DETERMINACIONES ANALITICAS

Cualitativas

Semicuantitativas

Cuantitativas

Pasos de una determinación analítica

AA. . Solicitud de una DA por el médico, a Solicitud de una DA por el médico, a través de un impreso especial que el propio través de un impreso especial que el propio laboratorio distribuye.laboratorio distribuye.

BB. . Realización de la DA.Realización de la DA.

CC. . Evaluación médicaEvaluación médica

AA.. Solicitud de una determinación analítica por el médico, a través de un impreso Solicitud de una determinación analítica por el médico, a través de un impreso especial que el propio laboratorio distribuye.especial que el propio laboratorio distribuye.

BB. . Realización de la determinación analítica.Realización de la determinación analítica.

aa) Fase preanalítica::1. Preparación del paciente1. Preparación del paciente2. Obtención de la muestra biológica2. Obtención de la muestra biológica3. Manipulación o procesamiento de la muestra biológica3. Manipulación o procesamiento de la muestra biológica

b) b) Fase analítica::1. Material1. Material2. Reactivos2. Reactivos3. Calibración3. Calibración4. Metodología4. Metodología5. Técnica5. Técnica

c) c) Fase postanalítica::1. Cálculo del valor de la cantidad medida1. Cálculo del valor de la cantidad medida22. . Trascripción del valor de la cantidad medidaTrascripción del valor de la cantidad medida3. Interpretación analítica y fisiopatológica3. Interpretación analítica y fisiopatológica

CC.. Evaluación médica.Evaluación médica.

a) Valoración del resultado en conjunto con la información conocida del a) Valoración del resultado en conjunto con la información conocida del paciente.paciente.

b) Toma de decisión basada en parte por el resultado de la determinación b) Toma de decisión basada en parte por el resultado de la determinación analítica.analítica.

Uroanálisis-preanalítica Recipiente limpio y estéril, con tapa hermética Los sistemas de recolección comerciales ayudan

a manejar rápidamente numerosa muestras y estandarizar los resultados

La primera orina recogida por la mañana, en condiciones higiénicas y de la parte media de la micción|

Uroanálisis-preanalítica

Debe ser examinada dentro de las 2 horas de haber sido recogida

Fijadores y conservadores: refrigerar entre 2° a 8°C, Etanol 95%, tolueno, fenol, timol

Uroanálisis-analíticaPruebas fisicoquímicas 

Las características físicas incluyen aspecto (color y turbidez) y olor; las químicas son: densidad, pH, proteínas, glucosa, cuerpos cetónicos, hemoglobina, bilirrubina, urobilinógeno, nitritos y esterasa leucocitaria

El estudio químico se realiza mediante TIRAS REACTIVAS: tiras rectangulares de papel o plástico que tiene varios cojinetes, cada uno de ellos capaz de dar tonos de color diversos en función de la concentración de alguna sustancia o analito de la orina.

Uroanálisis-analítica

Actualmente una sola tira llega a tener hasta 10 cojinetes diferentes, 2 para establecer características de la orina como pH y densidad y 8 para detectar sustancias que no deben estar normalmente en la orina.

Uroanálisis-analítica

1. Aspecto: registrar color y turbidez

2. Transferir 12 ml de la muestra al tubo de ensayo debidamente etiquetado para su adecuada identificación.

Uroanálisis-analítica 3. Utilizar las tiras reactivas, de acuerdo al instructivo del uso

del producto. Luego de sumergir la tira reactiva en la muestra y retirarla en forma inmediata, remover el exceso de orina de la tira tocando con el borde de esta el recipiente que contiene la muestra.

4. En el momento apropiado comparar las áreas reactivas con la correspondiente carta de colores del envase. La lectura debe realizarse con buena iluminación para lograr una comparación.

Uroanálisis-analítica

Las pruebas con tiras reactivas deben realizarse en muestras de orinas bien mezcladas y sin centrifugar, equilibradas a temperatura ambiente.

Cada parámetro químico debe evaluarse dentro de un período especificado en las instrucciones del fabricante.

Uroanálisis-analítica

Se debe extraer el número de tiras necesarias para el análisis inmediato y volverlo a tapar herméticamente.

Las tiras reactivas deben guardarse en un ambiente fresco y sin humedad (reactivos liofilizados) poniendo especial atención en no utilizarla después de su fecha de vencimiento.

Uroanálisis-analítica

5. Analizar una muestra control, como referencia.

6. Registrar los resultados.

Uroanálisis-analítica 7. Centrifugar la muestra y control a una fuerza centrífuga

relativa de 400 g (1500 r.p.m.), durante cinco minutos. formula utilizada:

rfc = 28.23 ( R ) n/10002 R=Radio del rotor en pulgadas

N=revoluciones por minuto

Si el volumen de orina proporcionado por el paciente es menor de 12 ml, se puede trabajar proporcionalmente con un volumen de 6 ml o 3 ml

Uroanálisis-analítica

8.Retirar cuidadosamente los tubos de la centrífuga, evitando la resuspensión

9. Desechar 11 ml del sobrenadante 10. Agregar una gota de colorante y resuspender 11. Colocar una gota de la suspensión en una

laminilla y colocar un cubreobjeto

Uroanálisis-analítica Leucocitos, eritrocitos y células epiteliales renales, se

cuantifican en número promedio por campo (promedio de 10 campos representativos) con el objetivo de 40X.

Si el número de cristales es extraordinariamente elevado o en su aspecto, hay que hacer notar esta característica y su recuento se efectúa con el objetivo de 10X.

Uroanálisis-analítica Los cilindros se cuentan por campo con el

objetivo de 10X en promedio de 10 campos y se identifica el tipo con el de 40X.

Si la cifra de células epiteliales escamosas es elevada, hay que registrar su presencia. También hay que informar la presencia de bacterias y levaduras con 40X.

Eritrocitos y leucocitos / campo a gran aumento

Cilindros y cristales anormales / campo a pequeño aumento

0-2 Negativo

2-5 0-2

5-10 2-5

10-25 5-10

25-50 10-25

50-99 25-50

100 50

Uroanálisis-analíticaControl de calidad y automatización:

Actualmente se dispone de instrumentos automatizados para estandarizar los resultados obtenidos con las tiras reactivas, debido a la manera subjetiva de la interpretación visual de las tiras reactivas.  

Uroanálisis-analíticaSe basan en el principio de reflectancia (la cantidad de luz reflejada es inversamente proporcional a la concentración de la sustancia presente)

Por el mismo motivo se debe implementar un programa de control de calidad, para verificar los resultados obtenidos con las tiras reactivas.

Uroanálisis-analítica

Existe disponibilidad comercial de varios preparados para control de calidad, en forma líquida o liofilizada, que contienen concentraciones variadas de diversos componentes químicos

Se pueden además utilizar controles preparados en el propio laboratorio y deben utilizarse positivos y negativos.

 INTERPRETACION Del estudio fisicoquímico 

El valor de pH normal es de 4.6 a 8; Si una muestra de orina al azar tras una dieta sin líquido durante 12 horas por la noche debe de ser alrededor de 1.022 (1.001 - 1.035).

Las pruebas químicas para proteínas, glucosa, hemoglobina, urobilinógeno, bilirrubina, cuerpos cetónicos, nitritos y estearasa leucocitaria deben de dar negativas, ya que no deben estar normalmente en la orina, (con la excepción del urobilinógeno que no debe de ser mayor 1mg/dl).

 INTERPRETACION Del estudio microscópico

Se considera normal de 0 a 2 eritocitos por campo, de 0 a 5 leucocitos por campo, de 0 a 2 células renales por campo

Cilindros hialinos de 0 a 3 por campo, cilindros granuloso de 0 a 1 por campo.

Se considera patológico la presencia de bacterias, levaduras y parásitos, al igual que la presencia de cristales de tirosina, cistina, leucina, colesterol, bilirrubina y una presencia aumentada de cristales considerados como no patológicos, por ejemplo ácido úrico y otros.

 

Uroanálisis-postanalítica

Formato estandarizado del reporte de de resultados

Terminología del reporte de resultados estandarizado

Uroanálisis-analítica

Muestras control Orina sintética Estandarización del análisis microscópico

Control de calidad externo

Condiciones renales patológicas Glomérulo nefritis Síndrome nefrótico Enfermedad tubular Infecciones del tracto urinario Enfermedad vascular Diabetes mellitus Obstrucción del tracto urinario Cálculos Insuficiencia renal aguda Insuficiencia renal crónica

Glomérulo nefritis

Inflamación aguda del glomérulo con: oliguria hematuria aumento de los niveles séricos de BUN y

creatinina, disminución de la IFG, formación de edema e hipertensión

Glomérulo nefritis La presencia de glóbulos rojos en la orina (hematuria)

por si solos no es evidencia suficiente

Puede originarse desde otra parte del riñón o del tracto urinario.

Cilindros de glóbulos rojos en la orina indican inflamación glomerular y es un hallazgo de gran importancia.

Otras anormalidades presentes en la nefritis aguda incluyen proteinuria y anemia.

Síndrome nefrótico

Entidad clínica caracterizada por proteinuria masiva, edema, hipoalbuminemia, hiperlipidemia, y lipiduria.

Este síndrome, el cual puede tener muchos causas aumentada permeabilidad de la membrana

glomerular excreción de grasas corporales

Síndrome nefrótico

Las velocidades de excreción proteicas son usualmente mayores que 2 o 3 g/día con la ausencia de una depresión de la IFG.

Hematuria y oliguria pueden estar presentes.

Como resultado de la pérdida masiva de proteínas séricas en la orina, primariamente albúmina Proteínas plasmáticas decrece Reducción en la presión oncótica plasmática. Edema

Causas del Síndrome Nefrótico

Asociado con varias formas de glomerulonefritis

Asociado con procesos de enfermedad generalizadaAmiloidosisCarcinomaLupus eritematoso sistémicoGlomeruloesclerosis diabéticaPoliartritis nodosa

Asociado con desórdenes mecánicos o de circulaciónTrombosis venosa renalPericarditis constrictivaAsociado con infeccionesSífilisMalariaEndocarditis bacteriana subaguda

Asociado con toxinas y alergenosPenicilaminaSales de oroPicadura de abejaEnfermedad del sueroDiversosPreclampsia severaRechazo de transplante

Enfermedad tubular

En algunos desórdenes de la función tubular renal, la depresión en la función renal no puede ser explicada por la reducción en la IFG.

Deprimida secreción o reabsorción de sustancias bioquímicas específicos o deterioro de los mecanismos de concentración y dilución urinaria.

La acidosis tubular renal (ATR) es el desorden clínico mas importante de la función tubular

Hay dos tipos principales de ATR:

ATR proximal, que es un resultado de la reducción en la reabsorción tubular proximal de bicarbonato y causa acidosis hiperclorémica, y

ATR distal, en la cual hay una incapacidad de las células tubulares de crear y mantener la diferencia usual de pH entre el fluido tubular y la sangre

Los defectos en la secreción de potasio y ácido úrico pueden resultar en elevación de los niveles séricos de potasio y ácido úrico que no pueden ser explicados por la reducción en la IFG.

Los desórdenes de reabsorción de los túbulos proximales puede resultar en hipouricemia, hipofosfatemia, aminoaciduria, y glucosuria renal.

Infecciones del tracto urinario

Las infecciones del tracto urinario pueden ocurrir en la vejiga (cistitis) o pueden involucrar los riñones (pielonefritis).

La presencia de una concentración bacteriana urinaria de más de 100,000 colonias/mL es diagnóstico de una infección del tracto urinario

En una infección del tracto urinario hay un elevado

número de glóbulos blancos (piuria) en la orina.

Enfermedades vascularesHipertensión

La hipertensión duradera y severa puede resultar en un daño renal progresivo y en insuficiencia renal crónica (nefroesclerosis hipertensiva).

causada:

por la retención de sodio y agua que ocurre en la falla renal crónica, glomerulonefritis aguda, y en el síndrome nefrótico (hipertensión volumen dependiente)

resultado de una liberación aumentada de renina desde los riñones dañados crónicamente (hipertensión renina dependiente).

Enfermedades vascularesEnfermedad arteriolar.

La enfermedad de las pequeñas arteria de los riñones (arteritis) puede ocurrir en asociación con procesos de enfermedad generalizada afectando el riñón, como un:

Lupus eritematoso sistémico, poliartritis nodosa, y esclerosis sistémica progresiva (escleroderma).

Estas enfermedades pueden resultar en las anormalidades clínicas y bioquímicas vistas en la

glomerulonefritis aguda el síndrome nefrótico insuficiencia renal crónica

Trombosis venosa renal Resulta en una proteinuria masiva y el

síndrome nefrótico. hipertensión, edema, hematuria,

Diabetes mellitus

La diabetes mellitus resulta en una amplia variedad de anormalidades en la función renal.

glucosuria, poliuria, y nocturia como resultado de la diuresis osmótica causada por la carga de glucosa.

En la diabetes tipo 1, una proteinuria manifiesta se desarrolla aproximadamente 17 años después que el diagnóstico fue hecho,

La hipertensión se desarrolla luego de 1 o 2 años, y la insuficiencia renal crónica es vista luego de otro año.

La excreción de proteínas, particularmente albúmina y IgG, están aumentadas en el curso temprano de esta enfermedad.

Una excreción urinaria de albúmina en el rango de 50 a 200 mg/24 hr es usualmente predictivo de nefropatía diabética

Obstrucción del tracto urinario alto

El daño renal crónico puede ocurrir desde la obstrucción y vaciamiento incompleto de la vejiga incompleto, y se pueden desarrollar los síntomas de insuficiencia renal crónica

Con la obstrucción completa, puede ocurrir: oliguria y anuria

Se pueden ver también síntomas de infección del tracto urinario

ausas:• Desórdenes congénitos del tracto urinario bajo

• Lesiones neoplásicas• Hipertrofia prostática benigna• Carcinoma de próstata o vejiga• Nodos linfáticos comprimiendo los uréteres• Desórdenes adquiridos (fibrosis retroperitoneal,

cálculos renales, o estenosis uretral).

Cálculos renales

Los cálculos renales, o piedras, se ven en combinación con cólico renal, hematuria, y síntomas de infección del tracto urinario u obstrucción.

Las piedras renales pueden formarse luego de :

1. Infecciones del tracto urinario frecuentes por organismos productores de ureasa

2. Cuando la orina está supersaturada por grandes cantidades de calcio, ácido úrico, cisteina, o xantina.

Insuficiencia renal aguda

1. Prerenal (ocurre antes que la sangre alcance el riñón) debido a hipovolemia o perfusión pobre como resultado de una falla cardiovascular.

2. Renal (ocurre en el riñón) debido a necrosis tubular aguda, que es la causa más frecuentemente observada de insuficiencia renal aguda, o debido a otras enfermedades renales, provocando rápido deterioro en la función renal, incluyendo obstrucción venosa y arterial.

3. Postrenal (ocurre luego que la orina deja el riñón) debido a obstrucción.

Causas de la Insuficiencia Renal Aguda Prerrenal

HipovolemiaInsuficiencia cardiovascular

RenalNecrosis tubular agudaGlomerulonefritisVasculitisNefroesclerosis malignaObstrucción vascularArterialVenosa

PostrenalObstrucción del tracto urinario bajoRuptura de la vejiga

Alteraciones bioquímicas IRA Oliguria o anuria, Hay formas de IRA no oligurica proteinuria, hematuria, y la presencia de

cilindros de glóbulos rojos y otras formas de cilindros en orina.

Azoemia Acidosis metabólica (Acidemia)

Insuficiencia renal crónica

Progresiva perdida de la función renal.

Los síntomas no solo se deben a falla excretora simple, sino también de la falla renal para regular ciertas sustancias, como sodio y agua

Falla biosintética, como la inadecuada producción renal de eritropoyetina, resultando en anemia; y excesiva producción de ciertas sustancias normales

Primer etapa La función renal esta disminuida, niveles de urea y creatinina plasmáticos normales. Por lo menos un 50% de la función normal debe estar perdida antes que

las concentraciones de estos compuestos aumente por encima del rango normal.

Segunda etapa se caracteriza por insuficiencia renal leve.

Tercer etapa es el desarrollo de una falla renal franca con anemia avanzada, acidosis, y otras manifestaciones clínicas y bioquímicas.

Cuarta etapa es la uremia, cuando todas las consecuencias de la falla renal se ponen de manifiesto.

Enfermedad glomerular primariaGlomerulonefritis crónica de varios tiposLupus eritematoso sistémicoPoliartritis nodosa

Enfermedad vascular renalHipertensión malignaTrombosis venosa renal

Enfermedad inflamatoriaPielonefritis crónicaTuberculosis

Enfermedad metabólica con involucramiento renalDiabetes mellitusGotaAmiloidosis

NefrotoxinasAminoglucósidosAnalgésicos nefropáticosEnvenenamiento crónico por metales pesados

Hipertrofia obstructivaCálculosHipertrofia prostáticaAnomalías congénitas del tracto urinario bajo

Anomalías congénitas de los riñonesRiñones hipoplásticosEnfermedad renal policística

Otros

Evaluación de la función renal Función glomerular: Depuración de

creatinina Función tubular: densidad, osmolalidad y el

pH Uroanalisis: Puede revelar enfermedad en

cualquier parte del tracto urinario

Físico, químico y microscópico