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INSTITUTO NACIONAL DE HIGIENE y MEDICINA TROPICAL“LEOPOLDO IZQUIETA PEREZ” (INHMT)
PROCESO DE INVESTIGACION Y DIAGNOSTICO MICROBIOLOGICOLABORATORIO DE PARASITOLOGIA
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Toma de Muestra para
LeishmaniaDra. Q.F. Yim Yan Wong Ch.
Instituto Nacional de Higiene “LIP”
Sub-Proceso de ParasitologiaMarzo 2011
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Toma de Muestra para Leishmania.
Fecha de nacimiento: _____________________________Edad:__________________
Lugar de residencia:______________________________________________________
Sexo: F M
Establecimiento que solicita el examen:______________________________________
Recibe medicación? Si No Si la respuesta es sí, mencione cual_________________
Ud ha presentado:
Fiebre Pérdida de apetito Pérdida de peso
Malestar general Picaduras por mosquitos Lesiones en piel/mucosas
En el siguiente gráfico señale con una cruz dónde presenta las lesiones
:
Fichas Leishmania
: Desde cuando tiene las lesiones? _______________________________ *Estas lesiones le causan : Dolor Picazón *Estas lesiones presentan: Pus Mal olor Enrojecimiento
*Esta lesión es: Nodular Placa *Conoce a alguna otra persona que tenga Lesiones similares a la suya? __________ Dónde? ___________________________
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Método Directo
Frotis Biopsia Cultivo
Método Indirecto
Reacción de Montenegro PCR Inmunofluorescencia indirecta
Toma de Muestra para Leishmania.
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Toma de Muestra para Leishmania.
Metodo Directo.Frotis
Bisturi romo Guantes Mechero Algodón o gasa Solución salina Placa portaobjeto
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Toma de Muestra para Leishmania.
Lesion de ulcera
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Tinciòn
Fijar con alcohol la Placa portaobjeto Colorante Wright o Guiemsa Enjuague y dejar secar la placa
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Microscopio
Objetivo 100X 1 gota de aceite de inmersión
Observacion Microscopio
Amastigotes de Leishmania (tinción)
Presenta: Kinetoplasto y nucleo coloreado intensamente.
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Metodo DirectoBiopsia
Sacabocado Tijeras pinza o pinza Guantes Mechero Algodón o gasa Solución salina Placa portaobjeto
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Metodo Directo Medio de Cultivo
Agar Sangre de conejo al 20% Jeringuillas de insulina (aguja 20-21) Solución Salina Estéril Mechero Guantes
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Método IndirectoReacción de Montenegro
Jeringuilla de Insulina Leishmanina Alcohol y Algodón
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Método IndirectoPCR Equipos Cámara de flujo tipo 2 Vortex Microcentrífuga Congelador de -80ºC Congelador de -20ºC Baño maría o termobloque Balanza
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Areas en Biologia Molecular.
AREA BLANCA O DE MIX.- Espacio destinado a la preparación de reactivos y MIX para la PCR, donde no ingresa material genético ya sea ARN o ADN.
AREA GRIS O DE EXTRACCIÓN DE ACIDOS NUCLEICOS.- Ambiente destinado a la extracción de ARN ó ADN, también se realiza allí se mezclan los reactivos del MIX con los ácidos nucleídos extraidos.
AREA NEGRA.- Es el espacio donde se realizará la corrida electroforética del amplicón, también se observaran y documentaran los resultados obtenidos en los geles de agarosa.
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Reactivos
Kit DNA Blood MINIKIT QIAmp
Muestra
Impresión de la muestras en papel filtro.
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Materiales Papel absorbente Cajas para almacenar muestras de 96 células para tubos de
1,5ml Micropipetas graduable Puntas con filtro para Micropipetas de 0.5, 5, 20 y 200 ul. Gradillas Seguros para microtubo de 1,5ml Papel de parafina Marcadores permanente punta fina Guantes desechables Contenedores desechables Microtubos de 1.5 ml Tijeras
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