实验六 酶的特性 一、实验目的 : 加深对酶的性质的认识二、内容： 本实验由温度对酶活力的影响； pH 对酶活力的影响；酶的激活剂及抑制剂；酶的专一性 4 组实验组成。

（一）温度对酶活力的影响1 、原理 酶的催化作用受温度的影响。在最适温度下，酶的反应速度最高。大多数动物酶的最适温度为 37-40℃ ，植物酶的最适温度为 50-60℃ 。 酶对温度的稳定性与其存在形式有关。有些酶的干燥制剂，虽加热到 100℃ ，其活性并无明显改变，但在 100℃ 的溶液中却很快完全失去活性。 低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。

4 、操作 淀粉和可溶性淀粉遇碘呈蓝色。糊精按其分子的大小，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色或红色。最简单的糊精遇碘不呈颜色，麦芽糖遇碘也不呈色。在不同温度下，淀粉被唾液淀粉酶水解的程度可由水解混合物遇碘呈现的颜色来判断。

取 3 支试管，编号后按下表加入试剂

管号 1 2 3

淀粉溶液（ ml ） 1.5 1.5 1.5

稀释唾液（ ml ）

1 1 -

煮沸过的稀释唾液（ ml ）

- - 1

摇匀后，将 1 、 3 号两试管放入 37℃ 恒温水浴中， 2 号试管放入冰水中。 10 分钟后取出（将 2 号管内液体分为两半），用碘化钾 - 碘溶液来检查 1 、 2 、 3 号管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程充。记录并解释结果，将号剩下的一半溶液放入 37℃ 水浴中继续保温 10分钟后，再用碘液检测，结果如何？

（二） pH 对酶活性的影响1 、原理酶的活力受环境 pH 的影响极为显著。不同酶的最适 pH 值不同。本实验观察 pH 对唾液淀粉酶活性的影响，唾液淀粉酶的最适 pH 约为6.8 。

4 、操作 取 4 个标有号码的 50ml 锥形瓶。用吸管按下表添加 0.2mo1/L 磷酸氢二钠溶液和 0.1mo1/L 柠檬酸溶液以制备pH5.0-8.0 的 4 种缓冲液。

锥形瓶号码

0.2mo1/L 磷酸氢二钠（ ml ）

0.1mo1/L柠檬酸（ ml ）

pH

1 5.15 4.85 5.0

2 6.05 3.95 5.8

3 7.72 2.28 6.8

4 9.72 0.28 8.0

从 4 个锥形瓶中各取缓冲液 3ml ，分别注入 4 支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加 0.5% 淀粉溶液 2ml 和稀释20 倍的唾液 2ml 。向各试管中加入稀释唾液的时间间隔各为 1 分钟。将各试管中物质混匀，并依次置于 37℃ 恒温水浴中保温。

待向第 4 管加入唾液 2 分钟由第 3 管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加 1 小滴碘化钾 -碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混合液变为棕黄色时，向所有试管依次添加 1-2 滴碘化钾 -碘溶液。添加碘化钾 - 碘溶液的时间间隔，从第 1 管起，亦均为 1 分钟。 观察各试管内容物呈现的颜色 , 分析 pH 对唾液淀粉酶活性的影响 .

（三）唾液淀粉酶的活化和抑制1 、原理 酶的活性常受某些物质的影响，有些物质能使酶的活性增加，称为酶的激活剂；有些物质能使酶的活性降低，称为酶的抑制剂。如氯离子为唾液淀粉酶的活化剂，铜离子为其抑制剂。

管号 1 2 3 40.1% 淀粉溶液

（ ml ） 1.5 1.5 1.5 1.5

稀释唾液（ ml ） 0.5 0.5 0.5 0.51% 硫酸铜溶液

（ ml ） 0.5 - - -1% 氯化钠溶液

（ ml ） - 0.5 - -1% 硫酸钠溶液

（ ml ） - - 0.5 -

蒸馏水（ ml ） - - - 0.5

37℃ 恒温水浴、保温 10 分钟 *碘 化 钾 - 碘 溶 液（滴）

2-3 2-3 2-3 2-3现象

4 、操作

（四）酶的专一性1 、原理 酶具有高度的专一性。本实验以唾液淀粉酶和蔗糖酶对淀粉和蔗糖的作用为例，来说明酶的专一性。 淀粉和蔗糖无还原性。唾液淀粉酶水解淀粉生成有还原性的麦芽糖，但不能催化蔗糖的水解。蔗糖酶能催化蔗糖水解产生还原性葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉的水解。用 Benedict 试剂检查糖的还原性。

NRE RE

直链淀粉

RE

NRE

(16) 分支点

支链淀粉或糖原分子示意图

蔗糖 +H2O 葡萄糖 + 果糖蔗糖酶

α－淀粉酶

β－淀粉酶

（ 1 ）淀粉酶的专一性管号

1 2 3 4 5 6

1% 淀粉溶液（滴）

4 - 4 - 4 -2% 蔗糖溶液

（滴） - 4 - 4 - 4

稀释唾液（ ml ）

- - 1 1 - -

煮沸过的稀释唾液（ ml ）

- - - - 1 1

蒸馏水（ ml ） 1 1 - - - -

37℃ 恒温水浴 15 分钟Benedict 试剂

（ ml ）1 1 1 1 1 1

沸水浴 2-3 分钟

现象

4 、操作

（ 2 ）蔗糖酶的专一性管号

1 2 3 4 5 6

1% 淀粉溶液（滴）

4 - 4 - 4 -

2% 蔗糖溶液（滴）

- 4 - 4 - 4

蔗糖酶溶液（ ml ）

- - 1 1 - -

煮沸过的蔗糖酶溶液（ ml ）

- - - - 1 1

蒸馏水（ ml ） 1 1 - - - -

37℃ 恒温水浴 15 分钟Benedict 试剂

（ ml ）1 1 1 1 1 1

沸水浴 2-3 分钟

现象

Benedict 氏试剂：先将 17.4g 无水硫酸铜溶于热水中 , 冷却后稀释至 150ml 。取 173g 柠檬酸及 100.0g 无水碳酸钠溶解于 600ml 蒸馏水中，溶解后冷却并加水至 850ml 。再将冷却的 150ml 硫酸铜溶液倾入。过滤保存于棕色瓶内备用。可长久保存。

醛或酮糖与 Benedict 试剂（ CuSO4 、柠

檬酸和 Na2CO3 ）一起加热时，溶液的蓝色消

失，同时生成 Cu2O 的砖红色沉淀。 能与这些试剂发生反应的糖叫还原糖，还

原糖分子中必定有半缩醛羟基，它能变为链状结构，即有 -CHO 或 >C=O ，而不与这些试剂反应的糖为非还原糖，其分子中无半缩醛羟基。如苷中就没有半缩醛 -OH ，所以它在碱性不能被氧化。