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INTERPRETACIÓN DE LA CITOMETRÍA HEMÁTICA
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UTILIDAD DE LA CITOMETRIA HEMATICA
Coadyuvante indispensable en el diagnóstico y control de la evolución de las enfermedades infecciosas, de las enfermedades crónicas en general, de las emergencias médicas, quirúrgicas y traumatológicas, y en el seguimiento de la quimioterapia y radioterapia.
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La interpretación correcta de toda la información que ofrece una Citometría hemática permite orientar el diagnóstico, confirmar con pruebas adicionales junto con el cuadro clínico del paciente y además ahorrar al medico y al paciente, tiempo dinero y esfuerzo.
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Toma de muestra
Preparación de frotis Lectura BH
Tinción
Observación Interpretación de
resultados
Y porqué hacer frotis?
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http://www.scielo.org.mx/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0186-23912016000400246#t1 https://images.app.goo.gl/ueGQuXVzd
hN2gozX6
Acta pediátrica de Méxicoversión On-line ISSN 2395-8235versión impresa ISSN 0186-2391Acta pediatr. Méx vol.37 no.4 México jul./ago. 2016
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Revista de la Sociedad Boliviana de Pediatríaversión On-line ISSN 1024-0675Rev. bol. ped. v.50 n.2 La Paz 2011
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Hemoglobina
Representa la cantidad de hemoglobina por unidad de volumen.
Las cifras varían de acuerdo a la edad, género, altura del sitio de residencia, etc.
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Se mide en gramos por decilitro( g/dL)14.0 g/dL
En unidades internacionales son de g/L140 g/L
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Este parámetro debe ser el único empleado para
definir si hay o no anemia.
Sólo si las cifras de hemoglobina son inferiores a los
valores normales puede asegurarse que existe
anemia.
Hemoglobina
Fundamentos de Hematología. Ruiz Argüelles Ruiz Delgado 5ª. Ed. Editorial Medica Panamericana. Pag. 16
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VALORES DE REFERENCIA NIÑOS
Fuente: Instituto de Hematopatología
RANGO DE EDAD Valor convencional (g/dL)
Valor SI (g/L)
0 – 2 meses 14 - 20 140 - 200
2 – 6 meses 10 – 15 100 - 150
6 - 12 meses 10 – 14 100 – 140
1 – 5 años 11 – 15 110 - 150
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HB
VCM NCMH N
Revisión del frotis
Reticulocitos
Resultado Analizador de Hematología
NORMALES O EN AUMENTO
MORFOLOGIA DE ERITROCITOS NORMAL
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ES POSIBLE QUE EN UNA HEMORRAGIA AGUDA SE OBSERVE ESTE TIPO DE COMPORTAMIENTO
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Representa la proporción de eritrocitos en el total de la sangre.
Se mide en % .
Esta variable no debe usarse como criterio para establecer el diagnóstico de anemia.
El cálculo manual es más exacto que el del citómetro.
No debe calcularse con base a la hemoglobina, ni viceversa.
HEMATÓCRITO (Hct)
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25 %25 %
HEMATOCRITO= VGM*ERI/10
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0.25 L/L 0.25 L/L
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NUMERO DE GLOBULOS ROJOS
Se puede reportar en millones
por microlitro (millones/uL) y
en unidades internacionales
Valores de referencia en adultos
son: 4 a 6 millones /µL.
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RANGO DE EDAD Valor convencional X10⁶/uL
Valor SI X1012/L
0 – 2 meses 4.8 – 6.8 4.8 – 6.8
2 – 6 meses 3.5 – 4.8 3.5 – 4.8
1 – 5 años 3.2 – 5.2 3.2 – 5.2
VALORES DE REFERENCIA NIÑOS
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Volumen Globular Medio
(VGM)
• Es de gran valor en el esclarecimiento de la causa de una anemia.
• Se refiere al volumen de los eritrocitos.
• Los valores del VGM permiten saber si una anemia es:
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Volumen Globular Medio
(VGM)
•Macrocítica (VGM mayor a los limites normales)
•Microcítica (VGM menor a los limites normales)
•Normocitica (VGM tamaño normal de las células)
Se mide en fentolitros (fl).
Los valores de referencia: 80 a 100 fL
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CLASIFICACIÓN MORFOLÓGICA
Microcito Normocito Macrocito
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Valores < VGM = “anemias microcíticas”
(deficiencia de hierro, talasemia,
esferocitosis hereditaria)
Valores > VGM = “anemias macrocíticas”
(eritropoyesis acelerada, megaloblástica, mielodisplasia,
anemia aplásica)
Volumen Globular Medio
(VGM)
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VGM(fL)
Enfermedad Frecuencia
Menor de 80 Deficiencia de hierro
85%
Menor de 70 Talasemia 2%
Entre 70 y 80 Esferocitosis hereditaria
1%
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BIOMETRIA
HEMATICA: RESULTADOS:
UNIDADES:VALORES
NORMALES
FEMENINO
ADULTA
Hemoglobina: 8.3 g/dl 12 - 14
Hematocrito: 28.1 % 36 – 44
V. G. M. : 72.0 fL 80 - 100
M.C.H.: 20.2 pg 26 – 32
C. M. H. G. : 26.9 g/dl 32 - 36
Eritrocitos:3.0 Millon. X µL 3.4 – 5.1
RDW: 18.0 % 11 A-13
INDICE DE MENTZER 24.0 VGM/ERI PUNTO DE CORTE 13
RETICULOCITOS23,000 25,000 A 100,000
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INDICE FORMULA ANEMIA FERROPENICA
TALASEMIA MENOR
MENTZER VCM/ERI MAYOR DE 13 MENOR DE 13
SIRVE SOLAMENTE PARA ORIENTAR EL DIAGNOSTICO, SE TENDRAN QUE HACER LAS PRUEBAS COMPLEMENTARIAS
INDICE DE MENTZER
SIRVE SOLAMENTE PARA DIFERENCIAR ENTRE ANEMIA FERROPENICA Y TALASEMIA MENOR
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CINETICA DE HIERROESTUDIOS
ADICIONALES
HIERRO SERICO SATURACION DE TRANSFERRINA
FERRITINA
CAPACIDAD DE FIJACION DE HIERRO A LA TRANSFERRINA
TRANSFERRINA
DEFICIENCIA DE HIERRO
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PÉRDIDA SANGUINEAPREVALENCIA
DEFICIENTE ABSORCION
AUMENTO EN LOS REQUERIMIENTOS
DISMINUCION EN EL APORTE
DEFICIENCIA DE HIERRO
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BIOMETRIA
HEMATICA: RESULTADOS:
UNIDADES:VALORES
NORMALES
NIÑOS 1 – 5 AÑOS
Hemoglobina: 12.4 g/dl 11 - 15
Hematocrito: 38.6 % 34 - 44
V. G. M. : 64.1 fL 70 - 88
M.C.H.: 20.2 pg 26 – 32
C. M. H. G. : 32.0 g/dl 32 - 36
Eritrocitos:6.06 Millon. X µL 3.2 – 5.2
RDW: 13.0 % 11 A-13
INDICE DE MENTZER 10.5 VGM/ERI PUNTO DE CORTE 13
RETICULOCITOS138,500 25,000 A 100,000
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2 GOTAS DE SANGRE Y DOS GOTAS DE AZUL DE CRESILO BRILLANTE
Reticulocitos BUSQUEDA DE ERITROCITOS CON
PRECIPITADOS DE Hb H
FORMA DE RED
RNA RIBOSOMAL
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INCUBAR 15 MINUTOSA 37 GRADOS CENTIGRADOS
2 GOTAS DE SANGRE Y DOS GOTAS DE AZUL DE CRESILO BRILLANTE
HEMOGLOBINA PRECIPITADA
INCUBAR UNA HORAA 37 GRADOS CENTIGRADOS
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ALFA TALASEMIA
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HB NORMAL VCM CMH
Revisión del frotis
Reticulocitos
Resultado Analizador de Hematología
AUMENTADOS
CODOCITOS
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ERITROCITOS AUMENTADOS
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CINETICA DE HIERRO NORMAL
ESTUDIOS ADICIONALES
HIERRO SERICO SATURACION DE TRANSFERRINA FERRITINACAPACIDAD DE FIJACION DE HIERRO A LA TRANSFERRINA TRANSFERRINA
ELECTROFORESIS DE HEMOGLOBINA
TALASEMIA MENOR
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5/11/2020 40
VGM(fL)
Enfermedad Frecuencia
Mayor de 100 Megaloblástica 1%
VGM(fL)
Fisiológico Frecuencia
Mayor de 100 Recién nacidos 98%
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Macrocytic Anemia (Meg.):
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5/11/2020 43
Hemoglobina corpuscular media(HCM)
• Representa la cantidad promedio de hemoglobina en peso contenida en cada eritrocito.
• Se mide en picogramos (pg)
• Los valores de referencia: 26 a 32 pg en hombres y mujeres
• Anemias hipocrómicas, normocromicas.
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• Eritrocitos normocrómicos tienen la cantidad de hemoglobina adecuada para su volumen.
• Una porción clara central que ocupa la tercera parte del diámetro celular.
Hemoglobina corpuscular media(HCM)
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Eritrocitos hipocrómicos, existe menos hemoglobina de laesperada para el volumen de la célula, la porción claracentral ocupa un diámetro mayor.
Hemoglobina corpuscular media(HCM)
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CLASIFICACIÓN MORFOLÓGICA
Hipocrómico Normocrómico Hipercrómico
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CLASIFICACIÓN MORFOLÓGICA
Microcito Normocito Macrocito
Hipocrómico Normocrómico Hipercrómico
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MACROCITICA
HIPOCROMICA
MACROCITICA
NORMOCROMICA
MACROCITICA
HIPERCROMICA
NORMOCITICA
HIPOCROMICA
NORMOCITICA
NORMOCROMICA
NORMOCITICA
HIPERCROMICA
MICROCITICA
HIPOCROMICA
MICROCITICA
NORMOCROMICA
MICROCITICA
HIPERCROMICA
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MACROCITICAHIPOCROMICARetis de estrés (anemias hemoliticas)Estomatocitos,ovaestomatocits
MACROCITICANORMOCROMICAVit,B12, acido folico
MACROCITICAHIPERCROMICA
NORMOCITICAHIPOCROMICADef.hierro inciales, anemias sideroblasticas y talasemias
NORMOCITICANORMOCROMICAAnemias hemoliticas
NORMOCITICAHIPERCROMICAEsferocitos ligeramente deshidratados,acantocitos
MICROCITICAHIPOCROMICAdef,. hierro, poiquilicitostalasemias
MICROCITICANORMOCROMICALeptocitos de las talasemiasDef. de hierro, codocitosesquizocitos
MICROCITICAHIPERCROMICAMicrocitos , esquizocitos o celulas fragmentadas
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• Cantidad de hemoglobina que tiene un eritrocito en relación con su volumen.
• En el frotis los eritrocitos normocrómicos tienen una porción clara central que ocupa la tercera parte del diámetro celular.
Concentración Media de Hemoglobina Globular (CMHG)
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• Eritrocitos hipocrómicos, existe menos hemoglobina de la esperadapara el volumen de la célula, la porción clara central ocupa undiámetro mayor.
• La hipercromía donde se encuentra más hemoglobina de laesperada para su volumen.
• Los valores de referencia: 32 a 36 g/dL.
Concentración Media de Hemoglobina Globular (CMHG)
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BIOMETRIA
HEMATICA: RESULTADOS:
UNIDADES:VALORES
NORMALES
NIÑOS 1 – 5
AÑOS
Hemoglobina: 9.0 g/dl 11 - 15
Hematocrito: 24 % 34 - 44
V. G. M. : 65 fL 70 - 88
M.C.H.: 28 pg 26 – 32
C. M. H. G. : 38 g/dl 32 - 36Eritrocitos:
2.6 Millon. X µL 3.2 – 5.2
RDW:16 % 11 A-13
LEUCOCITOS8.0 X10⁹/L 5 - 15
Plaquetas560 X10⁹/L 150 - 400
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• QUE SIGNIFICA QUE EN TODOS TUS RESULTADOS SE OBSERVE UN AUMENTO DE LA CMHC?
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Amplitud calculada de la distribución de los eritrocitos (ADE), Coeficiente de variación del VGM (CV-VGM)
o Red cell distribution width (RDW).
Histograma de frecuencia, informa sobre valores promedio de VGM.
Estimación cuantitativa de la Anisocitosis.
11-15% para una adulto.
Medida en % como un coeficiente de variación
o en fL como una desviación estándar.
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Amplitud calculada de la distribución de los eritrocitos (ADE)
Anemias ferropénicas que cursan con VGM y HCM bajos
el ADE o RDW está caracteristicamente aumentado (15 a 18%).
En las talasemias , que cursan también con VGM y HCM disminuidos el ADE y el RDW es normal (12 a 13%).
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Reticulocitos• Se refiere a la proporción porcentual
de células rojas inmaduras , recientemente desprovistas del núcleo, que han sido emitidas a la sangre periférica prematuramente por la médula ósea.
• Se denominan reticulocitos porque al teñir los glóbulos rojos con tinciones supravitales, los restos de ácidos nucleicos se disponen en el citoplasma a manera de una red.
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Reticulocitos
QFB-EHDL FELIPE MANCERA PATIÑO
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RETICULOCITOS
Indicador de la magnitud de la eritropoyesis eficaz.
Aumentada la eritropoyesis es dato de : Anemias hemolíticas,después de hemorragias, o en las deficiencias de hierro, vitaminaB12 o ácido fólico durante el tratamiento.
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RETICULOCITOS
EN EL TRATAMIENTO DE ANEMIAS CARENCIALES LA UTILIDAD ES:
QUE EL EL PACIENTE SE ESTA TOMANDO EL TRATAMIENTO QUE ES LA DOSIS ADECUADA QUE EL DIAGNOSTICO ES CORRECTO
deficiencia de hierro, vitamina B12 o ácido fólico.
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RETICULOCITOS
UTILIDAD CLINICA:
. Monitoreo de tratamientos inmunosupresores. Monitoreo terapéutico de:. tratamientos con Eritropoyetina. Corrección de anemias nutricionales. Tratamiento de Mielodisplasias. Definición de necesidad de transfusión en neonatos
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Porcentaje de reticulocitos x numero de eritrocitos x 10,000/uL.
Normales: 25,000 a 100,000 /ul en adultos.
Cantidades absolutas de reticulocitos
reticulocitos
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INDICE DE PRODUCCION DE RETICULOCITOS
QFB-EHDL ANTONIO VILLEGAS SAENZ
FORMULA RESULTADO
1. CONTAR 10 CAMPOS DE 100 CELULAS ANOTAR LOS RETICULOCITOS
DIVIDIR ENTRE 10
EJ: 980 ERITROCITOS 20 2.0 %
2.- CUENTA CORREGIDA DE RETICULOCITOS
CCR= RET% (HTO PAC/HTO NORMAL)
EJ: RET% (HTO PAC 20/HTO NORMAL 40) 1.0 %
3.- RETICULOCITOS ABSOLUTOS CCR(ERI)(10,000)
EJ: CCR 1.0%(2.0)(10,000) VR 25,000 A 100,000 20,000
4.- INDICE DE PRODUCCION DE RETICULOCITOS
CCR/TIEMPO DE MADURACION
CCR 1.0/ 2.5 0.4
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PROCEDIMIENTO
Hematocrito del
paciente
Tiempo de maduración
en sangre periférica
39 a 44 1.0
34 a 38 1.5
24 a 33 2.0
15 a 23 2.5
Menor de 15 3.0
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RESULTADOS VALORES NORMALES
INDICE DE
PRODUCCION DE
RETICULOCITOS0.4
Un IPR mayor a 2 indica respuesta
adecuada de la medula ósea
Un IPR menor a 2 indica respuesta
inadecuada de la medula ósea
INDICE DE PRODUCCION DE RETICULOCITOS
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ANEMIAS MICROCITICAS HOMOGÉNEAS (VCM < 80 fl y ADE < = 15)
Talasemia menores ( -talasemia)
Enfermedad crónica
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MICROCITICAS HETEROGÉNEAS(VCM < 80 fl y ADE >15)
Deficiencia de hierroHemoglobina STalasemiasCIDPrótesis valvulares
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NORMOCITICA HOMOGÉNEA (VCM 80 A 99 fl ADE <15)
HepatopatiasNefropatiasEnfermedades infecciosasEnfermedades inflamatoriasEsferocitosis hereditariaHemoglobinopatias AS y ACLeucemias agudasEstados posthemorragicos, postransfusionales o
posquimioterapia
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NORMOCITICA HETEROGÉNEA
Primeras etapas de deficiencia de hierro, acido folico o vitamina B12
Anemia perniciosaHemoglobinopatias SS SCSíndromes asociados a mielofibrosisAnemias sideroblasticas
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MACROCITICA HOMOGÉNEA
Recién NacidosEndocrinopatías (tiroides)Hepatopatías (cirrosis alcohólica)Anemias aplásicasEstados preleucémicosSíndrome dismielopoyetico
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MACROCITICA HETEROGÉNEA
Deficiencia de acido fólicoDeficiencia de Vitamina B12Anemias hemolíticas autoinmunesLupus eritematoso
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DESCANSO (SANTORINI)
QUEDATE EN MI CASA!!!
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QFB-EHDL ANTONIO VILLEGAS SAENZ
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PRINCIPIOS BÁSICOS
Impedancia electrónica Dispersión óptica
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• m
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PRINCIPIO DE LA IMPEDANCIOMETRIA
-+
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PRINCIPIO DE LA IMPEDANCIOMETRIA
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PRINCIPIO DE LA IMPEDANCIOMETRIA
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HISTOGRAMA
1 VARIABLE
Y: Frecuencia
(cantidad)
X: Variabilidad de la
población
(tamaño)
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5/11/2020 87
2 METODOLOGÍAS:
CITOMETRÍA HEMÁTICA
MÉTODO ÓPTICOIMPEDANCIA
ELÉCTRICA
•Eritrocitos
•Plaquetas
•Leucocitos (diferencial de 3partes)
•Leucocitos (diferencial de 5 partes)
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1.- Histograma de los eritrocitos de un individuo sano.
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2.- Histograma de los eritrocitos de un individuo con anemia por deficiencia de hierro. Nótese como la Hb está baja, el VGM disminuido y el CV-VGM aumentado. La curva del VGM está
desplazado a la izquierda (microcitosis).
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3.- Histograma de los eritrocitos de un individuo con talasemia beta. Nótese cómo la Hb está normal, el VGM disminuido y el CV-VGM, a diferencia de la deficiencia de hierro, es normal. La
curva del VGM está desplazada a la izquierda (microcitosis).
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4.- Histograma de los eritrocitos de un individuo con anemia por deficiencia de hierro a quien se han administrado sales de hierro. Nótese como la Hb se
encuentra disminuida, el VGM normal y el CV-VGM muy alto. La curva del VGM es bimodal y corresponde a dos poblaciones eritrocíticas: una
microcítica desplazada a la izquierda, y otra macrocítica desplazada a la derecha; esta última corresponde a la población eritrocitaria "nueva" que se
ha producido en respuesta a la administración de hierro.
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5.- Histograma de los eritrocitos de un individuo con anemia macrocítica por deficiencia de vitamina B12.
Nótese cómo la Hb está baja, el VGM muy alto y el CV-VGM también muy aumentado; la curva del VMG está
desplazada a la derecha (macrocitosis).
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• Policromatofilia, Eliptocitos, Esferocitos, Acantocitos, Hematíes fragmentados, Dacriocitos, Macroovalocitos, Punteado Basófilo, Anillos de Cabot, Cuerpos de Howell-Jolly, Parásitos hemáticos, etc.
Los analizadores no pueden observar:
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• Crioaglutininas:• Calentar la muestra a 37
grados y volver a analizar
Interferencias
• Se sugiere realizaranticuerpos anti Mycoplasma pneumoneae
• Investigar una leucemialinfoide tipo B
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• Presencia de eritrocitos nucleados
Interferencias
• CORRECCION DELA CUENTA DE LEUCOCITOS
• CUENTA TOTAL X 100
• 100 + ERITROCITOS NUCLEADOS
• CORRECCION DELA CUENTA DE LEUCOCITOS
• 20,000 X 100
• 100 + 40=14,285
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5/11/2020 109
Número de glóbulos blancos: (WBC)
Se reporta la cantidad/L ó x109/L
Adulto: 5,000 a 10000/L (5-10 x 109/L)
Las cuentas obtenidas por citometría deben correlacionar con el extendido de sangre periférica.
SERIE BLANCA:
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5/11/2020 110
Cuenta diferencial de leucocitos:
Basófilos: 0-1% (0-90/L)
Eosinófilos: 0-4% (0-300/L)
Monocitos: 1-10% (100-800/L)
Linfocitos: 20-45% (1,500-3,000/L)
Neutrófilos: 45-75% (3,000-7,000/L)
Neutrófilos en banda: 0-4% (0-400/L)
Neutrófilos segmentados: 45-70% (1,300-6,700/L)
FÓRMULA
BLANCA
Segmentados
Eosinófilos
Banda
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5/11/2020 111
Alteraciones de los eosinófilos
• Eosinofilia:
• Infecciones por metazoarios cuando estos invaden los tejidos, en enfermedades alérgicas.
• Asociadas a algunas neoplasias malignas
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5/11/2020 112
Alteraciones de los basófilos
• El aumento de basófilos es poco frecuente.
• Secretan sustancias que promueven la respuesta inflamatoria.
• Se observa generalmente como parte de procesos proliferativos malignos.
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5/11/2020 113
Alteraciones de los monocitos• Se encuentra monocitosis: en infecciones por micobacterias,
hongos , protozoarios y virus, en lesiones con necrosis tisular extensa y en la fase de recuperación de las infecciones por piógenos.
• Como parte de las células malignas proliferativas.
• En la endocarditis bacteriana se observan macrófagos en la circulación.
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5/11/2020 114
Alteraciones de los linfocitos• Linfocitosis a base de linfocitos grandes (T activados
(“irritativos” o" atípicos” ).
• Típicas del síndrome de mononucleosis infecciosa (linfadenopatía, fiebre, faringitis).
• Producida por virus de Epstein Barr, citomegalovirus o toxoplasma.
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5/11/2020 115
CAUSAS DE LEUCOCITOSIS
(MÁS DE 12 X 109//L GLÓBULOS BLANCOS)
Infecciones, dolor, parto, ejercicio vigoroso, Hemorragia aguda, Hemólisis aguda, Padecimientos mielo o linfoproliferativos, Leucemias crónicas, policitemia vera, Leucemia agudas, etc.
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• Neutrófilos bilobulados
• con granulación azurófila
• con cuerpos de Dohle
• con seudópodos
• Con vacuolización incluso de los monocitos.
• Fagocitosis bacteriana
En casos de sepsis ó infecciones severas se pueden observar en la morfología de los
neutrófilos:
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5/11/2020 118
Plaquetas:
Su tamaño varía entre 1 a 4μm y no poseen núcleo. Constituyen la primera línea de taponamiento o cierre de la
herida, cuando ocurre una lesión. Son células provenientes de otras células grandes llamadas
megacariocitos. Producen entre 2,000 a 4,000 plaquetas.
PARÁMETROS DE LA SERIE TROMBÓTICA.Recuento total de plaquetas (PLT):
Las cifras de referencia se halla entre 150 y 400 x109/L
SERIE PLAQUETARIA
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5/11/2020 119
• Número de plaquetas.
• Histograma de distribución de los volúmenes plaquetarios.
• Morfología plaquetaria.
SERIE PLAQUETARIA
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5/11/2020 120
• Causas de trombocitopenia:
• Púrpura auto inmune.
• Leucemia aguda.
• Anemia Aplásica.
• Mieloptísis.
• Hiperesplenismo.
• Púrpura trombocitopénica.
SERIE PLAQUETARIA
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5/11/2020 121
• Transfusiones sanguíneas.
• Lupus Eritematoso generalizado.
• Radiaciones ionizantes.
• Medicamentos citotóxicos.
SERIE PLAQUETARIA
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5/11/2020 122
Causas de trombocitósis.
• Padecimientos malignos.
• Síndromes mieloproliferativos.
• Estado posesplenectomía.
• Padecimientos autoinmunes.
• Anemia por deficiencia de Hierro.
• Infecciones agudas.
• Pancreatitis crónica.
• Cirrosis hepática.
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Bibliografía
• Fundamentos de Hematología. Ruiz Argüelles Ruiz Delgado 5ª. Edición Ed. Medica Panamericana.
• Hemograma Manual de Interpretación. Renato Failace. Flavo Fernandes 6ª. Edición Ed. Medica Panamericana.
• Hematología Fundamentos y aplicaciones Clínicas BernadetteF. Rodak 4ª. Edición Ed. Medica Panamericana.
• Hematología Clínica J. Sans-Sabrafen 5ª. Edición Elsevier
• Hematología Práctica Dacie y Lewis 10ª. Edición Elsevier
QFB-EHDL ANTONIO VILLEGAS SAENZ
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