analiza hidroclorotiazidei din comprimate

8/17/2019 Analiza Hidroclorotiazidei Din Comprimate

http://slidepdf.com/reader/full/analiza-hidroclorotiazidei-din-comprimate 1/23

Analiza hidroclorotiazidei din

comprimate

Angelescu Oana gr.1

B l ic Ana Maria gr.2ӑ ӑș ӑ

Bechir Emel gr.2

1



Cuprins

I.Comprimate……………………………………………………………………………………3

II.Hidroclorotiazid ……………………………………………………………………………….ӑ

III!Comprimate cu hidroclorotiazid …………………………………………………………….11ӑ

I". Analiza cantitati#$ a hidroclorotiazidei i determinarea sa %ntr&un preparat 'armaceutic prinș

H()C.............................................................................................................................................1*

".+ezultate i discu ii…………………………………………………………………………....23ș ț

Bi,liogra'ie………………………………………………………………………………………2*

Ane- Iӑ

2



I.Comprimate

Defini ieț

Comprimatele sunt 'orme 'armaceutice care con in o singur doz a# nd n compozi e unaț ӑ ӑ ȃ ȋ țȋ

sau mai multe su,tan e acti#e! o, inute prin comprimarea uni'orm a unui #olum de particule.ț ț ӑ

Comprimatele sunt destinate administr rii orale. nele dintre ele sunt nghi ite ntregi!ӑ ȋ ț ȋ

altele dupa ce au 'ost mestecate! unele sunt dizol#ate i dispersate n ap ! nainte de a 'iș ȋ ӑ ȋ

administrate i altele sunt men inute n gura unde su,stan a acti# este eli,erat .ș ț ȋ ț ӑ ӑ

(articulele con in una sau mai multe su,stan e acti#e cu sau ' r e-cipien i precumț ț ӑ ӑ ț

diluan i! agregan i! agen i de dizol#are! lu,re'ian i! su,stan e capa,ile s modi'iceț ț ț ț ț ӑcomportamentul preparatului n tractul digesti#! coloran i autoriza i de autorit i competente! i ȋ ț ț ӑț ș

su,stan e aromatizante.ț

Comprimatele sunt de o,icei drepte! cilindrice! circulare! solide! ale c ror supra'e e suntӑ ț

plate sau con#e-e! cu marginile rotun/ite. Ele pot a#ea linii sau marca/e de rupere i pot prezentaș

sim,oluri sau alte marca/e. Comprimatele pot 'i acoperite.

Componentele comprimatelor tre,uie s coincid cu cerin ele pre# zute n 0Materialeӑ ӑ ț ӑ ȋ

'olosite pentru 'a,ricarea componentelor sectiunile 3.1. si 3.2..

4intre categoriile de comprimate pentru administrare oral men ion mӑ ț ӑ 5

&comprimate acoperite 6

&comprimate neacoperite 6

&comprimate e'er#escente 6

&comprimate solu,ile 6

&comprimate dispersa,ile 6

&comprimate orodispersa,ile 6

&comprimate gastrorezistente 6&comprimate cu cedare modi'icatӑ

3



Producerea

Comprimatele sunt de o,icei preparate prin comprimarea unui #olum uni'orm de particule!

prepararea ' c ndu&se prin metode de granulare.ӑ ȃ

n 'a,ricarea comprimatelor sunt luate m suri care s asigure rezisten a mecanic pentru aȊ ӑ ӑ ț ӑ

e#ita s' r marea sau ruperea n timpul manipul rii sau a proceselor.ӑ ȃ ȋ ӑ

Acestea pot 'i demonstrate prin e-aminarea 07ria,ilitatea comprimatelor neacoperite si

0+ezistent a la s' r mare. Comprimatele mastica,ile sunt preparate ast'el nc t s 'ie u or deț ӑ ȃ ȋ ȃ ӑ ș

mestecat.

(entru comprimatele care este necesar di#izarea! este ne#oie de autoritate competen a careӑ ț

s supun par ile su,di#izate componente! testului A pentru 0uni'ormitatea con inutului aӑ ӑ ț ț

preparatului unidoz sau 0uni'ormitatea masei a preparatului unidoz .ӑ ӑn 'a,ricarea! am,alarea! depozitarea i distri,u ia comprimatelor sunt luate m suri care sȊ ș ț ӑ ӑ

asigure calitatea micro,iologic recomand rile n acest aspect sunt pre# zute n 0calitateaӑ ӑ ȋ ӑ ȋ

micro,iologic a preparatelor 'armaceutice.ӑ

Teste

Uniformitatea con inutuluițEste necesar ca comprimatele cu masa de su,stan a acti# mai mic de 2 mg sau 28 dinț ӑ ӑ

masa total s ndeplineasc testul A pentru uni'ormitatea con inutului a preparatelor unidoz .ӑ ӑ ȋ ӑ ț ӑ

4ac preparatul are un con inut mai mare de su,stan acti# ! cerin ele se aplic doar ӑ ț țӑ ӑ ț ӑ

pentru su,stan ele care corespund condi iilor de mai sus.ț ț

Este necesar ca comprimatele acoperite cu altce#a dec t 'ilm de acoperire! s ndeplineascaȃ ӑ ȋ

testul A pentru uni'ormitatea con inutului pentru preparatele unidoz i respecti# pentruț ӑ ș

con inutul de su,stanta acti# .ț ӑ

Uniformitatea masei.

Este necesar ca comprimatele neacoperite i 'ilmate s 'ie compati,ile cu testul pentruș ӑ

uni'ormitatea masei al preparatelor unidoz .ӑ

4ac testul de uni'ormitate a con inutului este necesar pentru toate su,stan ele acti#e! testulӑ ț ț

de uni'ormitate a masei nu este cerut.

4



4izol#area 4izol#area este un test potri#it pentru a demonstra eli,erarea su,stan ei acti#e!ț

de e-emplu unul din teste descrie testul de dizol#are pentru 'ormele 'armaceutice solide di#izate.

Comprimatele neacoperite

Defini ieț

Comprimatele neacoperite includ comprimatele unistrati'icate dintr&o singur comprimare aӑ

particulelor i comprimatele multistrati'icate care constau n straturi concentrice sau paraleleș ȋ

o, inute prin comprimarea succesi# a particulelor de di'erite compozi ii.ț ӑ ț

E-cipien ii 'olosi i nu sunt special destina i s modi'ice eli,erarea su,stan ei acti#e nț ț ț ӑ ț ȋ

'luidele digesti#e.Comprimatele neacoperite coincid de'ini iei generale a comprimatelor.ț

O portiune rupta! cand este e-aminata la microscop! arata uni'ormitatea te-turii

comprimate unistrati'icate sau te-tura strati'icata comprimate multistrati'icate! dar nu si

semne de acoperire.

Teste

4ezintegrare .Comprimatele neacoperite tre,uie sa 'ie compati,ile cu testul de dezintegrareal comprimatelor si capsulelor. 7olosim apa + ca lichid.

Adaugam un disc in 'iecare tu,. )asam aparatul sa lucreze 19 minute! necesar e-aminarii

starii ta,letelor.4aca comprimatele nu sunt compati,ile datorita aderarii de disc! repetam testul

pe inca comprimate omitand discurile.Comprimatele sunt compati,ile cu testul daca toate s&

au dezintegrat.Comprimatele mastica,ile nu tre,uie sa 'ie compati,ile cu testul.

5



II.Hidroclorotiazida

C 7 H8ClN3 O3 S2 Mr = 297,7

DEFINITIE

Hidroclorotiazida contine nu mai putin de :; 8 si nu mai mult de echi#alentul a 1<2 8

&clor&3!*dihidro&2H&1!2!*&,enzotiadiazin&=&sul'onamida 1!1&dio-id! calcul raportat la su,stanta

anhidra.

CARACTERISTICI

(udra cristalina al,a sau aproape al,a! 'oarte putin solu,ila in apa! solu,ila in acetone!

putin solu,ila in alcool. >e dizol#a in solutii diluate de hidro-id alcalin.

IDENTIFICARE

(rima identi'icare5 B

A doua indenti'icare5 A! C! 4.

A. >e dizol#a 9< mg in 1< ml solutie de hidro-id de sodiu <!1 M si se dilueaza la 1<< ml

cu apa. >e dilueaza 2 ml din aceasta solutie la 1<< ml cu hidro-id de sodiu <!<1 M. 4aca se

e-amineaza intre 29< nm si 39< nm! solutia prezinta a,sor,tie ma-ima la 2=3 nm si la 323 nm.

+ata de a,sor,tie ma-ima masurata de la 2=3 nm pana la 323 nm este de 9 A pana la 9!= A.

B. (rin e-aminare spectro'otometrica a a,sor,tiei in in'rarosu comparata cu spectrulo,tinut pentru hidroclorotiazida C+>.

C. E-aminare prin cromatogra'ie in strat su,tire! 'olosind ca 'aza stationara silicagel cu

un indicator 'luorescent a#and intensitatea optima la 29* nm.

Testul solutiei. >e dizol#a 9< mg in acetona + si se dilueaza la 1< ml cu acelasi sol#ent.

6



Solutia de referinta (a). >e dizol#a 9< mg hidroclorotiazida C+> in acetone + si se dilueaza la

1< ml cu acelasi sol#ent.

Solutia de referinta (b). >e dizol#a 29 mg clorotiazida + in solutia de re'erinta a si se dilueaza

la 9 ml cu aceeasi solutie de re'erinta.

>e aplica separat pe placa cromatogra'ica 2 micro) din 'iecare solutie. 4e#eloparea se 'ace

'olosind ca sol#ent acetat de etil in strat de 1 cm. >e usuca placa cromatogra'ica in current de aer

si se e-amineaza in lumina ultra#iolet la 29* nm. >potul principal din cromatograma o,tinut cu

solutia testata este similar ca pozitie si marime cu spotul principal din cromatograma o,tinut cu

solutia de re'erinta. ?estul este in#alid daca cromatograma o,tinuta cu solutia de re'erinta , nu

arata doua spoturi clare! separate.

4. >e incalzeste usor 1 mg su,stanta cu 2 ml solutie proaspat preparata de acid

cromotropic <!9 g@) si sare de sodiu + intr&un amestec racit de 39 #olume de apa + si 9 #olumede acid sul'uric +. >e de#elopeaza o culoare #iolet.

TEST

Aciditate sau alcalinitate5 >e agita <!9 g su,stanta de e-aminat pudra cu 29 ml apa +

pentru 2 minute si se 'iltreaza. )a 1< ml din 'iltrate se adauga <!2 ml hidro-id de sodiu <!<1 M si

<!19 ml solutie de rosu de metil +. >olutia se coloreaza in gal,en. u mai mult de <!* ml de acid

clorhidric <!<1 M este necesar pentru a schim,a culoarea indicatorului in rosu.

Sustante asemanatoare5 E-aminare prin cromatogra'ie lichida.Solutie solvent 5 >e dilueaza 9< ml dintr&un amestec de acetonitril + si metanol + in #olume egale

la 2<< ml cu solutie de tampon 'os'at pH 3!2 +1.

Test solutie5 >e dizol#a 3< mg su,stanta de analizat in 9 ml amestec acetonitril + si metanol + in

#olume egale! 'olosind sonicare daca este necesar! si se dilueaza la 2< ml cu solutie de tampon

'os'at pH 3!2 +1.

Solutia de referinta a5 >e dizol#a 19 mg hidroclorotiazida C+> in 29 ml de amestec in #olume

egale de acetonitril + si metanol +! 'olosing sonicare daca este necesar! si se dilueaza la 1<< ml

cu solutie de tampon 'os'at pH 3!2 +1. >e dilueaza 9 ml la 1<< ml cu solutia sol#ent.

Solutia de referinta (b5 >e dilueaza 1 ml din solutia de testat la 9< ml cu solutia sol#ent. >e

dilueaza 9 ml din aceasta solutie la 2< ml cu solutia sol#ent.

(rocedura cromatogra'ica se poate des'asura 'olosind5

7



&o coloana din otel ino-ida,il de <!1 m lungime si *! mm in diametru care contine octadecilsilil

silica gel pentru cromatogra'ie + 3 m!

&'aza mo,ila cu o rata de curgere de <!; ml@min5

Faza mobila A5 )a :*< ml solutie de tampon 'os'at pH 3!2 +1 se adauga < ml metanol + si 1<

ml tetrahidro'uran + si se amesteca.

Faza mobile B5 )a un amestec de 9<< ml metanol + si 9<< ml solutie de tampon 'os'at pH 3!2

+1 se adauga 9< ml tetrahidro'uran + si se amesteca.

Timp!min"

Faza moila A

!#$# % "

Faza moila &

!#$# % "

Comentarii

' ( )* 1<< 99 < *9 gradient linear )* ( +' 99 *9 izocratic+' , +- 99 1<< *9 < gradient linear

+- , -' 1<< < izocratic-' ' 1<< < Intoarcere la

compozitia eluentului

initial

& ca si detector un spectro'otometru setat la 22* nm.

>e echili,reaza coloana pentru cel putin 2< de minute cu 'aza mo,ila A. >e a/usteaza

sensi,ilitatea sistemului ast'el incat inaltimea punctului principal de pe cromatograma o,tinut cu

1< ) din solutia de re'erinta , sa 'ie macar 9< 8din intreaga scara inregistrata.

>e in/ecteaza 1< ) din solutia de re'erinta a. Cand cromatogramul inregistreaza conditiile

prescrise! timpul de retentie este5 pentru clorotiazida apro-imati# = minute iar pentru

hidroclorotiazida apro-imati# ; minute. ?estul nu este #alid daca rezolutia dintre inaltimile care

corespund clorotiazidei si hidrocorotiazidei nu este macar 2!9. 4aca este necesar se a/usteaza

incet compozitia 'azei mo,ile sau timpul pentru gradientul linear.

>e in/ecteaza separat 1< ) solutie de sol#ent martor! 1< ) din solutia testata si 1< ) din

solutia de re'erinta ,. In cromatograma o,tinuta cu solutia de testat5 supra'ata 'iecarui #ar'!e-ceptand #ar'ul principal! nu este mai mare decat supra'ata #ar'ului principal din cromatograma

o,tinuta cu solutia de re'erinta , <!9 86 suma supra'etelor tuturor #ar'urilor! e-ceptand

#ar'urile principale ! nu este mai mare decat de doua ori supra'ata #ar'ului principal din

cromatograma o,tinuta cu su,stanta de re'erinta , 1 8. >e e-clude 'iecare #ar' datorat

8



solutiei sol#ent si orice #ar' cu o supra'ata mai mica de <!1 ori decat supra'ata #ar'ului principal

din cromatograma o,tinuta cu solutia de re'erinta ,.

Clor5 >e dizol#a 1 g in 29 ml acetona + si se dilueaza la 3< ml cu apa +. 19 ml corespunde cu

limita testului pentru clor 1<< ppm. >e prepara solutia standard 'olosind 9 ml acetona + care

contine 198 "@" apa + si 1< ml solutie standard de clor 9 ppm Cl +.

Pierderi la uscare. u mai mult de <!9 8! determinat pe 1<<<g prin uscare la etu#a la 1<<&1<9<C.

Sulfura de carune. u mai mult de <!1 8! determinat pe 1g.

D/0ARE

>e dizol#a <!12< g in 9< ml dimetil sul'o-id +. >e titreaza cu hidro-id de tetra,utilamoniu <!1M

in 2&propanol! determinand 'inalul reactiei potentiometric la al doilea punct de echi#alenta. >e'ace o titrare martor. 1 ml hidro-id de tetra,utilamoniu <!1 M in 2&propanol este echi#alent cu

1*!;; C=H;CI3O*>2

I1PURITATI

A. clorotiazida!

B. *&amino&&cloro,enzen&1!3&disul'onamida salamida!

9



Comprimatele de hidroclorotiazid$ conin Hidroclorotiazid$.

?a,letele sunt %n con'ormitate cu cerin ele pre#$zute la ?a,lete i cu urm$toarele cerin e.ț ș ț

Con3inutul 7idroclorotiazidei 8C*H9CIN+/:S;

:2!9 la 1<=!9 8 din cantitatea indicat$.

IDENTIFICARE

Aplicarea metodei de cromatogra'ie %n strat su, ire ! Ane-a III A ! 'olosind silicagelț

F729* ca su,stan $ de acoperire i acetat de etil ca 'az$ mo,il$ . >e aplic$ separat pe plac$ 9 l aț ș

'iec$rei dintre urm$toarele solu ii. (entru solu ia 1 se tritureaz$ o cantitate de comprimate su,ț ț

'orm$ de pul,ere con inGnd 1< mg de hidroclorotiazid$ cu 1< ml de aceton$ i se 'iltreaz$.ț ș

>olu ia 2 con ine <.1 8 g @ # hidroclorotiazid$ E(C+> %n aceton$ . 4up$ %ndep$rtarea pl$cii !seț ț

usuc$ %ntr& un curent de aer ! se e-amineaz$ la lumin$ ultra#iolet$ i apoi se trateaz$ placaș

con'orm metodei i se e-amineaz$ din nou. (rin 'iecare metod$ de #izualizare spotul principalș

din cromatograma o, inut$ cu solu ia 1 corespunde la culoare i intensitate cu cea dinț ț ș

cromatograma o, inut$ cu solu ia 2 .ț ț

TESTE

Sustan e 5nruditeț

>e e'ectueaz$ metoda cromatogra'iei lichide ! Ane-a III 4 ! 'olosind urm$toarele

solu ii . (entru solu ia 1 se agit$ o cantitate de comprimate su, 'orm$ de pul,ere con inGnd 9<ț ț ț

mg hidroclorotiazid$ cu 29 ml dintr&un amestec de #olume egale de acetonitril i metanol i seș ș

dilueaz$ pGn$ la 1<< ml cu solu ie tampon 'os'at pH 3.2 +1. >e 'iltreaz$ printr&un 'iltru cu 'i,r$ț

de sticl$ hatman <!*9 F4 @ este potri#it . (entru solu ia 2 se dilueaz$ 1 #olum dinț

solu ia 1 la 1<< #olume cu un amestec con inGnd 1 #olum de metanol ! 1 #olum de acetonitril iț ț ș

2 #olume de solu ie tampon 'os'at pH 3.2 +1. (entru solu ia 3 se dizol#$ ! cu a/utorulț ț

ultrasunetelor ! 19 mg 'iecare de hidroclorotiazid$ E(C+> i clorotiazid$ E(C+> %n 29 mlșamestec de #olume egale de acetonitril i metanol i se dilueaz$ pGn$ la 1<< ml cu solu ieș ș ț

tampon 'os'at pH 3.2 +1. >e dilueaz$ 9 #olume din aceast$ solu ie cu 1<< #olume din acela iț ș

amestec de sol#en i.ț

(rocedura cromatogra'ic$ poate 'i realizat$ utilizGnd a o coloan$ de o el ino-ida,ilț

1< cm - *. mm umplut$ cu octadecilsilil silicagel pentru cromatogra'ie 3m (henosphere

11



O4> 3 sau Microsor, O4> 3 este adec#at ! , ca 'az$ mo,il$ cu un de,it de <!; ml pe

minut propor iile de schim,are ale 'azei mo,ile i a 'azei mo,ile B este descris mai /os i cț ș ș

o lungime de und$ de detec ie de 22* nm.ț

Faza mobilă A. n amestec de 1< #olume de tetrahidro'uran ! < #olume de metanol i :*<ș

#olume de solu ie tampon 'os'at pH 3.2 +1.ț

Faza mobilă B n amestec de 9< #olume de tetrahidro'uran ! 9<< #olume de metanol i 9<<ș

#olume de solu ie tampon 'os'at pH 3.2 +1.ț

>e echili,reaz$ coloana timp de cel pu in 2< de minute cu 'az$ mo,il$ A. >e in/ecteaz$ 2< l .)aț

un gradient de elu ie linear ! 'olosind urm$torul program de gradient .ț

Timp !min" Faza moil2 A

!la sut2 #$#"

Faza moil2 &

!la sut2 #$#"

Comentarii

'()* )''

--

'

:- <radient liniar

)*(+' -- :- Izocratic

+'(+- -- )'

'

:- ' <radient liniar

+-(-' )'' ' Izocratic

-'' )'' ' Re=enire la

compozi ia ini3ialaț

de eluent

?estul nu este #ala,il decGt %n cromatograma o, inut$ cu solu ia 3 ! 'actorul de rezolu ie %ntreț ț ț

#Gr'urile corespunz$toare clorotiazid$ i hidroclorotiazid$ este cel pu in 2.9. 4ac$ este necesar !ș ț

regla i compozi ia 'azei mo,ile sau a programului de timp al gradientului liniar.ț ț

Jn cromatograma o, inut$ cu solu ia 1 aria oric$rei #Gr' secundar nu este mai mareț ț

decGt aria #Gr'ului principal din cromatograma o, inut$ cu solu ia 2 1 8 ! iar sumaț ț

supra'e elor din oricare din #Gr'urile secundare nu este mai mare de 2!9 ori aria #Gr'ului principalțdin cromatograma o, inut$ cu solu ie 2 2!9 8 . u se ia %n considerare #Gr'urile cu oț ț

supra'a $ mai mic$ de <!1 ori 'a$ de aria #Gr'ului principal din cromatograma o, inut$ cu solu iaț ț ț

2 <!1 8 .

D/0ARE

12



C nt$rii si triturai 2< de comprimate. )a o cantitate de pul,ere care con ine 3< mg deȃ ț

hidroclorotiazid$ se adaug$ 9< ml de hidro-id de sodiu <!1 M ! se agit$ timp de 2< minute i seș

dilueaz$ la 1<< ml cu <!1 M de hidro-id de sodiu .>e amestec$ ! se 'iltreaz$ ! se dilueaz$ 9 ml de

'iltrat la 1<< ml cu ap$ i se m$soar$ a,sor,an a solu iei rezultate la ma-imum! la 2=3 nm !ș ț ț

Ane-a II B. >e calculeaz$ con inutul de hidroclorotiazid$ luGnd 92< ca #aloarea lui A 1 8 ! 1ț

cm la ma-imum! la 2=3 nm.

I#. Analiza cantitati=2 a 7idroclorotiazidei i determinarea sa 5ntr(ș

un preparat farmaceutic prin HP>C

Articol ori?inal aplicat pe +' Iunie ;'):.

Analiza cromatogra'ic a hidroclorotiazidei HC? a 'ost realizat printr&o procedur ӑ ӑ ӑ

simpl de nalta per'orman ! cromatogra'ia lichida H()C! care a 'ost dez#oltat pentruӑ ȋ țӑ ӑ

13



determinarea HC? din comprimatele 'armaceutice 'olosind di'erite 'aze mo,ile n anumite ȋ

proportii. >tudiile cromatogra'ice ale #aria iei semnalului de detectare H()C dependent de 'azaț

mo,il ! rata de curgere! lungimea de und i temperatura coloanei au 'ost analizate pentru a g siӑ ӑ ș ӑ

condi iile optime e-perimentale pentru determinarea H?C. ?ehnica dez#oltat H()C a 'ostț ӑ

aplicat cu success n cadrul analizei cantitati#e a HC? din comprimatele comerciale cu o medieӑ ȋ

de re'acere de :*!:K@&1!<<*8

). INTR/DUCERE

Hidroclorotiazida! prin a,re#iere HC?! HC?L sau HL?! apar ine clasei tiazidelor ț

droguri care actioneaza prin inhi,area a,ilit ii rinichilor de a re ine apa. Acest 'apt conduce laӑț ț

sc derea #olumului sang#in rezult nd sc derea aportul de s nge c tre inima i sc derea de,ituluiӑ ȃ ӑ ȃ ӑ ș ӑ

cardiac i! prin alte mecanisme! se crede c scade tensiunea #asculara peri'eric . HC? esteș ӑ ӑ

'olosit n principal pentru tratamentul hipertensiunii arteriale! insu'icien a cardiac ! edemӑ ȋ ț ӑsimptomatic! dia,et insipid! acidoz tu,ular renal i pentru a pre#eni 'ormarea de calculiӑ ӑ ӑ ș

renali.

4in punct de #edere chimic! hidroclorotiazida este &cloro&3!*&dihidro&2H&1!2!*&

,enzotiadiazina&=&sul'onamida&1!1&dio-id. 7ormula chimica a HC? esteC=H;CI3O*>2 iș

structura sa se poate #edea n >chema 1. ȋ

Multe articole pu,licate au 'ost dedicate determin rii HC? n di'erite 'luide ,iologice iӑ ȋ ș

'ormul ri 'armaceutice! 'olosind numeroase tehnici de analiz instrumental incluz ndӑ ӑ ӑ ȃ

specto'otometria ! cromatogra'ia! cromatogra'ia lichida cu detectare "! H()C i metodeș

electrochimice. Cu toate acestea! niciun articol special nu a 'ost dedicat analizei HC? prin H()C

'olosind o 'az mo,il care con ine metanol 5 apa 9< 5 9< #@# 8! alt 'az mo,il i studiulӑ ӑ ț ӑ ӑ ӑ ș

condi iilor asa cum sunt comunicate n literatur . n plus!aceast munc a 'ost depus pentru aț ȋ ӑ Ȋ ӑ ӑ ӑ

analiza su,stan a HC? ast'el nc t s se poate dez#olta o metoda H()C precis ! reproducti,il !ț ȋ ȃ ӑ ӑ ӑ

e'icace i sensi,il pentru determinarea HC? din comprimatele 'armaceutice.ș ӑ

;. PARTEA E@PERI1ENTA>A

;.) Aparatul

4eterminarile cromatogra'ice au 'ost 'acute 'olosind sitemul H()C cu detector "&"is

si prele#are automata ltiMate 3<<< ?hermo >cienti'ic 4ione-! >tatele nite cu sistem

manual de in/ectare de 2< ) si coloana C1; 9 m! conectat la un computer 4ell Optiple- 3<1<

14



China. Cromatogramele au 'ost printate cu un H( laser /et (ro 2<< color M291n! HeNlet&

(acard de#elopment companP! l.p. China. (entru in/ectarea #olumelor de ordinul micro&litrilor

de solutie standard si a prele#arilor de su,stanta HC? comerciala studiata s&a 'olosit micropipeta

a/usta,ila O-'ord Irlanda.

15



;.; 1ateriale si reacti=i

In general! toti sol#entii pentru H()C erau de grad de puritate H()C si su,stantele

chimice erau 'olosite 'ara alte puri'icari suplimentare. Hidroclorotiazida a 'ost preparata ca

solutie stoc potri#ita pentru studiile H()C. Metanol H()C 'iltrat la gradul <!27isher

>cienti'ic! produs ?rinidad! eN QerseP a 'ost 'olosit ca 'aza mo,ile. Ca sol#ent pentru solutia

standard de hidroclorotiazida! comprimate de hidroclorotiazida !s&a 'olosit apa! iar apa din 'aza

mo,ila a 'ost mereu distilata pentru a indeplini conditiile studiului cromatogra'ic.

;.+ Conditii HP>C

7aza mo,ila a reprezentat initial un amestec de metanol! apa si acetonitril. +ezultatele au aratat

ca H2O 5 MeOH 9< 5 9< #@# 8 a 'ost cea mai potri#ita 'aza mo,ila pentru determinarea

cromatogra'ica a HC?. Conditiile de lucru au 'ost dupa cum urmeaza5 rata de curgere

1m)@minut! temperatura coloanei 3< <C! lungimea de unda a detectorului 29* nm!

#olumul de in/ectie 2< )! coloana H()C C&1; 9 m. "olume egale 1< ) din solutia

preparata si prele#ari au 'ost in/ectate in coloana. ?impul initial de curgere al H()C a 'ost de 9

min. Ca rezultat! 2!;3 minute a 'ost ales ca timp optim pentru operarea tuturor determinarilor

cromatogra'ice pentru su,stanta hidroclorotiazida.

;.: Prepararea solutiei stoc

Hidroclorotiazida Rassim (harmaceutical (lant BuraPdah! >pamico AddNaeih!

BuraPdah! Ara,ia >audita solutie stoc de concentratie 1 - <!<<1 mol@) a 'ost preparata prindizol#area #olumului potri#it de HC? in apa distilata intr&un 'lacon de 9< m). Aceasta solutie a

'ost tinuta la intuneric. Concentratiile mici de solutii standard de su,stanta HC? au 'ost preparate

prin diluarea solutiei stoc 'olosind apa distilata printr&un proces de analiza.

;.- Prepararea comprimatului simplu

16



Continutul din comprimatele de HC? disponi,ile comercial Monizide 29 care contine 29

mg HC?! Qordanian (harmaceutical Manu'acturing Co.! Qordan au 'ost procurate din 'armaciile

locale din Ara,ia >audita. 1< ta,lete cu un continut de 29< mg HC? 'iecare au 'ost alese si

dizol#ate in apa distilata! apoti trans'erate intr&un 'lacon de 9< de m). >olutia a 'ost tinuta pana

cand s&a prods dizol#area complete a HC? apoi a 'ost 'iltrata pentru a indeplini cerintele

studiului H()C. ?oate prepararile si masuratorile cromatogra'ice s&au 'acut la temperatura

camerei 29< C.

17



Fi?.)." r'ul H()C pentru - 1<ȃ &* M HC? la 2.;3 min timpul de retenti#e i MeOH 5 Hș 2O 9<59<

#@#8 'aza mo,il 6ma-imumӑ Abs=119;mA

Fi?.;.Cur,a de cali,rare a HC?n 9<59< #@# 8 'aza mo,il ȋ ӑ

pentru 2.;3 min timpul de

retenti#e i 29* nm lungime deș

und n inter#alul 2- 1<ӑ ȋ &* la

1-1<&3mol@)

Concentra ia H?C mol@)ț

+.RE0U>TATE

+.).Parametrii cromato?rafici

+.).).Efectul raportului de faz2 moil2 . n studiu al raportului de 'az$ mo,il$ este

un parametru 'oarte important pentru determinarea cromatogra'ica HC? %n droguri . Aici!

- 1<& * M de HC? a 'ost analizat prin H()C %n propor ii di'erite de ap$ ! metanol i acetonitril %nț ș

'aza mo,il$ pentru 29* nm detector de lungime de und$ a a cum se arat$ %n ?a,elul 1 .ș

+.).;.Efectul de deit . 4e,itul este considerat ! de asemenea! un parametru 'oarte

important pentru studiul cromatogra'ic a medicamentelor analizate . Cote p$r i de - 1<ț & * M

HC? au 'ost monitorizate prin tehnica H()C %n inter#alul de de,ite de la <.9 la 3.9 ml @ min

#ezi ?a,elul 2.

+.).+.Efectul de detectare a lun?imii de und2 . O lungime de und$ este ad$ugat ca un

parametru important pentru o, inerea unui semnal cromatogra'ic al medicamentului studiat . (rinț

utilizarea metodei H()C !alicote de - 1<& *

M HC? au 'ost analizate %n inter#alul2<< la 29* nm #ezi ?a,elul 3 . Instrumentul H()C anga/at nu a putut %nregistra semnale %n

a'ara acestui inter#al.

+.).:.Efectul temperaturii de coloan2 . ?emperatura de coloan$ cromatogra'ic$ este

de asemenea considerat un important operator pentru determinarea H()C sensi,il al HC?

18



.>emnalul cromatogra'ic din - 1<& * M HC? a 'ost e#aluat$ peste inter#alul 29 la *< S C! a aș

cum se arat$ %n ?a,elul *

+.;./ptimizarea condi iilor HP>Cț

Con'orm studiului preliminar al condi iilor e-perimentale !o 'az$ mo,il$ con inGndț ț

metanol 5 ap$ 9< 5 9<# @ # 8 la 29* nm lungime de und$ de " detector i 1 ml @ min de,it deș

2!;3 min timp de reten ie! au 'ost adoptate ca condi ii optime pentru continuarea studiilor ț ț

cromatogra'ice. Aceast$ in#estigaie de analiz$ a medicamentelor HC? a indicat c$ a 'ost separat

%n mod e'icient prin H()C la ace ti parametri i a dat un #Gr' cromatogra'ic ,ine & de'init pentruș ș

-1<& * M HC?

prezentat %n 7ig . 1 .

Ast'el ! e-perimentele au 'ost realizate prin modi'icarea raportului de 'az$ mo,il$ !de,ite ! detectare de lungime de und$ ! i coloana de temperatur$.u a 'ost produs nici un e'ectș

e#ident asupra semnalului H()C i timpului de reten ie prin schim,area lungimii de und$ !%nș ț

timp ce modi'ic$rile raportului 'azei mo,ile ! de,itului i coloanei de temperatur$ a a'ectatș

semnalele cromatogra'ice .Ca rezultat!H2O 5 MeOH 9< 5 9< #@# 8 'aza mo,il$ a dat ce mai

%nalt$ a,sor,an$ la 29* nm!Ti a 'ost selectat ca #aloarea optim$ pentru studii cromatogra'ice

suplimentare .

.

Tael -. +ezultatele H()C studiului de precizie pentru compusul HC? reproducti,ilitate

19



-. Aplicatia analitica HP>C

Metoda H()C propusa a 'ost aplicata pentru determinarea HC? in comprimatele

'armaceutice. Continutul de HC?! disponi,il in comprimate! a 'ost analizat direct prin H()C

dupa pasii de dizol#are si 'iltrare. Cinci mostre de comprimate cu concentratia de HC? de 9 U1<&*

mol@) au 'ost preparate! diluate in apa sol#ent si 'iltrate pentru a 'ii analizate H()C.

+ezultatele sunt mentionate in ta,elul .

Taelul . 4eterminarea H()C a HC? in comprimatele comerciale6

Continutul

afisat al

comprimatelor

de ;-m? HCT

< sit !m?"ӑ Recuperat

%

1edia BS.D Timpul de

reten ieț

Deit

23.9

2*

23.9

23.=

2*

:*

:

:*

:*.;

:

:*!:8W1!<<* 2!;3=min 1ml@min

. Concluzii

"alidarea metodei H()C poate 'i 'olosita pentru determinarea HC? din comprimatele comerciale

'olosind noi operatori precum 'aza mo,ila6 de,itul si conditiile optime. 7olosind metoda

cromatogra'ica a 'ost dez#oltata analitic in conditii de liniaritate! limita de detectie! precizie si

sta,ilitate. H()C poate 'i de asemenea 'olosita cu succes in controlul analitic de calitate pentru

21



dizol#area comprimatelor ce contin HC? si in aplicatii pentru analiza medicamentului in

'ormularea 'armaceutica

#. Rezultate i discu iiș ț

?ema a#ut a 'ost hidroclorotiazida ca su,stan acti# ! g sit n 'orma 'armaceutic deӑ țӑ ӑ ӑ ӑ ȋ ӑ

comprimate n concentra ie de 29 mg! s&au descris monogra'iile din 7armacopeea European ȋ ț ӑ

respecti# monogra'ia de 'orm 'armaceutic comprimate! comprimate neacoperite! monogra'iaӑ ӑ

de su,stan acti# hidroclorotiazida i monogra'ia produsului comprimate dețӑ ӑ ș

hidroclorotiazid .ӑ

>&a urm rit coresponden a dintre un articol n care a 'ost descrisa o metoda de dozare aӑ ț ȋ

hidroclorotiazidei respecti# prin metoda H()C High (er'ormance )iXuid ChromatographP

!Cromatogra'ie lichid$ de %nalt$ per'orman $ i metoda de dozare din 7armacopeea European .ț ș ӑ

A#anta/ele 'olosirii metodei H()C au 'ost precizia i sta,ilitarea! dez#oltate analitic nș ȋ

condi ii de liniaritate! precum i e-isten a posi,ilit ii controlului analitic de calitate dar iț ș ț ӑț șanaliza medicamentului n 'ormularea 'armaceutic . ȋ ӑ

n concluzie #alidarea metodei H()C poate 'i 'olosit pentru determinareaȊ ӑ

hidroclorotiazidei din comprimatele comerciale! acest lucru 'iind in con'ormitate cu cele descrise

n cadrul 7armacopeei Europene. ȋ

22



&ilio?rafie

1. Consiliul European!?a,lets!7armacopeea European 9.<5 "ol&1. Editia 9!Consiliulӑ

european! 2<<*. (ag. 2

2. Consiliul European!Coated ?a,lets!7armacopeea European 9.<5 "ol&1. Editia 9!Consiliulӑ

european! 2<<*. (ag. 2=

3. Consiliul European!HPdrochlorothiazide!7armacopeea European 9.<5 "ol&2. Editiaӑ

9!Consiliul european! 2<<*. (ag. 1=9

*. Ali 7.Alghamdi! Ruantitati#e analPsis o' hPdrochlorothiazide and its determination in a pharmaceutical preparation ,P H()C !NNN.,i,liotecaum'.ro&articol din (harmaceuticalChemistrP Qournal!#ol.*;!nr.12!Martie !2<19!pag ;*9&;*;

23

analiza hidroclorotiazidei din comprimate

Documents