pamela l. ruegg, dvm, mpvm university of … · historia del control de mastitis staph aureus y...
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Leche de alta calidad• De apariencia blanca
• Sin olores desagradables
• Libre de sustancias
anormales
– Pesticidas
– Adicion de agua
– Residuos de antibióticos o
antisépticos
• Calidad definida por
– Conteo de celulas
somaticas
– Conteo bacteriano
Conteo Bacteriano• La leche es un excelente medio de crecimiento
para las bacterias
– Especialmente si no se refrigera o si el equipo no
se limpia en forma adecuada
• Conteo de bacteriano total (CBT)
– Incube 1 ml de leche en medio estándar durante 48
h a 32 C.
– Cuenta el número de colonias de bacterias
– Meta: < 5000 cfu/ml
– También se la conoce como “plate loop count”
• La causa mas común de altos CBT es la limpieza
inadecuada
Evaluando la calidad de leche
• Conteo de placa
standard
• Conteo Laboratorio
pasteurizado
• Conteo Coliform
• Conteo preliminar de
incubación
• Bactoscan
Conteo en standard placa (SPC)
• Metodo Oficial de referncia y regulatorio
• Regulaciones para la leche en U.S. – <100,000 cfu/ml –
Grado A
– <300,000 cfu/ml –Grado B
• Datos de WI SPC, ‟94-‟98– 804,575 resultados SPC
evaluados mensualmente
– Grado A (95% de leche)
• 90% <34,000 cfu/ml
– Grado B (5% de leche)
• 50% <25,000 cfu/ml
• 10% >170,000 cfu/ml
<5,000 cfu/ml es un objetivo razonable
>10,000 cfu/ml indican un problema
SPC Alto• Indica un problema con la
calidad de la leche– No util para diagnóstico
• Las tres C‟s– Cooling (enfriado)
– Cleaning problem (problema de limpieza)
– Contamination (contaminación)
• Preparación para el Pre-ordeño de la Vaca & Conteoos Bacterianos
• Pocas veces asociado con mastitis subclínica– Strep ag
– Strep uberis
Conteos bacterianos diagnosticos• Conteo pasteurizado en
laboratorio– Usado cuando CPS es
alto
– CPS hecho en leche pasteurizada ltlt
• 62.8C for 30 min.
– ID thermodurics
• Micrococcus, microbacterium, lactobacillus, clostridium, bacillus
• Causa desecho de la leche
• Causas de LPC alto– Equipamiento sucio
– Falta de higiene, depositos de piedras de leche (calcio)
• Objetivos del LPC– <100 to 200 cfu/ml
– <10 indica higiene excelente
• Datos de Penn (Jayarao et al., 2004)
– 10% < 30 cfu
– 50% <133 cfu
Conteo de coliformes
• Diluciones de cultivo
de leche cruda en
medios selectivos
– Violet red bile agar
– Inc. 32 C por 24 H
– Petrifilm™ tambien
• Fuentes de bacterias
coliformes
– Ubres de las vacas
– Falta de higiene
durante el ordeñe
Conteos de coliformes
• Objetivo– < 50 cfu/ml
– 100 – 1000 cfu/ml indica falta de higiene durante el ordeñe
– >1000 cfu/ml indica crecimiento de bacterias
• Muestra de tanque (NY)– 30% <10 cfu/ml
– 20% > 100 cfu/ml
• Muestras Penn– 10% < 10 cfu
– 50% < 60 cfu
Conteo de Bacterias por categoria de conteo de
coliformes
0
2,000
4,000
6,000
8,000
10,000
12,000
14,000
16,000
18,000
20,000
Low (<50) Med (50-100)High (>100)
Coliform Count (cfu/ml)
SP
C &
PIC
(cfu
/ml)
0
200
400
600
800
1,000
1,200
LP
C, C
NS
, E
S (
cfu
/ml)
LPC CNS ES
SPC PIC
Jayarao, et al., JDS 2004
Interpretacion de los conteos bacterianos de la leche del tanque
• Comparicion de los tests diagnosticos
• Tienen que usarse Tests multiples (por lo menos 3 muestras)
Células somáticas en leche• CCS se componen de
células blancas de la sangre y ocasionales células de descamación
• Los macrófagos son la célula más común en la glándula no infectada– Proporcionan vigilancia e
inician la respuesta inflamatoria
– Atraen a los PMNs
• 90% del CCS en glándulas infectadas son neutrófilos
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
80%
90%
100%
Distribución de las células en la leche normal
Aumentan A más del
90%
How Somatic Cells Get into Milk
Blood Flow
Blood Vessel Wall
M
M
M
Mammary Tissue
Adapted from Burton & Erskine, Vet Clinics Food
Anim Pract, 2003
CCS en leche normal
• El modificador más grande de la CCS es la mastitis
• CCS de cuartos o vacas no infectados es usualmente <200.000
• Muchas vacas tienen CCS <100.000
0
200
400
600
800
1000
1200
1400
1600
SCC
(ce
lls/m
l x 1
00
0)
CCs de curatos infectado y normal en una vaca
Timms, NMC 2001
Mastitis Clínica
• La leche no es normal o
las vacas muestran
signos clínicos de
enfermedad
• Los signos más comunes
– Grumos en la leche
– Cuarto hinchado
– Temperatura Corporal
Elevada
– Anorexia
– Agalactia
Historia del Control de Mastitis Staph aureus y Strep ag
• Desinfección post-ordeña de la teta
• Terapia de Secado Universal
• Tratamiento apropiado de casos clínicos
• Desecho de vacas cronicamente infectadas
• Maantenimiento regular de la máquina de ordeña
Plan de 5 Puntos
Aislamiento bacteriano en >77.000 muestras de leche, WI, 1994-2001
0%
5%
10%
15%
20%
25%
1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001
Año
Pro
po
rc
ión
de
ais
lam
ien
to
s
Staph aureus
Strep agalactiae
Makovec & Ruegg, 2002
Aislamiento bacteriano en muestras
de leche
Menores 16% Contag.
13%
Ambient.
17%Sin
crecimiento
31%
Tipos de Mastitis
usually subclinical
Staph aureus
usually subclinical
Strep agalactia
clinical and subclinical
Mycoplasma
Contagious
SCC Measures
clinical
Coliforms
clinical and subclinical
Environmental Streps
Environmental
not measured by SCC
Mastitis
Control IncrementadoProblema en
aumento
Contagious Mastitis Environmental Mastitis
Mastitis Contagiosa versus Mastitis Ambiental
• El Reservorio es el ambiente
• Frecuentemente diseminada entre ordeñas
• No puede ser erradicada
• El Reservorio es la ubre de
las vacas
• Frecuentemente diseminada
durante la ordeña
• Puede ser Erradicada
E. coli
Env. strepsS.aureus
Env. streps
Str. ag
El Pezón
• El esfinter del pezón es la barrera más importante para mantener a las bacterias fuera de la ubre
• El daño al extremo del pezón casi siempre causa mastitis Esfinter del Pezón
Exposición a patógenos
• Existe una constante exposición del esfinter a las bacterias
• Las bacterias deberán entrar a la ubre a través dell conducto del pezón para causar mastitis Diagram Credit: Purdue Univerisity:
http://www.milkquality.org/
Tratamiento de Mastitis
• Vacas enfermas requieren
cuidado inmediato
• La mayoría de las
decisiones de tratamiento
son voluntarias
• La Mastitis es usualmente
un síndrome
– Alterna entre estados clínicos
y subclínicos
SCC para vacas con mastitis
clinica recurrente
0250500750
10001250150017502000225025002750300032503500
enero
marz
mayo
julio
Sept.
Nov
SCC (x1000)
Principios para el Tratamiento Eficaz de Mastitis Clínica
• Identificación temprana de la mastitis
• Diagnóstico presuntivo del patógeno causal
• Conocer la probabilidad de la efectividad del tratamiento
Identificacion de Mastitis Clínica
• Los dueños de tambos son usualmente encargados y no ordeñan
• Porque los ordeñadores deben detectar y reportar casos de mastitis?
• Como sabe el dueño cuanta mastitis hay?– Despunte= no
– Retención de leche anormal=no
– Tratamiento=no El tratamiento no es efectivo Si la detección no es efectiva
Diagnóstico temprano de Infecciones con Gram + Afectan el Resultado del
Tratamiento• La probabilidad de cura
depende de la duración de la infección
• Evaluación de la duración del tratamiento basado en las SCC– Registros de 225 casos de
mastitis clínica en 1 tambo
– Días de descarte de leche comparados basados en SCC
– Infección crónica definida como 2 meses con tests >400,000 cel/ml
Dias de leche descartada
por caso
0
2
4
6
8
10
Cronica No cronica
Estado de la Infeccion antes del
Tratamiento
Dia
s d
e l
ech
e d
esc
arta
da
P< .006
Ruegg, NMC 2004
Sitio de la Infección
• Infecciones con bacterias
que invaden el tejido son
mas difíciles de curar
– Infección crónica por
S aureus
• Infecciones con bacterias
que infectan la superficie
de las células son mas
fáciles de curar
Alveolos SecretoriosConductos
Cisterna de la Glándula
Características de PatógenosContagiosos
S aureus Larga SCC aumentadas Celula <35% >70%
S agalactia Larga SCC aumentadas Sup. Celular >90%
M bovis Larga SCC, aumentadas Sup. Celular <5%
Clínicas, reducción & sangre
de prod leche
Patógeno Duración Detección Sitio Tasa de cura
Características de Patógenos Ambientales
Strep Variable SCC Sup. Celular >75%
dysgalactia Clínicas
Strep Variable SCC Sup. Celular >70%
uberis Clínicas Algunas invasivas
Coliforms Cortas Leve o severa Sup. Celular >85%
clínicas Sangre
CNS Variable SCC o leve Sup. Celular >70%
clínicas
Patógeno Duración Detección Sitio Tasa de cura
Streptococcus agalactiae• Patógeno Contagioso
• Muy controlable
• 80-90% sensible a
medicamentos a base de
penicilina.
• Causa un alto SCC en
tanques enfriadores
• Identifique las vacas
infectadas mediante
cultivo o SCC y
tratamiento durante con
el producto de la vaca en
lactancia
Erradicación Strep. ag
0%
5%
10%
15%
20%
25%
30%
35%
40%
45%
Pre-RX 30 d
PostR
12 M
PostRX
% I
nfe
cte
d
0
100
200
300
400
500
600
700
800
900
1000
SC
C (
x1000)
Vacas inf.
CCS
Erskine & Eberhart, 1990
Staphylococcus aureus
• Vive en la piel humana y de las vacas y
en las ubres
• Se disemina con facilidad de vaca a
vaca en el ordeño
• Causa mastitis clínica y subclínica
– Puede causar aumentos en los conteos
somáticos celulares
• Difundido en hatos
– 50-95% de hatos infectados
Staphylococcus aureus
• Muy resistente al tratamiento durante la
lactancia especialmente si es crónico
• Forma pequeños bolsillos de infección en
la ubre que destruye el tejido que produce
la leche.
• Muy dificil para los antibióticos llegar a los
bolsillos de infección
• Forma cicatrices en la ubre
Tratamiento de mastitis clínica por Staph aureus
• Tasa de curas para Staph aureus durante la lactancia <20%
• Factores que influencia la tasa de curación– Edad de la vaca
– SCC de los cuartos afectados
– Número de cuartos afectados
– Etapa de la lactancia
– Duración de la Infección
• Tasas mas altas de curación para vacas nuevas, en lactancia temprana y con infecciones de corta duración
Tasa de CuraOwens et al, „97
Infección nueva con S aureus: 70%
Crónica con S aureus 35%
Sol et al., 1997
Tasa de Cura Bacteriologica
0%
10%
20%
30%
40%
50%
60%
70%
80%
90%
Wilson '99 Morin '98
No Antibiotics Antibiotics
Streptococci Ambientales
• Streptococci otro que Strep ag – Strep uberis
– Strep dysgalactia
• Tendencias estacionales en las infecciones
• Tasa alta de cura espontanea – Tambien la tasa de
recurrencia cuando el tratamiento es inadecuado
• Casos clínicos necesitan tratamiento intramamario agresivo
Tasa de Recurrencia
29% de las vacas que reciben antibiótico
46% de vacas sin antibiótico
Mastitis por Coliformes
Resultados de mastitis inducida por E. coli
(n = 4 per group)
0
50
100
150
200
250
300
350
400
Cura Bacteriol Cura Clinica de
Cuarto
Cura Clinica de
la Vaca
Hou
rs t
o Out
come
Sin Trat
OrdeneFrecuente
• Coliforms– E. coli
– Klebsiella
• Típicamente de corta duración
– 7-10% puede recurrir
• Signos clínicos causados por endotoxinas
• Numero de bacterias hace el pico 5-16 horas post infección
– Mas tarde aparecen signos clínicos
• La mayoría de las curas dependen de la asistencia del sistema inmune de la vaca
• Terapia de sostén es importante
Leininger & Roberson, 1997
Factores relacionados con la probabilidad de eficacia del tratamiento
• Selección de casos apropiados
para recibir tratamientos
• Conocer el tipo de patógeno
• Selección de la droga
adecuada
• Administración por la vía
apropiada
• Duración correcta del
tratamiento
Como se cura la mastitis?
• Los antibióticos funcionan mejor cuando
el sistema inmune de la vaca es efectivo
• Cualquier complicación en el sistema
inmune de la vaca reduce las
probabilidades de cura
– Sanidad de la punta del pezón
– Enfermedad metabólica concurrente
– Periodo de periparto
– Stress calórico
Conclusiones
• El tratamiento de la mastitis es importante para la calidad de leche
• El tratamiento efectivo esta basado en el diagnostico correcto
• Los Antibióticos deben ser utilizados en casos apropiados
• Tasa de curación aceptables para vacas con casos recurrentes de mastitis en cuartos múltiples no han sido reportadas
• Vacas con mastitis severas por coliformes deben recibir terapia sistémica