sborník referátù odborného semináøe mastitidy...

34
Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty veterinárního lékaøství VFU Brno Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY SKOTU poøádaný v rámci Mezinárodní výstavy „VetFair“ v kongresovém centru ALDIS a.s. v Hradci Králové dne 3.5.2003 Odborný garant: Prof. MVDr. Bohumír Hofírek, DrSc.

Upload: others

Post on 11-Jan-2020

7 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

Page 1: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

Èeská buiatrická spoleènostaKlinika chorob pøežvýkavcùFakulty veterinárního lékaøství VFU Brno

Sborník referátù odborného semináøe

MASTITIDY SKOTU

poøádaný v rámci Mezinárodní výstavy „VetFair“ v kongresovém centru ALDIS a.s.

v Hradci Králové dne 3.5.2003

Odborný garant: Prof. MVDr. Bohumír Hofírek, DrSc.

Page 2: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty
Page 3: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

Obsah

ÚVOD ............................................................................................................................... 5Prof. MVDr. Bohumír Hofírek, DrSc.

NOVÉ ASPEKTY V ETIOLOGII MASTITID .................................................................................... 7Prof. MVDr. Jiøí Smola,CSc.- Ústav mikrobiologie a imunologie FVL VFU Brno MVDr. Dušan Haas - Klinika chorob pøežvýkavcù FVL VFU Brno

KATEGORIZACE ZDRAVÍ MLÉÈNÉ ŽLÁZY, KLINICKÉ FORMY MASTITID A JEJICH TERAPIE ................. 10Prof. MVDr. Bohumír Hofírek DrSc.- Klinika chorob pøežvýkavcù FVL VFU BrnoMVDr. Dušan Haas - Klinika chorob pøežvýkavcù FVL VFU Brno

ENVIRONMENTÁLNÍ MASTITIDY V CHOVECH SKOTU ................................................................ 24MVDr. Oto HumlMVDr. Jana PaškováAnalytické laboratoøe s.r.o. Plzeò

DEZINFEKCE JAKO SOUÈÁST ANTIMASTITIDNÍHO PROGRAMU ................................................... 26Ing Rùžena SeydlováMilcom a.s. Výzkumný ústav mlékárenský Praha

Page 4: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty
Page 5: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

5

ÚVODProf. MVDr. Bohumír Hofírek, DrSc,

Èeská buiatrická spoleènost

Po ètyøech letech od posledního poøádá Èeská buiatrická spoleènost ve spolupráci s Klinikou chorob pøežvýkavcù FVL VFU Brno opìt odborný semináø zamìøený na nejèastìjší onemocnìní dojnic - mastitidy. Zánìty mléèné žlázy jsou každodenní realitou na mléèných farmách každého zemìdìlského podniku. Posti-hují všechny chovy, ale jejich rozšíøení je odvislé od úsilí podnikového managementu, jak otázku jejich výskytu øeší, jak uplatòuje prevenci a jak dùslednì realizuje zvolený antimastitidní program. Z obecného pohledu je však nutno konstatovat, že mastitidy jsou a budou trvalým problémem spojeným s chovem skotu vzhledem k tomu, že pøi jejich vzniku dochází k interakci tøí biosystémù, kdy se uplatòuje mnoho vyvoláva-jících etiologických èinitelù a podmiòujících faktorù.

Chov skotu prodìlává zejména v posledních letech u nás významné zmìny. Mìní se plemenné složení našich stád, výraznì stoupá užitkovost, mìní se formy ustájení, mìní se technologické postupy pøi výživì dojnic, zaèínáme se setkávat s technickými inovacemi pøi získávání mléka a zdokonalují se metody sanitace. Mezi zásadní inovace v chovu dojnic, které se zaèínají uplatòovat i u nás patøí automatické systémy dojení. V tomto pøípadì jde o dvì velké zásadní zmìny v chovu dojnic, pøechod od skupinové péèe k péèi individu-ální a dále optimalizace prvkù tvoøících welfare zvíøat, tj. individuální denní režim, který umožòuje analýzou datového souboru jednotlivých dojnic zamezit vzniku mnohých zdravotních poruch.

Až dosud praktikované programy tlumení mastitid byly zamìøeny pøevážnì na infekèní pùvodce zánìtù mléèné žlázy, což postupnì navodilo v takových chovech zmìny ve složení spektra antigenù podílejících se na vzniku mastitid. V takových pøípadech mùžeme pozorovat nárùst výskytu koaguláza negativních stafylo-kokù a enterobakteriálních mikroorganismù. Environmentální mikroorganismy se stávají hlavními pùvodci klinických i subklinických mastitid a tomu je nutné pøizpùsobit preventivní a profylaktické programy tlu-mení, ve kterých se zdùrazòují postupy jako dezinfekce strukù pøed dojením, mezidezinfekce, nebo preven-tivní aplikace antibiotik v peripartálním období.

Dalším novým a velmi závažným faktem, v zahranièí zcela bìžným, se kterým se v posledních letech setkáváme i u nás, je preventivní aplikace antibiotik kravám pøi zaprahnutí jako souèást prevence mastitid, respektive jako trvalá souèást antimastitidního programu. Léèba klinických i subklinických forem mastitid, jakož i programovaná aplikace antibiotik pøi zaprahnutí dojnice, pøípadnì preventivní aplikace antibiotik v peripartálním období zvyšují riziko vzniku rezistence. Celý tento problém se bezprostøednì dotýká nejen veterinární mediciny, ale ještì významnìji i mediciny humánní. Na tomto úseku náleží veterinárnímu lékaøi velmi významné místo, být garantem antibiotické strategie používání antimikrobiálních látek, která spoèívá v opatrném jejich užívání, pokud možno na základì pøesné diagnózy a vyšetøení citlivosti.

Z toho co bylo uvedeno, respektive naznaèeno vyplývá nezpochybnitelná potøeba uspoøádání odborného semináøe zamìøeného na problematiku onemocnìní mléèné žlázy, tlumení mastitid a problémù, které s tím souvisejí.

Page 6: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

6

Page 7: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

7

Nové aspekty v etiologii mastitidProf. MVDr, Jiøí Smola, CSc.,

Ústav mikrobiologie a imunologie, Veterinární a farmaceutická univerzita Brno

MVDr. Dušan Haas, Klinika chorob pøežvýkavcù, Veterinární a farmaceutická univerzita Brno

STREPTOKOKYV uplynulých deseti letech ztratil na významu druh S. agalactiae, døíve považovaný za nejzávažnìjšího pùvodce

infekèních mastitid. V plné míøe ho však nahradily další druhy, døíve jen málo významné S. uberis, S. dysgalactiae, S. equi subsp. zooepidemicus. Tyto druhy se vyznaèují specifickou ekologií v hostitelském organismu skotu, což pak ústí v rozdílné cesty jejich šíøení v souvislosti se vznikem mastitid. Takto vznikající infekce jsou dále spojeny s urèitými rizikovými faktory typickými pro stádo.

Streptococcus uberis - vyznaèuje se pøedevším vìtším poètem lokalit nebo habitù v tìle skotu, v nichž je nalézán. Hlavním místem výskytu je støevní obsah, kde je pøítomen jako epifyt a saprofyt. V trávicím ústrojí je více ménì trvale, pøièemž k této kolonizaci dochází již nìkolik mìsícù po narození. Mikroorganismus není však vázán jen na støevní trakt, nachází se rovnìž v obsahu bachoru, kdy jeho poèty dosahuji 104 - 106/1g obsahu. Je tedy zøejmé, že S.uberis je souèástí bìžné mikroflóry GIT a v souvislosti s vyluèováním výkalù se tento, mikroorganismus dostává do vnìjšího prostøedí. Sekundárnì se pak nachází na kùži napøíklad v okolí rekta, ale i v krajinì sterna a na mléèné žláze. Aby byl obraz o ekologickém cyklu tohoto druhu úplný, je tøeba pøipomenout, že bìžný je i èastý výskyt kmenù S. uberis ve stìrech hltanu dojnic i jalovic, ale i ve tkáni tonsil. Z uvedeného vyplývá, že S. uberis je jedním ze základních mikroorganismù, které mùžeme najít na sliznicích a v obsahu trávicího traktu skotu. Mikrob se vyznaèuje také schopností odolávat vysychání, což mu umožòuje pøežít na povrchu kùže, pøípadnì srsti, po dobu nìkolika týdnù. Je tedy typickým reprezentantem pùvodcù ekologických mastitid a proto nelze klást souvislost mezi frekvencí výskytu v organismu hostitele a zaznamenaným poètem mastitid.

S. parauberis - je uznaným druhem, který byl vyèlenìn z pùvodního druhu S. uberis z dùvodù genetické a bioche-mické odlišnosti kmenù, jinak ovšem z hlediska ekologie odpovídá druhu S. uberis.

S. dysgalactiae - je ponìkud více vázán na svého hostitele už proto, že patøí do skupiny pyogenních streptokokù. Ekologie tohoto mikroorganismu je spjata s výskytem v øadì míst tìla, jako jsou sliznice hltanu, vaginy a tkáò tonsil. Není tedy epifytem obsahu støeva, což se odráží v rozdílném zpùsobu kolonizace jedincù. V pøípadì tohoto mikroorganismu se jedná spíše o kolonizaci povrchu sliznic v klasickém provedení, kdy k pøenosu dochází pøímým nebo nepøímým kontaktem. Z uvedeného vyplývá, že S. dysgalactiae není spjat pøímo s výskytem v prostøedí stáje a proto ke vzniku mastitidy dochází v souvislosti s pøenosem mezi zvíøaty, pøedevším dojícím zaøízením.

S. equi subsp. zooepidemicus - je v mnoha smìrech velmi podobný výše uvedeným ekologickým charakteristikám S. dysgalactiae. Frekvence výskytu mastitid je však pomìrnì nízká.

Ostatní streptokoky spojované s etiologií mastitid pøedstavují druhy ze skupiny viridujících streptokokù, kam ostatnì patøí i S. uberis. Nejèastìji zmiòovaným pùvodcem je S. bovis. Výskyt tohoto druhu je bìžný v obsahu bachoru, kde se nachází ve velkém množství a kde pøedstavuje autochtonní mikroflóru. Analogicky je potom pro-kazován v obsahu støeva skotu rùzných vìkových kategorií. Do vnìjšího prostøedí se dostává výkaly, kde zùstává pomìrnì dlouhou dobu pøítomen ve vysoké koncentraci. Musíme tedy pøedpokládat jeho více ménì trvalou pøítom-nost nejenom v podestýlce, ale i na pomùckách a zaøízení používaných v pøíslušném chovu skotu.

ENTEROKOKYEnterokoky se vyskytují jako saprofyté a komnezálové støevního ústrojí zvíøat, ale i bachoru. Nacházíme je jak

v obsahu tlustého, tak i tenkého støeva, což jim umožòuje jejich vysoká odolnost vùèi pùsobení žluèových kyselin, enzymù ve støevì a hodnot pH až do 9,6. Množství obsažené v jednom gramu støevního obsahu dosahuje 109 - 1011 CFU. Enterokoky zùstávají ve vnìjším prostøedí, kam se dostávají s výkaly, pøítomny trvale. To jim umožòuje jejich schopnost pøežívat jak ve vlhkém, tak i v suchém prostøedí (jeden týden až nìkolik mìsícù). Z enterokokù jsou známé pøedevším dva druhy Enterococcus faecalis a Enterococcus faecium, které víceménì pøedstavují indiká-tory celého rodu. Souèasná situace je však daleko složitìjší vzhledem k tomu, že v rámci rodu Enterococcus se v nedávné dobì popsaly témìø dvì desítky nových druhù, které se prokazují také ve støevì zvíøat a nìkteré z nich i jako pùvodci mastitid (Enterococcus gallinarum , Enterococcus casseliflavus).

Page 8: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

8

STAFYLOKOKYS. aureus - je pøedstavitelem klasických pùvodcù infekèních mastitid, jejichž frekvence závisí na úrovni hygieny

a veterinární péèe v chovu. Tento mikroorganismus se vyskytuje v menším procentu na sliznicích hltanu a ve tkáni tonsil, kde je považován za epifyta. Riziko vzniku mastitid tedy souvisí s predispozièními faktory, které umožòují zvýšení frekvence jeho výskytu u jednotlivých zvíøat ve stádì a následnì jeho šíøení mezi nimi. Mùžeme konstatovat, že z hlediska ekologie je možno výskyt tohoto mikroorganismu výraznì omezit na orgány mimo mléènou žlázu, což vede ve svém dùsledku k omezení výskytu mastitid jím zpùsobených. Jedná se tedy o pøímou závislost mezi procen-tem výskytu mikroorganismu v hostiteli a následnì jím zpùsobených mastitid. Totéž však není možno konstatovat v pøípadì koaguláza negativních stafylokokù (KNS).Tato skupina døíve tzv. nepatogenních stafylokokù se vyznaèuje pomìrnì úzkými vztahy ke svým hostitelùm. I když nedisponuje klasickými faktory virulence jako kmeny S. aureus, vyznaèuje se schopností trvalé vazby na urèité lokality nebo tkánì tìla zvíøat. Jedná se pøedevším o kùži skotu, vèetnì mléèné žlázy, která je tìmito bakteriemi trvale osídlena. Jako pøíklad lez uvést pøedevším záhyby kùže, kde se udržuje vìtší vlhkost a kde dochází k jejich pomnožování. Urèitou predispozici pro množení pak vytváøí èasté vlhèení povrchu kùže napøíklad pøi omývání mléèné žlázy pøed dojením. Tím však není øeèeno, že se jedná o patogeny kùže. Druhy KNS, které jsou pùvodci mastitid jsou saprofyty kùže. Nejèastìji nacházenými druhy KNS v této souvislosti jsou S. chromogenes, S. warneri, S. lentus, S. hominis, S. sciuri, S. simulans, S. epidermidis, S. xylosus a S. haemolyticus.

BAKTERIE Z RODÙ ARCANOBACTERIUM A CORYNEBACTERIUMVýznamným pùvodcem mastitid skotu je Arcanobacterium pyogenes, (døíve Actinomyces pyogenes). I když se

u tohoto mikroorganismu ekologická nika nerozšíøila a zùstává i nadále omezena na sliznice urogenitálního traktu, význam tohoto etiologického agens stoupá. Souvisí to zøejmì s uplatòováním technologií, které “zkracují èas pøe-nosu” mikroba do období nìkolika minut potøebných k jeho pøežití. Mikroorganismus sám není schopen pøežívat mimo hostitele, kde odolává pouze vyschnutí. V pøípadì A. pyogenes byly v posledním období popsány dlouho hledané faktory virulence kmenù spojené s jeho hemolyzinem (pyolyzin), který byl charakterizován jako cytolytický toxin. Zdá se tedy, že další z pùvodcù významných infekèních mastitíd byl úspìšnì charakterizován z hlediska faktorù patogenity.

Z rodu Corynebacterim pøichází v úvahu pøedevším novì popsaní pùvodci mastitid ovcí Corynebacterium cam-porealensis a Corynebacterium mastitidis. Lze oèekávat, že i v dalším období budou poznány nové druhy korynebak-terií nejenom u ovcí ale i skotu, vzhledem k jejich stále nevyhovujícímu zpùsobu identifikace.

ENTEROBAKTERIETypickým pøedstavitelem pùvodcù mastitid z této skupiny mikroorganismù je druh E. coli. Mikroorganismus

je dobøe znám jak z hlediska ekologie, tak i vlastností antigenních a biochemických. Na rozdíl od kmenù s jasnì definovanými faktory virulence, známých pùvodcù koliinfekcí zvíøat, se u kmenù vyvolávajících kolimastitidy s žád-nými specifickými faktory virulence nesetkáváme. Jednoduše øeèeno, mùžeme od kteréhokoliv kmene, kterých je ve støevním obsahu nepøedstavitelné množství, oèekávat mastitidu kdykoliv. Jedná se tedy spíše o kvantitativní, než kvalitativní stránku vzniku infekce. Predispozice jsou dány pøedevším výskytem rizikových faktorù v daném chovu a potom teprve ze strany vnímavého jedince. Zvláštní kapitolu v tomto smìru však tvoøí kmeny E. coli produkující verotoxiny, z nichž nejznámìjší jsou kmeny E.coli O157, O26. Právì tyto kmeny umožòují v souèasné dobì døíve nepøedstavitelnou detailní analýzu šíøení klonù E. coli z ekologické niky ve støevì do mléèné žlázy. Z hlediska eko-logického jsou dále velmi významné bakterie z rodu Klebsiella, Enterobacter, Serratia a Yersinia, které jsou schopny nezávislého množení na hostiteli. K tomu dochází bìžnì ve stájovém prostøedí, nejvíce však pøi vzestupu teplot v letním období a to jak v podestýlce, tak mimo ni.

JINÉ BAKTERIE, POCHÁZEJÍCÍ VÝLUÈNÌ Z PROSTØEDÍ CHOVU.Nìkteré mikroorganismy vyvolávající mastitidy skotu nejsou s tímto hostitelem vùbec spjaty. Jejich habitat se

nachází v suché nebo vlhké èásti prostøedí chovaných zvíøat. Strategickou výhodu v tomto pøípadì mají zejména aerobní sporuláty, pøedstavované druhem Bacillus cereus. Vylouèeny nejsou ani další druhy bacilù. Druhou skupi-nou mikroorganismù s ekologickou výhodou jsou aeromonády a pseudomonády. Jejich niku pøedstavuje vodní pro-støedí s dostateèným obsahem živin, kde se mohou pomnožovat pøi pokojových teplotách.

MYKOPLAZMATA Stále vìtší pozornost se vìnuje pøípadùm mastitid u nichž nebyl prokázán “klasický bakteriální” pùvodce

pøi kultivaci na bìžných médiích. Pøedpokládá se, a nìkteré dùkazy o tom svìdèí, že podíl na tìchto pøípa-dech nesou urèité druhy mykoplazmat. Tyto pøedpoklady byly opakovanì potvrzeny v nìkterých studiích

Page 9: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

9

úspìšným použitím antibiotik pøi terapii. Z hlediska ekologie mykoplazmat jako bakterií zcela závislých na hostiteli je však zøejmé, že k infekci mléèné žlázy dochází kontaktem a výskyt mastitid má typický infekèní charakter.

KVASINKYStále opomíjenou skupinou mikroorganismù, která mùže být pøíèinou mastitid jsou kvasinky, zejména z rodu

Candida. Jejich výskyt je totiž preferován používáním širokospektrálních antibiotik, nebo rùzných kombinací anti-biotik. Jsou to tedy pøípady dlouhodobì neúspìšnì léèené infekce, bez patøièné laboratorní diagnostiky.

MÌNÍCÍ SE SPEKTRUM PÙVODCÙ MASTITID BÌHEM LAKTACE Pøi hodnocení výskytu mastitid ve stádì je zapotøebí zvažovat mìnící se spektrum bakterií, vùèi kterým je jednot-

livé zvíøe exponováno. V øadì studií byla prokázána rùzná frekvence výskytu jednotlivých skupin mikroorganismù na kùži strukù v období stání na sucho, po porodu a následné laktaci. K tìmto zmìnám dochází, pøedevším v sou-vislosti s charakterem rùzných úkonù, které povrch kùže strukù exponují ke kolonizaci. K ovlivnìní dochází také používáním rùzných desinfekèních prostøedkù, ale i antibiotik v dobì zaprahlosti, stavem mléèné žlázy bìhem jed-notlivých fází laktace a úrovni imunitní odpovìdi daného jedince. Rùznorodost spektra pùvodcù byla zaznamenána rovnìž vzhledem k poètu prodìlaných laktací.

Rozšiøující se spektrum pùvodcù mastitid vyžaduje zmìnu pøístupù také ze strany mikrobiologické diagnostiky vèetnì testování citlivosti izolovaných pùvodcù na antibiotika. Primární je pøesná identifikace pùvodce, která umož-òuje stanovit prognózu infekce, stejnì tak jako postupy tlumení a prevence. Nález takových pùvodcù jako jsou napøíklad enterokoky je neklamným dùkazem nejenom tlaku bakterií pocházejících z prostøedí, ale i nedostateè-ného systému hygieny dojení. Úspìšný prùnik tìchto mikroorganizmù do mléèné žlázy je umožnìn pøedevším nedodržováním doporuèovaných standardù správné výrobní praxe.

Page 10: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

10

KATEGORIZACE ZDRAVÍ MLÉÈNÉ ŽLÁZY, KLINICKÉ FORMY MASTITID A JEJICH TERAPIE

Prof. MVDr. Bohumír Hofírek, DrSc., MVDr. Dušam HaasKlinika chorob pøežvýkavcù Fakulty veterinárního lékaøství VFU Brno, Palackého 1-3, tel. 541562402,

e mail: hrubai@vfu, cz

Zejména v posledním desetiletí jsme svìdky nebývalého rùstu prùmìrné užitkovosti dojnic v Èeské republice, která se blíží 6000 l na dojnici a rok. V uvedeném období došlo také k významným zmìnám v rozsahu, zpùsobu a technologii chovu dojnic. Není pøekvapivé proto, že v tìchto souvislostech docházelo k urèitým zmìnám i v kva-litì, výtìžnosti a technologických vlastnostech mléka. Bylo také ovlivnìno zdraví mléèné žlázy zejména u dojnic ve stádech s vysokou užitkovostí, kde management nezvládl výživu, technologii ustájení zejména z hlediska hygieny prostøedí a hygienu technologie získávání mléka. Výsledkem je narušení zdraví dojnic, které se manifestuje v kon-krétních podmínkách vìtší nebo menší frekvencí zánìtù mléèné žlázy - mastitidami v nejrozmanitìjších formách.

Zánìty mléèné žlázy skotu jsou nejdražší chorobou skotu snižují produkci mléka a jeho kvalitu terapeutická rezidua znehodnocují mléko zpùsobují pøedèasné vyøazování dojnic z chovù i nutné porážky onemocnìní jedné ètvrti bìhem laktace snižuje produkci cca o l0 - 12% cca 50% dojnic onemocní bìhem života klinickou nebo subklinickou mastitidou finanèní ztráty zpùsobené mastitidami èiní cca 300,- EURO na krávu a rok

Mastitidy jsou polyfaktorová a polyetiologická onemocnìní na jejímž vzniku a rozvoji se uplatòují tøi biosystémy: makroorganizmus - dojnice vybavená vlohami dìdièné a získané odolnosti nebo vnímavosti k onemocnìní široká škála mikrobiálních pùvodcù (patogenù závislých na krávì nebo environmentálního charakteru) široká škála faktorù zevního prostøedí (výživa, technologie chovu, technologie získávání mléka, metabolické

choroby a rùzné další stresory)

Mastitida je výslednicí interakce všech tøí zùèastnìných biosystémù a v žádném pøípadì nelze tyto biosystémy a jejich pùsobení chápat oddìlenì, pøípadnì pøeceòovat jeden na úkor ostatních dvou. Nerespektování tohoto prin-cipu znamená neúspìch pøi tlumení mastitid.

INTERAKCE TØÍ BIOSYSTÉMÙ UPLATÒUJÍCÍCH SE V PATOGENEZI MASTITID

Page 11: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

11

Z toho co bylo uvedeno o závažnosti onemocnìní dojnic mastitidami je zøejmé, že jejich rozšíøení ve stádì mùže znamenat ztrátu efektivnosti mléèné produkce a posunutí rentability produkce mléka do èervených èísel. Nutno se proto ptát, jaká jsou kritéria a charakteristika stáda s efektivní mléènou produkcí z pohledu souèasnosti (tab. è 1).

Tab. è. l Charakteristika stáda s efektivní mléènou produkcí (Wendt et al. l998)

Užitkovost > 6000 kg mléka za laktaci (prùmìr stáda) > 3 laktace na krávu (prùmìr stáda) < 30% brakování, z toho < 1/3 z dùvodù onemocnìní mléèné žlázy

Kvalita mléka < 200.000 bunìèných elementù/ml tržního mléka (bazénový vzorek)

Zdraví mléèné žlázy < 2% výskyt klinických mastitid za rok = stav dobrý 3 - 5% výskyt klinických mastitid za rok = stav uspokojivý > 8% výskyt klinických mastitid za rok = stav varující > 60% krav s poètem bunìèných elementù < 100.000ml >80% všech krav bez klinických zmìn na mléèné žláze > 90% mikrobiologických vyšetøení negativní < 5% nových infekcí za rok žádný výskyt mykoplazmat

Nezbytným pøedpokladem pro hodnocení stáda z hlediska posuzování zdraví mléèné žlázy a jeho oznaèení jako stádo bezproblémové nebo problémové je jednotná kategorizace zánìtù mléèné žlázy. Tyto otázky byly již pøed léty diskutovány a øešeny skupinou expertù z iniciativy Mezinárodní mlékaøské federace (International Dairy Fede-ration (l967, 1971), kdy byly definovány kategorie zdraví a nemoci mléèné žlázy na základì poètu bunìèných ele-mentù, prùkazu mikrobiálních pùvodcù mastitid a biochemických zmìn ve složení mléka. Od té doby uplynulo více jak tøicet let a uvedená kategorizace se jeví ze souèasného hlediska pøekonána, i když její principy zùstávají v platnosti.

Tab. è. 2 Definice zdraví a kategorizace zánìtù mléèné žlázy (Hamann,Fehlings, 2002)

poèet bunìèných elementù v 1 ml mléka patogenní mikroorganismy v mléce ano ne< 100 000 latentní infekce normální sekrece> 100 000 mastitis nespecifická mastitis

Pozn.: Vzorek mléka pro laboratorní vyšetøení je odebírán ze ètvrti mléèné žlázy v obvyklý èas dojení od dojnice v normální laktaci a na poèátku dojení. Poèet bunìèných elementù je zjišśován na fluorescenèním principu (Fosso-matic - System).

Kategorie zdraví mléèné žlázy jsou charakterizovány následujícím zpùsobem:

Zdravá mléèná žláza (normální sekrece) nezjišśují se žádné klinické zmìny na mléèné žláze mléko je rovnìž beze zmìn poèet bunìèných elementù je < 100.000 v mléku se nezjišśují patogeny mléèné žlázy

Latentní infekce mléèné žlázy nezjišśují se žádné klinické zmìny na mléèné žláze mléko je rovnìž beze zmìn poèet bunìèných elementù je < 100.000 v mléce se zjišśují patogeny mléèné žlázy

Nespecifický zánìt mléèné žlázy klinické zmìny na mléèné žláze jsou prokazatelné (nebo) jsou prokazatelné jen zmìny mléka poèet bunìèných elementù je > 100.000 v mléce se nezjišśují patogeny mléèné žlázy

Page 12: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

12

Zánìt mléèné žlázy (mastitis)

1. Subklinická mastitis klinické pøíznaky se nezjišśují mléko je nezmìnìné poèet bunìèných elementù je > 100.000 v mléce se zjišśují patogeny

2. Klinická mastitis (III stupnì)

I. Klinická mastitis mírného stupnì zmìny triasu se nemanifestují prokazatelné jsou zpravidla pouze zmìny v mléce (vloèky), zejména v prvních støicích nádoje klinické pøíznaky jsou zpravidla nevýrazné nebo se nezjišśují pøíjem potravy je zachován, rovnìž ruminace a pøežvýkování

II. Klinická mastitis støedního stupnì jsou prokazatelné klinické pøíznaky zánìtu zvýšená teplota tachykardie snížený pøíjem potravy snížená ruminace mléèný sekret je zmìnìný, vodnatý, zpravidla mléku podobný

III. Klinická mastitis vysokého stupnì - Mastitis acuta gravis vyznaèuje se výraznými klinickými pøíznaky na mléèné žláze mléèná žláza je velmi bolestivá sekret mléèné žlázy je zmìnìný, mléku nepodobný, sérovitý, hnisavý nebo hemorrhagický celkový zdravotní stav dojnice je vážnì narušen horeèka > 40,0 ° C, anorexie, zástava ruminace celková skleslost, èasto ulehnutí a pøíznaky intoxikace nebezpeèí náhlého uhynutí

Pozn.: Klinická mastitis mùže probíhat perakutnì, akutnì, subakutnì nebo chronicky

Page 13: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

13

Tab. è. 3 Pøehled významných patogenù mléèné žlázy (Wendt et al., l994)

G + KOKY - pùvodci streptokokových a stafylokokových mastitid

Rod Druh

STREPTOCOCCUS S. agalactiae, S. dysgalactiae, S. eberis, S. thermophilus

STAPHYLOCOCCUS S. aureus S. epidermidis - KOAGULÁZA NEGATIVNÍ STAFYLOKOKY

ENTEROCOCCUS E. faecalis, E. bovis, E. durans, E. faecium

MICROCOCCUS M. indolicus

G- TYÈINKY - pùvodci enterobakteriálních (Coli) mastitid

Èeleï ENTEROBACTERIACEAE

ESCHERICHIA E. coli

CITROBACTER C. diversus

ENTEROBACTER E. cloacae, E. aglomerans

PROTEUS P.vulgaris

SERRATIA S. marcescens

KLEBSIELLA K. pneumoniae

Ostatní patogeny mléèné žlázy

Pùvodci pyogenních mastit

ARCANOBACTERIUM A. pyogenes

PEPTOCOCCUS P .indolicus

FUSOBACTERIUM F. necroforum

BACTEROIDES B. melanogenocus

Další patogeny mléèné žlázy

BACILLUS B. cereus

PSEUDOMONAS P. aeuriginosa

MYCOPLASMA M. bovis

CHLAMIDOPHILLA CH.. abortus

NOCARDIA N. aeroides

PROTOTHECA P. zopfii

CRYPTOCOCCACEAE KVASINKY

Konkrétní situace ve výskytu klinických i subklinických mastitid na jednotlivých farmách mùže být velmi roz-dílná v závislosti na interakcích tøí uvedených biosystémù a také na tom, jak se managementu farmy daøí uplatòovat antimastitidní program. Zkušenosti ukazují, že pøi nezvládání situace pøevládají mastitidy, kde se jako etiologický èinitel uplatòují pøedevším mikroorganismy závislé na krávì, jako Streptococcus agalactiae, Streptococcus dysga-lactiae, Staphylococcus aureus a koaguláza negativní stafylokoky. Aplikace preventivních opatøení založených na tøech základních principech - dezinfekci strukù, hygienì a sanitaci dojícího stroje spolu s péèí o jeho bezchybnou funkci a ošetøení mléèné žlázy antibiotiky v okamžiku zaprahování, pøineslo zjevný pokles v incidenci kontagióz-ních mastitid (Booth l997). V tìchto souvislostech patogeny z okolního prostøedí (environmentální) nabývají na významu (Bradley,,Green, 2001) a dominantního pùvodce mastitidy zde pøedstavuje E. coli (Bradley, Green, 2002). Mimo to nabývají na významu také mastitidy vyvolané koaguláza negativními stafylokoky (Haas et al., 1999)/Graf è. 1,2/, pøítomné na kùži vemene a strukù, pøípadnì na rukou dojièe. Závažnost tìchto uvedených potencionálních patogenù mléèné žlázy spoèívá v tom, že se jimi vyvolané mastitidy prezentují zpravidla klinicky a to ve velmi tìžké formì jako mastitis acuta gravis, což vedle terapie antibiotiky vyžaduje další usilovnou a nákladnou systémovou léèbu (Friton, 2002: Fitzpatrick et al, 2002).

Page 14: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

14

Graf 1: Výsledky bakteriologického vyšetøení klinických pøípadù zánìtù mléèné žlázy.

Graf 2: Frekvenèní zastoupení bakteriálních pùvodcù.

S. aureus – 18 kmenù, S. koaguláza negativní – 73 kmenù, bakterie èeledi Enterobacteriacae – 31 kmenù, bakterie rodu Streptococcus a Enterococcus – 11 kmenù

Page 15: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

15

TERAPIE KLINICKÝCH ZÁNÌTÙ MLÉÈNÉ ŽLÁZY

Základní cíle dosáhnout likvidace patogenù v nemocné mléèné žláze zamezit tvorbu toxinù zabránit toxickému šoku a uhynutí dojnice obnovit pohodu dojnice potlaèit lokální pøíznaky zánìtu minimalizovat ireverzibilní poškození mléèné žlázy minimalizovat ztráty dojivosti normalizovat bachorovou fermentaci a metabolismus

Významné aspekty pro diagnostiku a terapii spolehlivá anamnéza dùkladné klinické vyšetøení stanovení klinické diagnózy a jejího stupnì laboratorní (mikrobiologické ) vyšetøení, urèení pùvodce, antibiogram - urèení míry rezistence epidemiologické vyhodnocení vèasná výsledná diagnóza bezprostøední zahájení terapie

a/ na mléèné žlázeb/ systémové

správý výbìr antibiotika pro aplikacia/ intra mamárníb/ parenterální

dokonalá spolupráce laika s odborníkem dùslednost a vysoké pracovní nasazení cytologická a mikrobiologická kontrola výsledkù terapie zastavení sekrece a potlaèení infekce u prognosticky nepøíznivé chronické mastitis aplikací intra cisternam

50 - 100 ml1. 5 - 10% Lugolova roztoku2. 1 - 3% dusiènanu støíbrného3. 5 - 10% Lugolova roztoku4. Betadine5. Pozor - po aplikaci je tøeba dojnici klinicky sledovat v následujících 24 hodinách, hrozí šok, gangréna

mléèné žlázy!!!

VÝZNAMNÉ ASPEKTY PØI TERAPII MASTITIS ACUTA GRAVISa/ lokální terapie mléèné žlázy pravidelné vydojování mléèné žlázy v intervalu 2 hodin oxytocin 20 IU i.m., 10 IU i. v. k podpoøe vydojení fyzikální terapie osmotická terapie (výplach cisterny a mlékovodù fyziol. roztokem nebo 6 - 8% roztokem glukózy tišení bolesti (nervová blokáda vemene), paravertebrální svodné znecitlivìní n. ilioinguinalis, n. iliohypogas-

tricus a n. pudendus antimikrobiální terapie i. mam. enzymová terapie (trypsinum, chymotrypsinum) i. mam.

b/ systémová terapie (symptomatická) kardiaka analeptika antihistaminika antipyretika nesteroidní antiflogistika (NSAID) flumixinum megluminicum 2,2 mg/kg ž. hm., meloxicamum O,5 mg/kg

ž. hm. diuretika (Kalium aceticum sol. 300 ml per os)

Page 16: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

16

rehydratace elektrolyty (8 - 12 l i.v. kapkovou infuzí glukóza i.v. (ochranná léèba jater) stimulace bachorové fermentace (propionáty a bachorová tekutrina i. rum) vitamin A prednisolon ACTH preparáty systémová chemoterapie

c/ antimikrobiální terapie klinické mastitidy výbìr antibiotika s úèinností na druhy diagnostikovaných patogenù výbìr antibiotik pro i. mam. a systémové požití se synergickým úèinkem nekombinovat antibiotika s bakteriocidním a bakteriostatickým úèinkem /viz. doporuèené schéma/ pøi i. mam. aplikaci antibiotika provádìt dokonalou desinfekci struku (nebezpeèí zavleèení infekce) i. mam. aplikací antibiotik ošetøit nejen klinicky se manifestující ètvrtì, ale také ostatní NK - test pozitivní

ètvrti rozsah terapie limituji podle stupnì klinického projevu z hlediska prevence vzniku klinické mastitidy provádìt ošetøení antibiotiky bezprostøednì po zjištìní

l. latentní infekce mléèné žlázy2. zvýšeného poètu bunìèných elementù > 100.0003. u problémových zvíøat /recidivující mastitidy/ použít peripartální terapie (parenterální aplikace antibio-

tik 24 - 0 hod pøed porodem a do 24 hodin po porodu

Schema doporuèení (nedoporuèení, tolerance) pøi kombinaci antibiotik

Page 17: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

17

ZÁSADY POUŽITÍ ANTIBAKTERIÁLNÍCH LÁTEK PØI TERAPII A PREVENCI KLINICKCH ZÁNÌTÙ MLÉÈNÉ ŽLÁZY

Zpùsoby použití:

Intramamární terapie - indikace: klinická mastitis mírného stupnì

Kombinovaná terapie (intramamární + systémová) - indikace: klinická mastitis støedního stupnì

Komplexní kombinovaná systémová terapie - indikace: mastitis acuta gravis

Peripartální terapie - provedení 24 - 0 hod. pøed, 0 - 24 po porodu parenterální aplikace antibiotik, indikace: prevence klinické mastitis

Na závìr laktace pøi zaprahnutí - intramamární aplikace antibiotik, indikace: prevence klinických mastitid

Nejèastìji používané a doporuèené kombinace antibiotik:KLOXACILIN * KOLISTINKLOXACILIN * AMOXICILINKLOXACILIN * AMPICILINAMOXICILIN * Kyselina klavulanováAMOXICILIN * KOLISTINDIKLOXACILIN * AMPICILINAMPICILIN * KOLISTINPENICILIN * NEOMYCINPENICILIN * STREPTOMYCIN

STREPTOKOKOVÁ MASTIS (INFEKÈNÍ)Pùvodce: Streptococcus agalactiae

Formy onemocnìní mléèné žlázy: latentní infekce, subklinický zánìt, galactophoritis, mastitis catarrhalis acuta, chronica, mastitis acuta gravis

Nástup klinických pøíznakù po infekci: 1 - 2 dny

Terapie: mastitis mírného stupnì - vydojování, antimikrobiální terapie i. mam. mastitis støedního stupnì - vydojování terapie na mléèné žláze i. mam. antimikrobiální terapie (systémová antimikrobiální terapie) mastitis acuta gravis - vydojování terapie na mléèné žláze i. mam. antimikrobiální terapie komplexní terapie ( kombinovaná systémová antimikrobiální terapie)

Použitelná antibiotika: Beta laktamová antibiotika - BENZYLPENICILIN, OXACILIN, AMPICILIN, KLOXA-CILIN, AMOXICILIN + kys. klavulanová, CEFALOSPORINY l. - 4. generace

Tlumení a prevence: prevence a metafylaxe metabolických poruch, hygiena a sanitace prostøedí, hygiena a sani-tace získávání mléka, péèe o bezchybnou funkci dojícího stroje, dezinfekce strukù, pøi zaprahnutí i. mam. aplikace antibiotik, prevence klinických recidiv peripartální antimikro-biální terapie

Neúspìchy pøi terapii: pøi rozsáhlém zánìtu, trombotizaci cév, nekróze, antibiotikum neproniká do míst pøítomnosti patogena pøi silnì kontaminovaném prostøedí pøi destrukci tkánì, která není schopna regenerace pøi chronických procesech pøi dlouhém intervalu mezi vznikem infekce a provedenou terapií

Streptokokové mastitidy vyvolané dalšími pùvodci (Streptococcus dysgalactiae, Streptococcus uberis, nemají infekèní charakter a jejich výskyt je spíše sporadický). Infekce vyvolaná enterokoky je následkem špatné hygieny a sanitace získávání mléka.

Page 18: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

18

STAFYLOKOKOVÁ MASTITISPùvodci: Staphylococcus aureus koaguláza negativní stafylokoky (KNS)

Formy onemocnìní mléèné žlázy: latentní infekce, subklinický zánìt, akutní zánìt, MASTITIS ACUTA GRAVIS (hemorrhagicko - nekrotizující mastitis)

Nástup klinických pøíznakù po infekci - u mastitis acuta gravis za 2 - 6 hodin u mastitis catarrhalis acuta za 1 až 2 dny

Výskyt v chovech má narùstající tendenci, pasážemi pøes hostitele se jeho virulence zvyšuje

Použitelná antibiotika: OXACILIN, KLOXACILIN, NAFCILIN, AMOXICILIN + kys. klavulanová, CEFALO-SPORINY l. - 4 generace, LINKOMYCIN + NEOMYCIN

Terapeutický postup, tlumení a prevence obdobnì jako u streptokokových mastitid

ENTEROBAKTERIÁLNÍ MASTITIDY (COLI) MASTITIDYPùvodci: Escherichia coli Klebsiella pneumoniae Enterobacter cloacae Citrobacter diversus Proteus vulgaris Serratia marcescens

Eoidemiologie: mikroorganizmy vyvolávající enterobakteriální (coli) mastitidy øadíme do skupiny environmentálních

pùvodcù zánìtù mléèné žlázy pžedpokládá se, že nìkteré podskupiny coliformních mikroorganizmù mají schopnost pøežívat v mléèné

žláze a adaptovat se nìkteré dojnice se této infekce zbaví, jiné zùstávají infikovány chronicky v závislosti na variabilitì jejich imu-

nitní výbavy a soubìžnì probíhajících chorob, karencí, energetického deficitu a dalších stresorù stání na sucho je významným obdobím možné infekce mléèné žlázy coliformními patogeny aplikace antibiotik do vemene pøi zaprahnutí je velkým rizikem pøi nesterilním provedení období mezi kontaminací a klinickým projevem coli mastitid je velmi variabilní klinické pøíznaky se èasto projeví v peripartálním období nebo v prvních l00 dnech laktace v chovech, kde se provádí úspìšné tlumení streptokokových mastitid mùže dojít k nárùstu coli mastitid

Formy zánìtù mléèné žlázy: perakutní, akutní, mastitis acuta gravis, chronická a subklinická

Nástup klinických pøíznakù: pøi kontaminaci a uplatnìní stresorù ( enteritis,septikémie, metritidy, poranìní strukù, chladový astres aj.), významná je tvorba toxinù

Použitelná antibiotika: KOLISTIN, NEOMYCIN+LINKOMYCIN, AMOXYCILIN + kys. klavulanová, CEFALOSPORINY 4. gen., (CEFCHINOM), TETRACYKLIN, OXYTETRACYKLIN, CHLORTETRACYKLIN, GENTAMICIN, ENROFLOXACIN, SULFONAMIDY + Trimethoprim

Tlumení a prevence enterobakteriálních (Coli) mastitid cestou optimálního konstrukèního øešení stájí a odpovídající hygienou prostøedí (zejména ustájení v pøed-

porodních boxech, porodnách, v produkèních stájích, odpoèívárnách) minimalizovat možnost kontaminace strukù

snížení pravdìpodobnosti infekce pøed dojením zajištìním dobré hygieny v nahánìcích prostorech dojírny omezení penetrace mikroorganizmù do mléèné žlázy bìhem dojení cestou zajištìní èistoty strukù, jejich osu-

šení a øádné dezinfekce pøed dojením použití jen øádnì fungujícího dojícího zaøízení a kontrola jeho technického stavu èištìní a dezinfekce dojících strojù personál èinný pøi dojení musí dodržovat pøísnou osobní hygienu (možnost dezinfekce rukou v prùbìhu

dojení)

Page 19: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

19

provádìní mezidezinfekce strukových násadcù dezinfekce strukù po dojení poskytnutí krmiva dojnicím po dojení, což by mìlo odradit zvíøata od pøedèasného uléhání minimalizace výskytu dystokií, peripartálních onemocnìní, poškození a poranìní strukù minimalizace metabolických onemocnìní (vèetnì subklinických forem) minimalizace onemocnìní paznehtù minimalizace výskytu dermatitis digitalis a dermatitis uberoinguinalis krávy, které neudrží mléko separovat nebo vyøadit intramamární aplikace antibiotik pøi zaprahování peripartální aplikace antibiotik

PYOGENNÍ MASTITIS (LETNÍ MASTITIS)Pùvodci: Arcanobacterium pyogenes (døíve Corynebacterium, Actinomyces pyogenes)

Výskyt: sporadický i enzootický, pøedevším v létì na pastvì, postiženy jsou krávy laktující, zaprahlé i jalovice

Zdroj infekce: veškerá hnisající poranìní, kontaminované dojící zaøízení, ruce dojièù

Šíøení: pøedevším hmyzem

Formy zánìtù mléèné žlázy: akutní mastitis, abscedující mastitis s tvorbou píštìlí

Terapie: akutní forma - kombinovaná terapie antibiotiky abscedující forma - kombinovaná teraoie antibiotiky a lokální ošetøení abscesù píštìlí

Použitelná antibiotika: beta laktamová antibiotika

Tlumení a prevence: pravidelná kontrola mléèných žláz, hygiena ustájení a peèlivá individuální terapie abscesu-jících pøípadù s píštìlí

ANTIBIOTICKÁ REZISTENCE PÙVODCÙ BAKTERIÁLNÍCH INFEKCÍ MLÉÈNÉ ŽLÁZY SKOTU

a) Pøirozená rezistence

bakteriální druh antibiotikum

CITROBACTER DIVERSUS AMPICILINENTEROBACTER CLOACAE AMPICILIN , CEFALOSPORIN I. gen.SERRATIA MARCESCENS “ “PSEUDOMONAS AERUGINOSA “ “PROTEUS VULGARIS AMPICILIN,CEFALOSPORIN I.gen., KOLISTIN

b) Získaná rezistence

Na farmách a ve stájích vzniká rezistence tehdy, když pøi aplikaci antibiotik nejsou dodržována základní pravi-dla jejich používání, pøi léèbì klinických mastitid, pøípadnì v podmínkách jejich dlouhodobého nekontrolovaného profylaktického užití v dobì zaprahnutí nebo pøi preventivní peripartální aplikaci. Nástup rezistence je dynamický proces a její projevení mùže být v nìkterých konkrétních pøípadech velmi rychlé. Pro praxi v maximální míøe je nutná znalost informací o stavu rezistence, aby z nich mohla vzejít správná rozhodnutí o volbì úèinného antibiotika nebo jejich kombinací. V konkrétních podmínkách musí být rezistence periodicky kontrolována, pøi èemž je daleko dùležitìjší znalost o výskytu rezistence z více vyšetøení na konkrétní farmì, než údaje z jednoho pøípadu klinické mastitidy.

Závažnost problematiky antibiotické rezistence demonstrujeme na výsledcích z konkrétního vyšetøení defino-vané farmy (Haas, Hofírek, Smola, l999)/Tab. è. 3,4,5/.

Výsledky ukázaly zvýšený podíl koaguláza negativních stafylokokù a koliformních mikroorganizmù ve vyšetøova-ných vzorcích mléka u dojnic s klinickou mastitidou a rovnìž výraznou rezistenci patogenù mléèné žlázy Staphylo-coccus aureus a KNS na nìkterá testovaná antibiotika.

Lze pøedpokládat, že pøíèinou nárùstu antibiotické rezistence v posledních letech ve stádech mléèného skotu je rozšiøující se preventivní terapie antibiotiky v okamžiku zaprahnutí jako souèást antimastitidních programù a také

Page 20: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

20

metoda preventivní peripartální terapie dojnic. Jsou však mnohé další ještì závažnìjší pøíèiny, používání antibio-tik v nepatøièné míøe a nevhodným zpùsobem u dalších druhù hospodáøských zvíøat. Situace je vážná neboś rezis-tentními mikrobiálními kmeny je ohrožen i èlovìk, a to jak pøímým kontaktem se zvíøetem, tak také závadnou potravinou kontaminovanou rezistentním patogenem. Situace je tak vážná, že se pøipravují legislativní opatøení pro oblast používání antibiotik ve veterinární medicinì. Pod patronací SVÚ Praha - referenèní laboratoø probìhl také celostátní monitoring antibiotické rezistence u vybraných patogenù (Salmonella spp., Staphylococcus aureus a Escherichia coli) a monitoring probíhá dále.

Graf 3: Antibiotická rezistence kmenù Staphylococcus aureus.

0

10

20

30

40

50

Graf 4: Antibiotická rezistence kmenù KNS (koaguláza negativních stafylokokù).

0

10

20

30

40

50

Page 21: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

21

Graf 5: Antibiotická rezistence kmenù èeledi enterobacteriacae.

0

10

20

30

40

50

Seznam ATB zkratek:AMC – amoxicilin + kyselina klavulonová, AMP – ampicilin, APR – apramycin, CIP – ciprofloxacin, ?CAZ

– ceftazidim, CT – colistin, C – chloramfenikol, E – erytromycin, GN – gentamicin, MY – linkomycin, OXA – oxacilin, OA – oxolinic acid, P – penicilin, SXT – sulfametoxazol + trimetoprim, S3 – smìs sulfonamidù, S10 – streptomycin, TE – tetracyklin

c) Strategie boje proti zvyšující se rezistenci1. Svìdomitì rozhodovat o použití antibiotik, redukovat jejich aplikaci na nejnutnìjší míru.2. Antibiotika používat jen v pøípadech, je li pøítomen vnímavý infekèní agens.3. Antibiotika používat jen v pøísnì indikovaných pøípadech4. Antibiotika nepoužívat jako kompenzaci nehygienických pomìrù na farmì5. Veterinární lékaø je odpovìdný za volbu a použití správného antibiotika6. Volba antibiotika je provedena na základì odborných znalostí s pøihlédnutím k prospìchu nebo možnému

riziku pro èlovìka a zvíøe.7. Pøedepsání antibiotik a jejich terapeutické použití je vyhrazeno jen veterinárnímu lékaøi a jejich podání zvíøeti

jen pod jeho dohledem.8. Aplikace antibiotik zvíøatùm je možné jedinì po stanovení etiologické diagnózy a ovìøení citlivosti k zjištì-

nému patogenu.9. Je li k dispozici úèinné úzkospektrální antibiotrikum jeho volba má prioritu pøed šitrokospektrálním antibio-

tikem.10. Jen ve vyjímeèných pøípadech mùže být použito antibiotikum na základì zkušeností s jeho døívìjším použí-

váním.11. Respektujeme a využíváme farmakokinetické vlastnosti antibiotika pøi jeho výbìru.12. Pøi kombinaci antibiotik respektujeme doporuèená pravidla.13. Pøed hromadným použitím antibiotik je nezbytné ovìøit úèinnost dílèím pokusem.

Page 22: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

22

14. Pøi dlouhodobém kalkulovaném používání antibiotik ve stádì (na pø. preventivní terapie pøi zaprahnutí) pro-vádíme periodicky kontroly citlivosti a podle výsledkù rozhodujeme o zmìnì antibiotika

15. O používání antibiotik a rezistenci vedeme vhodnou formou pøesné záznamy pro každou farmu nebo stáj.

BAKTERIÁLNÍ PATOGENY MLÉÈNÉ ŽLÁZY (Z MLÉKA A MLÉÈNÝCH PRODUKTÙ) VE VZTAHU K ONEMOCNÌNÍ ÈLOVÌKA

Potencionální riziko pøi nedostateèné pasteurizaci, chlazení, hygienì získávání, ošetøení a zpracování mléka

Staphylococcus aureus G+ kok- produkuje hemolyzíny, enterotoxiny a exotoxiny

Pøíznaky u èlovìka nastupují již za 1 - 3 hodiny po infekci i pozdìji- zvýšená teplota- pocení- bolesti hlavy a bøicha - prùjem- zvracení- svalové køeèe- dehydratace- toxický šokV praxi pøichází onemocnìní individuálnì i hrimadnì, úmrtí jsou vyjímeènáZdrojem infekce je mléko a zejména sýry krav, ovcí a koz, ale také kùže a sliznice èlovìka a zvíøat

Escherichia coli G- tyèinky- støevní patogeny, pùvodci enterobakteriálních (coli) mastitid.

enteropatogenní E.coli (EPEC)enteroinvazivní E.coli (EIEC)enteroagresivní E.coli (EAgEC)shigatoxigenní E.coli (STEC)

Pøíznaky u èlovìka:

a/ Hemorrhagická kolitisTìžká kolika, zvracení, prùjem, po 12 - 48 hodinách krvavý (trvá asi týdenOnemocní zejména dìti a starší osoby a imunologicky inkompetentní osoby

b/ HUS - hemolyticko-uremický syndromVyskytuje se zejména u dìtí až s 10% mortalitouZdrojem mohou být mléko a mléèné výrobkyÈasto je zjišśován sérotyp O157:H7

Bacillus cereus G+ tyèinkaKlinické pøíznaky èlovìka:- syndrom zvracení za 1 - 5 hodin- prùjmový syndrom za 8 - 16 hodin- prùbìh je zpravidla mírný, ale byly popsány i smrtelné pøípady

LITERATURA:Booth, J.M.: Progress in Mastitis Control - An Evolving Problem. Proceedings of the British Mastitis Conference, 1997: 3-9.Bradley, A.J., Green, M.J.: Adaptation of Escherichia coli to the Bovine Mammary Gland.J. Clin. Microbiol., 39, 2001,1845-1849.Bradley, A.J , Green, M.J.: The Changing of E coli Mastitis. Satelit Symposium, XXII WBC, 2002, Hannover. Novel Aspects of Mastitis Therapy, 2002:4-11. Fitzpatrick, J.L., Nolan, A.M., Scott, E.M.: Detection and Relevance of Pain Cows Suffering from Mastitis. Satellite Symposium , XXII WBC, 2002, Hannover. NovelAspects of Mastitis Therapy, 2002:24-26. Friton, G.: Recent Findings on the Impact of NSAIDs in Acute Mastitis. Satelit Symposium, XXII WBC, 2002, Hannover. Novel Aspects of Mastitis Therapy, 2002:27.

Page 23: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

23

Haas,D., Hofírek, B., Smola, J.: Analyse der Risikofaktoren bei der Entstehung klinischerEuterentzündungen bei Milchkühen in der Tschechischen Republik. 2. Fortbildungstagung der II. Medizinis-chen Universitätsklinik für Klauentiere der Veterinärmedizinische Universität Wien, 1999:70-71. Hamann, J., Fehlings, K.: Leitlinien zur Bekämpfung der Mastitis des Rindes als Bestandsproblem. Verlaf DVG, Goessen, 2002, 126 s.IDF, International Dairy Federation. Ann. Bull.,Part 3, 1967.IDF, A monograph on bovine mastitis, International Dairy Federation, Ann. Bull.- Part l, l971.Smola J., Celer, V., Klimeš, J., Šimùnek J.: Klinická veterinární mikrobiologie, VÚVeL, Brno - Medlánky, 2002 , 73 s.Šimùnek, J., Smola, J.: Antibiotika, sulfonamidy a chinolony ve veterinární medicinì. Vydavatelství LAST, Steinhauser, s.r.o., Tišnov,1998, 136 s. Wendt, K., Bostedt, H., Mielke, H., Fuchs, H-W.: Euter- und Gesäugekrankheiten. Verlag G. Fischer, Jena - Stuttgart, Germany, 1994, 531 s.Wendt, K., Lotthammer, K-H., Fehlings, K., Spohr, M.: Handbuch Mastritis. Kamlage Verlag, Osnabrück, Germany, 1998, 300 s.

Page 24: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

24

Environmentální mastitidy v chovech skotuMVDr. Oto Huml, MVDr. Jana Pašková, Analytické laboratoøe spol. s r.o., Plzeò

Mastitidy zùstávají jedním z hlavních problémù v chovech dojnic bez ohledu na technologickou vyspìlost chovù a úroveò veterinárních opatøení. V posledních letech se zdálo, že dojde k razantnímu poklesu incidence mastitid, ale došlo pouze k zmìnì zastoupení rùzných patogenù mléèné žlázy. Mezi nejèastìjší patogeny mléèné žlázy se zaøadila Escherichia coli, na vzestupu jsou i mastitidy vyvolané Streptococcus uberis 1).

Se zmìnami technologií v chovech skotu dochází i ke zmìnám ve zdravotním stavu dojnic. Jednou z pozorova-ných zmìn je i nárùst neinfekèních (environmentálních) mastitid.

Mastitidy lze epidemiologicky rozdìlit do dvou základních skupin:1. infekèní mastitidy (primárním rezervoárem patogenù je infikovaná mléèná žláza) 2)

2. environmentální mastitidy (primárním rezervoárem pùvodcù je životní prostøedí dojnic) 3)

Mezi bakterie, vyvolávající infekèní mastitidy, patøí Streptococcus agalactiae, Staphylococcus aureus, Myco-plasma spp. a Streptococcus dysgalactiae, v nìkterých oblastech i Corynebacterium bovis.

Mezi nejèastìjší pùvodce environmentálních mastitid patøí Gram-negativní bakterie (Obvykle se jedná o Escherichia coli, Klebsiella spp., Enterobacter spp., ménì èasto o Proteus spp., Serratia spp., Pseudomonas spp., setkali jsme se i s mastitidami vyvolanými zárodkem Salmonella enteritidis.) a environmentálními streptokoky (nejèastìji Streptococcus uberis). Všechny environmentální streptokoky hydrolyzují eskulin (s výjimkou Streptococcus dysgalactiae, který za nìkte-rých okolností vyvolává infekèní mastitidy a za jiných podmínek mùže pùsobit jako environmentální patogen).

Oproti vìtšinou subklinickým infekèním mastitidám jsou environmentální mastitidy spojeny pøedevším s klinic-kým prùbìhem onemocnìní.

Doba nakažení neinfikovaných mléèných ètvrtí je tedy u infekèních mastitid limitována dobou dojení, zatímco k nakažení environmentálními bakteriemi mùže dojít kdykoli.

Infekèní mastitidy jsou kontrolovány desinfekcí struku po dojení, léèbou krav v zaprahlosti, vyøazováním nemoc-ných kusù, terapií klinických pøípadù mastitid a správným seøízením dojícího aparátu.

Vìtšina z výše uvedených opatøení ale neovlivòuje environmentální mastitidy, protože nijak nepostihuje pùvodce v prostøedí.

Význam environmentálních mastitid vzrùstá se zvyšujícím se zavádìním volného ustájení, ale pøedevším se zlep-šující se kontrolou infekèních mastitid. Klinické mastitidy vyvolané environmentálními patogeny bývají nejobvyk-lejším onemocnìním mléèné žlázy u stád s nízkým obsahem somatických bunìk a s dobrou ošetøovatelskou péèí.

PÙVODCI ONEMOCNÌNÍ:GRAM NEGATIVNÍ BAKTERIE

Mikrobiologická diagnóza koliformních infekcí mléèné žlázy je komplikovaná. protože u mnoha procesù je poèet vyvolávajících bakterií (CFU).mL-1 < 100, tedy ménì, než je minimální detekèní limit.4) Na druhou stranu mùže být izolace koliformních mikroorganizmù zpùsobena kontaminací bìhem odbìru vzorku.

Pøibližnì 80–90 % infekcí mléèné žlázy gram-negativními bakteriemi vyústí v klinický proces, pøibližnì 10 % infekcí se manifestuje jako perakutní mastitida s pøíznaky celkového onemocnìní. Incidence koliformních mastitid je sezónní a je vyšší bìhem letních mìsícù. Výskyt klinických pøípadù je nejvyšší u dojnic na poèátku laktace, pozdìji se snižuje.

Klinický prùbìh onemocnìní se liší i podle pøevažujícího pùvodce. Akutní infekce Escherichia coli mají kratší dobu klinického prùbìhu, než akutní infekce vyvolané Klebsiella spp.. Chronické infekce, vyvolané gram-negativ-ními bakteriemi, jsou zpùsobeny obvykle zárodky rodu Klebsiella a Serratia.

ENVIRONMENTÁLNÍ STREPTOKOKY

Nejèastìjším pùvodcem je Streptococcus uberis, ale ojedinìle mùžeme izolovat i jiné druhy. Protože je zde jako u gram-negativních bakterií riziko zevní kontaminace vzorku, nedoporuèujeme u diagnostiky environmentálních mastitid vyšetøování smìsných vzorkù.

Pøibližnì 40–50 % environmentálních streptokokových infekcí je spojeno s klinickou mastitidou. Infekce trvají déle než u koliformních bakterií. Èetnost nových pøípadù prakticky není ovlivnìna roèní dobou ani stadiem laktace. Díky delší dobì trvání je prevalence u streptokokových environmentálních mastitid vyšší než u mastitid vyvolaných gram-negativními bakteriemi.

Léèba v zaprahlosti mùže pozitivnì ovlivnit incidenci mastitid vyvolaných environmentálními streptokoky.

Page 25: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

25

MECHANIZMY KONTROLYZákladním principem kontroly environmentálních mastitid je:1. snížit riziko infekce konce struku2. zvýšit celkovou rezistenci krav proti infekci.Redukce patogenù ve vnìjším prostøedí vyžaduje vìnovat pozornost všem faktorùm v ustájení dojnic. Dojnice

by mìly být ustájeny v suchém a èistém prostøedí. Bakterie vyžadují ke svému množení vlhko, teplo a potravu. Snížení vlhkosti je jedním z nejefektnìjších zpùsobù, jak snížit výskyt environmentálních mastitid. To platí pøe-devším pro podestýlku. Ideálním materiálem je v tomto pøípadì písek nebo jiný anorganický materiál. U všech organických materiálù, používaných na podestýlání (sláma, piliny, hobliny a pod.) pøevyšuje poèet koliformních mikroorganizmù 1 milion v gramu. Pokud není možno použít anorganický materiál, mìla by být podestýlka co nejkvalitnìjší a co nejsušší. Velká pozornost by mìla být vìnována vlhkosti ovzduší.

Nerovná a nevyspádovaná podlaha, ve které se zachycuje moè a voda, bývá v našich podmínkách velmi èastým místem infekce.

U èásti stád má na výskyt environmentálních mastitid pozitivní vliv desinfekce struku pøed dojením.5) Ideálním preparátem je 0,25 % roztok jódu. Struk se do nìj krátce ponoøí, preparát se nechá 20 - 30 sekund pùsobit a osuší se papírovou utìrkou. Pak se teprve nasazují strukové nástavce. Tento postup je úèinný a zabraòuje pøitom pronikání reziduí jódu do mléka.

Protože Èeská republika leží v oblasti deficitní na selen, má pozitivní vliv na èinnost obranných protiinfekèních mechanizmù aplikace vitamínu E a selenu.6) Zde jsou u øady chovatelù stále ještì velké rezervy, protože je jejich ekonomická situace nutí do co nejvìtšího omezení pøímých nákladù. Preventivní aplikace vitamínu E a selenu je ale v našich podmínkách u všech druhù hospodáøských zvíøat ekonomicky zdùvodnitelná.

TERAPIE KLINICKÝCH PØÍPADÙ Terapie v zaprahlosti je úèinná pouze u èásti pøípadù, zpùsobených environmentálními streptokoky.3) Gram-ne-

gativním bakteriím mùže dokonce napomoci intramamární aplikace léèiva proniknout do struku.Environmentální streptokoky jsou pomìrnì èasto rezistentní k penicilinovým antibiotikùm. Byly publikovány

relativnì dobré zkušenosti s cefalosporinovými antibiotiky.9, 10)

Relativnì dobrá citlivost vùèi cefalosporinùm byla prokázána i u koliformních bakterií (57 - 92 %). 9),10)

Terapie mastitid s sebou nese jednak pøímé náklady (na léèiva, na veterinárního lékaøe, vyøazené mléko, pokles mléèné užitkovosti), jednak nepøímé náklady (vyšší % vyøazování, riziko úhynu, prodloužené mezidobí a pod.).

Pøímé náklady se v dnešní dobì pohybují v Anglii u mírných pøípadù až k 125 EURO, u tìžkých mastitid mohou dosahovat 410 EURO, v souètu s nepøímými náklady se mohou ztráty vyšplhat až na 750 EURO na nemocné zvíøe.

U perakutních mastitid se pohybují náklady na veterináøe kolem 260 EURO, pøímé náklady dosahují 800 EURO a v souhrnu s nepøímými ztrátami se mohou výsledné ztráty pohybovat kolem 1560 EURO. V pøípadì fatálního prùbìhu infekce pøesahují celkové ztráty 2300 EURO 8).

LITERÁRNÍ PØEHLED 1) Bradley, A.J.: Bovine mastitis: An Evolving Disease, The Veterinary Journal, 2002, 164, 116 - 1282) Fox, L.K.; Gay, J.M.: Contagious mastitis; Veterinary Clinics of North America: Food Animal Practice,

Volume 9, Number 3, 1993, str. 475 - 4873) Smith, K.L.; Hogan, J.S.: Environmental mastitis; Veterinary Clinics of North America: Food Animal Prac-

tice, Volume 9, Number 3, 1993, str. 489 - 4984) Sears, P.M.; González, R.N.; Wilson, D.J.; Han, H.R.: Procedures for mastitis diagnosis and control, Veteri-

nary Clinics of North America: Food Animal Practice, Volume 9, Number 3, 1993, str. 445 - 4685) Pankey, J.W.; Drechsler, P.A.: Evolution of Udder Hygiene; Veterinary Clinics of North America: Food

Animal Practice, Volume 9, Number 3, 1993, str. 519 - 5306) Erskine, R.J.: Nutrition and mastitis, Veterinary Clinics of North America: Food Animal Practice, Volume

9, Number 3, 1993, str. 551 - 5617) Erskine, R.J., Kirk, J.H., Tyler, J.W. DeGraves, F.J.: Advances in the Therapy for Mastitis, Veterinary Clinics

of North America: Food Animal Practice, Volume 9, Number 3, 1993, str. 499 -5178) Esslemont, D; Kossaibati,M.: Mastitis: How to Get Out of the Dark Ages, The Veterinary Journal, 2002,

164, 85 - 86 9) firemní literatura CIBA-GEIGY: Vetimast, sensitivity testing, 199010) firemní literatura PFIZER: Beta laktamázová studie, 2002

Page 26: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

26

Desinfekce v zemìdìlské prvovýrobì, chvou dojnicIng. Rùžena Seydlová

MILCOM a.s., VÚM Praha

Desinfekce je soubor opatøení, která likvidují choroboplodné zárodky a pøerušují cestu pøenosu infekce od zdroje k vnímavému jedinci. Desinfekce je také souèástí opatøení ke zdolání nákaz a prevence jejich vzniku. Podle použitých prostøedkù a zpùsobu provedení se rozeznávají rùzné druhy desinfekce (mechanická, fyzikální, chemická, biologická a kombinovaná). Význam desinfekèních opatøení, a to jak v pøípadì vzniku nákazy tak její prevence, je v popøedí zájmu zemìdìlské veøejnosti a mìl by být akceptován v plném rozsahu.

Nárùst koncentrace chovaných zvíøat, zvýšený bakteriální tlak prostøedí s ohledem na pøevládající typ ustájení (boxy, hluboká podestýlka), zvýšená míra resistence bakteriálních kmenù vedou k situaci, kdy desinfekce by mìla být nosným programem. Rozlišujeme nìkolik desinfekèních režimù týkajících se chovu dojnic, a to: Desinfekce dojících a chladících zaøízení Desinfekce strukù mléèné žlázy Desinfekce dojících jednotek, mezidezinfekce Desinfekce paznehtù Desinfekce vody Desinfekce prostorù a podestýlky Desinfekce obsluhy - osobní hygiena

Pøi desinfekci dojících a chladících zaøízení se využívá zejména kombinovaných úèinkù chemických látek spolu s fyzikálními a mechanickými prostøedky. Mikrobiologická èistota všech mléèných dopravních a kontaktních cest je dùležitým momentem pro dosažení požadované mikrobiologické kvality mléka a jeho optimálního zpenìžení. Pùsobí zde koncentrace alkaligenních a acidogenních prostøedkù, teplota roztokù a doba expozice. Neopominu-telným momentem vysoké úèinnosti sanitace je i úroveò nastavené vnitøní turbulence vody a množství vodních rázù. Intenzita germicidních schopností závisí na koncentraci H+, pøítomností bílkovin je úèinek oslabován. Pro organické kyseliny je typický nejen baktericidní ale i fungicidní úèinek. Kromì desinfekèních úèinkù alkalické látky pùsobí na emulgaci tukù a denaturaci bílkovin, které jsou odvádìny do roztoku. Anorganické a organické kyseliny kromì desinfekèních úèinkù reagují s nánosy minerálních povlakù a biofilmù. Zbytky tukù a bílkovin stejnì jako minerální nánosy z používané vody penetrované procházejícím mlékem jsou ideálním živným médiem pro mikroor-ganismy. I když se mikrobiologická kvalita vykupovaného mléka neustále zvyšuje (prùmìrná hodnota bazénových vzorkù za rok 2002 - 43 348 CFu/ml), je v závìsu za hodnotami vyspìlých mlékaøských oblastí (Bavorsko 19 000, Sasko 21 000, Baden-Würtenbersko 23 000).

Kvalita toalety mléèné žlázy pøed dojením, realizace dezinfekce strukù mléèné žlázy (predipping a postdipping) jsou faktory ovlivòující mikrobiální kontaminaci kùže strukù a tím i pravdìpodobnost vzniku nových mastitid. Jednoznaènì nejúèinnìjší zpùsob pøípravy mléèné žlázy na dojení vychází z používání jednorázových hadrových lépe pak papírových utìrek namoèených v desinfekèním roztoku. Na namáèení se osvìdèily chlorové pøípravky a v poslední dobì pak slabé roztoky (0,25%) peroxidu vodíku a kyseliny peroctové. Ty patøí mezi chemické oxidaèní látky pùsobící baktericidnì (bakteriostaticky), sporocidnì, antimykoticky a èásteènì i virucidnì. Pøi kontaktu s bio-logickým materiálem se rozpadají na vodu a kyslík. Nejvhodnìjší je skloubení varianty vlhké toalety a predippingu v podobì desinfekèního vlhkého èištìní, které je velice úèinné a èasovì provoz nezatìžuje. Jinou variantou je èasovì nároènìjší aplikace samotného predippingu po základní toaletì. Struky jsou ponoøeny do vhodného desinfekèního roztoku, ponechány po urèitou dobu v jeho expozici, otøeny a následnì pak nasazena dojící jednotka. Desinfekce strukù pøed dojením a udržování mléèné žlázy v èistotì má nezastupitelný význam v minimalizaci nárùstu masti-tid (snížení až o 50%). Vlhká papírová utìrka s desinfekèním prostøedkem nebo kombinace základního ošetøení vlhkým hadrem a predipping znamená pokles bakteriální kontaminace povrchu struku až o 85% oproti použití jen vlhké utìrky nebo dokonce mokré toalety, která znamená pokles pouze o 40%. Kromì toho lze zkonstatovat, že režim sprchování mléèné žlázy je naprosto nevhodný, ale v zemìdìlských provozech stále hojnì používaný a nìkdy i odborníky doporuèovaný. Režim postdippingu je v zemìdìlských chovech realizovaný v pomìrnì širokém mìøítku. Lze ho klasifikovat jako moderní vysoce úèinnou metodu prevence infekcí mléèné žlázy, závisející na druhu a koncentraci použité úèinné látky. Pokud je postdipping doplnìn o péèi o suchou a èistou podestýlku, sní-žení poètu nových mastitid je výrazné (až o 90%). Zásadnì rozlišujeme dva základní typy desinfekèních prostøedkù po podojení, a to bezbariérové a bariérové. Bariérové obsahují komponenty, které vytváøejí navíc prodyšnou poly-merovou vrstvu a ta sama o sobì struk chrání. Prvotní úèinek jakéhokoli postdippingu je v uzavøení strukového kanálku a v pøípadì použití bariérového prostøedku vytvoøení mechanického ochranného štítu okolo struku. Ten

Page 27: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

27

úèinnì brání prùniku mikroorganismù na kùži struku a v pauze mezi dojeními i do strukového kanálku. Dùležitou roli sehrávají další desinfekèní složky a sekundární antibakteriální èinidla. Postdippy, které obsahují napø. kyselinu mléènou, pomáhají pøi obnovì pøirozené obranyschopnosti kùže. Kosmetické pøísady jsou nìkdy opomíjené, ale jejich úloha je dùležitá. Rozpraskaná kùže je vstupní branou infekce všech patogenù, místem lokalizace zánìtlivých procesù (Staphyl. aureus). Porovnání bìžných desinfekèních prostøedkù a bariérových jednoznaènì vychází ve pro-spìch bariérových (graf è.1), a to jak v minimalizaci patogenù kontagiózních tak enviromentálních. Desinfekèní pøípravky pro ošetøení mléèné žlázy pøed a po dojení obsahují celou øadu úèinných látek. Mají rùzné obchodní názvy a obsahují napø. slouèeniny jodu nebo jodofory, alkoholy, kyselinu mléènou, kyselinu sorbovou, kyselinu benzensulfonovou. Nìkteré jiné obsahují kvartérní amoniové soli a širokou chemickou škálu slouèenin chloru. Na struky postižené dermatitidami by mìly být aplikovány jednoznaènì jodové pøípravky. Vzhledem k agresivním pod-mínkám ustájení chovù dojnic v ÈR by mìly pøevažovat kvalitní bariérové prostøedky.

Vytvoøení základních principù protimastitidního programu úzce a novì v zemìdìlské výrobì navazuje na apli-kaci systému HACCP (Hazard Analytical Critical Control Points) i do oblasti produkce syrového mléka. Vzniká potøeba, aby nezávadnost potravin kontrolována analýzou finálních výrobkù byla doplnìna o systém, který podchy-cuje pravdìpodobnost poškození syrového mléka již pøi jeho získávání. Jeho uplatòováním mlékárny rozšiøují svùj dlouhodobý zájem z kvality dovezené suroviny na kontrolu systému výroby pøímo na zemìdìlských farmách.

Mezidezinfekce v terminologii systému HACCP je tak jedním z kontrolních bodù, jejichž realizací se redukuje reálné ohrožení zdraví dojnice a v návaznosti na to i kvality mléka, a to jak po stránce mikrobiologické a bakteriolo-gické. Prùkaz bakteriologického nálezu v mléce znamená vedle jednoznaènì zhoršeného stavu mléèné žlázy i pod-statné zmìny látkového složení. Úèinná mezidezinfekce v maximální míøe omezuje pøenos bakterií zbytky mléka ve strukových návleèkách a snižuje tak pravdìpodobnost zavleèení patogenù do mléèné žlázy v prùbìhu dojení. Mezi-dezinfekce strukových návleèek dojící jednotky mùže mít celou øadu podob. Tou nejjednodušší je ponoøování dojící jednotky po podojení každé dojnice do kbelíku s roztokem úèinného desinfekèního prostøedku. Vyšší úroveò spl-òuje manuální vystøíkávání strukových návleèek dojících souprav natlakovaným desinfekèním roztokem z postøiko-vaèù. Technicky nejdokonalejší je automatická mezidezinfekce každé dojící jednotky pøi dojení v dojírnì, Airwash systém. Odborným zájmem bylo stanovit maximálnì možnou úèinnost mezidezinfekce pøi rùznì zvolených sys-témech proplachové vody. Ta byla stanovena na základì rozdílu mikrobiologických hodnot odebraných stìrù ze strukových návleèek dojících souprav ihned po podojení dojnice a po proplachu téže dojící jednotky instalovaným systémem Airwash (tab. è.1, 2).

Do projektu aplikace rùzných stupòù mezidezinfekce byly pro porovnání zaøazeny Ludslavice s instalovaným Airwash systémem a dva chovy, kde probíhala mezidezinfekce manuálním vystøikováním strukových návleèek po každém stažení dojící soupravy po podojení dojnice na dojírnì. V pøípadì chovu „S“ se jednalo o dojírnu 2 x 12, v pøípadì chovu „B“ o dojírnu 2 x 6. Procentické zastoupení individuálních hodnot poètu somatických bunìk (PSB) na jednotlivých úrovních bylo vztaženo k prùmìrnému zastoupení PSB z individuálních poètù 60 000 vzorkù ze tøí plemenáøských laboratoøí v odpovídajícím období. Zemìdìlská spoleènost v Ludslavicích si zakoupila režim automatické mezidezinfekce s úmyslem zlepšení a stabilizace relativnì dobrého zdravotního stavu mléèné žlázy. Naproti tomu chovy „S“ a „B“ byly donuceny katastrofální situací pro zmìnu režimu hygieny mléèné žlázy, výbìru desinfekèních prostøedkù a pro zavedení mezidezinfekce. U obou chovù byl diagnostikován z individuálních vzorkù jedinýz patogenù, a to Staphylococcus aureus. Ve všech tøech zmínìných chovech se jednalo a vysokokapacitní a vysokoprodukèní stáda.

Roèní sledování vlivu instalovaného Airwash systému v Ludslavicích je velice dlouhé a promítají se do hodno-ceného znaku PSB celé øady jiných faktorù (od teplotního stresu, druhotné fermentace krmiv, nezkonzultovaného vylouèení adsorbéru na mykotoxiny z koncentrátu až po vzplanutí mykotických mastitid). Pøi diagnostice masti-tidních patogenù byla vždy diagnostikována v SVU pouze saprofytní mikroflóra. Kategorii zlatého standardu (graf è.2), poètu somatických bunìk do 100 000/ml mléka, kterou lze považovat jednoznaènì za zdravou, významnì vedou nad prùmìrem, a to v nìkterých mìsících až o 12% (tab. è.3). Rozdíly hodnot v grafu è.3 nejsou již tak výrazné. Vysoká míra úèinnosti instalovaného Airwash systému je dokladována zastoupením a roèním prùbìhem hodnot PSB v porovnání s plemenáøskými laboratoøemi (graf è.4). Témìø všechny hodnoty leží hluboce pod prù-mìrem individuálních vzorkù z plemenáøských laboratoøí.

Vstupní hodnoty chovù „S“ a „B“ dosáhly užitkovosti 6 - 7 000 litrù mléka, ale z hlediska zdravotní situace byly diametrálnì odlišné. Míra tržnosti mléka u obou chovù na zaèátku projektu dosahovala pouze 65 - 70%. Oba chovy vedle závažných bakteriologických nálezù provázely i významné problémy s kvalitou krmné dávky (vysoké obsahy kyseliny máselné, vysoké hladiny moèoviny na hranici fyziologického rozhraní) a problémy s laminitidami. Pøesto dlouhodobý vývoj v hodnoceném znaku PSB ovlivòovaný stejnì jako v Ludslavicích všemi možnými negativními faktory pøinesl urèitý posun v kvalitì mléka, a to zejména významný v prvních mìsících. Z posouzení grafu è.3 a 4 vyplývá stabilizovanìjší situace v chovu “B”, kdy individuální hodnoty PSB v kategorii 101 - 400 000 jsou

Page 28: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

28

podstatnì vyšší v porovnání s kontrolou. Zajímavé jsou pøehledy z prùbìhu PSB u chovu “S”, kdy byla prokázána vysoká úspìšnost atypické léèby dojnic s vysokými PSB pøi pøedèasném zaprahnutí. Antibiotika byla aplikována podle ATB pøi zaprahnutí, a to jak do mléèné žlázy, tak do svalu. Z ekonomických dùvodù došlo k pouze jedné intramuskulární aplikaci. Z plemenáøské sestavy je patrné vysoké procentické zastoupení dojnic, které se po 4 - 5 mìsících stání na sucho otelily jako naprosto zdravé a dlouhodobì si svùj stav zachovaly i vzhledem k zavedenému hygienickému režimu.

Mezidezinfekci je v souèasné dobì celosvìtovì vìnována obrovská pozornost v souvislosti s øešením národních a nadnárodních mastitidních programù. Øešení zdravotního stavu mléèné žlázy je jedním z nejsložitìjších jakost-ních znakù kvality mléka vzhledem k tomu, že zde spolupùsobí celá øada komplexních faktorù. Pøesto je ale potvrzeno, že jakákoli forma mezidezinfekce, a to od triviální až po automatickou zabudovanou do dojíren, vede jednoznaènì k minimalizaci pøenosu kontagiózních patogenù a tím k lepšímu zdravotnímu stavu mléèné žlázy dojnic.

Problematika onemocnìní paznehtù je velice rozsáhlá. Je úzce spjata se zabezpeèením vnìjších podmínek (ustá-jení, výživa, koncentrace zvíøat). V každém pøípadì je nutné paznehty udržovat v suchu a èistotì. Desinfekce paz-nehtù je nutnou souèástí nejenom akutního zdravotního øešení, ale i souèástí preventivních opatøení. Desinfekèní koupele mohou mít rùzné podoby. Nejménì vhodnou je varianta desinfekèních brodících rohoží. Úèinnìjší jsou pak brodící koupele nebo obrovské stacionární vany (nádrže), kam se zvíøata zaženou a nechávají po urèitou dobu stát vystaveny úèinku desinfekèního prostøedku. Nejèastìji používaným chemickým prostøedkem je aldehyd kyse-liny mravenèí, formaldehyd. 2 - 5% koncentrace pùsobí baktericidnì na vegetativní formy mikrobù. Nevýhodou je nemožnost jeho aplikace pøi teplotách nižších než 9°C, kdy dochází k vysrážení na desinfekènì neúèinný para-formaldehyd. Významnou výhodou formaldehydu je jeho cenová dostupnost, germicidní schopnost, ale i schopnost vytvrzovat a tím upevòovat strukturu paznehtu. V desinfekèních koupelích mohou být však používány i roztoky síranu zineènatého a mìïnatého nebo cheláty mìdi a zinku s organickou kyselinou. Tyto mají nejenom bakteriosta-tický a baktericidní úèinek ale i fungicidní. Naprostou novinkou v desinfekci paznehtù je pìnová desinfekce (Kovex System). Úèinnou složkou pìny je smìs peroxidu vodíku a kyseliny peroctové. Nejvhodnìjší je aplikace pìny na èisté paznehty pøed vstupem do dojírny tak, aby vydržela pùsobit co nejdéle nekontaminovaná výkaly. Výhodou je desinfekce i spodní èásti paznehtu a mezipaznehtní spáry. Kyselina peroctová je slabá kyselina se silným oxidaèním úèinkem a její germicidní schopnosti jsou významné.

Zdroje vody v zemìdìlské prvovýrobì musí vyhovovat urèitým mikrobiologickým požadavkùm. Pravdìpodob-nost kontaminace vodních zdrojù v zemìdìlské prvovýrobì je rozsáhlá, proto by mìlo docházet k pravidelné desin-fekci vodních zdrojù. Asidogenní a oxidaèní látky vedle hologenù se podílejí na desinfekèních úèincích.

Desinfekce prostorù a podestýlky je založena na úèinku specifických chemických látek, které zasahují do život-ních procesù mikroorganismù, vyvolávají zmìny enzymatických dìjù. V široké zemìdìlské veøejnosti k nejpoužíva-nìjším patøí hydroxid vápenatý, chlorové vápno,uhlièitan vápenatý, fosfát sodný a vápenatý, chlornan sodný nebo chloramin. Ménì rozšíøená je biologická desinfekce. Její úèinnost je dána smìsí bakteriálních kmenù v kombinaci s biokatalyzátory, které podestýlku èistí a odstraòují zápach ve stájových prostorách s omezením uvolòování vol-ného èpavku.

Vysoká míra pozornosti by mìla být vìnována i desinfekci obsluhy a dodržování její osobní hygieny. Ruce obsluhy mohou být jedním z dùležitých zdrojù kontaminace mléèné žlázy. Povrch rukou je znaènì nerovný, vrásèitý s èet-nými odìrkami, kde mohou být lokalizovány patogeny. Je vhodné, aby obsluha pøi režimu získávání mléka od dojnic pracovala v tenkých pryžových rukavicích, které by oplachovala v desinfekèním prostøedku. Obsluha by rovnìž mìla být vybavena èistým pracovním odìvem. Zamìstnavatelé musí vylouèit z manipulace se syrovým mlékem osoby, které by mohly surovinu kontaminovat. Kromì toho je nutné, aby se lékaøským osvìdèením proká-zalo, že osobám zabývajícím se dojením a manipulací se syrovým mlékem nic v této èinnosti nebrání.

Desinfekce v souèasné dobì nabývá stále vìtšího významu v biologických oborech hospodáøství, a je-li správnì provádìná, má znaèný význam v boji proti vzniku a šíøení pøenosných nemocí. Mikroorganismy jsou nevyhnutelnou souèástí prostøedí èlovìka a hospodáøských zvíøat a jejich reakce na nì je podmínìna zpùsobem života. Zvýšeným používáním antibiotik v zemìdìlských provozech se oslabila pozornost na sanitární režimy, zejména pak desinfekci. Všeobecnì platí, že pokud se vyskytují nedostatky provozní a materiálové, zanedbávají se i desinfekèní režimy a vzniká tak úrodná pùda pro rozvoj patogenù.

Základní prvky desinfekèních režimù lze pozorovat i u historicky primitivních národù a vhledem k tomu, že stojíme na prahu tøetího tisíciletí, mìli bychom plnì využívat nejnovìjších vìdeckých poznatkù a na odpovídající úrovni desinfekèní režimy øešit. Ne nadarmo již antiètí pøírodní filosofové tvrdili: Natura in minimis maxima.

Page 29: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

29

Germicidní úèinnost prostøedku P3 - OXONIA AKTIV tab. è.1

Testované zárodky Koncentrace na ml 5 °C 20 °C testovaného zárodku 0,2% 0,5% 0,2% 0,5%

Grampozitivní bakterie

Streptococcus faecalis 5 x 106 2,5 1 1 1

Lactobacillus brevis 6,8 x 106 1 1 1 1

Lactobacillus lindneri 6 x 106 2,5 1 1 1

Pedicoccus damnosus 5 x 106 2,5 1 1 1

Leuconostoc oenos 4,9 x 106 1 1 1 1

Gramnegativní bakterie

Escherichia coli 5,4 x 106 1 1 1 1

Serratia marcescens 5,1 x 106 5 1 2,5 1

Pectinatus cerevisiphilus 4,2 x 106 1 1 1 1

0,5% 0,75% 1% 0,5% 0,75% 1%

Kvasinky

Saccharomyces cerevisiae 5 x 106 10 5 2,5 1 1 1

Saccharomyces diastaticus 3 x 106 2,5 2,5 1 2,5 1 1

Hansenula anomala 4,6 x 10 6 20 10 2,5 2,5 1 1

Zygosaccharomyces bailii 3 x 105 20 10 5 5 2,5 1

Plísnì

Byssochlamys fulva 3 x 105 >240 60 40 120 10 1

Penicillium expansum 1 x 105 20 5 5 1 1 1

0 1 2 3 4 50 1 2 3 4 5

Staphylococcus aureus

Streptococcus agalactiae

Streptococcus dysgalactiae

Streptococcus uberis

Enterobacter aerogenes

Klebsiella pneumonia

Escherichia coli

Porovnání úèinnosti dezinfekèních prostøedkù pøi aplikaci na struky (graf è. 1)

bìžné dezinfekèní prostøedky

bariérové dezinfekèní prostøedky

logaritmus úbytku mikroorganismù

Page 30: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

30

Porovnání úèinnosti pøi rùzných nastaveních systému Airwash (tab. è. 2)

Èíslo Datum: 26.2.2002 Datum: 7.3.2002 Datum: 7.3.2002

mìøení Podmínky: voda + vzduch Podmínky: 0,15% oxon + vzduch Podmínky: 0,25% oxon + vzduch pøed aplikací se systémem

úèinnost/% pøed aplikací se systémem

úèinnost/% pøed aplikací se systémem

úèinnost/% Airwash CPM/ml systému /CPM/ml Airwash/ CPM/ml systému/ CPM/ml Airwash CPM/ml systému CPM/ml

1. >3*105 3,0*104 nelze urèit 100 000 13 000 87,0 530 000 2 400 99,5

2. >3*105 8,9*103 nelze urèit 260 000 7 200 97,2 330 000 770 99,8

3. >3*105 1,2*103 nelze urèit 110 000 7 000 93,6 31 000 350 98,9

4. >3*105 1,0*103 nelze urèit 40 000 57 000 * 140 000 150 99,9

5. >3*105 3,0*103 nelze urèit 100 000 7 600 92,4 650 000 <100 100,0

6. >3*105 9,0*103 nelze urèit 1 400 000 130 000 90,7 430 000 350 99,9

7. >3*105 1,2*104 nelze urèit 590 000 12 000 97,9 510 000 400 99,9

tab. è. 3 leden 02 únor 02 bøezen 02 duben 02 kvìten 02 èerven 02 èervenec 02 srpen 02 záøí 02 øíjen 02 listopad 02 prosinec 02 leden 03 únor 03

do 100 43,0 44,0 41,0 47,0 45,0 43,0 45,0 41,0 41,0 42,0 42,0 42,0

46,7 59,0 53,3 50,9 49,2 42,3 36,2 42,2 41,0 46,5 50,7 38,8

12,0 9,5 10,2 13,8 24,9 32,3 36,2 39,5 39,7 43,8 40,1 26,0

16,6 29,9 32,9 31,9 31,2 33,3 31,0 37,4

101 - 400 37,0 36,0 38,0 35,0 36,0 37,0 37,0 36,0 36,0 37,0 38,0 37,0

40,0 34,3 37,7 40,2 39,9 41,3 45,5 40,9 39,7 35,3 34,7 39,8

27,9 24,9 27,6 34,8 30,3 32,5 31,5 30,3 32,9 31,4 32,3 44,7

48,4 37,8 41,9 50,4 46,2 42,9 45,1 41,4

nad 401 20,0 20,0 21,0 18,0 19,0 20,0 20,0 23,0 23,0 21,0 20,0 21,0

13,3 6,7 9,0 8,9 10,9 16,4 18,3 16,9 19,3 18,2 14,6 21,4

60,1 65,6 62,2 51,4 44,8 35,2 32,3 30,2 27,4 24,8 27,6 29,3

35,0 32,3 25,2 17,7 22,6 23,7 23,9 21,2

základní mìøení – plemenáøi

Airwash – Ludslavice

ruèní mezidezinfekce (S)

ruèní mezidezinfekce (B)

0

10

20

30

40

50

60

Individuální hodnoty PSB v hladinì 0-100 000/ml

(graf è.2)

I.02 II.02 III.02 IV.02 V.02 VI.02 VII.02 VIII.02 IX.02 X.02 XI.02 XII.02 I.03 II.03

60

50

40

30

20

10

0

Page 31: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

31

20

30

40

50

60

Individuální hodnoty PSB v hladinì 101 000 - 400 000/ml

(graf è. 3)

I.02 II.02 III.02 IV.02 V.02 VI.02 VII.02 VIII.02 IX.02 X.02 XI.02 XII.02 I.03 II.03

0

10

20

30

40

50

60

70

80

Individuální hodnoty PSB v hladinì vyšší než 400 000/ml

(graf è. 4)

I.02 II.02 III.02 IV.02 V.02 VI.02 VII.02 VIII.02 IX.02 X.02 XI.02 XII.02 I.03 II.03

60

50

40

30

20

80

70

60

50

40

30

20

10

0

Page 32: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty

Od A do Z pro jakost a rozbory jakosti mléka

Program hygieny mléèné žlázy a vysoké jakosti mléka

A - Pøípravky pro èištìní rukouB - Oddojovací hrnkyC - Schalmtest pro orientaèní stanovení poètu somatických bunìkD - Desinfekce strukù pøed a po dojeníE - Eurodesinfektor strukùF - Jednorázové papírové utìrky pro vlhkou toaletu mléèné žlázy s Desinficinem CLG - KartáèeH - Filtraèní materiályI - Teplomìry mléka,pásky pro oznaèení dojnicJ - Zábrany proti samocucání dojnicK - Ochranný tuk pro mléènou žlázu a ruce dojièùL - Znaèkovací barvyM - Labutest ke stanovení moèoviny v mléceN - Pøípravky pro èištìní a desinfekci mlékovodných potrubí

Ve spolupráci s firmou Schwarte a Bartec

O - Mìøící systémy mléka, prùtokomìry a elektronické mìøení obsahu mléèných nádržíP - Automatické vzorkovací systémy ULTRASAMPLERR - Identifikace dodavatelù a vzorkovnic, zpracování dat systémem MAK 3001, 3002S - Autocisterny, pøívìsy a návìsy vlastní výroby a firmy Schwarte

Zaøízení a pomùcky pro laboratoøe

T - Laboratorní pøístroje firmy FOSS pro rozbor jakosti mléka

U - Klasické stanovení jakosti mléka laboratorními produkty firmy Gerber Instruments, souprava pro stanovení alkalické fosfatázy

V - Rychlotesty ke stanovení jakosti mlékaX - Stanovení inhibièních látek Delvotestem firmy Gist

Brocades pro sériová i individuální zapojení Y - Kalibraèní a referenèní vzorky, zapojení do kruhových

testùZ - Poradenství, laboratorní postupy

Hostivaøská 538/56, 102 00 PRAHA 10 - HostivaøTel.: 274867459, Fax: 274868236, e-mail: [email protected]

Page 33: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty
Page 34: Sborník referátù odborného semináøe MASTITIDY …buiatrics.cz/wp-content/uploads/2017/11/Mastitidy-skotu...Èeská buiatrická spoleènost a Klinika chorob pøežvýkavcù Fakulty