管理肠道健康 · 实现无抗养殖
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管理肠道健康 · 实现无抗养殖. —— 霉菌毒素及仔猪腹泻的防控心得. 孙进华 博士、副研究员 东北农业大学动物科技学院. 引起仔猪腹泻的原因. 一、非传染性腹泻 ■ 营养性 ■ 生理性腹泻 ■ 应激性腹泻 仔断奶换料腹泻 大多数人认为断奶腹泻是由于换料应激造成的,其实不够准确。 酶系发育不健全,蛋白酶、脂肪酶配方设计要求仔猪易消化的营养物质。. 仔猪出生后消化酶的变化动态. 引起仔猪腹泻的原因. 二、传染性腹泻 (病原性) 病原菌引起: 1、 细菌性腹泻(主要是革兰氏阴性菌) - PowerPoint PPT PresentationTRANSCRIPT
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管理肠道健康 ·实现无抗养殖—— 霉菌毒素及仔猪腹泻的防控心得
孙进华 博士、副研究员
东北农业大学动物科技学院
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一、非传染性腹泻 ■ 营养性■ 生理性腹泻■ 应激性腹泻 仔断奶换料腹泻 大多数人认为断奶腹泻是由于换料应激造成的,其实不够准确。 酶系发育不健全,蛋白酶、脂肪酶配方设计要求仔猪易消化的营养物质。
引起仔猪腹泻的原因
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仔猪出生后消化酶的变化动态
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二、传染性腹泻 (病原性)
病原菌引起:1 、细菌性腹泻(主要是革兰氏阴性菌)2 、病毒性腹泻3 、寄生虫性腹泻4 、霉菌毒素性腹泻
引起仔猪腹泻的原因
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主要致病菌: 大肠杆菌(黄、白痢)、沙门氏菌(副伤寒)、产气荚膜梭菌(红痢)、痢疾密螺旋体 (猪痢疾)。
致病机理: 致病菌能够吸附于肠粘膜绒毛细胞的表面,破坏小肠绒毛上皮细胞细胞; 影响营养物质消化吸收; 产生的毒素造成小肠脱水。
细菌性腹泻
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添加抗生素■ 过量添加造成药物残留、危害人类健康;同时造成小肠绒毛及隐窝的破坏,抑制后期仔猪生长;
■ 常量添加效果不够明显,并且持续反复刺激容易造成耐药性的产生。
普通防控措施
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改善养殖环境■ 养殖环境不是饲料企业所能控制的;
肠道环境
■ 肠道环境 添加益生菌在饲料生产过程中损耗过大,效果不够明显。
普通防控措施
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■ 霉菌毒素破坏肠绒毛上皮细胞,造成营养物质消耗吸收受阻、直肠温度升高。
■ 引起脱水、呕吐、粘膜炎、消瘦、腹泻。
■ 主要引起腹泻的毒素:赭曲霉毒素( OTA ) 、烟曲霉毒素( FUM ) 、呕吐毒素( DON )等。
霉菌毒素引起的腹泻
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■ 霉菌毒素是谷物或饲料中霉菌生长产生的次级代谢物。主要危害:致癌性、致突变性、致畸胎性、致雌激素异常、致出血、免疫毒性、肾毒性、肝毒性、皮肤毒性及神经毒性等
■ 美国 2002年就已经将霉菌毒素列为饲料安全的第二大危险因素。
■ 大多数霉菌毒素在动物采食饲料后的 30分钟内,就会释放到消化道中,小肠是霉菌毒素吸收的主要场所。
霉菌毒素
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■ 黄曲霉毒素( Aflatoxins, AFB1)
■ 玉米赤霉烯酮( Zearalenone, ZEA )
■ 呕吐毒素( Vomitoxin DON)
■ T—2 毒素( T-2 Toxin)
■ 赭曲毒素( Ochartoxins OTA)
■ 烟曲霉毒素( Fumonisins, FUM)
影响畜牧业的霉菌毒素种类
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霉菌毒素 敏感动物 主要表现症状
黄曲霉毒素 所有动物 肝脏受损伤,生长延缓,免疫力下降
呕吐毒素 猪 呕吐,厌食,拒食,免疫抑制
玉米赤霉烯酮 猪、奶牛 (与 DON 几乎同时存在)异常发情、发情延迟、阴门肿大
T—2 毒素 猪 厌食、皮炎、干扰凝血
烟曲霉毒素 猪、禽 肺脏水肿,胚胎畸形,腹泻、生长受抑制
赭曲霉毒素 猪、禽 肾脏受损,腹泻,生殖器肿胀
主要霉菌毒素的危害
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1、原料外观很好,没有霉菌污染变化(原料的隐蔽性); 2、养殖场没有表现霉菌毒素的症状(危害的隐蔽性); 3、只认为发生黑变是发霉(不知道霉变也有白变,红变); 4、只知道原料储存时发霉,不知道原料在田间已经污染霉菌。
霉菌毒素认识误区
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霉菌毒素种类 允许量( µg/kg )黄曲霉毒素 B1 玉米、花生饼粕、菜籽饼粕、棉籽
饼粕≤ 50 ,豆粕≤ 30玉米赤霉烯酮 玉米、配合饲料≤ 500呕吐毒素 猪配合饲料≤ 1mg/kgT—2 毒素 玉米、花生饼粕、菜籽饼粕、棉籽
饼粕< 50 ,豆粕< 30
赭曲霉毒素 A 猪配合饲料≤ 1mg/kg
饲料中霉菌毒素允许量标准
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项目能量饲料(玉米) 全价饲料 蛋白质饲料
检出率 超标率 检出率 超标率 检出率 超标率
黄曲霉毒素 83.90% 0% 100% 0% 100% 8.00%
烟曲霉毒素 77.30% 45.50% 91.70% 66.70% 72.70% 4.09%
赭曲霉毒素 60% 0% 93.70% 18.70% 76.10% 41.30%
T—2 毒素 87.50% 0% 100% 0% 97.80% 28.30%
呕吐毒素 100% 69.20% 100% 0% 87.00% 47.80%
玉米赤霉烯酮 100% 30.80% 100% 21.40% 92.90% 35.70%
三类被检饲料霉菌毒素污染情况
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■ 玉米 100%被霉菌污染,只是程度不同而已
■ 受目前整体环境影响,已经不存在无污染的地区
■ 传统认为北方干燥没有霉菌的概念,是完全错误的,玉米采购标准由霉粒 2%以下,放宽至5%
霉菌污染现状
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1 、物理脱毒: 高温、水洗、剔除、辐射等(费时、费力、费钱,不便规模操作); 无机吸附剂:铝硅酸盐类矿物吸附剂,利用多层空间结构和表面形成的离子极性,吸附具有相同离子极性的霉菌毒素,对于没有相同极性和非极性的霉菌毒素吸附能力很差; 有机吸附剂(甘露聚糖、酵母细胞壁)吸附霉菌毒素。其对极性和非极性的霉菌毒素都有广泛的吸附作用。
常规清除方法
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2 、化学脱毒: 氯气、氨气、氢氧化钠、氢氧化钙、次氯酸钠等(可减少少量的霉菌毒素,但会造成二次污染)。
常规清除方法
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3 、生物脱毒: 微生物(乳酸杆菌等)、酶制剂(脂类氧化酶、葡萄糖氧化酶等)。
常规清除方法
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如何更好的解决霉菌毒素污染?
如何更科学的防治仔猪腹泻?
如何保持肠道健康
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了解一个新产品
——亿霉脱 霉菌毒素吸附与抗腹泻双重功效
亿霉脱
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■ 结构成分一 埃洛石为含水层状硅酸盐矿物,其显微结构为纤细型弯曲管状结构,这种管状结构对霉菌毒素具有优异的吸附固定作用,不受霉菌毒素自身极性影响,因而对于 ZEA等非极性的霉菌毒素具有良好的吸收效果。
亿霉脱特色结构成分
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■ 结构成分二 高络合有机酸载铜蒙脱石
强大的比表面积,对具有极性的霉菌毒素具有高效吸附及强有力的杀菌能力。
亿霉脱特色结构成分
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■ 结构成分三 酵母细胞壁提取物、甘露聚糖等多种有效成分。
提升免疫,修复动物受损脏器,恢复器官生理机能。
亿霉脱特色结构成分
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■ 蒙脱石是天然的层状硅酸盐纳米材料,每层厚度仅 1 nm,颗粒细小,比表面积巨大,每立方毫米( 半个米粒 ) 能容纳三千亿个颗粒,每克粉剂就能覆盖 110平米的篮球场大小的消化道表面,可加强黏膜屏障的作用;加上蒙脱石的不均匀电荷特性,基本层中带负电,层间带正电,使得蒙脱石具有强大的吸附能力。
亿霉脱载体选择
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■ 蒙脱石
亿霉脱载体选择
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生产工艺流程图
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■ 提纯
■ 酸溶
■ 酸洗
■ 络合、加载
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独特生产工艺
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独特生产工艺
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独特生产工艺
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独特生产工艺
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因蒙脱石硅氧四面体和八面体组成的层结构,层结构之间是易于被取代的阳离子层,将多核[Cu(AIO)n(H2O)4-n]Χ+络离子替代蒙脱石层间的Ca2+、 Na+等离子,同时 Cu2+离子还可进入蒙脱石Si-O四面体晶内孔和八面体中的空位,从而导致蒙脱石电价失衡,使矿物带有正电荷。而大多数细菌细胞壁表面带有负电荷,载铜蒙脱石与细菌之间的静电引力,能使细菌能够更有效地被大量吸附在矿物表面 。 蒙脱石、亿霉脱、大肠杆菌在 pH为 6 时的Zeta电位分别为 -21mV、 928mV、 -22mV 。
亿霉脱加载工艺特点
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■有效的杀菌功能
■有效的粘膜保护功能
■强大的吸附脱霉、解毒能力
同时解决霉菌毒素污染及仔猪细菌性腹泻,有效地保护仔猪小肠绒毛和隐窝。
亿霉脱的优势
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■ 实验 1 :大肠杆菌培养实验结果显示: 培养液中天冬氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶、丙氨酸氨基转移酶活性显著升高 。 在正常情况下 , 细菌胞内酶很少释放到菌体外 , 只有当细菌细胞膜结构发生变化 , 通透性明显增强时 , 胞内酶才能释放到菌体外。
加入亿霉脱(终浓度 2ug/ml)
亿霉脱的杀菌作用
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亿霉脱对天冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、乳酸脱氢酶的影响
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■杀菌原理:
亿霉脱主要成分之一高络合酸洗载铜蒙脱石带有较高的正电荷,大肠杆菌细菌表面带有负电荷,库仑力的作用下,大肠杆菌被吸引到 MMT-Cu表面, MMT表面富集的 Cu2-使细菌细胞膜通透性增加或受损严重,酶从菌体内大量释放出来,从而导致细菌死亡。
杀菌原理
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■ 实验 2 :Caco-2细胞是体外培养的肠上皮单层细胞病原菌选用 E.coli K88、 S.choleraesuis
亿霉脱的粘膜保护作用
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①病原菌吸附实验
Caco-2 细胞
分别培养1 、 3 、 6h
分别培养1 、 3 、 6h
亿霉脱
DMEM
加入病原菌
加入病原菌
用 Hankˊs液洗裂解细胞
计数
亿霉脱的粘膜保护作用
涂板
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亿霉脱对病原菌吸附 Caco-2 细胞的影响
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用 MMT-Cu 处理过的 Caco-2 细胞,使病原菌 E.coli K88和 S.choleraesuis 被的数量明显增加,与对照组相比,差异显著。
吸附的病原菌是否能够入侵细胞?
亿霉脱对病原菌吸附 Caco-2 细胞的影响
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②病原菌入侵实验
Caco-2 细胞
分别培养1 、 3 、 6h
分别培养1 、 3 、 6h
亿霉脱
DMEM
加入病原菌
加入病原菌
用 Hankˊs液洗庆大作用 裂解细胞 涂板
计数洗
亿霉脱的粘膜保护作用
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亿霉脱对病原菌吸附 Caco-2 细胞的影响
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对照组病原菌入侵到 Caco-2 细胞内的数量并随时间的延长入侵数量在增加。而用亿霉脱处理过的 Caco-2 细胞,均可明显减少 E.coli K88和 S.choleraesuis 侵入到 Caco-2 细胞内的数量,与对照组相比,差异极显著。并随着作用时间的延长,可持续抑制E.coli K88、 S.choleraesuis 的入侵。
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入侵致病菌对细胞的破坏情况?
亿霉脱对病原菌吸附 Caco-2 细胞的影响
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③病原菌对细胞的破坏试验 用培养基中 LDH 的活性来判断细胞膜的完整性
C
Caco-2 细胞
分别培养1 、 3 、 6h
分别培养1 、 3 、 6h
亿霉脱
DMEM 加入病原菌
分别在 1 、 3 、 6h取培养液
检测 LDH活性
亿霉脱的粘膜保护作用
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分别培养1 、 3 、 6h
DMEM
DMEM
加入病原菌
Ⅰ
Ⅱ
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检测 1 、 3 、 6h培养液中 LDH的含量 对照组为正常培养 Caco-2细胞,试验组Ⅰ为致病菌感染组,试验组Ⅱ为添加亿霉脱致病菌感染组。
检测 1、 3、 6h培养液中 LDH 的含量
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图 A 表示正常生理条件下的 Caco-2 细胞表面绒毛密集而整齐; 图 B 表示加入亿霉脱后,可见细胞表面有一层膜状物覆盖,好象与外界形成一层屏障,绒毛仍然排列整齐、致密。
电镜扫描细胞表面
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图 C , D 可见,当 E.coli K88和 S.choleraesuis 粘 附 于 Caco-2 细 胞 上时,可见绒毛萎缩而凌乱,绒毛变短,甚至细胞上绒毛已脱落,而且细胞破裂。表明 E.coli K88和 S.choleraesuis 粘附肠上皮细胞后,可破坏细胞的完整性,使细胞死亡。 由于致病菌粘附细胞后,可分泌一种不利于细胞存活的毒素从而破坏细胞膜的完整性,使细胞绒毛受损。
电镜扫描细胞表面
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从图 E, F 可见,亿酶脱与 Caco-2 细胞共同温育后, E.coliK88和 S.choleraesuis 再粘附细胞时,可见绒毛排列依旧很整齐、致密,肠上皮细胞完好。 这充分说明亿霉脱,能阻止病原菌对消化道粘膜的侵害,维护消化道正常的生理功能。
电镜扫描细胞表面
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是由于亿霉脱主要成分之一是高络合酸洗载铜蒙脱石( MMT-Cu ),它能连续覆盖在肠上皮细胞表面与糖蛋白结合,又由于它们表面 Zeta电位的不同,对病原菌具有较强的吸附作用,可将病原菌固定在其表面,从而阻止细菌进入到肠细胞内( 因为不能再与肠上皮细胞上的受体结合)。而且 MMT-Cu 中的 富集表面的高浓度 Cu2+可将病原菌杀死。
粘膜保护机理
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以上试验充分证明了亿霉脱具有吸附、杀灭病原菌的作用,同时对肠上皮细胞没有危害,因而可作为一种消化道粘膜保护剂。
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亿霉脱对六种细菌的最小抑菌( MIC)和杀菌浓度 (MBC)
大肠杆菌
沙门氏菌
产气荚膜梭菌
痢疾密螺旋体
枯草芽孢杆菌
嗜酸乳酸杆菌
MIC 75mg/L 75mg/L 100mg/
L
200mg/L 1000mg/L 1000mg/L
MBC 150mg/
L
150mg/
L
200mg/
L
400mg/L >1000mg/
L
>1000mg/
L
亿霉脱体外对四种病原菌及两种肠道有益菌杀菌作用
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0
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
0h 2h 4h 6h 12h 24h
CUF/
mL
亿霉脱对不同微生物作用时间结果
大肠杆菌沙门氏菌C型产气荚膜梭菌痢疾密螺旋体嗜酸乳酸杆菌枯草芽孢杆菌
2 倍MBC对六种微生物的影响
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亿霉脱对大肠杆菌、沙门氏菌、 C 型产气荚膜梭菌 、痢疾密螺旋体 (革兰氏阴性菌 )的杀菌效果明显优于嗜酸乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌 (革兰氏阳性菌 )。主要是由于革兰氏阴性菌与革兰氏阳性菌的细胞壁结构不同。
■ 接触
在 pH为 6 时革兰氏阴性菌的 Zeta电位大于革兰氏阴性菌,由于亿霉脱带有正电荷,因此,革兰氏阴性菌比革兰氏阳性菌更易被吸附。
不杀灭有益菌群的机理
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■ 细胞壁结构
1.革兰氏阳性菌细胞壁所含的肽聚糖是革兰氏阴性菌的 3~20倍,
2.细胞壁厚度是阴性菌的 4-8倍。
3.同时革兰氏阳性菌细胞壁表面还含有一层磷壁酸。
4.革兰氏阴性菌的细胞壁较革兰氏阳性菌的细胞壁薄 ,对杀菌剂具有不同的敏感性。因此 ,革兰氏阳性菌比阴性菌不容易被破坏杀灭。
不杀灭有益菌群的机理
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■ 高效吸附:
高效络合铜蒙脱石强大的比表面积,巨大的吸附能力。
■ 不可逆吸附毒素:
亿霉脱化学稳定性强,与霉菌毒素结合后形成聚合物后使之不易解吸,随肠道蠕动排出体外,不会产生次级代谢产物;
亿霉脱强大的吸附能力
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■ 广谱吸附毒素能力:
络合铜蒙脱石能特异性地吸收黄曲霉毒素、赭曲霉毒素等含有极性基团或共面苯环结构的霉菌毒素,而埃洛石能够很好的吸附玉米赤霉烯酮等非极性毒素。
■ 选择性吸附:
亿霉脱有稳定的阳离子交换值,因而对饲料中各种营养物质如矿物质、氨基酸、维生素(包括部分B族维生素)、色素无破坏性吸附性。
亿霉脱强大的吸附能力
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■ 生物类黄酮物质
可抑菌、消炎、解毒,尤其在毒素已被机体吸收的状况下可入血解毒,提高机体免疫力,快速恢复健康。
■ 酯化葡甘露聚糖
产品添加了酯化葡甘露聚糖,加强对镰刀霉菌毒素的吸附,实现高效快速吸附。酯化处理后,葡聚糖、甘露聚糖更稳定,吸附能力和效果大为增强。
亿霉脱生物解毒功能
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■ 酶制剂分解
本品添加了多种酶制剂及生物活性成分,能够在畜禽体内增加有益菌数,减少有害霉菌的生存空间,同时酶制剂能有效打开双呋喃环,破坏黄曲霉素,从而降解其毒性。
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亿霉脱的毒素降解功能
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耐高温、稳定性好
■ 亿霉脱在制粒、膨化具有较高的稳定性;在肠胃不同 pH值环境中 Cu2+具的解离率为 5-10%左右。因此亿霉脱能与霉菌毒素高效结合通过肠道安全排出体外。
亿霉脱在饲料生产上的优势
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■ 显著降低料肉比,提高动物生产性能 项目 对照组 亿霉脱
仔猪
日采食量 /g 562.67±2.08b 596.93±23.18a
日增重 /g 325.27±6.43 347.33±14.50
料重比 1.73±0.03 1.72±0.05
生长猪
日采食量 /g 1809.33±54.45 1818.35±35.92
日增重 /g 665.23±37.32 672.43±24.11
料重比 2.72±0.07 2.70±0.09
育肥猪
日采食量 /g 3089.33±270.78 2986.00±141.86
日增重 /g 823.92±232.49b 922.23±284.90a
料重比 3.74±0.06A 3.24±0.21B
全程
日采食量 /g 1781.33±92.65 1735.21±90.28
日增重 /g 623.33±31.97 650.31±14.04
料重比 2.86±0.03a 2.67±0.14b
注:同一行肩标相同小写字母或不标者差异不显著( P> 0.05 );肩标不同小写字母者差异显著( P< 0.05 );肩标不同大写字母差异极显著( P< 0.01 )
亿霉脱在生产性能上的优势
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■ 根据目标原料、饲料的受污染程度和畜禽出现的临床症状,合理确定添加比例:
■ 本产品具有良好的流畅性,采用一般预混法
■ 预防用量: 1~ 2 公斤 /吨,已污染的饲料根据霉变程度轻重添加 2~ 3 公斤 /吨。
正确的使用方法
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地址:北京市海淀区永泰园新地标 14-105 邮编: 100192电话: 010-82751546 81915662 传真: 010-82751549网址: www.yirukeji.com 邮箱:[email protected]
外商投资批准号:商外资京字 [2003]14006号出口饲料企业检验检疫注册登记证号: 1100FA014
ISO9001: 2008国际质量管理体系认证: UQ131607R1ISO14001: 2004国际环境管理体系认证: 04313E20709R1M
ISO22000: 2005HACCP国际食品安全管理体系认证: 115FSMS1300168
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工厂实景
■ 亿如科技(北京)有限公司专注于饲用添加剂的研发、生产的高新企业。
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工厂实景 工厂实景
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车间设备 ■ 在产品研发中公司将动物营养,预防兽医,食品科学,生物发酵,精细化工,地质矿物学等多学科的最新研究成果,开发新产品及新工艺,应用到动物生产中。
喷雾干燥车间 精细合成车间63
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实验室 ■ 在产品研发中公司将动物营养,预防兽医,食品科学,生物发酵,精细化工,地质矿物学等多学科的最新研究成果,开发新产品及新工艺,应用到动物生产中。
研发中心实验室 高效液相色谱检测室64
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