Eksperimentalna vežba na daljinu -tečna hromatografija od kuće

dr Dejan Orčić, vanredni profesorDepartman za hemiju, biohemiju i zaštitu životne sredine

Prirodno-matematički fakultetUniverzitet u Novom Sadu

• bojene reakcije• volumetrija• gravimetrija• TLC• potenciometrija• plamena fotometrija• UV/VIS spektrofotometrija• AAS• ICP• PCR• FTIR• MS• HPLC, LC-MS• GC-FID/ECD/MS• CE-MS• NMR• ...

klas

ičn

ein

stru

men

taln

e

lab

ora

nti

BSc

/MSc

/Ph

D

Osnovne akademske studije biohemije• Osnovi instrumentalne analize• (Eksperimentalna biohemija)• Bioanalitička hemija• Spektroskopske i difrakcione metode u biohemiji• Praktikum iz instrumentalne analize• HPLC u biohemiji• (Biohemija hrane i ishrane)• (Hemija farmaceutskih proizvoda)• Instrumentalna organska hemija

Master akademske studije biohemije• Hromatografska analiza hrane i suplemenata

Doktorske studije biohemije• (Odabrane eksperimentalne metode za ispitivanje biološke aktivnosti)• Strukturna analiza monosaharida i derivata• (Metabolizam i farmakološki značaj etarskih ulja)• Izolacija i karakterizacija prirodnih proizvoda• Rendgenska strukturna analiza biomolekula

priprema instrumenta

dijagnostika

razvojmetode

analiza

obradapodataka

tumačenjerezultata

• UV/VIS 5 k€• AAS 30 k€• ICP 60 k€• HPLC 60 k€• GC-MS 100 k€• LC-MS 100–500 k€• NMR 500 k€• HRMS 750–2000 k€

Izvođenje• individualno• grupno• demo• turistički• teorijski

Izvođenje• individualno• grupno• demo• turistički• teorijski

Napon fragmentora (Vfrag) optimizuje se

analizom standarda (ili uzorka) pri

različitim vrednostima Vfrag i procenom

vrednosti koja obezbeđuje maksimalan

signal, odn. maksimalan prinos jona

prekursora (u ovom slučaju, [M–H]– ...

??

?

? ?

Izvođenje• individualno• grupno• demo• turistički – NMR• teorijski – HRMS, CE

ICT Networking for Overcoming Technical and Social Barriers in Instrumental AnalyticalChemistry Education (NETCHEM)

Web accessed remote instrumental analytical laboratories (WARIAL)

Agricultural University of Tirana• GC-MS Varian 413/210• AAS• HPLC-UV Varian ProStar 210/218/325

Univerzitet u Nišu• GC-MS• ESI-MS Decca• ESI-MS Advantage• HPLC + ESI-MS LTQ Orbitrap• UV-VIS• AAS• Dionex Aquion Ion Chromatograph• Stereo Microscope Leica MZ-16A with camera• Light Microscope Leica DM 1000 with camera

Univerzitet u Beogradu• X-ray fluorescence spectrometry (XRF)• GC-MS

University of Tirana• GF-AAS, Analytic Jena novAA 400• SF UV/VIS Spectrophotometer Shimadzu Double Beam UV-2401 PC• Electrochem analyzer MEC-12B

University of Greenwich• Thermogravimetric Analysis (TGA) TA Instruments Q50000 IR• Differential Scanning Calorimetry (DSC) TA Instruments Q2000• Hot Stage Microscopy (Mettler Toledo FP90, FP82HT)

Univerzitet u Novom Sadu• Agilent Technologies 1100 HPLC-DAD• Agilent Technologies 1200/6410 HPLC-DAD-ESI-QqQ-MS/MS• Shimadzu UFLC-DAD• AAnalyst 700 AAS• Ion Chromatography Dionex IC 3000• TOC analyzer (LiquiTOC II, Elementar)• Agilent Technologies 1290 Infinity HPLC-DAD• GCMS-QP 2010 Ultra Shimadzu

Brno University of Technology• GC-TOFMS Pegasus III (IVD)• GC-QqQ EVOQ System

Univerzitet u Kragujevcu• UV-VIS STOPPED-FLOW

Spectrophotometer

nastavnik

studenti

nastavnik

operater

studenti

Izolacija i karakterizacija prirodnih proizvoda (DSB614)

Agilent Technologies series 1200 HPLCAgilent Technologies series 6410 ESI-QqQ-MS/MS

• rad sa LC-DAD-MS/MS instrumentom

• rad sa MassHunter-om

• kvalitativna analiza

• kvantitativna analiza

• preparativna HPLC

samostalni rad kod kuće

teorijske osnove

• principi HPLC

• principi ESI-MS/MS

• spektralne karakteristike odabranih klasa jedinjenja

okvirno poznavanje softverâ

praktični rad i diskusija sa nastavnikom

praktične veštine

• rad sa softverima

• rad sa instrumentom i dizajn metode

• tumačenje rezultata

• detekcija artifaktâ

• tumačenje UV/VIS spektara

• tumačenje MS1 spektara

• tumačenje MS2 spektara

Identifikacija sekundarnih biomolekula pomoću LC-DAD-MS/MS

materijali (teorija)• udžbenik• knjige• radovi

materijali (vežbe)• Remote Access Guide• video-uputstva• praktikum

WARIAL vežba

• kontrola instrumenta

• diskusija postupaka i pojava

• obrada rezultata

• tumačenje i diskusija rezultata

Filmovi:

• Uputstvo za LC-DAD-MS/MS instrument (26 min)

• Uputstvo za MassHunter InstrumentControl (24 min)

• Vodič za MassHunter Qualitative Analysis (24 min)

• Identifikacija sekundarnih biomolekula pomoću LC-DAD-MS/MS (12 min)

• Kvantifikacija sekundarnih biomolekula pomoću LC-DAD-MS/MS (11 min)

• Semi-preparativna HPLC (10 min)

nastavnik• vođenje vežbe• transfer znanja• manuelne operacije

studenti• kontrola instrumenta• izvođenje eksperimenata• obrada rezultata merenja

opšta obrada: • upravljanje fajlovima• tipovi hromatograma• ekstrahovanje spektara• artifakti i čistoća pika

• podešavanja instrumenta (MS1 eksperiment)

• injektovanje uzorka

rad sa MassHunter Qual softverom

rad sa MassHunter Instrument Control softverom

interpretacija:• UV/VIS spektri• MS1 spektri• preliminarni zaključci

• postavka MS2

eksperimenta• injektovanje uzorka

interpretacija:• MS2 spektri• rasvetljavanje strukture00:42:53

Demonstracija: analiza superkritičnog ekstrakta kanabisa

Cilj projekta: dobijanje kanabidiola (CBD) prečišćenog od 9-tetrahidrokanabinola (THC)

O

H

HOH

OH

H

H OH

OH

H

H OH

COOHCBDAMw = 358

CBDMw = 314

THCMw = 314

O

H

HOH

COOHTHCAMw = 358

THCA

CBDA

CBCA

CBLA

200 300 400