mémoires écophysiotox 2013
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Environmental Physiology & Toxicology
Ecophysiology – Ecotoxicology (PK) Systems Ecotoxicology (FS)
P. Kestemont
F. Silvestre
http://webapps.fundp.ac.be/system-ecotox
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2
Effet des chocs thermiques sur l’état de smoltification d’une souche de saumon Atlantique au cours de la migration de dévalaison
• Prélèvement de smolts dans des rivières salmonicoles
• Analyses physiologiques de marqueurs de smoltification
Promoteurs: Prof. P. Kestemont Encadrants: B. Bernard, Dr R. Mandiki
• Marquage de poissons
• Opérations de repeuplement
• Prélèvement de sang et d’organes
• Activités enzymatiques (spectrophotométrie)
• Dosages hormonaux (RIA, ELISA)
• Dosage des HSPs (Western-blot)
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3
Etude des perturbations neurologiques chez l’anguille exposée au méthylmercure
• Contamination in vivo d’anguilles avec du MeHg à doses environnementales
• Analyses physiologique et comportementale
Analyses protéomiques et biochimiques
• gels d’électrophorèse 2D (FUNDP-URBE)
• enzymes antioxydantes (UCL-BNTE)
• dosage de marqueurs neurologiques (dopamine, sérotonine) (URBE)
• analyses comportementales (ULG)
Promoteurs: Prof. P. Kestemont et J-F. Rees Encadrants: Dr D. Scaion, MC, Forget, A. Evrard
Déclin des populations de Anguilla anguilla
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Impact des perturbateurs endocriniens sur le système immunitaire de la truite arc-en-ciel
Promoteur: Prof. P. Kestemont Encadrant: Sophie Massart
Perturbateurs endocriniens
Système reproducteur Système immunitaire
Expérience in vivo Exposi'on des poissons et prélèvements des organes
Analyses de paramètres immunitaires
Complément, lysozyme, immunoglobulines, distribu'on
leucocytaire
Étude transcriptomique Etude de l’expression de gènes
spécifiques par qPCR
Les perturbateurs endocriniens modulent-‐ils les différents mécanismes de l’immunité ?
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5
Nutrition lipidique et réponse immunitaire chez la perche commune Perca fluviatilis
Aliment riche en AGLPI
Aliment carencé en AGLPI
J0 J60 J67
ANALYSES: § Foie + rate: mesure du niveau d’expression de gènes clés de la réponse immunitaire § Sang: mesures de marqueurs immunitaires (lysozyme, complément C3, leucogramme)
Echantillonnages: Foie, rate, sang
OBJECTIF: étudier l’impact d’un régime carencé en AGLPI sur le système immunitaire de la perche, en présence d’un agent pathogène (Aeromonas)
Bactérie Aeromonas
Aliment riche en AGLPI
Aliment carencé en AGLPI Témoin
Conditionnement alimentaire Challenge bactérien
Promoteur : Prof. P. Kestemont Encadrants : Dr F. Geay, A. Evrard
http://www.fishlipids.be/index.html
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• Stress • Nutrition sub-optimale • Présence de pathogènes opportunistes
6
Influence de la nutrition sur la résistance aux maladies infectieuses des poissons en élevage
Sensibilité accrue aux infections Pics de mortalité en élevage
Promoteurs: Prof. P. Kestemont Encadrants: Dr J.Douxfils, Dr R. Mandiki, A. Evrard
• Objectif: Etudier les effets et mécanismes d’action de composés immunostimulants (β-glucans) via l’alimentation sur le statut immunitaire et la résistance aux maladies infectieuses chez la truite AEC
Immunostimulation orale préventive (>< antibiotiques) !!!
• Analyses: - Nourrissage suivi d’infection expérimentale (challenge bactérien) - Prélèvements d’organes impliqués dans l’immunité et de sang
- Marqueurs immunitaires humoraux, cellulaires, moléculaires (Q-PCR)
Projet PAI AQUASTRESS
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F1
F2
Pollutant/stress
Se, triclosan
New theories of evolution
1° Quels rôles pour l’analyse épigénétique en écologie et en écotoxicologie ?
Acclima'on/adapta'on
Phenotypic plas'city
Evolu'on of the environmental stress response
F. Silvestre E. Falisse
Project FNRS with the Dpt of Chemistry and the Laboratory
of Oceanology (ULg)
Delayed effects
Transgenerational effects
Epigenetics
Larvae & juveniles
Zebra fish / Cyprinodon
• Whole methylation level
• Specific methylation level of CpG islands of genes of interest (according to OMICS) (pyrosequencing)
• Shotgun genomic bisulfite sequencing (BS-Seq)
• Histones PTMs
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F1
F2
2° Impacts du réchauffement climatique sur la toxicité des polluants chez les organismes aquatiques. Approches transgénérationnelles.
F. Silvestre P. Kestemont
J. Douxfils E. Falisse
Transgenerational effects
Larvae & juveniles
Zebra fish
F0
28 days +2 or +4°C
Acute metal exposure
F1, F2, F3,…
Epigenetics OMICS
Projet PAI AQUASTRESS
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Techniques biochimiques utilisées
Cultures cellulaires, chromatographie, SDS-PAGE, méthodes spectroscopiques
P. fluviatilis
Contexte général: Compréhension des interactions polluants-protéines impliquées dans les mécanismes toxicologiques chez Danio rerio
Objectifs du mémoire:
1. Production et purification de l’enzyme PDI (Protein Disulfide Isomerase) chez Danio rerio
2. Caractérisation de son activité enzymatique et de son inhibition par des polluants type PCB ou
triclosan
?
Effets écotoxicologiques
3° Isolation et caractérisation de l’enzyme PDI, potentiellement impliquée dans le mode d’action de polluants aquatiques
F. Silvestre C. Michaux
E. Tinti
Projet FNRS avec le Dpt de Chimie et le Laboratoire d’Océanologie (Ulg)
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