proiect controlul medicamentului.analiza amlodipinei din comprimate

8/20/2019 Proiect Controlul Medicamentului.analiza Amlodipinei Din Comprimate

1/24

Analiza Amlodipinei din comprimate

AUTORI:

ADAM MADALINA GEORGIANA - grupa 1

TOMA DANIEL ALE!ANDRU- grupa " NU#UD $ANNA - grupa "%


2/24

CUPRINS

I% MONOGRA&IE &ARMA'O(EEA EURO(EAN) - 'OM(RIMATE%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%1

II% MONOGRA&IE &ARMA'O(EEA EURO(EAN) *AMLODI(INA%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%

III%MONOGRA&IE &ARMA'O(EEA +RITANI') - 'OM(RIMATE 'U

AMLODI(INA%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%

I,%DOAREA AMLODI(INEI DIN 'OM(RIMATE (RIN METODA .INETI'-/(E'TRO&OTEMETRI'A0000000000%0000%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%

,% REULTATE I DI/'UȚII%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%%

,I%ANE!E000000000000000000000000000000%

,II% +I+LIOGRA&IE0000000000000000000000%%0000


3/24

1

I. MONOGRAFIE FARMACOPEEA EUROPEANĂ - COMPRIMATE

'omprimatele 2unt preparate 2olide care con3in doze unitare din una 2au mai multe

2u42tan3e acti5e 6i 7n general 2unt o43inute prin comprimarea unui 5olum con2tant de

particule% 'omprimatele 2unt de2tinate admini2tr8rii pe cale oral8% Unele 2e 7ng9it ca

atare altele dup8 ce au ;o2t me2tecate unele 2e dizol58 2au 2e di2per2eaz8 7n ap8 7nainte

de admini2trare 6i altele 2unt 3inute 7n gura p


4/24

?

'omprimatele 2unt de o4icei o43inute prin comprimarea unui 5olum con2tant de

particule 2au agregate de particule o43inute printr-o metod8 de granulare% @n proce2ul de

;a4ricare a comprimatelor 2unt a2igurate mi>loacele ca ele 28 po2ede o rezi2ten38

mecanic8 adec5at8 pentru e5itarea 2;8ru2ti;icate 6i autorizate de alt;el 6i comprimatele ;ilmate tre4uie 28 core2pund8 cu te2tul

pentru uni;ormitatea ma2ei preparatelor unidoz8% Dac8 te2tul pentru uni;ormitatea

con3inutului e2te cerut 2au >u2ti;icat 6i autorizat pentru toate 2u42tan3ele acti5e te2tul

uni;ormit83ii ma2ei nu mai e2te nece2ar%


5/24

"

Tetul "e "i#ol$are. Un te2t core2punz8tor care poate ;i e;ectuat pentru a

demon2tra cedarea adec5at8 a 2u42tan3eiJ 2u42tan3elor acti5e e2te de e=emplu unul din

te2tele de2cri2e la Te2tul de dizol5are pentru ;ormele 2olide ?%B%"% '


6/24

II. MONOGRAFIE FARMACOPEEA EUROPEANĂ

AM%O&IPINA 'ESI%AT

'?F$"1'lN?O/ M r FC%1

K111HC-BB-F

&EFINITIE"-etil-metilHR/-?-K?-aminoeto=imetil-H-?-cloro;enil-F-metil-1H-di9idropiridina-"-dicar4o=ilat 4enze2ul;onat%Continut: BC% pana la 1?% 2u42tanta an9idra%Caracteristici

A(ect) pudra al4a 2au aproape al4a%Solu*ilitate) putin 2olu4ila in apa u2or 2olu4ila in etanol ;oarte putin 2olu4ila inetanol putin 2olu4ila in ?-propanol%

Identificare:Meto"a (rinci(ala) /pectro;otometrie de a42or4tie in in;raro2u% 'omparatie cuamlodipina 4e2ilat 'R/%

Meto"e ecun"are)A% E=aminarea cromtogramelor o4tinute in te2tul principal pentru

2u42tante a2emanatoare in U, la "FF nm%+% /e dizol5a % mg intr-o 2olutie 1 ,J, de acid clor9idric in metanol

1ml% /e e=amineaza intre " nm 2i H nm 2olutia prezentand un

ma=im de a42or4tie la "F nm% A42or4anta 2peci;ica la "F nm e2te de

11" pana la 1?1%

H


7/24

TESTERotatia o(tica) -%1o pana la %1o%

/e dizol5a %? g in metanol R 2i 2e dilueaza la ? ml cu acela2i 2ol5ent% Substante inrudite:

A. Cromatografie in strat subtire.

Solutia tet !a+) /e dizol5a %1Hg din 2u42tanta de e=aminat in metanol 2i2e dilueaza pana la ? ml cu acela2i 2ol5ent%

Solutia tet !*+) /e dilueaza 1 ml 2olutie te2t a pana la 1 ml cu metanolR%

Solutia "e referinta !a+) /e dizol5a C mg amlodipina 4e2ilat 'R/2olutie de re;erinta 2tandard * certi;ied re;erence 2olution in 1 ml metanol R%

Solutia "e referinta !*+) /e dilueaza 1 ml 2olutie re;erinta a pana la 1ml cu metanol R%

Solutia "e referinta !c+) /e dilueaza " ml 2olutie re;erinta 4 pana la 1 ml cumetanol R%

Solutia "e referinta !"+) /e dilueaza 1 ml 2olutie re;erinta 4 pana la 1 ml cu

metanol R%Placuta) TL' 2ilica gel &?H placuta R%Fa#a mo*ila) /tratul 2uperior al unui ame2tec de acid acetic glacial R apa

di2tilata R 2i metil-i2o4util cetona R ?:?: ,J,J,%A(licatie) 1 microlitrii%Re$elare) pe2te o cale de 1 cm%Ucare) 1 minte la o '%&etectie) /e e=amineaza in U, la ?H nm 2i "FF nm%A(lica*ilitatea itemului) 'romatograma o4tinuta cu 2u42tanta de re;erina a

prezinta ? 2poturi clare 2eparate cu 5alori R f de %1 pana la %??%%imite) In cromatograma o4tinuta cu 2olutia te2t a%

- Orice impuritate: orice 2pot in a;ara celui principal nu e2te maiinten2 decat 2potul o4tinut cu 2olutia de re;erina c %" 2i

cel mult doua 2poturi 2unt mai inten2e decat 2potul o4tinut cu

2olutia de re;erinta d %1%

B. Cromatografie lichida.

Solutia tet !a+. /e dizol5a mg 2u42tanta de analizat in ;aza mo4ila 2i 2e dilueaza pana la ml cu ;aza mo4ila%

Solutia tet !*+. /e dilueaza ml 2olutie te2t a pana la 1 ml cu ;aza mo4ila%Solutia "e referinta !a+. /e dizol5a mg amlodipina 4e2ilat 'R/ in ;aza mo4ila 2i

2e dilueaza pana la ml cu ;aza mo4ila% /e dilueaza apoi ml din 2olutia o4tinuta panala 1 ml cu ;aza mo4ila%

Solutia "e referinta !*+. /e dilueaza " ml 2olutie te2t a pana la 1 ml cu ;azamo4ila 2i 2e dilueaza ml din 2olutia o4tinuta pana la ml cu ;aza mo4ila%

Solutia "e referinta !c+. /e dizol5a mg 2u42tanta de analizat in ml 2olutie de pero=id de 9idrogen concentrata R% /e incalze2te la Co ' pentru H minute%


8/24

Coloana)- Marime: 1 %1 m diametru "%B mm%- &aza 2tationara: octadecil2ilil 2ilica gel pentru cromatograi;e R%

Fa#a mo*ila) Ame2tec 1 parti acetonitril R " parti metanol R 2i parti2olutie preparata a2t;el: 2e dizol5a C ml trietilamina R in 1 litru apa di2tilata 2i 2e

a>u2teaza p$-ul " P %1 cu acid ;o2;oric R%Flu,) 1 mlJmin%&etectie) /pectro;otometru la ?"C nm%Inectie) 1 microlitrii 2olutie te2t a 2i 2olutie re;erinta 4 2i c%Tim() De trei ori timpul de retentie al amlodipinei%

Retentie relati5a cu re;erire la amlodipina timp de retentie apro=imati5 C minute:impuritate D apro=imati5 %%

A(lica*ilitatea itemului) re;erinta c:- 'el putin H% intre peaQ-urile core2punzatoare amlodipinei

re2pecti5 impuritatilor - &actor de corectie: pentru calculul continutului 2e multiplica

aria de 2u4 peaQ-ul core2punzator impuritatii cu ?%- Impuritate D: nu mai mult decat aria de 2u4 cur4a peaQ-ului

principal in cromatograma o4tinuta cu 2olutia de re;erinta 4%- Impuritati totale: nu mai mult decat aria de 2u4 peaQ-ul

principal din cromatograma o4tinuta cu 2olutia de re;erinta 4

2e ignora orice peaQ datorat 4enzenului 2ul;onat%- Limita de ignorare: de %1 ori aria de 2u4 peaQ-ul principal din

cromatograma o4tinuta cu 2olutia de re;rinta 4%Continut "e a(a) ma=im % determinat pe "% g 2u42tanta%Cenua "e ulf) ma=im %? determinat pe 1% g 2u42tanta%&o#are)

'romatogra;ie lic9ida ca cea de2cri2a in te2tul 2u42tantelor inrudite cuurmatoarele modi;icari:

In>ectie: 2olutie te2t 4 2olutie de re;erinta a%/e calculeaza concentratie de amlodipina 4e2ilat din ariile de 2u4 peaQ-uri 2i

din continutul declarat de '?F$"1'lN?O/ din amlodipina 4e2ilat 'R/%&e(o#itare.

In ;lacoane inc9i2e etan2 2i ;erite de lumina 2oarelui%

IMPURITATI

F


9/24

C


10/24


11/24

III. MONOGRAFIE FARMACOPEEA 'RITANICĂ

COMPRIMATE CU AM%O&IPINA

B


12/24

I. &O/AREA AM%O&IPINEI &IN COMPRIMATE PRIN METO&A CINETIC-

SPECTROFOTEMETRICA

O metoda 2pectro;otometrica 2impla 2i 2en2i4ila ;o2t creata 2i 5alidata pentru

dozearea amlodipinei 4e2ilat AML% Metoda e2te 4azata pe conden2area AML cu C-

cloro-H-nitro-?%1%"-4enzo=adiazol in tampon alcalin p$ %F ce are ca rezultat un compu2

inten2 colorat% Inten2itatea culorii a ;o2t ma2urata 2pectro;otometric cu un ma=im de

a42or4tie la HC nm% &actorii ce a;ecteaza reactia au ;o2t 2tudiati 2i conditiile de reactie au

;o2t optimizate% /toec9iometria reactiei a ;o2t determinata 2i reactia generala a ;o2t

po2tulata% In plu2 enegia de acti5are 2i rata 2peci;ica con2tanta a reactiei la Co ' au ;o2t

determinate ca F%CH Qcal mole-1 2i re2pecti5 "% 2-1% Metodele 4azate pe rata initiala 2i petimpul ;i= au ;o2t ;olo2ite pentru a con2trui 2i cali4ra gra;cele determinarii concentratiei

de AML% In conditii optime de reactie limitele de detectie 2i de cuanti;icare au ;o2t %"

2i re2pecti5 1% gJmL% (recizia metodei a ;o2t 2ati2;acatoare de5iatia 2tandard relati5a

a ;o2t de %-1%CF% Metoda propu2a a ;o2t aplicata cu 2ucce2 analizei de AML in ;orma

ei pura 2i din ta4lete cu acuratete 4una procenta>ele de recuperare au ;o2t de la BB% P

1%FB pana la 1%F P 1%H% Rezultatele au ;o2t comparate cu cele ale metodei

2tandard%

0. Intro"ucere

Amlodipina 4e2ilate AML "- etil -metil HR/-?-K?-aminoeto=imetil-H-?-

cloro;enil-F-metil-1H-di9idropiridina-"-dicar4o=ilat 4enze2ul;onat e2te un 4locant al

canalelor de calciu cu e;ect potent 2i de lunga durata% E2te ;olo2it la 2cara larga pentru

tratamentul 9iperten2iunii 2i al anginei 2ta4ile 2i 5ariate% E2te mai e;icienta decat S-

4locantele in tratamentul anginei pentru ca pre5ine 2i re5er2eaza 2pa2mele coronariene

rezultand in cre2terea ;lu=ului 2ang5in 2i a o=igenarii miocardice% Mai mult in9i4a

2electi5 proli;erarea celulelor mu2c9iului neted arterial pre5enind ingro2area arterelor%

Amlodipina e2te prezenta ca monogra;ie in +( U/( 2i EU(%

Din cauza importantei terapeutice a AML au aparut multe metode de dozare a

1


13/24

concentratie ;ie din ;orme ;armaceutice ;ie din ;luide 4iologice% Ace2te metode includ

$(L' $(TL' gaz-cromatogra;ia electro;oreza capilara analiza in>ectiei de ;lu=

5oltametrie anodica 2i imunodozare enzimatica% /pectro;otometria e2te alea2a pentru

2implicitatea ei 2i e2te con2iderata una din cele mai u2or de ;olo2it metode de dozare%

Unele metode de dozare 2pectro;otometrica au ;o2t aplicate dozarii AML c9iar daca ele

implica proce2e complicate 2au aparatura a5an2ata ceea ce ;ace ca metodele 2a nu ;ie

aplica4ile in toate la4oratoarele% In comparatie cu metodele $(L' metoda propu2a e2te

2impla ie;tina 2i la ;el de 2en2i4ila ca 2i unele metode $(L' 2au $(TL' 2i mai 2en2i4ila

2i 2electi5a decat metodele 2pectro;otometrice% De aceea era ne5oie de o metoda de

dozare noua% /pectro;otometria Qinetica e2te din ce in ce mai cautata in analiza

;armaceutica% Aplicatiile metodelor 2pecro;otometriei Qinetice o;era a5anta>e precum

2electi5itate cre2cuta e5ita inter;erenta ;undalului colorat 2au tur4idi2cent 2i po2i4ilae5itare a inter;erentelor altor compu2i pre2enti in produ2ul comercial daca ace2tia 2unt

rezi2tenti la conditiile de reactie ale metodelor propu2e% (ana acum nu au ;o2t ela4orate

metode de dozare Qinetic-2pectro;otometric pentru AML% (entru ace2t moti5 2copul

ace2tui 2tudiu e2te ela4orarea unei metode Qinetic-2pectro;otometrice pentru dozarea

AML din comprimate ;olo2ind C-cloro-H-nitro?1"-4enzo=adiazol N+D-'l agent

2electi5 pentru aminele primare 2i 2ecundare% Acea2ta metoda e2te 4azata pe reactia de

conden2are a aAML cu N+D-'l in mediu tampon alcalin cu producerea unei coloratiiinten2e 2u ma=im de a42or4tie la HC nm% Rata de colorare e2te ma2urata

2pectro;otometric 2i utilizata in metoda de dozare propu2a%

1. E,(eriment

11


14/24

1. Aparatura

/pectro;otometrul U, U,-1F1 (' /9imadzu #aponia cu cu5e de cuartz de 1

cm a ;o2t ;olo2it pentru toate ma2uratorile% /uper-agitator La4-line Intrument2 Inc%

U/A% +aie de apa controlata termo2tatic de tip ML memmert Gm4$ 'o% /c9a

4ac9 Germania%

2. Reactivi, substante si comprimate

Amlodipina 4e2ilat AML: $etero Drug2 Ltd% $Vdera4ad India a ;o2t ;olo2ita

a2a cum a2a cum a ;o2t primita puritate BB%?-1%?% N+D-'l MercQ Darm2tadtGermania ;olo2it a ;o2t de % in metanol 2i preparat zilnic% Urmatoarele comprimate

au ;o2t ;olo2ite in 2tudiu: Regcor comprimate EgVptianInternational(9armaceutical

Indu2trie2'o%'airo EgVpt 2i comprimate AlQapre22

andAlQapre22ta4let2AlQan(9arma'airo EgVpt cu continut declarat de mg AML pe

comprimat% Toti reacti5ii ;olo2iti au ;o2t reacti5i de puritate analitica iar apa a ;o2t du4lu

di2tilata%

3. Prepararea reactivilor

3.1. Solutia standard stoc

? mg cantarite cu acuratete de AML 2e dizol5a in 1 mL metananol intr-un

4alon cotat de mL% /e aduce 4alonl la 2emn cu metanol pentru a o4tine o 2olutie

2tandard de % mgJmL AML% /olutia 2-a do5edit 2ta4ila pentru cel putin o 2aptamana

tinuta la re;rigerare%

3.2. Solutiile comprimatelor

? de comprimate din ;iecare ;ormulare au ;o2t cantarita 2i triturate% O cantitate de

pudra ce core2punde la ? mg AML a ;o2t tran2;erata intr-un 4alon de mL 2i dizol5at

in ? mL metanol% Dupa omogenizare minute 2-a adu2 la 2emn cu metanol 2-a agitat

puternic 1 minute apoi 2-a ;iltrat%

1?


15/24

3.3. Solutia tampon

/oluti tampon Teorell-/ten9agen de p$ %F au ;o2t preparate cu apa di2tilata

proa2pat ;iarta 2i racita% Tampon con2ta in acid ;o2;oric acid citric 2i 2olutie de 9idro=id

de 2odiu 1M a>u2tate la p$ %F cu acid 9idrocloric %1M%

4. Proceduri analitice generale

Un mililitru din 2olutia de re;erinta a ;o2t tran2;erat in epru4eta te2t apoi un

mililitru Torell-/ten9agen 2i 1 mL N+D-'l% Reactia a ;o2t la2ata 2a ai4a loc la C o ' pe

4aie de apa% Apoi epru4etele au ;o2t racite in 4aie de g9eata 2i 2-a adaugat %? mL de acid

2ul;uric concentrat dupa care 2-a ame2tecat puternic% 'ontinutul 2-a tran2;erat cantitati5 in

epru4ete gradate de 1 mL 2i diluate la 2emn cu metanol% A42or4antele 2olutiilor rezultate

au ;o2t ma2urate la HC nm a5and ca martor 2olutii 2imilare ;ara N+D-'l%

5. eterminarea raportului molar al reactiei

A ;o2t ;olo2ita metoda 5ariatiei continue% Au ;o2t preparate 2olutii ec9imolare de

AML 2i N+D-'l% 'oncentratiile ace2tor 2olutii au ;o2t de = 1 -" M in metanol% /erii de

1 mL din 2olutia de AML 2i din 2olutia de N+D-'l au ;o2t ame2tecate in di;erite

proportii :1 1:B %%% %%% B:1 1:1 in epru4ete% /-a adugat apoi 1 mL de tampon Torell-

/ten9agen in ;iecare epru4eta% Reactiil au ;o2t la2ate 2a ai4a loc la C

o

' pentru " deminute au ;o2t racite pe 4aie de g9eata 2i 2-a adaugat %? mL acid 2ul;uric concentrat%

'ontinutl epru4etelor 2-a tran2;erat in epru4ete gradate de 1 mL 2i adu2e la 2emn cu

metanol% A42or4antele au ;o2t ma2urate la HC nm contra pro4e 4lanQ ;ara N+D-'l%

!. "nergia de activare a reactiei #inetice dintre AM$ si %&'(l

Timpul de reactie dintre AML 2i N+D-'l a ;o2t ma2urat la di;erite temperaturi:

? H F C 2i o ' ;olo2ind ? gJmL AML 2i 1 gJmL N+D-'l la p$ %F% /-au

2ta4ilit cur4ele a42or4anta-timp pentru a 2ta4ili rata initiala% /-au 2ta4ilit apoi cur4e 1)*

raportat la log # pentru a determina panta cur4ei energia de acti5are a reactiei%

+. Adunarea datelor si procesarea lor

1"


16/24

Datele Qinetice au ;o2t adunate 2i tran2;ormate in programul /lide rite (lu2

5er2iunea %11 Ad5anced Grap9ic2/o;tareInc%'AU/A pentru ela4orare cur4elor

analizei de regre2ie 2i a calcularii 2tati2tice% Rata initiala - a reactiei la di;erite

concentratii a ;o2t o4tinuta din panta tangentei la cur4a a42or4anta-timp% 'ur4a de

cali4rare a ;o2t con2truita prin plotarea log 5er2u2 log c concentratia AML%

Limitele de detectie LOD 2i limitele cuanti;icarii LOW au ;o2t determinate

;olo2id ;ormula: LODQ /DaJ4 unde Q "%" pentru LOD 2i 1 pentru LOW /D a e2te

de5iatia 2tandard iar 4 e2te panta%

2. Re#ultate i "icutii

3.1. (onditii optime pentru reactia AM$ cu %&'(l

N+D-'l a ;o2t

initial utilizat ca reacti5

;luorigenic in

determinarea unor

amine% Mai mult a ;o2t

;olo2it ca reacti5

cromogenic pentrudeterminarea

colorimetrica a multor

amne ;armaceutice% In

2tudiul prezent reactia

AML cu N+D-'l a

produ2 o coloratie

inten2a a compu2ului

rezultat cu a42or4tie ma=ima la HC nm ;ig%1%

1H


17/24

/-a o42er5at ca ;ormarea

compu2ului colorat cre2te in

timp de aceea 2-a con2iderat

utila ela4orarea unei metode

Qinetice pentru determinarea

concentratiei de AML%

Urmatorul paragra; de2crie

conditiile 2u4 care reactia AML

cu N+D-'l indepline2te

conditiile analizei

2pectro;otometrice%

Datorita componentei clorura din N+D-'l reacti5ul a tre4uit 2a ;ie preparat zilnic%E;ectul concentratiei N+D-'l a2upra reactiei a ;o2t 2tudiat la temperatura camerei 2i

departe de lumina naturala 2ua arti;iciala% Dupa cum 2e o42er5a in ;igura ? reactia AML

cu N+D-'l e2te dependenta de concentratia de N+D-'l% 'ea mai mare a42or4anta a ;o2t

atin2a cu o concentratie de reacti5 N+D-'l in 2olutie ;inala de %F 2i %1% De aceea

concentratia de % a ;o2t 2electata pentru re2tul e=perimentelor%

(entru a genera nucleo;ile din

AML 2-au ;olo2it mai multe 5ariantede tampon la di;erite 5alori de p$ C-

1% 'ele mai 4une rezultate au ;o2t

o4tinute ;olo2ind un tampon Torell-

2ten9agen p$ %F ;ig% "%% La 5alori

mai mari de p$ la adaugarea N+D-

'l 2-a con2tatat aparitia unui coloid

al4 care precipita citiri mari de pro4a

4lanQ 2i 2en2i5itate 2cazuta%

E;ectul temperaturii a2upra

reactiei a ;o2t 2tudiat prin e;ectuarea

reactiei la di;erite 5alori de

1


18/24

temperatura iar rezultatele au aratat ca cele mai 4une citiri au ;o2t pentru pro4ele

e;ectuate la Co ' ;ig% H%% La temperaturi mai mari 2-au o42er5at 2caderii in 5alorile

a42or4antei% Ace2t ;apt a ;o2t atri4uit in2ta4ilitatii comple=ului AML-N+D la temperaturi

mari% N+D-'l e2te 9idrolizat in mediu alcalin cu o4tinerea de N+D-O$ care are o

inten2itate de a42or4tie la HC nm% De aceea a ;o2t nece2ar acidularea ame2tecului la p$ ?

pentru a 2cade a42or4anta pro4ei 4lanQ% (entru a alege cel mai potri5it acid pentru

acidulare 2-au e;ectuat te2te cu acid 2ul;uri 9idrocloric pecloric nitric ;o2;oric 2i acetic%

'ele mai 4une rezultate au ;o2t o4tinute ;olo2ind acidul 2ul;uric%

(entru a alege cel mai 4un 2ol5ent pentru dilutii 2-au ;acut te2te cu 2ol5enti de

di;erite polaritati: apa metanol etanol acetonitril 2i acetona% Metanol a ;o2t ga2it ca ;iind

cel mai 4un 2ol5ent o;erind inten2itatea ma=ima de a42or4tie 2i a ;o2t 2electat pentru

e=perimentele urmatoare%3.2. Stoeciometria si mecanismul de reactie.

/toec9iometria reactiei dintre AML 2i N+D-'l a ;o2t determinata ;olo2ind metoda

#o4% Raportul dintre AML:N+D-'l a ;o2t ga2it ca ;iin 1:1 c9iar daca 2unt ? grupari amino

care reactioneaza cu reacti5ul N+D-'l% Datorita a;initaitii mai mari a grupei amino

principale pentru N+D-'l 2-a deci2 ca reactia a5an2eaza con;orm ;ig% %

3.3. (inetica reactiei

&olo2ind conditiile optime de2cri2e mai 2u2 au ;o2t generate cur4ele a42or4anta-timpalea reactiei% Ratele initiale au ;o2t 2ta4ilite prin panta tangentei la cur4a a42or4anta-timp

;ig% FX% Ordinul reactiei a ;o2t 2ta4ilit prin 2tudierea reactiei la di;erite concentratii de

N+D-'l 2i o concentratie ;i=a de AML% 'ur4a ratei initiale pe a42or4anta intiala a ;i2t

lineara 2i trecea prin origine indicand o reactie de ordinul I% 'u toate ace2tea in conditii

optime e=perimentale 2-a ;olo2it un mic e=ce2 relati5 de N+D-'l ceea ce a atra2 o

cinetica de p2eudo ordin I%

1F


19/24

3.4. "nergia de activare

Energia de acti5are energia minima cinetica pe care o molecula tre4uie 2a o detina

pentru a intra intr-o reactie 2e poate 2ta4ili ;olo2ind ecuatia Arr9eniu2: , Y Q Y

AeEaRT unde e2te rata reactiei A e2te o con2tanta numita ;actor de ;rec5enta "a e2te

energia de acti5are * e2te temperatura a42oluta R e2te con2tanta gazoa2a%

Energia de acti5are a areactiei AML * +D-'l a ;o2t determinata prin 2tudierea

reactiei la di;erite temperaturi ;olo2ind concentratii ;i=e de reacti5i% 'ur4ele a42or4tie-

timp la ace2t temperaturi au ;o2t con2truite pentru a determina rata initiala apoi 2-a

contruit 1)* 5er2u2 log # pentru a determina panta cur4ei - "a) ?%"" R /fig. +-. Energia de

acti5are a ;o2t ga2ita ca ;iind F%CH Qcal mol -1% Acea2ta energie de acti5are >oa2a a e=plicat

;aptul ca reactia de 2u42titutie nucleo;ilica dintre AML 2i N+D-'l poate a5ea loc in

conditii 4lande 2i ca N+D-'l e2te un reacti5 5ia4il%

3.5. Metode de cuantificae

3.5.1. Metoda ratei initiale

Rata initala a reactiei urmeaza o cinetica de p2eudo ordin I 2i re2pecta ecuatia: , Y

DADt Y . 'n unde , e2te rata reactiei A e2te a42or4anta t e2te timpul ma2uratorii .

e2te con2tanta de ordin ' e2te concentratia AML iar n e2te ordinul reactiei% &orma

1C


20/24

logaritmica a ecuatiei e2te Log, Y logDADt Y log. nlog'% Analiza de regre2ie a

;o2t ;olo2ita pentru a e5alua panta 2i corela coe;icientii% (arametrii analitici 2i rezultatele

analizei de progre2ie 2unt dati in Ta4elul 1% Rata 2peci;ica con2tanta a reactiei cinetice a

;o2t determinata ca ;iind ?1H%min-1 2au "%2-1% ,aloarea lui in ecuatia progre2iei e2te

%BF?" con;irmand ca reactia AML cu N+D-'l e2te de ordin I raportat la concentratia

AML% Limita de detectie LOD 2i limita de cuanti;icare LOW au ;o2t ga2ite ca ;iind%" 2i re2pecti5 1% gJmL% Ace2te 5alori mici con;irma 2en2i5itatea 4una a metodei

ratei initiale2i in con2ecinta a4ilitatea metodei de a determina cantitati mici de AML%

3.5.2. Metoda timpului fi0

In acea2ta metoda a42or4anta di;eritelor 2olutii cu di;erite cantitati de AML au ;o2t

ma2urate la momente ;i=e de timp% 'ali4rarea cur4elor de a42or4anta 5er2u2 concentratia

de AML au 2ta4ilit momente ;i=e ale reactiei% Ecuatiile de regre2ie corelatia

coe;icientilor LOD 2i LOW 2unt date in Ta4elul ?% 'ele mai >oa2e limite de cuanti;icare

au ;o2t ga2ite ca ;iind in momentele ? " 2i " min% Totu2i momentul min% a aratat un

domeniu mai larg de cuanti;icare a concentratiei% 'on;orm g9idurilor I'$ limita de

detectie nu e2te nece2ara pentru procedurile analitice de aceea 2-a utilizat momentul

min% pentru determinarea AML%

1


21/24

3.5.3. alidarea metodelor propuse

3.5.3.1. Acuratete si preciie. Acuratetea 2i precizia metodei cinetic-

2pectro;otometrice propu2e au ;o2t determinate la " ni5ele de concentratie de AML

analizand pro4e replicat din ;iecare concentratie prin am4ele metode de2cri2e mai 2u2%

De5iatiile relati5e 2tandard pentru rezultate au 5ariat de la 1%H pana la 1%CF 2i %

pana la 1%H? pentru metodele ratei initiale 2i ale timpului ;i= din metoda

2pectro;otometrica propu2a% Ace2t lucru demon2treaza reproducti4ilitate mare a

rezultatelor 2i precizia metodelor% Ace2te caracteri2tici 2unt potri5ite pentru analiza AML

din comprimate ;armaceutice%

3.5.4. Recuperearea analitica si interferente

Acuratetea metodei a ;o2t te2tata 2i prin e=perimente de recuperare ;olo2ind metoda

aditiei 2tandard% 'antitati cuno2cute de AML pura au ;o2t adaugate pe2te comprimate pre-

analizate 2i apoi determinate prin metoda propu2a% Rezultatele au 5ariat intre B%F 2i

BB%H iar de5iatiile au 5ariat intre %CB-1%""% Ace2te rezultate au do5edit acuratetea

metodeleor propu2e 2i a42enta inter;erentelor din partea e=cipientilor% Merita notat ;aptul

ca metoda 2pectro;otometrica propu2a a ;o2t e;ectuata in domeniul 5izi4il 2i nu in

domeniul U, unde pot aparea inter;erente de la e=cipienti%3.5.5. Robustete

Ro4u2tetea a ;o2t te2tata prin e5aluarea in;luentei 5ariatiei mici ale parametrilor

e=perimentali a2upra per;ormantei analitice a metodei% In ace2te e=perimente un

parametru a ;o2t 2c9im4at in timp ce re2tul au ;o2t pa2trate con2tante 2i au ;o2t calculate

rezultatele de ;iecare data% /-a do5edit ca niciunul dintre parametrii nu a 2c9im4at nota4il

per;ormantele metodei% Ace2t lucru e2te un indicator al per;ormantei metodei 2i al

dependa4ilitatii ei la aplicatii de rutina% /-au e;ectuat analizei prin metoda propu2a 2i in

la4oratoare di;erite cu aparate di;erite iar de5iatiile 2tandard nu au depa2it ?%"?%

3.!. Aplicatia metodei propuse

'ele doua metode al 2pectro;otometriei cinetice au ;o2t ;olo2ite pentru comprimate

;armaceutice cu AML din comert% Rezultatele o4tinute prin metoda propu2a au ;o2t

comparate cu cele o4tinute din metoda de re;erinta cu pri5inta la acuratete 2i precizie% /-

1B


22/24

au e;ectuat te2te t' 2i ' dar rezultatele nu au aratat di;erente nota4ile intre cele doua

metode a;i2and un grad de incredere de B% Ace2t lucru arata precizie 2i acuratete

2imilara in analiza AML din comprimate%

3. Conclu#ie

O metoda 2pectro;otometrica cinetica 2impla 2i 2en2i4ila pentru determinarea

AML a ;o2t ela4orata 2i 5alidata cu 2ucce2% Metoda e2te 4azata pe reactia de conden2are a

AML cu N+D-'l% Metodele ratei intiale 2i al timpului ;i= pentru metoda

2pectro;otometrica pot ;i utilizate cu u2urinta pentru determinarea cantitatii de AML pura

din comprimate% De a2emenea energia de acti5are a reactiei a ;o2t determinata% Metoda

propu2a e2te de2tul de 2en2i4ila pentru determinarea cantitatilor mici de AML 2i

compara4ila cu metoda de re;erinta din punct de 5edere al acuratetei 2i preciziei% Metoda propu2a pentru ca 5izeaza o citire in mediul 5izi4il e2te mai 2electi5a decat metoda de

re;erinta care implica ma2uratori in U,% Ace2te a5anta>e incura>eaza aplicarea metodei

propu2e in analiza de rutina a AML in la4oratoarele de control analitic ca alternati5a la

metodele e=i2tente%

?


23/24

. Re#ultate i "icuţii

Lucrarea prezentata are ca tem8 de2crierea comprimatelor de Amlodipina%

?1


24/24

'i*lio4rafie

1% &armacopeea European8 % 5ol 1 1J? pag%?% &armacopeea European8 % 5ol ? pag%

"% &armacopeea +ritanic8 7n 5igoare cu edi3ia a C-a a &armacopeei Europene 6i/uplimenteleH% 9ttp:JJ%2ciencedirect%comJ2cienceJarticleJpiiJ/?B1CCB1?H?1

proiect controlul medicamentului.analiza amlodipinei din comprimate

Documents