Protočna citometrija u MDS- u ndash korak naprijed

Zoran Šiftar

Klinički zavod za medicinsku biokemiju i laboratorijsku medicinu

KB Merkur Zagreb

Tečaj HKMB 01062019

KLASIFIKACIJA

MINIMALNI MORFOLOŠKI KRITERIJI ZA DIJAGNOZU

MIJELODISPLASTIČNOG SINDROMA (MDS)

MINIMALNO 10 STANICA NAJMANJE JEDNE OD STANIČNIH

LINIJA

KOŠTANE SRŽI

MORA POKAZIVATI NEDVOSMISLENU DISPLAZIJU

Jaffe ES Harris NL Stein H Vardiman JW i sur World Health Organization Classification of Tumours WHO Classification of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues Fourth Edition Lyon France IARC Press 2008

DISPLAZIJA U JEDNOJ OD

LOZA ERITROCITNE

GRANULOCITNE

TROMBOCITNE

KOŠTANE SRŽI

CITOGENETSKE PROMJENE

KLINIČKE ZNAČAJKE

KLASIFIKACIJA

WHO Classification of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues Swerdlow SH Campo E Harris NL i sur World HealthOrganization Classification of Tumours 2017 Revised Edition WHOClassification of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues Lyon France IARC Press 2017

Gredelj Šimec Nj Kaić G Škrtić A i sur Smjernice za dijagnozu i liječenje bolesnika s mijelodisplastičnim sindromom Radna skupina za mijelodisplastični sindrom Hrvatske kooperativne grupe za hematološke bolesti (KROHEM)Referalni centar Ministarstva zdravlja Republike Hrvatske za dijagnostiku i liječenje mijelodisplastičnog sindroma Hrvatsko hematološko društvo Hrvatskoga liječničkog zboraLiječ Vjesn 20171391ndash11

Malcovati L Hellstrom-Lindberg E Bowen D i sur Diagnosis and treatment of primary myelodysplastic syndromes in adults recommendations from the European LeukemiaNet Blood 2013122(17) 2943ndash2964

+ IMUNOFENOTIPIZACIJA

STANDARDIZACIJA

van de Loosdrecht AA Alhan C Beacuteneacute MC i sur Standardization of flow cytometry in myelodysplasticsyndromes reportfrom the first European LeukemiaNet working conference on flow

cytometric in myelodysplastic syndromes Haematologica 2009941124-1134

Westers TM Ireland R Kern W i sur Standardization of flow cytometry in myelodysplastic syndromes a report from an international consortium and the European LeukemiaNet Working Group Leukemia 2012 26(7) 1730 ndash 1741

Porwit A van de Loosdrecht AA Bettelheim P i sur Revisiting guidelines for integration of flow cytometry results in the WHO classification of myelodysplastic syndromesmdashproposal from the InternationalEuropean LeukemiaNet Working Group for Flow Cytometry in MDS Leukemia 201428(9)1793-1798

European LeukemiaNet Working Group

STANDARDIZACIJAEuroFlow Consortium

T Kalina T Flores-Montero J van der Velden VHJ i sur EuroFlow Consortium (EU-FP6 LSHB-CT-2006-018708)

EuroFlow standardization of flow cytometer instrument

settings and immunophenotyping protocols Leukemia 2012

26(9) 1986ndash2010

van Dongen JJM Lhermitte L Boumlttcher S i sur EuroFlow antibody

panels for standardized n-dimensional flow cytometric

immunophenotyping of normal reactive and malignant

leukocytesldquo Leukemia 201226(9)1908-75

8 bojna analiza ndash uvjet strogo definirana vrsta

citometra vrsta protutijela na stanične biljege vrsta

fluorokroma i njihova međusobna kombinacija i

proizvođači

KLASIFIKACIJA

MINIMALNI MORFOLOŠKI KRITERIJI ZA DIJAGNOZU

MIJELODISPLASTIČNOG SINDROMA (MDS)

MINIMALNO 10 STANICA NAJMANJE JEDNE OD STANIČNIH

LINIJA

KOŠTANE SRŽI

MORA POKAZIVATI NEDVOSMISLENU DISPLAZIJU

Jaffe ES Harris NL Stein H Vardiman JW i sur World Health Organization Classification of Tumours WHO Classification of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues Fourth Edition Lyon France IARC Press 2008

DISPLAZIJA U JEDNOJ OD

LOZA ERITROCITNE

GRANULOCITNE

TROMBOCITNE

KOŠTANE SRŽI

CITOGENETSKE PROMJENE

KLINIČKE ZNAČAJKE

KLASIFIKACIJA

WHO Classification of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues Swerdlow SH Campo E Harris NL i sur World HealthOrganization Classification of Tumours 2017 Revised Edition WHOClassification of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues Lyon France IARC Press 2017

Gredelj Šimec Nj Kaić G Škrtić A i sur Smjernice za dijagnozu i liječenje bolesnika s mijelodisplastičnim sindromom Radna skupina za mijelodisplastični sindrom Hrvatske kooperativne grupe za hematološke bolesti (KROHEM)Referalni centar Ministarstva zdravlja Republike Hrvatske za dijagnostiku i liječenje mijelodisplastičnog sindroma Hrvatsko hematološko društvo Hrvatskoga liječničkog zboraLiječ Vjesn 20171391ndash11

Malcovati L Hellstrom-Lindberg E Bowen D i sur Diagnosis and treatment of primary myelodysplastic syndromes in adults recommendations from the European LeukemiaNet Blood 2013122(17) 2943ndash2964

+ IMUNOFENOTIPIZACIJA

STANDARDIZACIJA

van de Loosdrecht AA Alhan C Beacuteneacute MC i sur Standardization of flow cytometry in myelodysplasticsyndromes reportfrom the first European LeukemiaNet working conference on flow

cytometric in myelodysplastic syndromes Haematologica 2009941124-1134

Westers TM Ireland R Kern W i sur Standardization of flow cytometry in myelodysplastic syndromes a report from an international consortium and the European LeukemiaNet Working Group Leukemia 2012 26(7) 1730 ndash 1741

Porwit A van de Loosdrecht AA Bettelheim P i sur Revisiting guidelines for integration of flow cytometry results in the WHO classification of myelodysplastic syndromesmdashproposal from the InternationalEuropean LeukemiaNet Working Group for Flow Cytometry in MDS Leukemia 201428(9)1793-1798

European LeukemiaNet Working Group

STANDARDIZACIJAEuroFlow Consortium

T Kalina T Flores-Montero J van der Velden VHJ i sur EuroFlow Consortium (EU-FP6 LSHB-CT-2006-018708)

EuroFlow standardization of flow cytometer instrument

settings and immunophenotyping protocols Leukemia 2012

26(9) 1986ndash2010

van Dongen JJM Lhermitte L Boumlttcher S i sur EuroFlow antibody

panels for standardized n-dimensional flow cytometric

immunophenotyping of normal reactive and malignant

leukocytesldquo Leukemia 201226(9)1908-75

8 bojna analiza ndash uvjet strogo definirana vrsta

citometra vrsta protutijela na stanične biljege vrsta

fluorokroma i njihova međusobna kombinacija i

proizvođači

KLASIFIKACIJA

WHO Classification of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues Swerdlow SH Campo E Harris NL i sur World HealthOrganization Classification of Tumours 2017 Revised Edition WHOClassification of Tumours of Haematopoietic and Lymphoid Tissues Lyon France IARC Press 2017

Gredelj Šimec Nj Kaić G Škrtić A i sur Smjernice za dijagnozu i liječenje bolesnika s mijelodisplastičnim sindromom Radna skupina za mijelodisplastični sindrom Hrvatske kooperativne grupe za hematološke bolesti (KROHEM)Referalni centar Ministarstva zdravlja Republike Hrvatske za dijagnostiku i liječenje mijelodisplastičnog sindroma Hrvatsko hematološko društvo Hrvatskoga liječničkog zboraLiječ Vjesn 20171391ndash11

Malcovati L Hellstrom-Lindberg E Bowen D i sur Diagnosis and treatment of primary myelodysplastic syndromes in adults recommendations from the European LeukemiaNet Blood 2013122(17) 2943ndash2964

+ IMUNOFENOTIPIZACIJA

STANDARDIZACIJA

van de Loosdrecht AA Alhan C Beacuteneacute MC i sur Standardization of flow cytometry in myelodysplasticsyndromes reportfrom the first European LeukemiaNet working conference on flow

cytometric in myelodysplastic syndromes Haematologica 2009941124-1134

Westers TM Ireland R Kern W i sur Standardization of flow cytometry in myelodysplastic syndromes a report from an international consortium and the European LeukemiaNet Working Group Leukemia 2012 26(7) 1730 ndash 1741

Porwit A van de Loosdrecht AA Bettelheim P i sur Revisiting guidelines for integration of flow cytometry results in the WHO classification of myelodysplastic syndromesmdashproposal from the InternationalEuropean LeukemiaNet Working Group for Flow Cytometry in MDS Leukemia 201428(9)1793-1798

European LeukemiaNet Working Group

STANDARDIZACIJAEuroFlow Consortium

T Kalina T Flores-Montero J van der Velden VHJ i sur EuroFlow Consortium (EU-FP6 LSHB-CT-2006-018708)

EuroFlow standardization of flow cytometer instrument

settings and immunophenotyping protocols Leukemia 2012

26(9) 1986ndash2010

van Dongen JJM Lhermitte L Boumlttcher S i sur EuroFlow antibody

panels for standardized n-dimensional flow cytometric

immunophenotyping of normal reactive and malignant

leukocytesldquo Leukemia 201226(9)1908-75

8 bojna analiza ndash uvjet strogo definirana vrsta

citometra vrsta protutijela na stanične biljege vrsta

fluorokroma i njihova međusobna kombinacija i

proizvođači

STANDARDIZACIJA

van de Loosdrecht AA Alhan C Beacuteneacute MC i sur Standardization of flow cytometry in myelodysplasticsyndromes reportfrom the first European LeukemiaNet working conference on flow

cytometric in myelodysplastic syndromes Haematologica 2009941124-1134

Westers TM Ireland R Kern W i sur Standardization of flow cytometry in myelodysplastic syndromes a report from an international consortium and the European LeukemiaNet Working Group Leukemia 2012 26(7) 1730 ndash 1741

Porwit A van de Loosdrecht AA Bettelheim P i sur Revisiting guidelines for integration of flow cytometry results in the WHO classification of myelodysplastic syndromesmdashproposal from the InternationalEuropean LeukemiaNet Working Group for Flow Cytometry in MDS Leukemia 201428(9)1793-1798

European LeukemiaNet Working Group

STANDARDIZACIJAEuroFlow Consortium

T Kalina T Flores-Montero J van der Velden VHJ i sur EuroFlow Consortium (EU-FP6 LSHB-CT-2006-018708)

EuroFlow standardization of flow cytometer instrument

settings and immunophenotyping protocols Leukemia 2012

26(9) 1986ndash2010

van Dongen JJM Lhermitte L Boumlttcher S i sur EuroFlow antibody

panels for standardized n-dimensional flow cytometric

immunophenotyping of normal reactive and malignant

leukocytesldquo Leukemia 201226(9)1908-75

8 bojna analiza ndash uvjet strogo definirana vrsta

citometra vrsta protutijela na stanične biljege vrsta

fluorokroma i njihova međusobna kombinacija i

proizvođači

STANDARDIZACIJAEuroFlow Consortium

T Kalina T Flores-Montero J van der Velden VHJ i sur EuroFlow Consortium (EU-FP6 LSHB-CT-2006-018708)

EuroFlow standardization of flow cytometer instrument

settings and immunophenotyping protocols Leukemia 2012

26(9) 1986ndash2010

van Dongen JJM Lhermitte L Boumlttcher S i sur EuroFlow antibody

panels for standardized n-dimensional flow cytometric

immunophenotyping of normal reactive and malignant

leukocytesldquo Leukemia 201226(9)1908-75

8 bojna analiza ndash uvjet strogo definirana vrsta

citometra vrsta protutijela na stanične biljege vrsta

fluorokroma i njihova međusobna kombinacija i

proizvođači

Tablica 1 Preporuke za obradu uzoraka koštane srži za analizu protočnom

citometrijom na displaziju prema European LeukemiaNet (ELN)

Antikoagulans u uzorcima koštane

srži

heparin (alternativa EDTA)

temperatura pohrane sobna temperatura

vrijeme za obradu lt 24 sata

pre-tretman prije obilježavanja

(opcionalno)

liziranje eritrocita cjelog ili dijela uzorka

amonij klorid (bez fiksativa) lizatorom

pufer za pranje stanica (opcionalno) PBS sa 05 goveđeg ili humanog

albumina

prezervacija stabilnih antigena paraformaldehid fiksativ (05)

ograda nezrelih mijeloidnih stanica bolji naziv bdquoprogenitorildquo od bdquoblastildquo

slijepljene stanice (bdquodubletsldquo) moraju se isključiti iz analize na

histogramu FCSheightFCSarea

degranulirani granulociti procjenjuju se usporedbom njihova SSC

(lin ili log skala) prema SSC limfocita

glikozil-fosfatidil-inozitol- vezani

antigeni (npr CD14 CD16 CD24)

njihov izražaj može biti promijenjen u PNH

ali to ne isključuje MDS dijagnozu

Populacija stanica

Koštane sržiBitni CD biljezi

Preporučena analiza Nađena aberacija

Nezreli

mijeloidni i monocitni

progenitori

SSC

CD45

CD34

CD117

CD38

HLA DR

CD13

CD33

CD15 CD11b

CD5 CD7 CD19

CD56

Postotak stanica u frakciji nukleariranih stanica

Uvećan postotak

Izražaj CD45

Expression of CD45

Gubitak ili sniženuvećan

Izražaj CD34 Gubitak ili sniženuvećan

Izražaj CD117 Homogen nizak ili prekomjeran izražaj

Izražaj CD13 i CD33 Gubitak ili sniženuvećan

Izražaj HLA DDR Gubitak ili sniženuvećan

Asinhron izražaj CD11b CD15 Pozitivnost biljega zrelih stanica

Izražaj biljega CD5 CD7 CD19 CD56

Pozitivnost biljega limfocitne loze

Neutrofili

SSC

CD45

CD15 CD11b CD16 CD10

CD13 CD33

CD36 CD64

CD34 CD117

HLA DR

CD5 CD7

CD56 CD19

Postotak stanica kao omjer prema limfocitima

Smanjen

SSC kao omjer prema SSC limfocita

Smanjen

Odnos CD13 i CD11b Promijenjen izgled

Odnos CD13 i CD16 Promijenjen izgled

Odnos CD15 i CD10 Promijenjen izgled

Tablica 2 Preporuke za obradu uzoraka koštane srži za analizu protočnom

citometrijom na displaziju prema European LeukemiaNet (ELN)

Tablica 1 Preporuke za obradu uzoraka koštane srži za analizu protočnom

citometrijom na displaziju prema European LeukemiaNet (ELN)

Populacija stanica

Koštane sržiBitni CD biljezi

Preporučena analiza Nađena aberacija

Monociti

SSC

CD45

CD14 CD11b

CD13 CD33

CD64 CD16

CD36 CD34

HLA DR

CD5 CD7

CD56

(CD300e)

Postotak stanica Sniženuvećan

Distribucija stadija zrelosti Pomak ka nezrelim

Odnos HLA DDR i CD11b Promijenjen izgled

Odnos CD36 i CD14 Promijenjen izgled

Izražaj CD13 i CD33 (Homogeno) nizak ili prekomjeran izražaj

Izražaj CD56 Pozitivnost biljega limfocitne loze

Progenitori

B limfocita

CD45

CD19

CD34

CD10

Broj kao frakcija ukupnog broja

CD34+ stanica u ogradi

CD45CD34SSC u kombinaciji sa CD10 ili CD19

Smanjen ili odsutan

Eritrocitni odjeljak CD117

CD235a

CD36 CD71

(CD105)

Postotak nukleiranih eritriodnih stanica

Uvećan

Odnos CD71 i CD235a Promijenjen izgled

Izražaj CD71 Snižen

Izražaj CD36 Snižen

Postotak CD117 pozitivnih prekursora

Uvećan

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

FIZIKALNE KARAKTERISTIKE STANICA OKOMITO RASPRŠENJE (FS)BOČNO RASPRŠENJE (SS)NEDOVOLJNO INFORMATIVNO ZA IDENTIFIKACIJU VRSTE STANICA

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

CD45SSOGRAĐIVANJE

limfociti

monociti

Neutrofilni granulociti

mijeloblasti

B progenitori

hematogoni

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

MDS Kronična mijelomonocitna leukemija CMML

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

Uvećanje broja mijeloidnih progenitora

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

OMJER CD45 limfocitiCD45mijeloblasta Normalno 45-74

Snižen CD45Snižen omjer 553597= 93

CD45 limfociti CD45 mijeloblasti

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

NORMALAN MDSCD34 vs CD117

uvećanje intenziteta izražaja CD117

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

Snižen SS neutrofilaSnižen omjer 605107 = 565Snižena granuliranost

OMJER SS limfocitiSS neutrofiliNormalno gt60

GRANULIRANOST

SS limfociti SS neutrofili

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

CD10 gubitak

CD117 pozitivitet

CD66abcevs

CD10

CD15vs

CD117

Analiza monocitnog odjeljka

CD13 gubitak

CD56 pozivitet

HLA DDRvs

CD13

CD33vs

CD56

Analiza progenitorskih B limfocita

Nema populacije CD19+CD10+

CD19 vs CD10

Analiza eritroidnog odjeljka

CILJ

A) Identifikacija fenotipskih aberantnosti

najčešće zamijećena aberacija je

uvećanje broja eritrocitni progenitora

povezana sa većim udjelom nezrelih

eritroidnih stanica (CD117+)

asinhron izražaj biljega CD71 vs

CD235a

snižen izražaj CD36

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

Populacija stanica

Koštane sržiBitni CD biljezi

Preporučena analiza Nađena aberacija

Nezreli

mijeloidni i monocitni

progenitori

SSC

CD45

CD34

CD117

CD38

HLA DR

CD13

CD33

CD15 CD11b

CD5 CD7 CD19

CD56

Postotak stanica u frakciji nukleariranih stanica

Uvećan postotak

Izražaj CD45

Expression of CD45

Gubitak ili sniženuvećan

Izražaj CD34 Gubitak ili sniženuvećan

Izražaj CD117 Homogen nizak ili prekomjeran izražaj

Izražaj CD13 i CD33 Gubitak ili sniženuvećan

Izražaj HLA DDR Gubitak ili sniženuvećan

Asinhron izražaj CD11b CD15 Pozitivnost biljega zrelih stanica

Izražaj biljega CD5 CD7 CD19 CD56

Pozitivnost biljega limfocitne loze

Neutrofili

SSC

CD45

CD15 CD11b CD16 CD10

CD13 CD33

CD36 CD64

CD34 CD117

HLA DR

CD5 CD7

CD56 CD19

Postotak stanica kao omjer prema limfocitima

Smanjen

SSC kao omjer prema SSC limfocita

Smanjen

Odnos CD13 i CD11b Promijenjen izgled

Odnos CD13 i CD16 Promijenjen izgled

Odnos CD15 i CD10 Promijenjen izgled

Tablica 2 Preporuke za obradu uzoraka koštane srži za analizu protočnom

citometrijom na displaziju prema European LeukemiaNet (ELN)

Tablica 1 Preporuke za obradu uzoraka koštane srži za analizu protočnom

citometrijom na displaziju prema European LeukemiaNet (ELN)

Populacija stanica

Koštane sržiBitni CD biljezi

Preporučena analiza Nađena aberacija

Monociti

SSC

CD45

CD14 CD11b

CD13 CD33

CD64 CD16

CD36 CD34

HLA DR

CD5 CD7

CD56

(CD300e)

Postotak stanica Sniženuvećan

Distribucija stadija zrelosti Pomak ka nezrelim

Odnos HLA DDR i CD11b Promijenjen izgled

Odnos CD36 i CD14 Promijenjen izgled

Izražaj CD13 i CD33 (Homogeno) nizak ili prekomjeran izražaj

Izražaj CD56 Pozitivnost biljega limfocitne loze

Progenitori

B limfocita

CD45

CD19

CD34

CD10

Broj kao frakcija ukupnog broja

CD34+ stanica u ogradi

CD45CD34SSC u kombinaciji sa CD10 ili CD19

Smanjen ili odsutan

Eritrocitni odjeljak CD117

CD235a

CD36 CD71

(CD105)

Postotak nukleiranih eritriodnih stanica

Uvećan

Odnos CD71 i CD235a Promijenjen izgled

Izražaj CD71 Snižen

Izražaj CD36 Snižen

Postotak CD117 pozitivnih prekursora

Uvećan

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

FIZIKALNE KARAKTERISTIKE STANICA OKOMITO RASPRŠENJE (FS)BOČNO RASPRŠENJE (SS)NEDOVOLJNO INFORMATIVNO ZA IDENTIFIKACIJU VRSTE STANICA

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

CD45SSOGRAĐIVANJE

limfociti

monociti

Neutrofilni granulociti

mijeloblasti

B progenitori

hematogoni

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

MDS Kronična mijelomonocitna leukemija CMML

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

Uvećanje broja mijeloidnih progenitora

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

OMJER CD45 limfocitiCD45mijeloblasta Normalno 45-74

Snižen CD45Snižen omjer 553597= 93

CD45 limfociti CD45 mijeloblasti

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

NORMALAN MDSCD34 vs CD117

uvećanje intenziteta izražaja CD117

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

Snižen SS neutrofilaSnižen omjer 605107 = 565Snižena granuliranost

OMJER SS limfocitiSS neutrofiliNormalno gt60

GRANULIRANOST

SS limfociti SS neutrofili

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

CD10 gubitak

CD117 pozitivitet

CD66abcevs

CD10

CD15vs

CD117

Analiza monocitnog odjeljka

CD13 gubitak

CD56 pozivitet

HLA DDRvs

CD13

CD33vs

CD56

Analiza progenitorskih B limfocita

Nema populacije CD19+CD10+

CD19 vs CD10

Analiza eritroidnog odjeljka

CILJ

A) Identifikacija fenotipskih aberantnosti

najčešće zamijećena aberacija je

uvećanje broja eritrocitni progenitora

povezana sa većim udjelom nezrelih

eritroidnih stanica (CD117+)

asinhron izražaj biljega CD71 vs

CD235a

snižen izražaj CD36

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

Tablica 1 Preporuke za obradu uzoraka koštane srži za analizu protočnom

citometrijom na displaziju prema European LeukemiaNet (ELN)

Populacija stanica

Koštane sržiBitni CD biljezi

Preporučena analiza Nađena aberacija

Monociti

SSC

CD45

CD14 CD11b

CD13 CD33

CD64 CD16

CD36 CD34

HLA DR

CD5 CD7

CD56

(CD300e)

Postotak stanica Sniženuvećan

Distribucija stadija zrelosti Pomak ka nezrelim

Odnos HLA DDR i CD11b Promijenjen izgled

Odnos CD36 i CD14 Promijenjen izgled

Izražaj CD13 i CD33 (Homogeno) nizak ili prekomjeran izražaj

Izražaj CD56 Pozitivnost biljega limfocitne loze

Progenitori

B limfocita

CD45

CD19

CD34

CD10

Broj kao frakcija ukupnog broja

CD34+ stanica u ogradi

CD45CD34SSC u kombinaciji sa CD10 ili CD19

Smanjen ili odsutan

Eritrocitni odjeljak CD117

CD235a

CD36 CD71

(CD105)

Postotak nukleiranih eritriodnih stanica

Uvećan

Odnos CD71 i CD235a Promijenjen izgled

Izražaj CD71 Snižen

Izražaj CD36 Snižen

Postotak CD117 pozitivnih prekursora

Uvećan

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

FIZIKALNE KARAKTERISTIKE STANICA OKOMITO RASPRŠENJE (FS)BOČNO RASPRŠENJE (SS)NEDOVOLJNO INFORMATIVNO ZA IDENTIFIKACIJU VRSTE STANICA

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

CD45SSOGRAĐIVANJE

limfociti

monociti

Neutrofilni granulociti

mijeloblasti

B progenitori

hematogoni

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

MDS Kronična mijelomonocitna leukemija CMML

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

Uvećanje broja mijeloidnih progenitora

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

OMJER CD45 limfocitiCD45mijeloblasta Normalno 45-74

Snižen CD45Snižen omjer 553597= 93

CD45 limfociti CD45 mijeloblasti

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

NORMALAN MDSCD34 vs CD117

uvećanje intenziteta izražaja CD117

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

Snižen SS neutrofilaSnižen omjer 605107 = 565Snižena granuliranost

OMJER SS limfocitiSS neutrofiliNormalno gt60

GRANULIRANOST

SS limfociti SS neutrofili

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

CD10 gubitak

CD117 pozitivitet

CD66abcevs

CD10

CD15vs

CD117

Analiza monocitnog odjeljka

CD13 gubitak

CD56 pozivitet

HLA DDRvs

CD13

CD33vs

CD56

Analiza progenitorskih B limfocita

Nema populacije CD19+CD10+

CD19 vs CD10

Analiza eritroidnog odjeljka

CILJ

A) Identifikacija fenotipskih aberantnosti

najčešće zamijećena aberacija je

uvećanje broja eritrocitni progenitora

povezana sa većim udjelom nezrelih

eritroidnih stanica (CD117+)

asinhron izražaj biljega CD71 vs

CD235a

snižen izražaj CD36

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

FIZIKALNE KARAKTERISTIKE STANICA OKOMITO RASPRŠENJE (FS)BOČNO RASPRŠENJE (SS)NEDOVOLJNO INFORMATIVNO ZA IDENTIFIKACIJU VRSTE STANICA

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

CD45SSOGRAĐIVANJE

limfociti

monociti

Neutrofilni granulociti

mijeloblasti

B progenitori

hematogoni

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

MDS Kronična mijelomonocitna leukemija CMML

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

Uvećanje broja mijeloidnih progenitora

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

OMJER CD45 limfocitiCD45mijeloblasta Normalno 45-74

Snižen CD45Snižen omjer 553597= 93

CD45 limfociti CD45 mijeloblasti

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

NORMALAN MDSCD34 vs CD117

uvećanje intenziteta izražaja CD117

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

Snižen SS neutrofilaSnižen omjer 605107 = 565Snižena granuliranost

OMJER SS limfocitiSS neutrofiliNormalno gt60

GRANULIRANOST

SS limfociti SS neutrofili

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

CD10 gubitak

CD117 pozitivitet

CD66abcevs

CD10

CD15vs

CD117

Analiza monocitnog odjeljka

CD13 gubitak

CD56 pozivitet

HLA DDRvs

CD13

CD33vs

CD56

Analiza progenitorskih B limfocita

Nema populacije CD19+CD10+

CD19 vs CD10

Analiza eritroidnog odjeljka

CILJ

A) Identifikacija fenotipskih aberantnosti

najčešće zamijećena aberacija je

uvećanje broja eritrocitni progenitora

povezana sa većim udjelom nezrelih

eritroidnih stanica (CD117+)

asinhron izražaj biljega CD71 vs

CD235a

snižen izražaj CD36

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

CD45SSOGRAĐIVANJE

limfociti

monociti

Neutrofilni granulociti

mijeloblasti

B progenitori

hematogoni

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

MDS Kronična mijelomonocitna leukemija CMML

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

Uvećanje broja mijeloidnih progenitora

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

OMJER CD45 limfocitiCD45mijeloblasta Normalno 45-74

Snižen CD45Snižen omjer 553597= 93

CD45 limfociti CD45 mijeloblasti

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

NORMALAN MDSCD34 vs CD117

uvećanje intenziteta izražaja CD117

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

Snižen SS neutrofilaSnižen omjer 605107 = 565Snižena granuliranost

OMJER SS limfocitiSS neutrofiliNormalno gt60

GRANULIRANOST

SS limfociti SS neutrofili

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

CD10 gubitak

CD117 pozitivitet

CD66abcevs

CD10

CD15vs

CD117

Analiza monocitnog odjeljka

CD13 gubitak

CD56 pozivitet

HLA DDRvs

CD13

CD33vs

CD56

Analiza progenitorskih B limfocita

Nema populacije CD19+CD10+

CD19 vs CD10

Analiza eritroidnog odjeljka

CILJ

A) Identifikacija fenotipskih aberantnosti

najčešće zamijećena aberacija je

uvećanje broja eritrocitni progenitora

povezana sa većim udjelom nezrelih

eritroidnih stanica (CD117+)

asinhron izražaj biljega CD71 vs

CD235a

snižen izražaj CD36

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

ANALIZA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

MDS Kronična mijelomonocitna leukemija CMML

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

Uvećanje broja mijeloidnih progenitora

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

OMJER CD45 limfocitiCD45mijeloblasta Normalno 45-74

Snižen CD45Snižen omjer 553597= 93

CD45 limfociti CD45 mijeloblasti

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

NORMALAN MDSCD34 vs CD117

uvećanje intenziteta izražaja CD117

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

Snižen SS neutrofilaSnižen omjer 605107 = 565Snižena granuliranost

OMJER SS limfocitiSS neutrofiliNormalno gt60

GRANULIRANOST

SS limfociti SS neutrofili

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

CD10 gubitak

CD117 pozitivitet

CD66abcevs

CD10

CD15vs

CD117

Analiza monocitnog odjeljka

CD13 gubitak

CD56 pozivitet

HLA DDRvs

CD13

CD33vs

CD56

Analiza progenitorskih B limfocita

Nema populacije CD19+CD10+

CD19 vs CD10

Analiza eritroidnog odjeljka

CILJ

A) Identifikacija fenotipskih aberantnosti

najčešće zamijećena aberacija je

uvećanje broja eritrocitni progenitora

povezana sa većim udjelom nezrelih

eritroidnih stanica (CD117+)

asinhron izražaj biljega CD71 vs

CD235a

snižen izražaj CD36

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

Uvećanje broja mijeloidnih progenitora

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

OMJER CD45 limfocitiCD45mijeloblasta Normalno 45-74

Snižen CD45Snižen omjer 553597= 93

CD45 limfociti CD45 mijeloblasti

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

NORMALAN MDSCD34 vs CD117

uvećanje intenziteta izražaja CD117

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

Snižen SS neutrofilaSnižen omjer 605107 = 565Snižena granuliranost

OMJER SS limfocitiSS neutrofiliNormalno gt60

GRANULIRANOST

SS limfociti SS neutrofili

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

CD10 gubitak

CD117 pozitivitet

CD66abcevs

CD10

CD15vs

CD117

Analiza monocitnog odjeljka

CD13 gubitak

CD56 pozivitet

HLA DDRvs

CD13

CD33vs

CD56

Analiza progenitorskih B limfocita

Nema populacije CD19+CD10+

CD19 vs CD10

Analiza eritroidnog odjeljka

CILJ

A) Identifikacija fenotipskih aberantnosti

najčešće zamijećena aberacija je

uvećanje broja eritrocitni progenitora

povezana sa većim udjelom nezrelih

eritroidnih stanica (CD117+)

asinhron izražaj biljega CD71 vs

CD235a

snižen izražaj CD36

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

OMJER CD45 limfocitiCD45mijeloblasta Normalno 45-74

Snižen CD45Snižen omjer 553597= 93

CD45 limfociti CD45 mijeloblasti

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

NORMALAN MDSCD34 vs CD117

uvećanje intenziteta izražaja CD117

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

Snižen SS neutrofilaSnižen omjer 605107 = 565Snižena granuliranost

OMJER SS limfocitiSS neutrofiliNormalno gt60

GRANULIRANOST

SS limfociti SS neutrofili

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

CD10 gubitak

CD117 pozitivitet

CD66abcevs

CD10

CD15vs

CD117

Analiza monocitnog odjeljka

CD13 gubitak

CD56 pozivitet

HLA DDRvs

CD13

CD33vs

CD56

Analiza progenitorskih B limfocita

Nema populacije CD19+CD10+

CD19 vs CD10

Analiza eritroidnog odjeljka

CILJ

A) Identifikacija fenotipskih aberantnosti

najčešće zamijećena aberacija je

uvećanje broja eritrocitni progenitora

povezana sa većim udjelom nezrelih

eritroidnih stanica (CD117+)

asinhron izražaj biljega CD71 vs

CD235a

snižen izražaj CD36

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

Analiza mijelo-monocitnih progenitorskih stanica

NORMALAN MDSCD34 vs CD117

uvećanje intenziteta izražaja CD117

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

Snižen SS neutrofilaSnižen omjer 605107 = 565Snižena granuliranost

OMJER SS limfocitiSS neutrofiliNormalno gt60

GRANULIRANOST

SS limfociti SS neutrofili

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

CD10 gubitak

CD117 pozitivitet

CD66abcevs

CD10

CD15vs

CD117

Analiza monocitnog odjeljka

CD13 gubitak

CD56 pozivitet

HLA DDRvs

CD13

CD33vs

CD56

Analiza progenitorskih B limfocita

Nema populacije CD19+CD10+

CD19 vs CD10

Analiza eritroidnog odjeljka

CILJ

A) Identifikacija fenotipskih aberantnosti

najčešće zamijećena aberacija je

uvećanje broja eritrocitni progenitora

povezana sa većim udjelom nezrelih

eritroidnih stanica (CD117+)

asinhron izražaj biljega CD71 vs

CD235a

snižen izražaj CD36

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

Snižen SS neutrofilaSnižen omjer 605107 = 565Snižena granuliranost

OMJER SS limfocitiSS neutrofiliNormalno gt60

GRANULIRANOST

SS limfociti SS neutrofili

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

CD10 gubitak

CD117 pozitivitet

CD66abcevs

CD10

CD15vs

CD117

Analiza monocitnog odjeljka

CD13 gubitak

CD56 pozivitet

HLA DDRvs

CD13

CD33vs

CD56

Analiza progenitorskih B limfocita

Nema populacije CD19+CD10+

CD19 vs CD10

Analiza eritroidnog odjeljka

CILJ

A) Identifikacija fenotipskih aberantnosti

najčešće zamijećena aberacija je

uvećanje broja eritrocitni progenitora

povezana sa većim udjelom nezrelih

eritroidnih stanica (CD117+)

asinhron izražaj biljega CD71 vs

CD235a

snižen izražaj CD36

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

Analiza odjeljka zrelih neutrofila

CD10 gubitak

CD117 pozitivitet

CD66abcevs

CD10

CD15vs

CD117

Analiza monocitnog odjeljka

CD13 gubitak

CD56 pozivitet

HLA DDRvs

CD13

CD33vs

CD56

Analiza progenitorskih B limfocita

Nema populacije CD19+CD10+

CD19 vs CD10

Analiza eritroidnog odjeljka

CILJ

A) Identifikacija fenotipskih aberantnosti

najčešće zamijećena aberacija je

uvećanje broja eritrocitni progenitora

povezana sa većim udjelom nezrelih

eritroidnih stanica (CD117+)

asinhron izražaj biljega CD71 vs

CD235a

snižen izražaj CD36

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

Analiza monocitnog odjeljka

CD13 gubitak

CD56 pozivitet

HLA DDRvs

CD13

CD33vs

CD56

Analiza progenitorskih B limfocita

Nema populacije CD19+CD10+

CD19 vs CD10

Analiza eritroidnog odjeljka

CILJ

A) Identifikacija fenotipskih aberantnosti

najčešće zamijećena aberacija je

uvećanje broja eritrocitni progenitora

povezana sa većim udjelom nezrelih

eritroidnih stanica (CD117+)

asinhron izražaj biljega CD71 vs

CD235a

snižen izražaj CD36

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

Analiza progenitorskih B limfocita

Nema populacije CD19+CD10+

CD19 vs CD10

Analiza eritroidnog odjeljka

CILJ

A) Identifikacija fenotipskih aberantnosti

najčešće zamijećena aberacija je

uvećanje broja eritrocitni progenitora

povezana sa većim udjelom nezrelih

eritroidnih stanica (CD117+)

asinhron izražaj biljega CD71 vs

CD235a

snižen izražaj CD36

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

Analiza eritroidnog odjeljka

CILJ

A) Identifikacija fenotipskih aberantnosti

najčešće zamijećena aberacija je

uvećanje broja eritrocitni progenitora

povezana sa većim udjelom nezrelih

eritroidnih stanica (CD117+)

asinhron izražaj biljega CD71 vs

CD235a

snižen izražaj CD36

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS engl FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

Prema nađenim anomalijama klasificira se u 3 grupe bdquonormalanldquo sa 0 ili 1 abnormalnosti bdquoumjerenldquo sa 2 do 4 abnormalnosti nađenih u 1 od loza i bdquoozbiljanldquo sa 2 ili 3 abnormalnosti nađene u 2 ili više loza

1 Wells DA Benesch M Loken MR i sur Myeloid and monocytic dyspoiesis as determined by flow cytometric scoring in myelodysplastic syndrome correlates with the IPSS and with outcome after hematopoietic stem cell transplantation Blood 2003 102 394ndash403

2 van de Loosdrecht AA Westers TM1 Westra AH i sur Identification of distinct prognostic subgroups in low- and intermediate-1ndashrisk myelodysplastic syndromes by flow cytometry Blood 20081111067-1077

analiza stanica mijelomonocitne loze (mijeloblasta neutrofila i monocita)

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

određivanje broja i anomalija mijeloblasta

(izražaj i intenzitet biljega CD45CD11b CD16 CD56)

B progenitorskihstanica

i izmjerenom omjeru SSC granulocitaSSC limfocita

Ogata K Kishikawa Y Satoh C Tamura H Dan K Hayashi A Diagnostic application of flow cytometric characteristics of CD34+ cells in

low-grade myelodysplastic syndromes Blood 2006 108 1037ndash1044

bdquoOgata indeksldquo

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

BODOVNI SUSTAV ANALIZE FENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM (FC INDEKS ENGL FLOWCYTOMETRY

SCORING SYSTEM FCSS)

fenotipski zasebno dokazana displazija na odjeljcima

a) progenitorskim mijeloidnim stanicama

b) zrelim stanicama granulocitne i monocitne loze

c) nezrelim stanicama eritrocitne loze

van de Loosdrecht AA Westers TM Cutting Edge Flow Cytometry in Myelodysplastic Syndromes J Natl Compr Canc Netw 201311892-902

Alhan C Westers TM Cremers EM i sur The myelodysplastic syndromes flow cytometric score a three- parameter prognostic flow cytometric scoring system Leukemia 2016 30(3)658ndash665

bdquo Intregirani FC indeks (iFCS) ili tzv ABC score ldquo

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

bull DOBRA KORELACIJAFCCS vs Internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl International Prognostic Scoring System IPSS 1997) FCCS vs Revidirani internacionalni prognostički sustav bodovanja (engl Revised International Prognostic Scoring System IPSS-R 2012)

bull LOŠIJA PROGNOZA- Broj mijeloidnih progenitora s fenotipskim anomalijama što veći broj -viši FCM indeks - nepovoljna prognoza (progresija u AML relaps nakon alogene transplantacije)- Veći broj aberacija u pacijenata IPSS niskog i IPSS int-1rizika - povezan sa progresijom bolesti- Snižen SSC- Povišen izražaj CD117 u mijeloidnim progenitorima

bull DOBRA PROGNOZA-Snižen izražajem CD13 u zrelim monocitima - Niži FCCS (u pacijenata sa MDS sa displazijom jedne loze (MDS-SLD) MDS neklasificiranim (MDS-U) MDS sa prstenastim sideroblastima (MDS-RS)

PROGNOSTIČKA VRIJEDNOST ANALIZE

IMUNOFENOTIPA PROTOČNOM CITOMETRIJOM

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike

ZAKLJUČCIIMUNOFENOTIPIZACIJA PROTOČNOM CITOMETRIJOM U

DIJAGNOSTICI MDS_a

FCI nalaz bi trebao biti integriran u cjelokupno dijagnostičko izvješće zajedno s citomorfološkim nalazom venske krvi i koštane srži histopatološkim citogenetskih i ili molekularnih nalazima

- glavni nedostatak nedovoljno visoka pozitivna prediktivna vrijednost ndash NE MOŽE SE KORISTITI KAO ZASEBAN DIJAGNOSTIČKI POSTUPKA

- može pružiti dodatne važne informacije koje nisu dobivene morfološkim nalazom citogenetikom ili testovima molekularne dijagnostike