s o f d i ar r h ea

a n d was commonly

a s s o c i -

a t e d

w i t h

b l o o d y

d i a r r h e a

( 7 )

a n d

among

c h i l d r e n

w i t h

d i a r r h e a w ho

were 3 t o 5 yea rs

o l d 9 ) . EIEC

a c c o u n t e d f o r

15 o f

t h e

b a c t e r i a t h a t p o s s e s s e d t h e i n v a s i v e

p l a s m i d

a n d

c a u s e d

d i s e a s e

b y s h i g e l l a l i k e

e n t e r o i n v a s i o n . T h u s ,

EIEC i s

a n

i m p o r t a n t

component

o f t h e e t i o l o g y o f e n d e m i c d i a r r h e a l

d i s e a s e .

I n

a

pr evious

s t u d y , S h i g e l l a spp. were

i s o l a t e d f r o m 44

a n d

EIEC

was

i s o l a t e d

f r o m 5 o f 2 0 0 c h i l d r e n w i t h b l o o d y

d i a r r h e a ( 2 4 ) . W i t h

s i m i l a r

m e t h o d s

i n t h i s

s t u d y ,

EIEC were

d e t e c t e d

f r o m

4 o f c h i l d r e n w i t h d i a r r h e a a n d

s i g n i f i c a n t l y

l e s s

o f t e n ( 0 . 9 ) f r o m

c h i l d r e n w i t h o u t

d i a r r h e a .

T h e num

b e r o f

EIEC

c o l o n i e s pe r s p e c i m e n

was

a l s o s i g n i f i c a n t l y

l e s s

i n

c h i l d r e n

w i t h o u t d i a r r h e a , s u g g e s t i n g

t h a t a s y m p t o m a t i c

c h i l d r e n s h e d f e w e r o r g a n i s m s . T h e

a g e - r e l a t e d i s o l a t i o n

r a t e s a n d c l i n i c a l f e a t u r e s o f EIEC i n f e c t i o n s

were s i m i l a r

t o

s h i g e l l o s i s ,

a l t h o u g h

t h e

i l l n e s s

a p p e a r e d

t o

b e

l e s s

severe.

A l l

EIEC i s o l a t e d

i n p r e v i o u s s t u d y

( 2 4 )

w e r e

l a c t o s e

p o s i t i v e

a n d

l y s i n e


n e g a t i v e ; EIEC

f r o m

7

o f

1 0 p a t i e n t s w e r e r e c o g n i z e d

EIEC s e r o t y p e s

( 0 2 8 a c : H - ,

0 2 9 : H - ) ,

a n d 3 o f 1 0 b e l o n g e d t o

a new s e r o t y p e ( F . O r s k o v ,

p e r s o n a l

c o m m u n i c a t i o n ) .

I n

t h i s

s t u d y

65 o f

EIEC

w e r e

l a c t o s e

p o s i t i v e ,

a n d a l l

b e l o n g e d

t o

r e c o g n i z e d

EIEC

s e -

r o t y p e s .

E . c o l i

0 1 4 4 : H 2 5 ,

i s o l a t e d f r o m two p a t i e n t s ,

w e r e


b u t

l y s i n e

d e c a r b o x y l a s e p o s i t i v e .

T h e s e

s t r a i n s were

b i o c h e m i c a l l y

d i s t i n c t f r o m t h o s e

d e s c r i b e d

b y

S a k a z a k i e t

a l .

( 2 0 ) .

EIEC

0144:H25

t h a t

w e r e

l y s i n e

d e c a r b o x y l a s e n e g a t i v e

w e r e

r e c e n t l y

i d e n t i f i e d

w i t h

DNA

p r o b e s ( 1 0 ) .

I n

o t h e r

s t u d i e s EIEC i s o l a t e s were

p r e d o m i -

n a n t l y

l a c t o s e

n e g a t i v e ( 2 5 ) ;

i n t h i s

s t u d y

we f o u n d

t h a t a

g r e a t e r p r o p o r t i o n

o f


E .

c o l i

were e n t e r o i n -

v a s i v e

c o m p a r e d

w i t h


E .

c o l i ,

b u t

l a c t o s e -

n e g a t i v e

E .

c o l i

were

o n l y

i s o l a t e d

f r o m 12

o f

c h i l d r e n .

DNA

h y b r i d i z a t i o n

m e t h o d s

are

p a r t i c u l a r l y

u s e f u l

i n

s c r e e n i n g l a r g e

n u m b e r s

o f


E .

c o l i

( 5 ) .

I n

a

p r e v i o u s s t u d y

we

f o u n d

t h a t t h e DNA

p r o b e

a p p l i e d

t o

c o l o n i e s

was a s s e n s i t i v e

a n d

s p e c i f i c

a s

t h e

S e r e n y

t e s t and

VMA

ELISA

i n

d e t e c t i n g

EIEC

( 2 4 ) .

Based o n

t h e s e

p r e v i -

o u s

r e s u l t s ,

t h e

sanie

p r o b e

was u s e d t o

screen

E .

c o l i

c o l o n i e s i n

t h e

p r e s e n t

s t u d y ,

and

i t

was

found t h a t a l l

c o l o n i e s

t h a t

h y b r i d i z e d

w i t h t h e

DNA

p r o b e

c o u l d

be

c o n f i r m e d

a s

EIEC

b y

S e r e n y t e s t ,

VMA

ELISA,

a nd

s e r o t y p i n g .

C o m p a r e d

w i t h

c o l o n y h y b r i d i z a t i o n ,

t h e s t o o l b l ot ha d

a

s e n s i t i v i t y

o f

76

i n

d e t e c t i n g

EIEC

c a s e s ; c o m p a r e d

w i t h

c u l t u r e r e s u l t s , t h e s t o o l

b l o t

h a d

a

s e n s i t i v i t y

o f 45 f o r

S h i g e l l a c a s e s .

T h e

s t o o l

b l o t

w a s c o n s i d e r a b l y

l e s s

s e n s i t i v e

t h a n

c o l o n y

h y b r i d i z a t i o n f o r EIEC

o r c u l t u r e

f o r

S h i g e l l a

d e t e c t i o n . L a c t o s e - p o s i t i v e EIEC

w e r e i d e n t i f i e d

m o r e o f t e n

b y s t o o l

b l o t t h a n l a c t o s e - n e g a t i v e EIEC

o r

S h i g e l l a

s p e c i e s .

T h e g r o w t h o f

l a c t o s e - n e g a t i v e o r g a n i s m s o n

M a c C o n k e y

a g a r m a y

h a v e

b e e n

i n h i b i t e d

b y

o t h e r

f e c a l b a c t e r i a .

I t i s

p o s s i b l e t h a t

e x a m i n i n g s t o o l

g r o w n

o n

a n o n s e l e c t i v e m e -

d i u m , s u c h

a s

b l o o d a g a r ,

o r a n o t h e r e n t e r i c

m e d i u m , s u c h

a s

H e k t o e n

o r

e o s i n - m e t h y l e n e

b l u e ,

m i g h t

i n c r e a s e

t h e

d e t e c t i o n o f l a c t o s e - n e g a t i v e EIEC

a n d

S h i g e l l a s p p . b y

t h i s

t e c h n i q u e .

H o w e v e r , e x a m i n i n g s t o o l

b l o t s

w i t h DNA

p r o b e s t o

d e t e c t


E .

c o l i

h a s a l s o b e e n

l e s s

s e n s i t i v e

t h a n

e x a m i n i n g

c o l o n i e s ( 7 ) .

On t h e o t h e r h a n d ,

t h i s

p r o b e

i s r e m a r k a b l y s p e c i f i c

i n s c r e e n i n g DNA

f r o n i

u n s e l e c t e d b a c t e r i a l g r o w t h . H y b r i d i z a t i o n

o f

s t o o l

b l o t s i s

a n e a s i e r a n d

m o r e

r a p i d m e t h o d o f i d e n t i f y i n g EIEC

t h a n

c o l o n y

b l o t s .

A l t h o u g h

i t i s n o t a s s e n s i t i v e a s

c o l o n y

h y b r i d i z a t i o n ,

t h e

h i g h s p e c i f i c i t y

s u g g e s t s t h a t s t o o l b l o t


may b e a p r o m i s i n g

m e t h o d t o

d e t e c t e n t e r o -

p a t h o g e n s .

LITERATURE CITED

1 . B o i l e a u , C . R . , H .

M. d ' H a u t e v i l l e , a n d

P .

J . S a n s o n e t t i .

1 9 8 4 .

DNA


t e c h n i q u e

t o

d e t e c t

S h i g e l l a

s p e c i e s

a n d


E s c h e r i c h i a c o l i . J .

C l i n .

M i c r o b i o l .

2 0 : 9 5 9 - 9 6 1 .

2 .

B r o n d s o n ,

M.

A .

1 9 8 4 . R a p i d d i m e t h y l s u l f o x i d e - m o d i f i e d

a c i d -

f a s t

s t a i n o f

C r y p t o s p o r i d i u m

o o c y s t s i n

s t o o l s p e c i m e n s . J .

C l i n . M i c r o b i o l . 1 9 : 9 5 2 - 9 5 3 .

3 .

D e a n ,

A .

G . ,

Y .

C . C h i n g ,

R .

G . W i l l i a m s ,

a n d L . B . H a r d e n .

1 9 7 2 .

T e s t

f o r E s c h e r i c h i a c o l i e n t e r o t o x i n

u s i n g

i n f a n t

m i c e :

a p p l i c a t i o n

i n a

s t u d y

o f

d i a r r h e a

i n c h i l d r e n i n H o n o l u l u .

J .

I n f e c t . D i s .

1 2 5 : 4 0 7 - 4 1 1 .

4 .

D u P o n t ,

H .

L . ,

S . B .

F o r m a l ,

R . B .

H o r n i c k ,

M.

J .

S n y d e r , J .

P .

L i b o n a t i ,

D . G .

S h e a h a n ,

E .

H .

L a B r e c ,

a n d

J .

P . K a l a s .

1 9 7 1 .

P a t h o g e n e s i s

o f E s c h e r i c h i a

c o l i

d i a r r h e a .

N .

E n g l .

J .

M e d .

2 8 5 : 1 - 9 .

5 .

E c h e v e r r i a ,

P . , J .

S e r i w a t a n a ,

O .

S e t h a b u t r ,

a n d D . N .

T a y l o r .

1 9 8 5 .

DNA


i n t h e

d i a g n o s i s

o f b a c t e r i a l

d i a r r h e a .

C l i n .

L a b .

M e d . 5 : 4 4 7 - 4 6 2 .

6 .


P . ,

J . S e r i w a t a n a ,

D .

N .

T a y l o r ,

S .

Y a n g g r a t o k e ,

a n d

C .

T i r a p a t .

1 9 8 5 .

A

c o m p a r a t i v e

s t u d y

o f


E s c h -

e r i c h i a

c o l i , S h i g e l l a ,

A e r o m o n a s ,

a n d V i b r i o

a s

e t i o l o g i e s

o f

d i a r r h e a

i n n o r t h e a s t e r n

T h a i l a n d .

Am .

J .

T r o p .

M e d .

H y g .

3 4 : 5 4 7 - 5 5 4 .

7 .

E c h e v e r r i a , P . ,

D . N .

T a y l o r , J .

S e r i w a t a n a ,

A . C h a t k a e o m o r a -

k o t ,

V .

K h u n g v a l e r t ,

T .

S a k u l d a i p e a r a ,

a n d

R .

D .

S m i t h . 1 9 8 6 .

A

c o m p a r a t i v e

s t u d y

o f e n t e r o t o x i n

g e n e

p r o b e s

a n d

t e s t s

f o r

t o x i n

p r o d u c t i o n

t o

d e t e c t



c o l i .

J .

I n f e c t .

D i s .

1 5 3 : 2 5 5 - 2 6 0 .

8 .

E w i n g ,

W.

H . 1 9 8 6 .

E d w a r d s a n d

E w i n g ' s

i d e n t i f i c a t i o n

o f

E n t e r o b a c t e r i a c a e ,

4 t h

e d . , p . 4 9 ,

1 2 0 - 1 2 4 .

E l s e v i e r

S c i e n c e

P u b l i s h i n g , I n c . ,

Ne w

Y o r k .

9 .

F o r m a l ,

S .

B . ,

a n d

R . B . H o r n i c k .

1 9 8 7 .

I n v a s i v e


c o l i . J .

I n f e c t .

D i s .

1 3 7 : 6 4 1 - 6 4 4 .

1 0 .

G o m e s ,

T .

A .

T . ,

M.

R . F .

T o l e d o ,

L . R .

T r a b u l s i ,

P . K .

W o o d ,

V O L .

2 6 ,

1 9 8 8


6/6

1 3 6 6

TAYLOR

ET

A L .

a n d

J .

G . M o r r i s , J r . 1 9 8 7 . DNA p r o b e s

f o r


o f

e n t e r o i n v a s i v e E s c h e r i c h i a

c o l i . J . C l i n .

M i c r o b i o l .

2 5 : 2 0 2 5 -

2 0 2 7 .

1 1 . H a l e , T . L . , P . J . S a n s o n e t t i ,

P .

A .

S c h a d ,

S . A u s t i n , a n d

S . B .

F o r m a l .

1 9 8 3 . C h a r a c t e r i z a t i o n

o f v i r u l e n c e

p l a s m i d s a n d p l a s -

m i d- a s s oc i at e d o u t e r m e m b r a n e

p r o t e i n s

i n

S h i g e l l a

f l e x n e r i ,

S h i g e l l a s o n n e i ,

a n d

E s c h e r i c h i a c o l i . I n f e c t .

I m m u n . 4 0 : 3 4 0 -

3 5 0 .

1 2 .

H a r r i s ,

J .

C . ,

H .

L .

D u P o n t ,

a n d

R .

B .

H o r n i c k .

1 9 7 2 .

F e c a l

l e u k o c y t e s i n d i a r r h e a l i l l n e s s .

A n n . I n t e r n . M e d . 7 6 : 6 9 7 - 7 0 3 .

1 3 . H a r r i s ,

J .

R . ,

I .

K . W a c h s m u t h ,

B .

R . D a v i s , a n d M. L .

C o h e n .

1 9 8 2 .

H i g h - m o l e c u l a r - w e i g h t

p l a s m i d c o r r e l a t e s w i t h E s c h e -

r i c h i a

c o l i

e n t e r o i n v a s i v e n e s s . I n f e c t .

I m m u n .

3 7 : 1 2 9 5 - 1 2 9 8 .

1 4 .

H e r r m a n n , J . E . , N . R . B l a c k l o w , D .

M.

P e r r o n ,

G . C u k o r , P . J .

K r a u s e , J . S . H y a m s , H . J . B a r r e t t , a n d P . L . O g r a .

1 9 8 5 .

Enzyme i m m u n o a s s a y w i t h

m o n o c l o n a l a n t i b o d i e s f o r t h e d e -

t e c t i o n

o f

r o t a v i r u s i n s t o o l s p e c i m e n s . J .

I n f e c t . D i s .

1 5 2 : 8 3 0 -

8 3 2 .

1 5 .

K e u s c h ,

G .

T . , a n d S . B . F o r m a l . 1 9 8 4 . S h i g e l l o s i s ,

p .

7 2 3 - 7 3 6 .

I n

K .

S .

W a r r e n

a n d A .

A . F . Mahmoud

( e d . ) , T r o p i c a l a n d

g e o g r a p hi c al m e di c i ne ,

l s t

e d .

M c G r a w - H i l l B o o k

C o . ,

Ne w

Y o r k .

1 6 . M e l v i n ,

D .

M . , a n d

M.

M. B r o o k .

1 9 7 4 .

L a b o r a t o r y p r o c e d u r e s

f o r t h e

d i a g n o s i s o f i n t e s t i n a l

p a r a s i t e s , p . 1 0 8 , 1 1 5 , 1 2 3 . C e n t e r s

f o r

D i s e a s e C o n t r o l ,

A t l a n t a .

1 7 .

P a l , T . ,

A .

S .

P ac s a, L . Emody,

S .

V o r o s ,

a n d

E .

S e l l e y .

1 9 8 5 .

M o d i f i e d e n z y m e - l i n k e d i m m u n o s o r b e n t

a s s a y

f o r d e t e c t i n g


E s c h e r i c h i a c o l i

a n d v i r u l e n t S h i g e l l a s t r a i n s . J .

C l i n . M i c r o b i o l . 2 1 : 4 1 5 - 4 1 8 .

1 8 . O r s k o v , F . , a n d I . O r s k o v .

1 9 7 5 .


c o l i

O: H s e r o t y p e s

i s o l a t e d f r o m h u m a n b l o o d :

p r e v a l e nc e o f

t h e K i

a n t i g e n

w i t h

t e c h n i c a l

d e t a i l s o f t h e O

a n d H

a n t i g e n i c d e t e r m i n a n t s .

A c t a

P a t h o l .

M i c r o b i o l . S c a n d . S e c t . B

8 3 : 5 9 5 - 5 6 0 .

1 9 . S a c k , D .

A . ,

a n d

R . B . S ac k .

1 9 7 5 . A

t e s t f o r e n t e r o t o x i g e n i c

E s c h e r i c h i a c o l i u s i n g

Y - 1 a d r e n a l

c e l l s

i n m i n i c u l t u r e . I n f e c t .

I m m u n . 1 1 : 3 3 4 - 3 3 6 .

2 0 . S a k a z a k i , R . ,

K .

T a m u r a ,

a n d

M.

S a i t o .

1 9 6 7 .

E n t e r o p a t h o g e n i c


a s s o c i a t e d w i t h d i a r r h e a i n

c h i l d r e n a n d a d u l t s .

J p n . J . M e d . S c i . B i o l . 2 0 : 3 8 7 - 3 9 9 .

2 1 .

S e r e n y ,

B .

1 9 5 5 .

E x p e r i m e n t a l

S h i g e l l a k e r a t o c o n j u n c t i v i t i s .

A c t a

M i c r o b i o l . A c a d .

S c i .

H u n g .

2 : 1 9 3 - 1 9 6 .

2 2 . S e t h a b u t r , O . ,

S .

H a n c h a l a y ,

P .


D . N .

T a y l o r ,

a n d U .

L e k s o m b o o n .

1 9 8 5 .

A n o n - r a d i o a c t i v e DNA p r o b e t o i d e n t i f y

S h i g e l l a

a n d


E .

c o l i i n s t o o l s o f c h i l d r e n

w i t h

d i a r r h o e a .

L a n c e t i i : 1 0 9 5 - 1 0 9 7 .

2 3 . S t o l l , B .

J . , R .

I . G l a s s , M. I . H u g , M. U . K h a n , H . B a n u , a n d J .

H o l t . 1 9 8 2 . E p i d e m i o l o g i c

a n d

c l i n i c a l

f e a t u r e s

o f

p a t i e n t s

i n f e c t e d w i t h

S h i g e l l a

who a t t en de d a

d i a r r h e a l

d i s e a s e h o s p i t a l

i n B a n g l a d e s h .

J .

I n f e c t . D i s . 1 4 6 : 1 7 7 - 1 8 3 .

2 4 .

T a y l o r ,

D .

N . ,

P .


T .

P a l ,

O .

S e t h a b u t r ,

S . W a n k i j t -

c h a r o e n ,

S . S r i c h a r m o r n ,

B .

R o w e ,

a n d

J .

C r o s s . 1 9 8 6 . T h e r o l e

o f


e n t e r o i n v a s i v e E .

c o l i ,

a n d

o t h e r e n t er o p a th o -

g e n s

a s c a u s e s

o f

c h i l dh o o d d y s en t e r y

i n T h a i l a n d . J .

I n f e c t .

D i s .

1 5 3 : 1 1 3 2 - 1 1 3 8 .

2 5 .

T o l e d o ,

M. R .

F . ,

a n d

L .

R .

T r a b u l s i . 1 9 8 3 .

C o r r e l a t i o n b e t w e e n

b i o c h e m i c a l

a n d

s e r o l o g i c a l

c h a r a c t e r i s t i c s o f


a n d

r e s u l t s

o f

t h e

S e r e n y

t e s t .

J .

C l i n .

M i c r o b i o l .

1 7 : 4 1 9 - 4 2 1 .

2 6 .

W o o d ,

P .

K . , J .

G . M o r r i s , J r . ,

P .

L . C . S m a l l ,

O .

S e t h a b u t r ,

M.

R .

F .

T o l e d o ,

L .

T r a b u l s i , a n d J . B . K a p e r . 1 9 8 6 . C o m p a r i -

s o n o f

DNA

p r o b e s

w i t h

t h e

S e r e n y

t e s t

f o r

t h e


o f

i n v a s i v e S h i g e l l a

a n d


s t r a i n s .

J .

C l i n . M i c r o -

b i o l .

2 4 : 4 9 8 - 5 0 0 .

J . C L I N . M I C R O B I O L .

j. clin. microbiol. 1988 taylor 1362 6

Documents