prof. odir dellagostin disciplina de biologia molecular
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Prof. Odir DellagostinDisciplina de Biologia Molecular
RNARNA – Ácido ribonucléico– Ácido ribonucléico
- mRNA- mRNA
- tRNA- tRNA
- rRNA- rRNA
- hnRNA- hnRNA
- snRNA- snRNA
Estrutura de um gene eucarioto
Sítio de PoliAPromotor Região Codificadora
hnRNAAAAAAAAAAA
mRNA
AAAAAAAAAA
Exon
Intron
DN
AR
NA
CAP
CAP
Transcrição em eucariotos
Requerem proteínas auxiliares: fatores de transcrição
RNA pol I Nucleólo rRNA28S, 18S, 5,8S
Várias subunidades
50-70%
RNA pol II Nucleoplasma hnRNA (transcrito primário)
snRNA
Várias subunidades 20-40 %
RNA pol III Nucleoplasma rRNA 5S
tRNAs
Várias subunidades
10%
RNA pol Mitocondrial
Mitocôndria 01 subunidade
RNA pol de Cloroplastos
Cloroplasto Similar as bacterianas
Estrutura de Promotores da RNA Pol II
Tata Binding Protein
Promotores de genes transcritos pela RNApol II
TFIIDTFIID = = TBP + 10 TAFs
Proteínas necessárias para transcrição a partir de promotores reconhecidos pela RNA Pol II
IntroduçãoTranscrito primárioTranscrito primário
Pré-RNAPré-RNA
Precursores de RNA Precursores de RNA (hnRNA)(hnRNA)
Processamento Processamento
RNAs funcionais (mRNA)RNAs funcionais (mRNA)
Algumas informações sobre íntrons3,7 íntrons por kb de região codificadoraNo homem o número médio é de 5 íntrons
por gene94% dos genes contém íntronsO tamanho médio dos íntrons é de 125 pbO tamanho médio dos éxons é de 90 a
120 pb (30 a 40 aa)
Splicing de íntrons de mRNA
Características de íntrons de mRNA
- Adenina localizada 20 a 50 nt da extremidade 3’ do íntron
- Região rica em pirimidinas na extremidade 3’ do íntron
- Regra GU-AG
Íntrons na região codificadoraÍntrons na região codificadora
SplicingSplicing- Spliceossomo: formado por proteínas e snRNPs
- Estrutura montada assim que o íntron é transcrito
- Reação em cascata direcionada pelo pareamento de bases
Cis-splicingCis-splicing
Trans-splicingTrans-splicing
- Ascaris lumbricoidesAscaris lumbricoides
- TripanossomasTripanossomas
Splicing alternativoSplicing alternativo
Splicing alternativoSplicing alternativo
Transporte ativo para o citoplasmaTransporte ativo para o citoplasma
Spliceossomo – 3000 kDaSpliceossomo – 3000 kDa
Erros no processo de splicingErros no processo de splicing
• Mecanismo de proteção contra RNAs incorretosMecanismo de proteção contra RNAs incorretos
Localização do códon de terminaçãoLocalização do códon de terminação
4- Splicing de íntrons de tRNA4- Splicing de íntrons de tRNA
A presença de íntrons nos genes eucarióticos, aparentemente,
representa um enorme desperdício celular
Então, por que a evolução nos presenteou com estas seqüências?
Mecanismo de proteção contra mutações? Diversidade: genomas e proteomas (splicing alternativo)? Regulação gênica?...
Adição do CAPAdição do CAP
Fosfo-hidrolaseGuanilil-transferase
Cauda poli ACauda poli A
Poli(A)-polimerase
Processamento dos rRNAsProcessamento dos rRNAs
Processamento de precursores de tRNA
tRNA maduro
Modificação das bases Processamento
Modificação de nucleotídeosModificação de nucleotídeos
- rRNA e tRNA
- Metilação de bases, da ribose (C2)
- Catalizadas por várias enzimas