IDENTIFICACION DE LEVADURAS

Gentileza de

Maria Teresa Mujica

Virginia Jewtuchowicz

Cristina Iovannitti

T richosporon spp

presentes

G eotrichum spp

a usentes

bla stosporos

H ifa s presentes y a rtroconid ios

p os it ivoC n eo fo rm an s

n eg a tivoas im ilac ió n d e c a rb oh id ra tos

id en tificac ió n d e o tras es p ec iesd e C ryp toc coc u s

tes t d e L -D O P Aag ar sem illas d e a lp is te

espec ies de C ryptoccocus

positiva

C an d id a g lab ra ta

célula s pequeña ssa ca rosa -treha losa +

p os it ivo S ac ch arom yc es uo tras levad u ras as cop oró g en as

células grandesasim ilación de carbohidratos

ascosporos

nega tiva

urea sa

colonia s b la nca s

R hodotorula spp

colonia s ro ja s

no hifa s- so lo b la stoconid ios

C an d id a a lb ic an sC an d id a d u b lin ien s is

c on c lam id ocon id ios

m orfo log ía , c o lo r en e l C H R O M ag arau xon og ram a, z im og ram a, m ed ios

c om erc ia les

s in c lam id oc on id ios

b las toc on id ios y p s eu d om ic e lios

Aga r leche-tw een 80 a l 1% o a ga r ha rina de m a íz

ESQUEMA PARA LA IDENTIFICACION DE LEVADURAS

Candida albicans

Candida dubliniensis

BLASTOCONIDIOS CON PSEUDOMICELIOS

CON CLAMIDOCONIDIOS

C albicans

C dubliniensis

Candida albicans

Pseudomicelio con clamidoconidias terminales

C.albicans C. dubliniensis

CHROM agar VERDE VERDE OSCURO

AGARLECHE-T

PSEUDOMICELIOCLAMIDOCONIDIAS

+

PSEUDOMICELIOCLAMIDOCONIDIA

S+++

UTILIZACION XILOSA

POSITIVO NEGATIVO

CRECIM. 42º C

SI NO

CRECIM. 45º c

SI_NO NO

API ID 32C SI SI

BIOLOGIA MOLECULAR

SI SI

BLASTOCONIDIOS CON PSEUDOMICELIOS

SIN CLAMIDOCONIDIOS

MICROMORFOLOGIA EN AGAR LECHE 1%-TWEEN 20

CHROM Agar

METODOS ENZIMATICOS

ASIMILACION

SISTEMAS SEMIAUTOMATIZADOS

Candida tropicalis

PSEUDOMICELIOS ABUNDANTES, CONIDIAS SE AGRUPAN EN PEQUEÑOS GRUPOS .

Candida krusei

Candida krusei

Candida krusei

Candida parapsilosis

Candida parapsilosis

Candida parapsilosis

Pseudomicelio, en cadenas ramificadas en

células alargadas.

Candida guillermondii

Candida glabrataUTILIZACION

TREHALOSA: +

SACAROSA: -

UREA: NEGATIVA

BLASTOCONIDIOS SIN PSEUDOMICELIOS

COLONIAS BLANCAS EN SDA

C. parapsilosis (62%) resultó la especie predominante en las onixis blastomiceticas.

C. parapsilosis, C. albicans y C. tropicalis fueron las especies que demostraron mayor indice de asociación.

C. krusei se encontró siempre junto a otra levadura.

El uso de CHROMagar permitió el aislamiento primario de levaduras y la demostración de las asociaciones de especies.

La determinación de la sensibilidad antifúngica resultó útil para demostrar la resistencia de cepas habitualmente sensibles.

Conclusiones

V Jewtuchowicz, MT Mujica, JL Finquelievich, S Scarano, C Iovannitti

Centro de Micología. Departamento de Microbiología. Facultad de Medicina. UBA.

BLASTOCONIDIOS SIN PSEUDOMICELIOS

COLONIAS ROJAS

UREA POSITIVA

RHODOTORULA SPP

Saccharomyces cerevisiae

ASCOS

Medio V 8

Acetato

Medio de GORODKOWA

A S C O S

Cryptococcus neoformans

BLASTOCONIDIOS Trichosporon

H I F A S Y A R T R O C O N I D I O S

UREA: Positiva

Trichosporon

SIN BLASTOCONIDIOS

Geotrichum spp

H I F A S Y A R T R O C O N I D I O S

Ureasa negativo

Medios de cultivos

Medio de Gorodkowa

Se usa para formación de ascosporos

Glucosa: 1,25 g

Peptona: 5g

Cloruro de sodio: 2,50g

Extracto de carne: 5g

Agar: 10g

Agua destilada: 500ml

Agar harina de maíz con tween 80

Formación de clamidosporos

Harina de maíz: 40g

Agar: 20g

Tween 80: 10 ml

Agua destilada: 1000 ml

Harina de maíz calentar a 60ºC durante 1 hora. Filtrar y agregar los otros componentes.

Agar leche con Tween 80

Se usa para producción de clamidosporos (microcultivo)

Tubo 1

Agar 2g

Tween 80 1ml

Agua destilada 100ml

Fraccionar y esterilizar

Tubo 2

Leche descremada 1ml

Esterilizar

Para su uso mezclar los dos tubos fundir y hacer microcultivo.