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IGFBP-3

IMMULITE® 2500 IGFBP-3

2 IMMULITE 2500 IGFBP-3 (PIL5KGB-2, 2005-08-08)

English

Intended Use: For in vitro diagnostic usewith the IMMULITE 2500 Analyzer — forthe quantitative measurement of insulin-like growth factor binding protein 3(IGFBP-3) in serum or heparinizedplasma, as an aid in the evaluation ofgrowth disorders.Catalog Number: L5KGB2 (200 tests)Test Code: BP3 Color: Red

Summary and ExplanationInsulin-like growth factors (IGF-I, IGF-II)are a family of peptides involved in theregulation of cell growth, the actions ofwhich are mediated by binding to theinsulin-like growth factor binding proteins.6Six binding proteins (IGFBP-1 throughIGFBP-6) have been described.5 IGFBP-3is the most predominant of these.6IGFBP-3 is a 264-amino acid peptide(MW 29kD) which forms a 150kDglycoprotein complex consisting ofIGFBP-3 itself and an IGF molecule.2,6

Approximately 95% of IGF-I and IGF-II arebound to IGFBP-3, which makes thisprotein the major carrier of the insulin-likegrowth factors in circulation.5,6 Thefunction of the binding protein is to extendthe half-life of the growth factors in thecirculation, to several hours.1,5,6

IGFBP-3 is used as an aid in theevaluation of growth disorders. It is growthhormone (GH) dependent and thereforeuseful in the evaluation of GH secretion.

Principle of the ProcedureIMMULITE 2500 IGFBP-3 is a solid-phase, enzyme-labeled chemiluminescentimmunometric assay.Incubation: 30 minutes.

Specimen CollectionThe use of an ultracentrifuge isrecommended to clear lipemic samples.Hemolyzed samples may indicatemistreatment of a specimen before receipt

by the laboratory; hence the results shouldbe interpreted with caution.

Centrifuging serum samples before acomplete clot forms may result in thepresence of fibrin. To prevent erroneousresults due to the presence of fibrin,ensure that complete clot formation hastaken place prior to centrifugation ofsamples. Some samples, particularlythose from patients receivinganticoagulant therapy, may requireincreased clotting time.Blood collection tubes from differentmanufacturers may yield differing values,depending on materials and additives,including gel or physical barriers, clotactivators and/or anticoagulants.IMMULITE 2500 IGFBP-3 has not beentested with all possible variations of tubetypes.

Volume Required: 5 µL serum orheparinized plasma.Storage: Samples stored at 2–8°C or atroom temperature (22°C) are stable for upto 24 hours. Samples stored at –25°C arestable for 12 months.9

Automatic Predilution Factor: 100

Warnings and PrecautionsFor in vitro diagnostic use.Reagents: Store at 2–8°C. Dispose of inaccordance with applicable laws.Follow universal precautions, and handleall components as if capable oftransmitting infectious agents. Sourcematerials derived from human blood weretested and found nonreactive for syphilis;for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitisB surface antigen; and for antibodies tohepatitis C.Chemiluminescent Substrate: Avoidcontamination and exposure to directsunlight. (See insert.)Water: Use distilled or deionized water.

Materials SuppliedComponents are a matched set. Labels onthe inside box are needed for the assay.

IMMULITE 2500 IGFBP-3 (PIL5KGB-2, 2005-08-08) 3

IGFBP-3 Bead Pack (L2GB12)With barcode. 200 beads, coated withmurine monoclonal anti-IGFBP-3. Stableat 2–8°C until expiration date.L5KGB2: 1 pack.

IGFBP-3 Reagent Wedge (L2GBA2)With barcode. 11.5 mL alkalinephosphatase (bovine calf intestine)conjugated to murine monoclonal anti-IGFBP-3 in buffer. Stable at 2–8°C untilexpiration date.L5KGB2: 1 wedge.Before use, tear off the top of the label atthe perforations, without damaging thebarcode. Remove the foil seal from the topof wedge; snap the sliding cover down intothe ramps on the reagent lid.

IGFBP-3 Adjustors (LGBL, LGBH)Two vials (Low and High), 4 mL each, ofof IGFBP-3 in a protein/buffer matrix. (Nopredilution is required.) Stable at 2–8°Cfor 30 days after opening or for 6 months(aliquotted) at –20°C.L5KGB2: 1 set.

Before making an adjustment, place theappropriate Aliquot Labels (supplied withthe kit) on test tubes so that the barcodescan be read by the on-board reader.

IGFBP-3 Sample Diluent (L2GBZ)For the on-board dilution of patientsamples and controls. 55 mL ofconcentrated (ready-to-use) IGFBP-3-freeprotein/buffer matrix. Stable at 2–8°C for30 days after opening, or for 6 months at–20°C.L5KGB2: 1 vialBarcode labels are provided for use withthe diluent. Before use, place anappropriate label on a 16 × 100 mm testtube, so that the barcodes can be read bythe on-board reader.L5KGB2: 3 labels

Kit ComponentsSupplied SeparatelyL2SUBM: Chemiluminescent SubstrateL2PWSM: Probe WashL2KPM: Probe Cleaning KitLRXT: Reaction Tubes (disposable)L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes(16 × 100 mm)L2ZC: 250 Sample Diluent Tube Caps

LGCOCM: Bi-level control modulecontaining IGF-1 and IGFBP-3.

Also RequiredDistilled or deionized water; test tubes;controls.

Assay ProcedureNote that for optimal performance, it isimportant to perform all routinemaintenance procedures as defined in theIMMULITE 2500 Operator's Manual.See the IMMULITE 2500 Operator'sManual for: preparation, setup, dilutions,adjustment, assay and quality controlprocedures.Recommended Adjustment Interval:2 weeks.Quality Control Samples: Use controlsor sample pools with at least two levels(low and high) of IGFBP-3.

Expected ValuesThe reference range values weregenerated on the IMMULITE analyzer.Based on the relationship of IMMULITE2500 IGFBP-3 to DPC's IMMULITE 2000IGFBP-3 (see Method Comparison 1), andthe relationship of IMMULITE 2000IGFBP-3 to IMMULITE IGFBP-3 (seeMethod Comparison 2), all three assayscan be expected to have essentially thesame reference ranges.

A reference range study performed withDPC's IMMULITE IGFBP-3 kit on 85neonatal samples (1-15 days old), as wellas 1,499 pediatric and adult samples froman apparently healthy population, yieldedthe following results, presented in thetables and graphs below.

IGFBP-3 Neonatal Reference Ranges:IGFBP-3 values for 1–7 days (n = 45):95%ile: 0.7 µg/mLIGFBP-3 values for 8–15 days (n = 40):median: 0.9 µg/mL,central 95% range: 0.5 – 1.4 µg/mL


IGFBP-3 Pediatric DataIMMULITE Results for 793 Healthy Children

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19

Age, years

12

48

IGFB

P-3

, mg/

L

IGFBP-3 Pediatric Reference Ranges

IGFBP-3, µg/mL

Age, y Median Central 95% Range

1 1.6 0.7 – 3.6

2 1.8 0.8 – 3.9

3 2.0 0.9 – 4.3

4 2.2 1.0 – 4.7

5 2.4 1.1 – 5.2

6 2.7 1.3 – 5.6

7 2.9 1.4 – 6.1

8 3.2 1.6 – 6.5

9 3.6 1.8 – 7.1

10 4.1 2.1 – 7.7

11 4.5 2.4 – 8.4

12 4.9 2.7 – 8.9

13 5.4 3.1 – 9.5

14 5.8 3.3 – 10

15 5.9 3.5 – 10

16 5.7 3.4 – 9.5

17 5.3 3.2 – 8.7

18 4.9 3.1 – 7.9

19 4.6 2.9 – 7.3

20 4.6 2.9 – 7.2

IGFBP-3 Adult DataIMMULITE Results for 706 Healthy Adults

25 35 45 55 65 75 85

Age, years

12

48

IGFB

P-3

, mg/

L

IGFBP-3 Adult Reference Ranges

IGFBP-3, µg/mL

Age, y Median Central 95% Range

21-25 5.1 3.4 – 7.8

26-30 5.2 3.5 – 7.6

31-35 4.9 3.5 – 7.0

36-40 4.8 3.4 – 6.7

41-45 4.7 3.3 – 6.6

46-50 4.7 3.3 – 6.7

51-55 4.8 3.4 – 6.8

56-60 4.8 3.4 – 6.9

61-65 4.6 3.2 – 6.6

66-70 4.3 3.0 – 6.2

71-75 4.0 2.8 – 5.7

76-80 3.5 2.5 – 5.1

81-85 3.1 2.2 – 4.5


IGFBP-3 Tanner StageReference Ranges

IGFBP-3, µg/mL

Tanner Stage Median Central 95% Range

Combined, n = 420

1 3.6 1.3 – 6.3

2 4.2 2.4 – 6.7

3 5.3 3.3 – 9.1

4 6.2 3.5 – 8.6

5 5.4 2.7 – 8.9

Female, n = 226

1 3.6 1.2 – 6.4

2 4.5 2.8 – 6.9

3 5.3 3.9 – 9.4

4 5.9 3.3 – 8.1

5 5.6 2.7 – 9.1

Male, n = 194

1 3.6 1.4 – 5.2

2 3.9 2.3 – 6.3

3 5.4 3.1 – 8.9

4 6.5 3.7 – 8.7

5 5.2 2.6 – 8.6

Consider these limits as guidelines only.Each laboratory should establish its ownreference ranges.

LimitationHeterophilic antibodies in human serumcan react with the immunoglobulinsincluded in the assay components causinginterference with in vitro immunoassays.[See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinelyexposed to animals or animal serumproducts can demonstrate this type ofinterference potentially causing ananomalous result. These reagents havebeen formulated to minimize the risk ofinterference; however, potentialinteractions between rare sera and testcomponents can occur. For diagnosticpurposes, the results obtained from thisassay should always be used incombination with the clinical examination,patient medical history, and other findings.

Performance DataSee Tables and Graphs for datarepresentative of the assay's performance.Results are expressed in µg/mL. (Unlessotherwise noted, all were generated onserum samples collected in tubes withoutgel barriers or clot-promoting additives.)The IMMULITE 2500 assay employs thesame reagent and bead formulation asIMMULITE 2000. All performancecharacteristics are equivalent between thetwo platforms.All performance data except MethodComparison 1 were generated on theIMMULITE 2000 analyzer.

Conversion Factor:µg/mL × 1 → mg/Lµg/mL × 34.78 → nmol/LCalibration Range: up to 16 µg/mL(556 nmol/L) [WHO NIBSC Reagent 93/560)Analytical Sensitivity: 0.1 µg/mL

High-dose Hook Effect:None up to 340 µg/mL.Precision: Samples were processed induplicate over the course of 20 days, tworuns per day, for a total of 40 runs and 80replicates. (See "Precision" table.)Linearity: Samples were serially dilutedand then processed using the on-board1:100 automatic predilution. (See"Linearity" table.)Recovery: Samples spiked 1 to 19 withthree IGFBP-3 solutions (32, 70 and140 µg/mL) were assayed. (See"Recovery" table.)Specificity: The assay is highly specificfor IGFBP-3, with low crossreactivity toother naturally occurring substances. (See"Specificity" table.)Bilirubin: Presence of conjugated andunconjugated bilirubin in concentrationsup to 200 mg/L has no effect on results,within the precision of the assay.

Hemolysis: Presence of hemoglobin inconcentrations up to 550 mg/dL has noeffect on results, within the precision of theassay.

Lipemia: Presence of triglycerides inconcentrations up to 3,000 mg/dL has noeffect on results, within the precision of theassay.


Method Comparison 1: The IMMULITE2500 IGFBP-3 assay was compared toDPC's IMMULITE 2000 IGFBP-3 on 98samples. (Concentration range:approximately 1.5 to 10 µg/mL. See graph1.) By linear regression:(IML 2500) = 1.07 (IML 2000) – 0.15 µg/mLr = 0.979

Means:5.0 µg/mL (IMMULITE 2500)4.9 µg/mL (IMMULITE 2000)

Method Comparison 2: The IMMULITE2000 IGFBP-3 assay was compared toDPC's IMMULITE IGFBP-3 on 218samples. (Concentration range:approximately 0.6 to 12 µg/mL. See graph2.) By linear regression:(IML 2000) = 0.92 (IML) + 0.35 µg/mLr = 0.952

Means:5.1 µg/mL (IMMULITE 2000)5.2 µg/mL (IMMULITE)

References1) Baxter RC, Martin JL, Beniac VA. Highmolecular weight insulin-like growth factorbinding protein complex. Purification andproperties of the acid-labile subunit from humanserum. J Biol Chem 1989;264:11843-8. 2)Daughaday WH, Rotwein P. Insulin-like growthfactors I and II. Peptide, messenger ribonucleicacid and gene structures, serum, and tissueconcentrations. Endocr Rev 1989;10:68-91. 3)Hall K, Enberg G, Ritzen M, et al. SomatomedinA levels in serum from healthy children and fromchildren with growth hormone deficiency ordelayed puberty. Acta Endocrinol (Copenh)1980;94:155-65. 4) Lee PD, Rosenfeld RG.Clinical utility of insulin-like growth factor assays.Pediatrician 1987;14:154-61. 5) Rechler MM.Insulin-like growth factor binding proteins. VitamHorm 1993;47:1-114. 6) Singh P. Insulin-likegrowth factor system in growth, developmentand carcinogenesis. J Clin Ligand Assay2000;23:214-32. 7) Underwood LE, Murphy MG.Radioimmunoassay of the somatomedins. In:Patrono C, Peskar BA, editors.Radioimmunoassay in basic and clinicalpharmacology. Handbook of experimentalpharmacology. vol. 82. New York: Springer-Verlag; 1987: 561-74. 8) National Committee forClinical Laboratory Standards. Procedures forthe collection of diagnostic blood specimens byvenipuncture; approved standard. 4th ed.NCCLS Document H3-A4, Wayne, PA: NCCLS,1998. 9) Elmlinger MW, Zwirner, M, Kühnel, W.Stability of Insulin-Like Growth Factor (IGF)-Iand IgF Binding Protein (IGFBP)-3 Measured bythe Immulite® Automated Chemi-LuminescenceAssay System in Different Blood Specimens.Clin Lab 2005; 51:145-52. 10) Elmlinger MW,

Kühnel W, Weber MM, Ranke MB. Referenceranges for two automated chemiluminescentassays for serum insulin-like growth factor I(IGF-I) and IGF-binding protein 3 (IGFBP-3).Clin Chem Lab Med 2004;42:654-64.

Technical AssistanceIn the United States, contact DPC'sTechnical Services department.Tel: 800.372.1782 or 973.927.2828Fax: 973.927.4101. Outside the UnitedStates, contact your National Distributor.Manufactured by EURO/DPC Ltd. under aQuality System registered to ISO 13485:2003.

Tables and Graphs

Precision (µg/mL)

Within-Run1 Total2

Mean3 SD4 CV5 SD CV

1 0.91 0.04 4.4% 0.06 6.6%

2 1.21 0.05 4.1% 0.08 6.6%

3 1.91 0.08 4.2% 0.13 6.8%

4 3.59 0.15 4.2% 0.26 7.2%

5 4.82 0.22 4.6% 0.35 7.3%

6 8.83 0.42 4.8% 0.46 5.2%


Linearity (µg/mL)

Dilution1 Observed2 Expected3 %O/E4

1 8 in 85 2.35 — —

4 in 8 1.15 1.18 97%

2 in 8 0.53 0.59 90%

1 in 8 0.26 0.29 90%

2 8 in 8 4.81 — —

4 in 8 2.32 2.41 96%

2 in 8 1.24 1.20 103%

1 in 8 0.55 0.60 92%

3 8 in 8 6.97 — —

4 in 8 3.54 3.49 101%

2 in 8 1.77 1.74 102%

1 in 8 0.89 0.87 102%

4 8 in 8 7.37 — —

4 in 8 3.68 3.69 100%

2 in 8 1.85 1.84 101%

1 in 8 0.89 0.92 97%

5 8 in 8 7.72 — —

4 in 8 3.62 3.86 94%

2 in 8 1.81 1.93 94%

1 in 8 0.90 0.97 93%

Recovery (µg/mL)

Solution1 Observed2 Expected3 %O/E4

1 — 3.31 — —

A 4.44 4.74 94%

B 6.24 6.64 94%

C 9.80 10.1 97%

2 — 4.56 — —

A 5.53 5.93 93%

B 7.60 7.83 97%

C 10.5 11.3 93%

3 — 6.41 — —

A 7.65 7.69 99%

B 9.11 9.59 95%

C 12.6 13.1 96%

4 — 6.59 — —

A 7.74 7.86 98%

B 9.32 9.76 95%

C 12.2 13.3 92%

5 — 7.43 — —

A 7.61 8.66 88%

B 9.36 10.6 88%

C 12.5 14.1 89%

Specificity

Compound1µg/mLAdded2

Apparentµg/mL3

% Cross-reactivity4

IGF-II 0.7 ND ND

α-Antitrypsin 2,000 ND ND

IGFBP-1(phosphorylated) 4 ND ND

IGFBP-1(dephosphorylated) 4 ND ND

IGFBP-1(complex) 4 ND ND

IGFBP-2 4 ND ND

Transferrin 4,000 ND ND

Bilirubin(unconjugated) 10 ND ND

Bilirubin(conjugated) 500 ND ND

Human SerumAlbumin 50,000 ND ND

Hemoglobin 170,000 ND ND

Human IgG 17,700 ND ND

ND: Not detectable.5


Method Comparison 1

0

3

6

9

12

0 3 6 9 12

IMMULITE 2000 IGFBP-3, µg/mL

IMM

ULI

TE 2

500

IGFB

P-3

(IML 2500) = 1.07 (IML 2000) – 0.15 µg/mLr = 0.979

Method Comparison 2

0

4

8

12

0 4 8 12IMMULITE IGFBP-3, µg/mL

IMM

ULI

TE 2

000

IGFB

P-3

(IML 2000) = 0.92 (IML) + 0.35 µg/mLr = 0.952

Deutsch. Precision: 1Intra-Assay, 2Gesamt,3Mittelwert, 4SD (Standardabweichung), 5CV(Variationskoeffizient). Linearity: 1Verdünnung,2Beobachtet (B), 3Erwartet (E), 4% B/E, 58 in 8.Recovery: 1Lösung, 2Beobachtet (B), 3Erwartet(E), 4% B/E. Specificity: 1Verbindung,2zugesetzte Menge, 3Gemessene Konzentration,4% Kreuzreaktivität, 5NN: Nicht nachweisbar.

Español. Precision: 1Intraensayo, 2Total,3Media, 4DS, 5CV. Linearity: 1 Dilución,2Observado (O), 3Esperado (E), 4%O/E, 58 en 8.Recovery: 1Solución, 2Observado (O),3Esperado (E), 4%O/E. Specificity:1Compuesto, 2Cantidad añadida, 3Concentraciónaparente, 4% Reacción cruzada, 5ND: nodetectable.

Français. Precision: 1Intraessai, 2Total,3Moyenne, 4SD, 5CV. Linearity: 1Dilution,2Observé (O), 3Attendu (A), 4%O/A, 58 dans 8.Recovery: 1Solution, 2Observé (O), 3Attendu(A), 4%O/A. Specificity: 1Composé, 2ajouté,3Concentration apparente, 4Réaction croisée %.5ND: non détectable.

Italiano. Precision: 1Intra-serie, 2Totale, 3Media,4SD (Deviazione Standard), 5CV (Coefficiente diVariazione). Linearity: 1Diluizione, 2Osservato(O), 3Atteso (A), 4%O/A, 58 in 8. Recovery:1Soluzione, 2Osservato (O), 3Atteso (A), 4%O/A.Specificity: 1Composto, 2quantità aggiunta,3Concentrazione apparente, 4Percentuale diCrossreattività, 5ND: non determinabile.

Português. Precision: 1Entre-ensaios, 2Total,3Média, 4Desvio padrão, 5Coeficiente devariação. Linearity: 1Diluição, 2Observado (O),3Esperado (E), 4%O/E, 58 em 8. Recovery:1Solução, 2Observado (O), 3Esperado (E),4%O/E. Specificity: 1Composto, 2Quantidadeadicionada, 3Apparent Concentration,4Percentagem de reacção cruzada, 5ND: nãodetectável.

Deutsch

IMMULITE 2500 IGFBP-3Anwendung: Zur in vitro Diagnostik unterVerwendung des IMMULITE 2500Systems - zur quantitativen Bestimmungvon Insulin-like growth factor bindingprotein 3 (IGFBP-3) in Serum oderHeparin-Plasma, als Hilfestellung bei derDiagnose von Wachstumsstörungen.Artikelnummern: L5KGB2 (200 Tests)Testcode: BP3 Farbe: rot

Klinische RelevanzDie Insulin-like growth factors (IGF-I,IGF-II) sind eine Familie von Peptiden, diean der Regulation des Zellwachstumsbeteiligt sind und deren Wirkungsweisedurch die Bindung an die Insulin-like-growth factor bindenden Proteinevermittelt wird. Insgesamt sind bishersechs Bindeproteine (IGFBP-1 bis IGFBP-6) beschrieben. 5 IGFBP-3 ist das ammeisten vorherrschende unter diesen. 6IGFBP-3 ist ein aus 264 Aminosäurenbestehendes Peptid (MW 29kD), daseinen 150 kD Glykoproteinkomplex ausIGFBP-3 selbst und einem IGF Molekülbildet. 2,6 Zirka 95 % von IGF-I und IGF-IIsind an IGFBP3 gebunden, was diesesProtein zum Hauptträgerprotein von inZirkulation befindlichen Insulin Like growthFactors macht. Die Funktion desBindeproteins ist, die Halbwertszeit der inZirkulation befindlichen


Wachstumsfaktoren auf mehrere Stundenauszuweiten. 1,5,6

IGFBP-3 wird als Hilfsmittel bei derEvaluierung von Wachstumsstörungeneingesetzt. Es ist abhängig vomWachstumshormon (GH) und daher auchhilfreich bei der Untersuchung der GH-Sekretion.

MethodikDer IMMULITE 2500 IGFBP-3 ist einFestphasen, Enzym-markierter,immunometrischer ChemilumineszenzAssay.Inkubation: 30 Minuten.

ProbengewinnungDer Einsatz einer Ultrazentrifuge wird zurKlärung von lipämischen Probenempfohlen.

Bei hämolysierten Proben besteht dieMöglichkeit einer unsachgemäßenHandhabung vor Eintreffen im Labor,daher sind die Ergebnisse mit Vorsicht zuinterpretieren.Die Zentrifugation der Serumproben vordem völligen Abschluss der Gerinnungkann zu Fibringerinnseln führen. Umfehlerhaften Analysenergebnissen infolgevon Gerinnseln vorzubeugen, istsicherzustellen, dass die Gerinnung vorder Zentrifugation der Proben vollständigabgeschlossen ist. Insbesondere Probenvon Patienten unter Antikoagulantien-therapie können eine verlängerteGerinnungszeit aufweisen.Blutentnahmeröhrchen von verschiedenenHerstellern können differierende Werteverursachen. Dies hängt von denverwendeten Materialien und Additiven(Gel oder physische Trennbarrieren,Gerinnungsaktivatoren und /oderAntikoagulantien) ab. IMMULITE 2500IGFBP-3 sind nicht mit allen möglichenRöhrchenvariationen ausgetestet worden.

Erforderliche Menge: 5 µl Serum oderHeparin-Plasma.Lagerung: Proben, die gekühlt bei 2–8°Cbzw. bei Raumtemperatur (22°C) gelagertwerden, sind bis zu 24 Stunden haltbar.Proben, die bei –25°C gelagert werden,sind bis zu 12 Monate haltbar.9

Faktor für automatischeVorverdünnung: 100

Hinweise undVorsichtsmaßnahmenZur In-vitro-Diagnostik.Reagenzien: Bei 2–8 °C lagern. DieEntsorgung muss nach den jeweilsgültigen Gesetzen erfolgen.

Die generell geltendenVorsichtsmaßnahmen sind einzuhaltenund alle Komponenten als potenziellinfektiös zu behandeln. Alle ausmenschlichem Blut gewonnenenMaterialien wurden auf Syphilis,Antikörper gegen HIV-1 und HIV-2,Hepatitis-B-Oberflächenantigen undHepatitis-C-Antikörper untersucht undnegativ befundet.Chemilumineszenz-Substrat:Kontamination und direkteSonneneinstrahlung vermeiden. SiehePackungsbeilage.Wasser: Destilliertes bzw. deionisiertesWasser benutzen.

Im Lieferumfang enthaltenDie Bestandteile sind aufeinanderabgestimmt. Die Aufkleber auf derInnenverpackung werden zurTestdurchführung gebraucht.

IGFBP-3 Kugel-Container (L2GB12)Der barcodierte Kugel-Container enthält200 Kugeln, beschichtet mit Anti-IGFBP-3(monoklonal, Maus). Bei 2–8°C bis zumVerfallsdatum haltbar.L5KGB2: 1 Container.

IGFBP-3 Reagenzbehälter (L2GBA2)Mit Barcode. 11,5 ml alkalischePhosphatase konjugiert mit Anti-IGFBP-3(monoklonal, Maus) in Puffer. Bei 2–8°Cbis zum Verfallsdatum haltbar.L5KGB2: 1 Behälter.

Vor Gebrauch den Aufkleber an derPerforation abreißen, ohne dabei dieBarcodierung zu beschädigen. Die Folievon der Oberseite des Containersentfernen. Die Folie von der Oberseite desContainers entfernen. Den Schiebedeckelnach unten in die Führung desReagenziendeckels einrasten lassen.

IGFBP-3 Kalibratoren (LGBL, LGBH)Zwei Fläschchen (niedrig und hoch) à4 ml, mit IGFBP-3 in einer Proteinpuffer-


Matrix (keine Vorverdünnung notwendig).30 Tage nach dem Öffnen bei 2–8°C oder6 Monate (portioniert) bei –20°C haltbar.L5KGB2: 1 Set.Vor der Kalibrierung die entsprechendenAufkleber (dem Kit beiliegend) aufGlasröhrchen kleben, so dass dieBarcodes vom Barcodereader desSystems gelesen werden können.

IGFBP-3 Verdünnungsreagenz (L2GBZ)Für die on-board Verdünnung vonPatientenproben und Kontrollen. 55 mleiner konzentrierten IGFBP-3 freienProteinpuffer-Matrix (gebrauchsfertig). 30Tage nach dem Öffnen bei 2–8°C oder6 Monate bei –20°C haltbar.L5KGB2: 1 Fläschchen

Zum Einsatz des Verdünnungsreagenz(Diluents) werden Barcode Etikettenmitgeliefert. Vor Verwendung einentsprechendes Etikett so auf ein16 × 100 mm Teströhrchen kleben, dasses vom eingebauten Barcode Readergelesen werden kann.L5KGB2: 3 Etiketten

Separat erhältliche Testsystem-KomponentenL2SUBM: Chemilumineszenz-SubstratmodulL2PWSM: WaschmodulL2KPM: ReinigungsmodulLRXT: Einweg-ReaktionsgefäßeL2ZT: 250 Teströhrchen (16 × 100 mm)für die ProbenverdünnungL2ZC: 250 Röhrchenverschlüsse für dieProbenverdünnungLGCOCM: IMMULITE IGF-Kontroll-Modul(2 Konzentrationsbereiche, enthält IGF-1und IGFBP-3).

Ebenfalls benötigtDestilliertes bzw. deionisiertes Wasser;Teströhrchen; Kontrollen.

TestdurchführungFür eine optimale Funktion des Gerätes istunbedingt zu beachten, dass dieWartungen, wie im IMMULITE 2500-Handbuch beschrieben, regelmäßigdurchgeführt werden.

Hinweise zur Vorbereitung, täglichenInbetriebnahme des Systems, derKalibrierung sowie Verfahren zur Test-

und Qualitätskontrolle entnehmen Sie bittedem IMMULITE 2500-Handbuch.

Empfohlenes Kalibrationsintervall:2 Wochen.Qualitätskontrollseren: Kontrollen oderPool-Seren mit IGFBP-3 in zumindestzwei Konzentrationen (niedrige und hohe)verwenden.

ReferenzwerteDie Referenzbereiche wurden mit demIMMULITE System bestimmt.Basierend auf der Übereinstimmung vonIMMULITE 2500 IGFBP-3 mit demIMMULITE 2000 IGFBP-3 (sieheMethodenvergleich 1) und derÜbereinstimmung von IMMULITE 2000IGFBP-3 mit IMMULITE IGFBP-3 (sieheMethodenvergleich 2), kann von gleichenReferenzbereichen für alle drei Assaysausgegangen werden.

In einer Studie mit dem IMMULITE-IGFBP-3 Assay wurden folgendeReferenzwerte bei 85 offensichtlichgesunden Neugeborenen (1-15 d) und1499 offensichtlich gesunden Kindern undErwachsenen ermittelt:

IGFBP-3 Referenzbereich beiNeugeborenen:IGFBP-3 Werte für 1–7 Tage (n = 45):95%ile: 0,7 µg/mlIGFBP-3 Werte für 8–15 Tage (n = 40):Median: 0,9 µg/ml,zentraler 95% Bereich: 0,5 – 1,4 µg/ml


IGFBP-3 Daten: KinderIMMULITE Results for 793 Healthy Children

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19

Age, years

12

48

IGFB

P-3

, mg/

L

IGFBP-3 Pädiatrische Referenzwerte

IGFBP-3, µg/ml

Alter, a Median 95% Bereich

1 1,6 0,7 – 3,6

2 1,8 0,8 – 3,9

3 2,0 0,9 – 4,3

4 2,2 1,0 – 4,7

5 2,4 1,1 – 5,2

6 2,7 1,3 – 5,6

7 2,9 1,4 – 6,1

8 3,2 1,6 – 6,5

9 3,6 1,8 – 7,1

10 4,1 2,1 – 7,7

11 4,5 2,4 – 8,4

12 4,9 2,7 – 8,9

13 5,4 3,1 – 9,5

14 5,8 3,3 – 10

15 5,9 3,5 – 10

16 5,7 3,4 – 9,5

17 5,3 3,2 – 8,7

18 4,9 3,1 – 7,9

19 4,6 2,9 – 7,3

20 4,6 2,9 – 7,2

IGFBP-3 Daten: ErwachseneIMMULITE Results for 706 Healthy Adults

25 35 45 55 65 75 85

Age, years

12

48

IGFB

P-3

, mg/

L

IGFBP-3 Referenzwerte für Erwachsene

IGFBP-3, µg/ml

Alter, a Median 95% Bereich

21-25 5,1 3,4 – 7,8

26-30 5,2 3,5 – 7,6

31-35 4,9 3,5 – 7,0

36-40 4,8 3,4 – 6,7

41-45 4,7 3,3 – 6,6

46-50 4,7 3,3 – 6,7

51-55 4,8 3,4 – 6,8

56-60 4,8 3,4 – 6,9

61-65 4,6 3,2 – 6,6

66-70 4,3 3,0 – 6,2

71-75 4,0 2,8 – 5,7

76-80 3,5 2,5 – 5,1

81-85 3,1 2,2 – 4,5


IGFBP-3 Tanner-Stadium

IGFBP-3, µg/ml

TannerStadium Median 95% Bereich

kombiniert, n = 420

1 3,6 1,3 – 6,3

2 4,2 2,4 – 6,7

3 5,3 3,3 – 9,1

4 6,2 3,5 – 8,6

5 5,4 2,7 – 8,9

Weiblich, n = 226

1 3,6 1,2 – 6,4

2 4,5 2,8 – 6,9

3 5,3 3,9 – 9,4

4 5,9 3,3 – 8,1

5 5,6 2,7 – 9,1

Männlich, n = 194

1 3,6 1,4 – 5,2

2 3,9 2,3 – 6,3

3 5,4 3,1 – 8,9

4 6,5 3,7 – 8,7

5 5,2 2,6 – 8,6

Diese Grenzwerte sind lediglich alsRichtlinien aufzufassen. Jedes Laborsollte seine eigenen Referenzbereicheetablieren.

Grenzen der MethodeHeterophile Antikörper in Humanserenkönnen mit Immunglobulinen aus denAssaykomponenten reagieren undInterferenzerscheinungen innerhalb des invitro Immunoassays verursachen. (Clin.Chem. 1988:34:27-33) Proben vonPatienten, die häufig mit Tier- bzw.Tierserumprodukten zu tun haben, könnendie erwähnten Interferenzen verursachenund zu anomalen Resultaten führen. Dieverwendeten Reagenzien sind sokonzipiert, dass das Risiko einerInterferenz mit den zu messenden Probenminimiert ist. Dennoch können potentiellInteraktionen zwischen seltenen Serenund den Testkomponenten auftreten. Zudiagnostischen Zwecken sollten die mitdem Assay erhaltenen Ergebnisse immerin Kombination mit der klinischenUntersuchung, der Patientenanamneseund anderen Befunden gesehen werden.

LeistungsdatenSiehe Tabellen und Grafiken mitrepräsentativen Daten für den Assay. DieErgebnisse sind als µg/ml ausgedrückt.(Alle Daten wurden - sofern nicht andersangegeben - aus Serumproben inRöhrchen ohne Gelbarrieren odergerinnungsfördernde Zusätze gewonnen.)Der IMMULITE 2500 verwendet diegleichen Reagenzien und Kugeln wie derIMMULITE 2000. Dadurch ist dieAssaycharakteristik auf beiden Systemengleichwertig.Alle Leistungsdaten, mit Ausnahme desMethodenvergleichs 1, wurden auf demIMMULITE 2000 System generiert.

Umrechnungsfaktor: µg/ml × 1 → mg/lµg/ml × 34,78 → nmol/lMessbereich: bis 16 µg/ml(556 nmol/l) [WHO NIBSC Reagenz 93/560)Analytische Sensitivität: 0,1 µg/ml

High-Dose-Hook-Effect:keiner bis 340 µg/ml.Präzision: Proben wurden innerhalb von20 Tagen mit jeweils zwei Testansätzen inDoppelbestimmung gemessen (insgesamt40 Bestimmungen und 80Einzelmessungen). (Siehe Tabelle"Precision").

Linearität: Proben wurden seriellverdünnt und anschliesend unterVerwendung einer automatischen 1:100on-board-Verdünnung getested (SieheTabelle "Linearity".)Wiederfindung: Proben wurden mit dreiIGFBP-3-Lösungen (32, 70 und140 µg/ml) im Verhältnis von 1:19versetzt. (Repräsentative Datenentnehmen Sie bitte der Tabelle„Recovery“.)

Spezifität: Der Assay ist hochspezifischfür IGFBP-3, mit geringer Kreuzreaktivitätzu anderen natürlich vorkommendenSubstanzen. (siehe Tabelle „Specificity“.)Bilirubin: Konjugiertes undunkonjugiertes Bilirubin hat inKonzentrationen bis zu 200 mg/l keinenEinfluss auf die Messung, der größer alsdie Impräzision des Assays selbst ist.

Hämolyse: Hämoglobin hat inKonzentrationen bis zu 550 mg/dl keinen


Einfluss auf die Ergebnisse, der größer alsdie Impräzision des Assays selbst ist.

Lipämie: Triglyceride hat inKonzentrationen bis zu 3 000 mg/dlkeinen Einfluss auf die Ergebnisse, dergrößer als die Impräzision des Assaysselbst ist.Methodenvergleich 1: Der IMMULITE2500 IGFBP-3 Assay wurde unterVerwendung von 98 Proben mit demIMMULITE 2000 IGFBP-3 Assay von DPCverglichen. (Konzentrationsbereich: ca.1,5 – 10 µg/ml. Siehe Grafik 1.)Berechnung der linearen Regression:(IML 2500) = 1,07 (IML 2000) – 0,15 µg/mlr = 0,979

Mittelwerte:5,0 µg/ml (IMMULITE 2500)4,9 µg/ml (IMMULITE 2000)

Methodenvergleich 2: Der IMMULITE2000 IGFBP-3 Assay wurde unterVerwendung von 218 Proben mit demIMMULITE IGFBP-3 Assay von DPCverglichen. (Konzentrationsbereich: ca.0,6 – 12 µg/ml. Siehe Grafik 2.)Berechnung der linearen Regression:(IML 2000) = 0,92 (IML) + 0,35 µg/mlr = 0,952

Mittelwerte:5,1 µg/ml (IMMULITE 2000)5,2 µg/ml (IMMULITE)

AnwendungsberatungBei Rückfragen wenden Sie sich bitte anIhre DPC Niederlassung.Hergestellt von Euro/DPC Ltd. unter demQualitätssystem ISO 13485:2003.

Español

IMMULITE IGFBP-3Utilidad del análisis: para el diagnósticoin vitro con el analizador IMMULITE 2500y la medición cuantitativa de la proteínatransportadora del factor de crecimientoinsulinoide (IGFBP-3) en suero ó plasmaheparinizado como ayuda en laevaluación de los desórdenes delcrecimiento.Referencia: L5KGB2 (200 tests)

Código del Test: BP3Código de Color: Rojo

Resumen y Explicación delTestLos factores de crecimiento insulinoides(IGF-I, IGF-II son una familia de péptidosque tienen una función en la regulacióndel crecimiento de la célula, cuyasacciones están mediadas por la unión alas proteínas transportadoras del factor decrecimiento insulinoide. 6 Se han descritoseis proteínas transportadoras (IGFBP-1hasta IGFBP-6). 5 La más predominantede éstas es la IGFBP-3. 6 La IGFBP-3 esun péptido de 264 aminoácidos (PesoMolecular 29kD) que forma un complejoglicoprotéico de 150kD que está formadopor la misma IGFBP-3 y una molécula deIGF. 2, 6 Aproximadamente un 95% de IGF-I y IGF-II se unen a IGFBP-3, lo queconvierte a esta proteína en el mayorportador de los factores de crecimientoinsulinoides en la circulación.5, 6 La funciónde la proteína transportadora es alargar lavida media de los factores de crecimientoen circulación hasta varias horas.1, 5, 6

La IGFBP-3 se utiliza como ayuda en laevaluación de los transtornos delcrecimiento. Es dependiente de lahormona del crecimiento (GH) y, por lotanto, es útil en la evaluación de lasecreción de la GH.

Principio del análisisIGFBP-3 IMMULITE 2500 es un ensayoinmunométrico enzimático porquimioluminiscencia en fase sólida.Incubación: 30 minutos.

Recogida de la muestraSe recomienda el uso de unaultracentrífuga para aclarar las muestraslipémicas.

Las muestras hemolizadas podrían indicaruna mala manipulación de la muestraantes de ser recibida por el laboratorio; eneste caso, los resultados debeninterpretarse con precaución.La centrifugación de las muestras desuero antes de que se forme el coagulopuede ocasionar la presencia de fibrina.Para evitar resultados erróneos debidos ala presencia de fibrina, asegurarse que seha formado el coagulo completamente


antes de centrifugar las muestras.Algunas muestras, particularmenteaquellas de pacientes sometidos a terapiaanticoagulante, pueden requerir mayortiempo de coagulación.

Los tubos para recoger sangre dedistintos fabricantes pueden producirvalores diferentes, dependiendo delmaterial del tubo y de los aditivos,incluyendo barreras de gel o barrerasfísicas, activadores de la coagulación y/oanticoagulantes. El IGFBP-3IMMULITE 2500 no ha sido analizado contodos los distintos tipos de tubos.Volumen requerido: 5 µl de suero óplasma heparinizado.Conservación: Las muestrasalmacenadas a 2–8°C o a temperaturaambiente (22°C) son estables hasta24 horas. Las muestras almacenadas a–25°C son estables durante 12 meses.9

Factor de Predilución automático: 100

Advertencias y precaucionesPara uso diagnóstico in vitro.

Reactivos: Mantener a 2–8°C. Desecharde acuerdo a la legislación en vigor.Siga las precauciones universales ymanipule todos los componentes como sifueran capaces de transmitir agentesinfecciosos. Los materiales derivados desangre humana han sido analizados y sonnegativos para sífilis; para anticuerposfrente al HIV 1 y 2; para el antígeno desuperficie de hepatitis B y para losanticuerpos de hepatitis C.

Sustrato quimioluminiscente: Evite lacontaminación y exposición a la luzdirecta del sol. (Ver el prospecto.)Agua: Usar agua destilada o desionizada.

Materiales suministradosLos componentes representan un juegocompleto. Las etiquetas incluidas en lacaja son necesarias para el ensayo.

Cartucho de bolas de IGFBP-3(L2GB12)Con código de barras. 200 bolasrecubiertas con anticuerpo monoclonalanti-IGFBP-3 de ratón. Estable a 2–8°Chasta la fecha de caducidad.L5KGB2: 1 cartucho.

Vial de Reactivo de IGFBP-3 (L2GBA2)Con código de barras. 11,5 ml defosfatasa alcalina (de intestino de ternera)conjugada con anticuerpo monoclonalmurino anti-IGFBP-3, en solución tampón.Estable a 2–8°C hasta la fecha decaducidad.L5KGB2: 1 vial.

Antes de usar, cortar la parte superior dela etiqueta en la perforación, sin dañar elcódigo de barras. Quitar el precinto delorificio del vial; encajar la cubiertadeslizante en las rampas de la tapa delreactivo.

Ajustadores de IGFBP-3 (LGBL, LGBH)Dos viales (alto y bajo), con 4 ml cada unode IGFBP-3 en una matriz protéica y ensolución tampón. (No se requiere diluciónadicional). Estable a 2–8°C durante 30días o 6 meses (alícuotados) a –20°C.L5KGB2: 1 juegoAntes de hacer un ajuste, colocar lasetiquetas a las alícuotas apropiadas(suministradas con el kit) sobre tubos deensayo, de forma tal que los códigos debarras puedan ser leídos por el lector.

Diluyente de muestra de IGFBP-3(L2GBZ)Para la dilución automática de muestras ycontroles. 55 ml de tampón concentradolibre de IGFBP-3 (listo para usar). Establea 2–8°C durante 30 días después de abriró 6 meses a –20°C.L5KGB2: 1 vial.

Se suministran etiquetas con códigos debarras para usarse con este diluyente.Antes del uso, colocar la etiqueta con elcódigo de barras en un tubo de ensayo de16 x 100 mm, así los códigos de barraspueden ser identificados por el lector delinstrumento.L5KGB2: 3 etiquetas

Componentes del kit que sesuministran por separadoL2SUBM: Substrato quimioluminiscenteL2PWSM: Lavado de sondaL2KPM: Kit de limpieza de sondaLRXT: Tubos de reacción (desechables)L2ZT: 250 Tubos Del Del Diluyente deMuestra (16 × 100 mm)L2ZC: 250 Tapones Del Tubo DelDiluyente De Muestra


LGCOCM: Módulo de control de dosniveles que contiene IGF-I y IGFBP-3.

También necesariosAgua destilada o desionizada; tubos deensayo; controles.

EnsayoNótese que para una óptima ejecución, esimportante realizar los procedimientos demantenimiento rutinarios definidos en elmanual del operador IMMULITE 2500.Consulte el Manual del operador deIMMULITE 2500 para: la preparación,instalación, dilución, ajuste, ensayo yprocedimientos de control de calidad.Intervalo de ajuste recomendado:2 semanas.Muestras de control de calidad: Usecontroles o pooles de muestras con almenos dos niveles (bajo y alto) de IGFBP-3.

Valores esperadosEl rango de valores normales fuégenerado con el analizador IMMULITE.Basado en la relación entre los kits deDPC IMMULITE 2500 IGFBP-3 eIMMULITE 2000 IGFBP-3 (verComparación de Métodos 1), y la relaciónentre IMMULITE 2000 IGFBP-3 eIMMULITE IGFBP-3 (ver Comparación deMétodos 2), se ha de esperar que los tresensayos tengan esencialmente losmismos valores normales de referencia.Un estudio de rangos de referenciarealizado con el kit de IGFBP-3 IMMULITEde DPC utilizando 85 muestrasneonatales (1–15 días de edad), así como1 499 muestras pediátricas y de adultosde una población aparentemente sana,generó los siguientes resultados, que sepresentan en las siguientes tablas ygráficas.

Rangos de referencia neonatales deIGFBP-3Valores de IGFBP-3 de 1–7 días (n = 45):95% percentil: 0,7 µg/mlValores de IGFBP-3 de 8–15 días (n = 40):Mediana 0,9 µg/ mLRango central 95%: 0,5 – 1,4 µg/ml

Datos Pediátricos de IGFBP-3IMMULITE Results for 793 Healthy Children

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19

Age, years

12

48

IGFB

P-3

, mg/

L

Rangos de referencia pediátricos deIGFBP-3

IGFBP-3, µg/ml

Años Mediana Rango Central 95%

1 1,6 0,7 – 3,6

2 1,8 0,8 – 3,9

3 2,0 0,9 – 4,3

4 2,2 1,0 – 4,7

5 2,4 1,1 – 5,2

6 2,7 1,3 – 5,6

7 2,9 1,4 – 6,1

8 3,2 1,6 – 6,5

9 3,6 1,8 – 7,1

10 4,1 2,1 – 7,7

11 4,5 2,4 – 8,4

12 4,9 2,7 – 8,9

13 5,4 3,1 – 9,5

14 5,8 3,3 – 10

15 5,9 3,5 – 10

16 5,7 3,4 – 9,5

17 5,3 3,2 – 8,7

18 4,9 3,1 – 7,9

19 4,6 2,9 – 7,3

20 4,6 2,9 – 7,2


Datos de IGFBP-3 en AdultosIMMULITE Results for 706 Healthy Adults

25 35 45 55 65 75 85

Age, years

12

48

IGFB

P-3

, mg/

L

Rangos de referencia en adultos deIGFBP-3

IGFBP-3, µg/ml

Años Mediana Rango Central 95%

21-25 5,1 3,4 – 7,8

26-30 5,2 3,5 – 7,6

31-35 4,9 3,5 – 7,0

36-40 4,8 3,4 – 6,7

41-45 4,7 3,3 – 6,6

46-50 4,7 3,3 – 6,7

51-55 4,8 3,4 – 6,8

56-60 4,8 3,4 – 6,9

61-65 4,6 3,2 – 6,6

66-70 4,3 3,0 – 6,2

71-75 4,0 2,8 – 5,7

76-80 3,5 2,5 – 5,1

81-85 3,1 2,2 – 4,5

Rangos de referencia de IGFBP-3según los estadíos de Tanner

IGFBP-3, µg/ml

Fase Tanner Mediana Rango Central 95%

Combinados, n = 420

1 3,6 1,3 – 6,3

2 4,2 2,4 – 6,7

3 5,3 3,3 – 9,1

4 6,2 3,5 – 8,6

5 5,4 2,7 – 8,9

Mujeres, n = 226

1 3,6 1,2 – 6,4

2 4,5 2,8 – 6,9

3 5,3 3,9 – 9,4

4 5,9 3,3 – 8,1

5 5,6 2,7 – 9,1

Hombres, n = 194

1 3,6 1,4 – 5,2

2 3,9 2,3 – 6,3

3 5,4 3,1 – 8,9

4 6,5 3,7 – 8,7

5 5,2 2,6 – 8,6

Estos límites han de considerarse sólocomo una guía. Cada laboratorio deberáestablecer sus propios intervalos dereferencia.

LimitaciónLos anticuerpos heterofílicos en el suerohumano pueden reaccionar con lasinmunoglobulinas de los componentes delensayo provocando interferencias con losinmunoanálisis in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Las muestras de lospacientes que frecuentemente estánexpuestos a animales o a productosséricos animales pueden presentar estetipo de interferencia que potencialmenteocasione un resultado anómalo. Estosreactivos han sido formulados paraminimizar el riesgo de interferencia, noobstante, pueden darse interaccionesanómalas entre sueros conflictivos y loscomponentes del ensayo. Con fines dediagnóstico, los resultados obtenidos coneste ensayo siempre deben ser usados encombinación con el examen clínico, la


historia médica del paciente y cualquierotro dato clínico relevante.

Características analíticasPara ver resultados representativos de lascaracterísticas del ensayo, consulte lastablas y los gráficos. Los resultados seexpresan en µg/ml. (A no ser que seindique lo contrario, todos los resultadosfueron generados en muestras de suerorecogidas en tubos sin geles oactivadores de la coagulación.)El IMMULITE 2500 usa la mismaformulación de reactivos y bolas que elIMMULITE 2000. Todas las característicasanalíticas son equivalentes en las dosplataformas.Todos los datos excepto la Comparaciónde Métodos 1 se generaron en elanalizador IMMULITE 2000.

Factor de Conversión: µg/ml × 1 → mg/lµg/ml × 34,78 → nmol/lIntervalo de calibración: Hasta 16 µg/ml(556 nmol/l) [WHO NIBSC Reactivo 93/560)Sensibilidad analítico: 0,1 µg/mlEfecto de gancho a altas dosis:Ninguno hasta 340 µg/ml.

Precisión: Las muestras fueronprocesadas por duplicado durante 20 días,en dos tandas de trabajo por día, para untotal de 40 tandas y 80 replicados. (Vertabla “Precision”)Linealidad: Se hicieron dilucionesseriadas y después ensayadas utilizandola predilución automática 1:100. (Véase latabla de "Linearity").Recuperación: Se ensayaron muestrassobrecargadas, de la 1 a la 19, con tressoluciones de IGFBP-3 (32, 70 y140 µg/mL). (Ver tabla “Recovery”)Especificidad: El ensayo es altamenteespecífico para IGFBP-3 con unareactividad cruzada baja con otrassustancias presentes naturalmente (Vertabla de “Specificity”).Bilirrubina: La presencia de bilirrubinaconjugada y libre en concentracioneshasta 200 mg/l no tiene efecto en elensayo, en lo concerniente a la precisióndel ensayo.Hemólisis: La presencia de hemoglobina,en concentraciones hasta 550 mg/dl, no

tiene ningún efecto sobre los resultadosen términos de precisión.

Lipemia: La presencia de triglicéridos enconcentraciones hasta 3 000 mg/dl notiene efecto alguno en los resultados, enlo correspondiente a la precisión delensayo.Comparación de métodos 1: El ensayoIGFBP-3 IMMULITE 2500 se comparó conel IGFBP-3 IMMULITE 2000 de DPCutilizando 98 muestras. (Rango deconcentración: aproximadamente de 1,5hasta 10 µg/ml. (Ver gráfica 1.) Porregresión lineal:(IML 2500) = 1,07 (IML 2000) – 0,15 µg/mlr = 0,979

Medias:5,0 µg/ml (IMMULITE 2500)4,9 µg/ml (IMMULITE 2000)

Comparación de métodos 2: El ensayoIGFBP-3 IMMULITE 2000 se comparó conel IGFBP-3 IMMULITE de DPC utilizando218 muestras. (Rango de concentración:aproximadamente de 0,6 hasta 12 µg/ml.(Ver gráfica 2.) Por regresión lineal:(IML 2000) = 0,92 (IML) + 0,35 µg/mlr = 0,952

Medias:5,1 µg/ml (IMMULITE 2000)5,2 µg/ml (IMMULITE)

Asistencia técnicaPóngase en contacto con el distribuidornacional.Fabricado por EURO/DPC Ltd. bajo un Sistemade Calidad acorde con la ISO 13485:2003.

Français

IMMULITE IGFBP-3Domaine d'utilisation : Réservé à unusage diagnostic in vitro avec l'analyseurIMMULITE 2500 pour la mesurequantitative de la protéine porteuse dufacteur de croissance insuline-like(IGFBP-3) dans le sérum ou le plasmahépariné. Ce test constitue une aide àl'évaluation des désordres de lacroissance.Référence catalogue :L5KGB2 (200 tests)


Code produit : BP3 Code couleur : rouge

IntroductionLes facteurs de croissance Insulin-like(IGF-I, IGF-II) appartiennent à une famillede peptides impliqués dans la régulationde la croissance cellulaire, leurs actionssont initiées par la fixation aux protéinesde liaison de facteur de croissanceinsuline-like.6 Six protéines de liaison(IGFBP-1 à IGFBP-6) ont été décrites.5IGFBP-3 est la forme prédominante.6IGFBP-3 est un peptide comportant 264acide aminés (MW 29kD) qui forme uncomplexe glycoprotéique de 150kDcomposé de l'IGFBP-3 lui-même et d'unemolécule IGF.2,6 Approximativement 95%de l'IGF-I et IGF-II sont liés àl' IGFBP-3, ce qui fait de cette protéine leporteur majeur du facteur de croissanceinsulin-like en circulation.5,6 La fonction dela protéine de liaison est d'étendre lademi-vie des facteurs de croissance dansla circulation à plusieurs heures.1,5,6

Le dosage IGFBP-3 est une aide dansl'évaluation des désordres de lacroissance. Elle est dépendante del'hormone de croissance (GH) et, parconséquent, utile dans l'évaluation de lasecretion de GH.

Principe du testIMMULITE 2500 IGFBP-3 est un dosageimmunométrique chimiluminescentenzymatique en phase solide.Incubation : 30 minutes.

Recueil des échantillonsIl est recommandé de clarifier leséchantillons hyperlipémiques parultracentrifugation.Des échantillons hémolysés peuvent êtrerévélateurs d'une préparation inadéquatedu prélèvement avant son envoi aulaboratoire ; il faudra donc interpréter lesrésultats avec prudence.

La centrifugation des échantillonssériques avant la formation complète ducaillot peut entraîner la présence defibrine. Pour éviter les résultats erronésdûs à la présence de fibrine, s'assurer dela formation complète du caillot avant decentrifuger les échantillons. Certainséchantillons, en particulier ceux provenantde patients sous anti-coagulants, peuvent

nécessiter un temps plus long pour laformation du caillot.

Des tubes pour prélèvements sanguinsprovenant de fabricants différents peuventdonner des résultats différents, selon lesmatériaux et additifs utilisés, y comprisgels ou barrières physiques, activateursde la coagulation et/ou anticoagulants. Lecoffret IMMULITE 2500 IGFBP-3 n'a pasété testé sur tous les types de tubespossibles.Volume nécessaire : 5 µl de sérum ou deplasma hépariné.Conservation : Les échantillonsconservés à +2/8°C ou à températureambiante (22°C) sont stables pendant 24heures. Les échantillons conservés à–25°C sont stables pendant 12 mois.9

Facteur de prédilution automatique :100

Précautions d'emploiRéservé à un usage diagnostique in vitro.Réactifs : Conserver les réactifs à +2°/+8 °C. Éliminer les déchets conformémentaux lois en vigueur.

Respecter les précautions d'emploi etmanipuler tous les composants du coffretcomme des produits potentiellementinfectieux. Les réactifs dérivés de produitshumains et utilisés dans ce coffret ont subiun test sérologique pour la Syphilis et destests de dépistage pour les anticorps anti-VIH1 et 2, anti- VHC et pour l'antigène desurface de l'hépatite B, qui se sont tousavérés négatifs.

Substrat chimiluminescent : Éviter toutecontamination et l'exposition directe à lalumière solaire (voir la fiche technique).Eau : utiliser de l'eau distillée oudésionisée.

Matériel fourniLes composants de la trousse ne peuventêtre utilisés que conjointement. Lesétiquettes à l'intérieur du coffret sontnécessaires au dosage.

Cartouche de billes IGFBP-3 (L2GB12)Avec code-barre. 200 billes revêtuesd'anticorps monoclonal murin anti-IGFBP-3. Stable à +2/ +8 °C jusqu'à la date depéremption.L5KGB2 : 1 cartouche.


Cartouche à réactif IGFBP-3 (L2GBA2)Avec code-barre. 11,5 ml d'anticorpsmonoclonal murin anti-IGFBP-3 conjuguéà de la phophatase acaline (intestins deveaux) dans un tampon. Stable à +2/+8 °C jusqu'à la date de péremption.L5KGB2 : 1 cartouche.Avant l'emploi, retirer la partie supérieurede l'étiquette au niveau des perforationsen ayant soin de ne pas endommager lecode-barres. Retirer le film protecteursitué sur la partie supérieure de lacartouche-réactif ; insérer le couverclecoulissant entre les glissières sur ledessus de la cartouche-réactif.

Ajusteurs IGFBP-3 (LGBL, LGBH)Deux flacons (Bas et Haut), de 4 mlchacun, contenant de l'IGFBP-3 dans unematrice protéine/tampon. (Aucuneprédilution n'est requise). Stable à +2–8°Cpendant 30 jours après ouverture ou 6mois (aliquoté) à –20°C.L5KGB2 : 1 jeu.

Avant de procéder à un ajustement, placerles étiquettes correspondant à l'aliquot(fournies avec le coffret) sur des tubes enverre de sorte que les code-barres soientlisibles par le lecteur.

Diluant échantillon IGFBP-3 (L2GBZ)Pour la dilution automatique à bord deséchantillons de patients et des contrôles.55 ml d'une matrice concentrée (prête àl'emploi) protéine/tampon sans IGFBP-3.Stable à +2–8°C pendant 30 jours aprèsouverture, ou 6 mois à –20°C.L5KGB2 : 1 flaconLes étiquettes code-barres sont fourniesavec le Diluant. Avant utilisation, placerl'étiquette appropriée sur un tube de16 × 100 mm de façon que le code-barrepuisse être lu par le lecteur de l'appareil.L5KGB2 : 3 étiquettes.

Composants du coffret fournisséparémentL2SUBM : Substrat chimiluminescentL2PWSM : Solution de lavageL2KPM : Coffret de décontamination del'aiguille de prélèvementLRXT : Godets réactionnels (jetables)L2ZT : 250 Tubes À essai De Diluantéchantillon (16 × 100 mm)L2ZC : 250 Bouchons pour tubes dediluants

LGCOCM : Contrôle à deux niveauxcontenant de l'IGF-1 et de l'IGFBP-3.

Egalement requisEau distillée ou désionisée ; tubes;Contrôle.

Protocole de dosageNoter que pour des performancesoptimales, il est important de réalisertoutes les procédures de maintenance deroutine selon les instructions du Manueld'Utilisation IMMULITE 2500.

Se reporter au manuel d'utilisation del'IMMULITE 2500 pour : la préparation, ledémarrage du système, le dilution, lesajustements, le dosage et les procéduresde contrôle de qualité.

Intervalle d'ajustement recommandé :2 semaines.Echantillons pour le Contrôle deQualité : Utiliser des pools de contrôlesou de sérum avec au moins deux niveaux(bas et haut) d'IGFBP-3.

Valeurs de référenceLes valeurs de référence ont été obtenuesavec l'automate IMMULITE.La bonne corrélation entre les testsIMMULITE 2500 IGFBP-3 et IMMULITE2000 IGFBP-3 (voir Comparaison deMéthode 1) et la bonne corrélation entreles test IMMULITE 2000 IGFBP-3 etIMMULITE IGFBP-3 (voir Comparaison deMéthode 2), font que ces trois dosagesont des valeurs de référencesuperposables.Une étude des valeurs de références faiteavec le coffret IMMULITE IGFBP-3 deDPC sur 85 échantillons de nouveaux nés(1–15 jours) ainsi que sur 1 499échantillons pédiatriques et adultes d'unepopulation apparemment en bonne santéa donné les résultats suivants, présentésdans les graphiques et les tableaux ci-dessous.

Valeurs de références IGFBP-3,nouveaux nés :Valeurs IGFBP-3 pour les nourrissons de1–7 jours (n = 45) :95%ile : 0,7 µg/ml

Valeurs IGFBP-3 pour les nourrissons de8–15 jours (n = 40) :


médiane : 0,9 µg/ml,Intervalle centré à 95% : 0,5 – 1,4 µg/ml

Données pédiatriques IGFBP-3IMMULITE Results for 793 Healthy Children

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19

Age, years

12

48

IGFB

P-3

, mg/

L

Valeurs de références pédiatriquesIGFBP-3

IGFBP-3, µg/ml

Age, ans MédianeIntervalle centré à

95%

1 1,6 0,7 – 3,6

2 1,8 0,8 – 3,9

3 2,0 0,9 – 4,3

4 2,2 1,0 – 4,7

5 2,4 1,1 – 5,2

6 2,7 1,3 – 5,6

7 2,9 1,4 – 6,1

8 3,2 1,6 – 6,5

9 3,6 1,8 – 7,1

10 4,1 2,1 – 7,7

11 4,5 2,4 – 8,4

12 4,9 2,7 – 8,9

13 5,4 3,1 – 9,5

14 5,8 3,3 – 10

15 5,9 3,5 – 10

16 5,7 3,4 – 9,5

17 5,3 3,2 – 8,7

18 4,9 3,1 – 7,9

19 4,6 2,9 – 7,3

20 4,6 2,9 – 7,2

Données adultes IGFBP-3IMMULITE Results for 706 Healthy Adults

25 35 45 55 65 75 85

Age, years

12

48

IGFB

P-3

, mg/

L

Valeurs de références Adultes IGFBP-3

IGFBP-3, µg/ml

Age, ans MédianeIntervalle centré à

95%

21-25 5,1 3,4 – 7,8

26-30 5,2 3,5 – 7,6

31-35 4,9 3,5 – 7,0

36-40 4,8 3,4 – 6,7

41-45 4,7 3,3 – 6,6

46-50 4,7 3,3 – 6,7

51-55 4,8 3,4 – 6,8

56-60 4,8 3,4 – 6,9

61-65 4,6 3,2 – 6,6

66-70 4,3 3,0 – 6,2

71-75 4,0 2,8 – 5,7

76-80 3,5 2,5 – 5,1

81-85 3,1 2,2 – 4,5


Valeurs de référence selon laclassification de Tanner IGFBP-3

IGFBP-3, µg/ml

Tanner Stage MédianeIntervalle centré à

95%

Combiné, n = 420

1 3,6 1,3 – 6,3

2 4,2 2,4 – 6,7

3 5,3 3,3 – 9,1

4 6,2 3,5 – 8,6

5 5,4 2,7 – 8,9

Femme, n = 226

1 3,6 1,2 – 6,4

2 4,5 2,8 – 6,9

3 5,3 3,9 – 9,4

4 5,9 3,3 – 8,1

5 5,6 2,7 – 9,1

Homme, n = 194

1 3,6 1,4 – 5,2

2 3,9 2,3 – 6,3

3 5,4 3,1 – 8,9

4 6,5 3,7 – 8,7

5 5,2 2,6 – 8,6

Utiliser ces valeurs à titre indicatifuniquement. Chaque laboratoire devraétablir ses propres valeurs de référence.

LimitesLes anticorps hétérophiles du sérumhumain peuvent réagir avec lesimmunoglobulines faisant partie descomposants du coffret et interférer avecles immunodosages in vitro. [Voir BoscatoLM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Les échantillonsprovenant de patients fréquemmentexposés aux animaux ou aux produitssériques d'origine animale peuventprésenter ce type d'interférence pouvantpotentiellement donner un résultatanormal. Ces réactifs ont été mis au pointafin de minimiser le risque d'interférence,cependant des interactions potentiellesentre des sérums rares et les composantsdu test peuvent se produire. Dans un butdiagnostique, les résultats obtenus avecce dosage doivent toujours être utilisés enassociation avec un examen clinique,

l'histoire médicale du patient et d'autresrésultats.

Performances du testConsulter les tableaux et graphiques pourobtenir les données représentatives desperformances de ce test. Les résultatssont donnés en µg/ml. (En l'absenced'indication contraire, tous les résultats ontété obtenus sur des échantillons sériquesrecueillis en tubes, sans gel ni activateurde la coagulation.)L'IMMULITE 2500 utilise, pour les réactifset les billes, la même composition quel'IMMULITE 2000. Toutes lescaractéristiques des performances sontéquivalentes entre les deux plateformes.Toutes les données relatives auxPerformances du Test, exceptée laComparaison de Méthode 1, ont étéobtenues avec l'automate IMMULITE2000.Facteur de conversion :µg/ml × 1 → mg/lµg/ml × 34,78 → nmol/lDomaine de mesure : jusqu'à 16 µg/ml(556 nmol/l) [WHO NIBSC Réactif 93/560)Sensibilité analytique : 0,1 µg/mlAccoutumance aux doses élevées :aucune jusqu'à 340 µg/ml.

Précision : les échantillons ont été dosésen duplicata sur une période de 20 jours,avec deux séries par jours, soit 40 séries et80 replicata au total. (Voir le tableau"Precision".)Test de dilution : Les échantillons ont étédilués en série et ensuite prétraités avecla prédilution automatique à bord au1:100. (Voir le tableau "Linearity".)Test de récupération : Des échantillonschargés dans un rapport de 1 à 19 avectrois solutions d' IGFBP-3 (32, 70 et140 µg/ml) ont été dosés. (Voir le tableau"Recovery".)Spécificité : Ce test est hautementspécifiques de l'IGFBP-3, avec une trèsfaible réaction croisée aux autressubstances présentes naturellement. (Voirle tableau « Specificity ».)Bilirubine : La présence de bilirubine,conjuguée ou non, n'a aucun effet sur ledosage ni sur sa précision si laconcentration ne dépasse pas 200 mg/l.


Hémolyse : La présence d'hémoglobinene présente aucun effet sur les résultats nisur la précision du dosage si laconcentration ne dépasse pas 550 mg/dl.Lipémie : La présence de triglycéridesjusqu'à une concentration de 3 000 mg/dln'interfère ni sur la précision du dosage, nisur les résultats.Comparaison de méthodes 1 : Le testIMMULITE 2500 IGFBP-3 a été comparéau test IMMULITE 2000 IGFBP-3 de DPCsur 98 échantillons. (intervalle deconcentrations : de environ 1,5 à10 µg/ml. Voir graphique 1.) Parrégression linéaire :(IML 2500) = 1,07 (IML 2000) – 0,15 µg/mlr = 0,979

Moyennes :5,0 µg/ml (IMMULITE 2500)4,9 µg/ml (IMMULITE 2000)

Comparaison de méthodes 2 : Le testIMMULITE 2000 IGFBP-3 a été comparéau test IMMULITE IGFBP-3 de DPC sur218 échantillons. (intervalle deconcentrations : de environ 0,6 à12 µg/ml. Voir graphique 2.) Parrégression linéaire :(IML 2000) = 0,92 (IML) + 0,35 µg/mlr = 0,952

Moyennes :5,1 µg/ml (IMMULITE 2000)5,2 µg/ml (IMMULITE)

Assistance techniqueContacter votre distributeur national. EnFrance distribué par DPC France 90 bdNational 92257 La Garenne-Colombes.Fabriqué par EURO/DPC Ltd. dans le cadre d'unSystème Qualité enregistré sousISO 13485:2003.

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IMMULITE 2500 IGFBP-3Uso: Ad uso diagnostico in vitro conl'Analizzatore IMMULITE 2500 — per lamisurazione quantitativa della proteinalegante il fattore della crescita insulinosimile 3 (IGFBP-3) nel siero umano o nelplasma eparinizzato, quale ausilio nellavalutazione dei disturbi della crescita.Codice: L5KGB2 (200 test)

Codice del Test: BP3 Colore: Rosso

Riassunto e spiegazione delTestI fattori di crescita insulino-simili (IGF-I,IGF-II) sono una famiglia di peptidicoinvolti nella regolazione della crescitacellulare, le cui azioni sono mediatelegando al fattore di crescita insulino-simile le proteine leganti.6 Sono statedescritte sei proteine leganti dallaIGFBP-1 alla IGFBP-6.5 L' IGFBP-3 èquella maggiormente predominante.6L'IGFBP-3 è un peptide formato da 264aminoacidi (MW 29kD) che forma uncomplesso di glicoproteine da 150kDformato dall' IGFBP-3 e da una molecolal'IGF.2,6 Circa il 95% dell'IGF-I e dell'IGF-IIsono legati all'IGFBP-3, che rende questaproteina il carrier prevalente dei fattoridella crescita insulino-simili presenti nelcircolo. 5,6 La funzione della proteinalegante è estendere l'emivita dei fattoridella crescita in circolo a diverse ore.1,5,6

L'IGFBP-3 è utilizzata quale ausilio nellavalutazione dei disturbi della crescita. E'dipendente dall'ormone della crescita(GH) e quindi utile nella valutazione dellasecrezione di GH.

Procedura del DosaggioIl dosaggio IMMULITE 2500 IGFBP-3 è undosaggio immunometrico inchemiluminescenza in fase solida,marcato con enzima.Incubazione: 30 minuti.

Prelievo dei CampioniSi consiglia l'utilizzo di un'ultracentrifugaper schiarire i campioni lipemici.I campioni emolizzati possono indicare untrattamento non idoneo del campioneprima dell'arrivo al laboratorio; per questomotivo, i risultati devono essereinterpretati con prudenza.

La centrifugazione dei campioni di sieroprima che la coagulazione sia completapuò produrre fibrina. Per evitare risultatierrati dovuti alla presenza di fibrina,assicurarsi che il processo dicoagulazione sia completo prima dicentrifugare i campioni. Alcuni campioni,in modo particolare quelli di pazientisottoposti a terapia con anticoagulanti,


possono richiedere tempi di coagulazionepiù lunghi.

Provette per il prelievo di sangue diproduttori diversi possono dare valoridifferenti, a seconda dei materiali e degliadditivi usati, incluso gel o barriere fisiche,attivatori di coaguli e/o anticoagulanti.L'IMMULITE 2500 IGFBP-3 non é statoverificato con tutte le possibili variazioni ditipi di provette.Volume Richiesto: 5 µL di siero o diplasma eparinizzato.Conservazione: I campioni conservati a2–8°C o a temperatura ambiente (22°C)rimangono stabili fino a 24 ore. Campioniconservati a –25°C sono stabili per12 mesi.9

Fattore Automatico di Pre-Diluizione:100

Avvertenze e precauzioniAd uso diagnostico in vitro.

Reagenti: Conservare a 2–8°C. Eliminaresecondo le normative di legge vigenti.Seguire le precauzioni generali, emanipolare tutti i componenti come sefossero potenzialmente infetti. I materialiderivati dal sangue umano sono statitestati con esito negativo per la sifilide, glianticorpi anti-HIV 1 e 2, per l'Antigene diSuperficie dell'Epatite B e gli AnticorpiAnti-Epatite C.Substrato chemiluminescente: Evitarela contaminazione e l'esposizione alla lucesolare diretta. (Vedi metodica).Acqua: Utilizzare solo acqua distillata odeionizzata.

Materiali fornitiI componenti costituiscono un unico set.Le etichette all'interno della confezionesono necessarie per eseguire i dosaggi.

Confezione di Sferette IGFBP-3(L2GB12)Con codice a barre. 200 biglie, coattatecon un anticorpo monoclonale murino anti-IGFBP-3. Stabile a 2–8°C fino alla data discadenza.L5KGB2: 1 confezione.

Porta Reagente IGFBP-3 (L2GBA2)Con codice a barre. 11,5 mL di fosfatasialcalina (intestino di vitello) coniugata conun anticorpo monoclonale murino anti-IGFBP-3, in un tampone. Stabile a 2–8°Cfino alla data di scadenza.L5KGB2: 1 porta reagente.Prima dell'utilizzo rimuovere la partesuperiore dell'etichetta lungo laperforazione senza danneggiare il codicea barre. Togliere il foglio protettivo dallaparte superiore del flacone. Far scattarenella corretta posizione il coperchioscorrevole lungo le guide del coperchiodel reagente

Calibratori IGFBP-3 (LGBL, LGBH)Due flaconi (Basso ed Alto), 4 mLciascuno, di IGFBP-3, in unamatrice/tampone proteica. (Non è richiestaprediluizione) Stabile a 2–8°C per 30giorni dopo l'apertura o per 6 mesi(aliquotato) a –20°C.L5KGB2: 1 set.

Prima di ricalibrare collocare le etichettegiuste (fornite col kit) sulle provette dellealiquote cosicché i codici a barre possanoessere registrati dal lettore.

Diluente del Campione IGFBP-3(L2GBZ)Per la diluizione interna dei campioni e deicontrolli dei pazienti. 55 mL di unamatrice/tampone concentrato (prontoall'uso) privo di anticorpi IGFBP-3. Stabilea 2–8°C per 30 giorni dopo l'apertura oper 6 mesi a –20°C.L5KGB2: 1 flacone.Vengono Fornite Le provette da utilizzarsicon il diluente. Prima dell'utilizzo,collocare un'etichetta appropriata su unaprovetta 16 x 100 mm cosicchè i codici abarre possano essere letti dal lettoreinterno.L5KGB2: 3 etichette.

Componenti del kit fornitiseparatamenteL2SUBM: Substrato ChemiluminescenteL2PWSM: Tampone di lavaggio dell'AgoL2KPM: Kit di Pulizia dell'AgoLRXT: Tubi di Reazione (monouso)L2ZT: 250 Provette (16 × 100 mm) perDiluente del CampioneL2ZC: 250 Tappini per Provette perDiluente del Campione


LGCOCM: Controlli a due livelli con IGF-1e IGFBP-3.

Materiali richiestiAcqua distillata o deionizzata; Provette;controlli.

Procedura del DosaggioAttenzione: per prestazioni ottimali, èimportante effettuare le procedure dimanutenzione di routine cosiccomedefinito nel Manuale dell'OperatoreIMMULITE 2500.

Vedi Manuale dell'OperatoreIMMULITE 2500 per: preparazione, messaa punto, diluizione, calibrazione, dosaggioe procedure di controllo di qualità.Intervallo di Calibrazione Consigliato:2 settimane.

Campioni per il Controllo di Qualità:Utilizzare controlli o pool di campioni conalmeno due livelli (basso ed alto) diIGFBP-3.

Valori AttesiI valori del range di riferimento sono statigenerati utilizzando.Sulla base del rapporto tra IMMULITE2500 IGFBP-3 e IMMULITE 2000 IGFBP-3 (vedi Comparazione dei Metodi 1), ed ilrapporto tra IMMULITE 2000 IGFBP-3 eIMMULITE IGFBP-3 (vedi Comparazionedei Metodi 2), ci si attende che tutti e tre Idosaggi abbiano gli stessi range diriferimento.Uno studio sui range di riferimentoeffettuato con il dosaggio DPC IMMULITEIGFBP-3 su 85 campioni neonatali (da 1 a15 giorni d'età) cosiccome su 1 499campioni pediatrici e di adulti provenientida una popolazione apparentementesana, ha prodotto i seguenti risultati,presentati nelle tabelle e nei grafici di cuidi seguito.

Range di Riferimento per l'IGFBP-3NeonataleValori di IGFBP-3 da 1–7 giorni (n = 45):95°ile: 0,7 µg/mL

Valori di IGFBP-3 da 8–15 giorni (n = 40):mediana: 0,9 µg/mL,range centrale al 95%: 0,5 – 1,4 µg/mL

IGFBP-3 Dati PediatriciIMMULITE Results for 793 Healthy Children

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19

Age, years

12

48

IGFB

P-3

, mg/

L

IGFBP-3 Range di RiferimentoPediatrico

IGFBP-3, µg/mL

Età,anni Mediana

Range Centrale95% 0.1%ile

1 1,6 0,7 – 3,6

2 1,8 0,8 – 3,9

3 2,0 0,9 – 4,3

4 2,2 1,0 – 4,7

5 2,4 1,1 – 5,2

6 2,7 1,3 – 5,6

7 2,9 1,4 – 6,1

8 3,2 1,6 – 6,5

9 3,6 1,8 – 7,1

10 4,1 2,1 – 7,7

11 4,5 2,4 – 8,4

12 4,9 2,7 – 8,9

13 5,4 3,1 – 9,5

14 5,8 3,3 – 10

15 5,9 3,5 – 10

16 5,7 3,4 – 9,5

17 5,3 3,2 – 8,7

18 4,9 3,1 – 7,9

19 4,6 2,9 – 7,3

20 4,6 2,9 – 7,2


IGFBP-3 Dati negli AdultiIMMULITE Results for 706 Healthy Adults

25 35 45 55 65 75 85

Age, years

12

48

IGFB

P-3

, mg/

L

IGFBP-3 Range di Riferimento negliAdulti

IGFBP-3, µg/mL

Età,anni Mediana

Range Centrale95% 0.1%ile

21-25 5,1 3,4 – 7,8

26-30 5,2 3,5 – 7,6

31-35 4,9 3,5 – 7,0

36-40 4,8 3,4 – 6,7

41-45 4,7 3,3 – 6,6

46-50 4,7 3,3 – 6,7

51-55 4,8 3,4 – 6,8

56-60 4,8 3,4 – 6,9

61-65 4,6 3,2 – 6,6

66-70 4,3 3,0 – 6,2

71-75 4,0 2,8 – 5,7

76-80 3,5 2,5 – 5,1

81-85 3,1 2,2 – 4,5

IGFBP-3 Dati di Riferimento negli Stadidi Tanner

IGFBP-3, µg/mL

Stadi diTanner Mediana

Range Centrale95%

Combinati, n = 420

1 3,6 1,3 – 6,3

2 4,2 2,4 – 6,7

3 5,3 3,3 – 9,1

4 6,2 3,5 – 8,6

5 5,4 2,7 – 8,9

Femmine, n = 226

1 3,6 1,2 – 6,4

2 4,5 2,8 – 6,9

3 5,3 3,9 – 9,4

4 5,9 3,3 – 8,1

5 5,6 2,7 – 9,1

Maschi, n = 194

1 3,6 1,4 – 5,2

2 3,9 2,3 – 6,3

3 5,4 3,1 – 8,9

4 6,5 3,7 – 8,7

5 5,2 2,6 – 8,6

Considerare questi limiti soltanto comelinee guida. Ogni laboratorio dovrebbestabilire i propri range di riferimento.

LimitiGli anticorpi eterofili presenti nel sieroumano possono reagire con leimmunoglobuline presenti nellecomponenti del dosaggio provocandoun'interferenza con i dosaggi in vitro. [VediBoscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Campioni di pazienti routinariamenteesposti agli animali o a prodotti derivati dasiero di animali possono presentarequesto tipo di interferenza causapotenziale di risultati anomali. Questireagenti sono stati formulati perminimizzare il rischio di interferenze,tuttavia, possono verificarsi interazionipotenziali tra sieri rari e componenti deltest. A scopo diagnostico, i risultati ottenuticon questo dosaggio devono sempreessere utilizzati unitamente all'esame


clinico del paziente alla sua anamnesi ead altre indagini di laboratorio.

Prestazioni del DosaggioVedi tabelle e grafici per datirappresentativi delle prestazioni deldosaggio. I risultati sono espressi inµg/mL. (Se non diversamente indicato,tutti i risultati sono stati generati dacampioni di siero prelevati in tubi senzabarriere di gel o additivi che favoriscano lacoagulazione.)L'IMMULITE 2500 utilizza gli stessireagenti e la stessa formulazione dellesferette dell'IMMULITE 2000. Tutte lecaratteristiche delle prestazioni sonoequivalenti tra le due piattaforme.Tutti i dati delle prestazioni ad eccezionedi quelli della Comparazione di Metodi 1sono stati generati sull'analizzatoreIMMULITE 2000.Fattore di Conversione:µg/mL × 1 → mg/Lµg/mL × 34,78 → nmol/LRange di Calibrazione: Fino a 16 µg/mL(556 nmol/L) [WHO NIBSC Reagente93/560)Sensibilità Analitica: 0,1 g/mLEffetto Gancio a Dosi Elevate: Nessunofino a 340 µg/mL.

Precisione: I campioni sono stati elaboratiin doppio in 20 giorni, due sedute al giorno,per un totale di 40 sedute ed 80 replicati.(Vedi tabella "Precision".)

Linearità: I campioni sono stati diluitiserialmente e quindi processati utilizzandola prediluizione interna automatica 1:100(Vedi tabella "Linearity").

Recupero: Sono stati dosati campioni 1:19 con tre soluzioni di IGFBP-3 (32, 70 e140 µg/mL). (Vedi tabella “Recovery” perdati rappresentativi).

Specificità: L'anticorpo è molto specificoper l'IGFBP-3 con una bassacrossreattività verso altre sostanzeesistenti in natura. (Vedi tabella"Specificity".)

Bilirubina: La presenza di bilirubinaconiugata e non coniugata inconcentrazioni fino a 200 mg/L non hanessun effetto entro il range di precisionedel dosaggio.

Emolisi: La presenza di emoglobina inconcentrazioni fino a 550 mg/dL non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.Lipemia: La presenza di trigliceridi inconcentrazioni fino a 3 000 mg/dL non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.Comparazione di Metodi 1: Il dosaggioIMMULITE 2500 IGFBP-3 è statocomparato al dosaggio DPC IMMULITE2000 IGFBP-3 su 98 campioni. (Range diconcentrazione: circa da 1,5 a 10 µg/mL.Vedi grafico 1.) Mediante regressionelineare:(IML 2500) = 1,07 (IML 2000) – 0,15 µg/mLr = 0,979

Valore Medio:5,0 µg/mL (IMMULITE 2500)4,9 µg/mL (IMMULITE 2000)

Comparazione di Metodi 2: Il dosaggioIMMULITE 2000 IGFBP-3 è statocomparato al dosaggio DPC IMMULITEIGFBP-3 su 218 campioni. (Range diconcentrazione: circa da 0,6 a 12 µg/mL.Vedi grafico 2.) Mediante regressionelineare:(IML 2000) = 0,92 (IML) + 0,35 µg/mLr = 0,952

Valore Medio:5,1 µg/mL (IMMULITE 2000)5,2 µg/mL (IMMULITE)

Assistenza TecnicaAll'Estero: Contattare il proprioDistributore Nazionale.Prodotto dalla EURO/DPC Ltd. nell'ambito di unSistema di Qualità Certificato ISO 13485:2003.

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IMMULITE IGFBP-3Utilização: Para uso diagnóstico in vitrocom o IMMULITE 2500 para odoseamento quantitativo do factor decrescimento insulinóide ligado á proteina3 (IGFBP-3) em soro ou plasmaheparinizado como ajuda no estudo dealterações de crescimento.Números de catálogo:L5KGB2 (200 testes)


Código do teste: BP3 Cor: Vermelho

Sumário e explicação do testeOs factores de crescimento insulinóides(IGF-I, IGF-II) são uma família de péptidosenvolvidos na regulação do crescimentocelular, acções que são mediadas porligação das proteinas ao factor decrescimento insulinóide.6 Seis proteinasde ligação (IGFBP-1 até IGFBP-6) foramdescritas.5 A IGFBP-3 é a predominante.6A IGFBP-3 é um peptido composto por264 péptidos aminoácidos (MW 29kD) queformam um complexo glicoproteíco de150kD constituido pela própria IGFBP-3 euma molécula de IGF.2,6

Aproximadamente 95% da IGF-I e IGF-IIestão ligadas à IGFBP-3, o que torna estaproteína o maior transportador dosfactores de crescimento insulinóides emcirculação.5,6 A função das proteinas deligação é prolongar a vida média dosfactores de crescimento em circulaçãodurante várias horas.1,5,6

A IGFBP-3 é usada como ajuda no estudodas desordens de crescimento. Édependente da hormona de crescimento(GH), sendo por isso útil no estudo dasecreção da hormona de crescimento(GH).

Princípio do ProcedimentoO kit de IGFBP-3 no IMMULITE 2500apresenta-se como um ensaioimunométrico quimioluminescente emfase sólida.Incubação: 30 minutos.

ColheitaPara clarear amostras lipémicasrecomenda-se a ultra-centrifugação.Amostras hemolisadas podem indicartratamento incorrecto de uma amostraantes do envio para o laboratório; portantoos resultados devem ser interpretadoscom cuidado.

A centrifugação de amostras de soroantes da formação completa do coágulopode resultar na presença de fibrina. Paraprevenir resultados erróneos, devido àpresença de fibrina, certifique-se que aformação do coágulo se completou, antesda centrifugação das amostras. Algumasamostras, em especial as de doentessubmetidos a terapia anti-coagulante,

podem requerer um maior tempo deformação do coágulo.

Os tubos para colheita sanguínea dediferentes fabricantes, podem originardiferentes valores, dependendo dosmateriais e aditivos, incluíndo gel oubarreiras fisicas, activadores do coáguloe/ou anti coagulantes. IMMULITE 2500IGFBP-3 não foram ainda testados comtodas as possiveis variações originadaspelos tipos de tubos.Volume de Amostra: 5 µL de soro ouplasma heparinizado.Estabilidade: Amostras armazenadas a2–8°C ou à temperatura ambiente (22°C)são estáveis até 24 horas. Amostrasarmazenadas a –25°C são estáveisdurante 12 meses.9

Factor de pré-diluição automática: 100

PrecauçõesPara uso de diagnóstico in vitro.

Reagentes: Manter a 2–8°C. Eliminar deacordo com as leis aplicáveis.Manipule com as devidas precauçõestodos os materiais capazes de transmitirdoenças infecciosas. As matérias primas,obtidas de soro humano, foram testadas,revelando resultados negativos para asífilis, para os anticorpos do vírus daimunodeficiência humana (HIV) 1 e 2;para o antigénio de superfície da hepatiteB (HBsAg) e para os anticorpos do vírusda hepatite C.Substrato quimioluminescente: Evitecontaminação e exposição à luz directa(ver bula do substrato).

Água: Utilize água destilada oudesionizada.

Materiais FornecidosOs componentes formam um conjunto unoe indivisível. Os códigos de barras nointerior das caixas são necessárias para oensaio.

Embalagem de pérolas de IGFBP-3(L2GB12)Com código de barras. 200 pérolasrevestidas com anticorpo monoclonalmurino anti-IGFBP-3. Estável até a datade validade a 2–8°C.L5KGB2: 1 embalagem.


Embalagem de reagente de IGFBP-3(L2GBA2)Com código de barras. 11,5 mL defosfatase alcalina (de intestino de vitela)conjugado a anticorpo monoclonal murinoanti-IGFBP-3 em tampão. Estável até adata de validade a 2–8°C.L5KGB2: 1 embalagem.

Antes de utilizar, retire a etiqueta deprotecção da tampa deslizante; levante atampa, tire o resto da etiqueta comcuidado para não danificar o código debarras. Remova o selo de alumínio docimo da embalagem, encaixe a tampadeslizante nas ranhuras e verifique sedesliza.

Ajustes de IGFBP-3 (LGBL, LGBH)Dois frascos (baixo e alto), 4 mL cada, deIGFBP-3 num tampão de matriz proteica.(não é necessário pré-diluição) Estável a2–8°C por 30 dias após a abertura ou por6 meses (aliquotado) a –20°C.L5KGB2: 1 conjunto.

Antes de realizar qualquer ajuste, coloqueas etiquetas da alíquota apropriadas(fornecidas com o "kit") nos tubos deamostra de forma a que os códigos debarras possam ser lidos pelo dispositivode leitura do aparelho.

Diluente de amostras de IGFBP-3(L2GBZ)Para a diluição no instrumento deamostras de doentes e controles. 55 mLde um tampão de matriz proteicaconcentrada (pronta a usar) livre deIGFBP-3. Estável a 2–8°C por 30 diasapós a abertura ou por 6 meses a –20°C.L5KGB2: 1 frascoEtiquetas de código de barras sãofornecidas para usar com o diluente.Antes de usar, colocar a etiquetaapropriada num tubo de teste(16 × 100 mm) de modo a que o códigode barras possa ser lido pelo dispositivode leitura do aparelho.L5KGB2: 3 etiquetas

Componentes do kit fornecidosseparadamenteL2SUBM: Substrato quiomioluminescenteL2PWSM: Solução de lavagemL2KPM: Kit de limpeza do pipetadorLRXT: Tubos de reacção (descartáveis)L2ZT: 250 Tubos de diluente da amostra

(16 × 100 mm)L2ZC: 250 Tampas para tubos de diluenteda amostraLGCOCM: Controle de dois níveis numtampão de matriz proteica contendo IGF1e IGFBP-3.

Também necessário :Água destilada ou desionizada; tubos deamostra; controlos.

Procedimento de doseamentoTer em atenção que para obter umdesempenho óptimo, é importanteefectuar todos os procedimentos rotineirosde manutenção, conforme indicado no"Manual do Operador" do IMMULITE2500.

Consulte o Manual do Operador deIMMULITE 2500 para para instruçõessobre preparação, diluição, ajuste,doseamento e procedimentos de controlode qualidade.Intervalo entre ajustes aconselhável:2 semanas.Amostras de controlo de Qualidade:Usar controlos ou “pool” de amostras compelo menos dois níveis (baixo e alto) deIGFBP-3.

Valores de ReferênciaA gama de valores de referência foi obtidano sistema IMMULITE.

Com base na semelhança dos kits deIGFBP-3 do IMMULITE 2500 e doIMMULITE 2000 (ver Comparação deMétodos 1), bem como na comparaçãoentre a IGFBP-3 do IMMULITE 2000 e doIMMULITE (ver Comparação de Métodos2), pode-se esperar de todos os trêsensaios valores de referênciasemelhantes.Um estudo de referência efectuado com okit de IGFBP-3 no IMMULITE em 85amostras neonatais (1 a 15 dias deidade), bem como em 1 499 amostraspediátricas e adultas de uma populaçãoaparentemente saudável, fornecendo osseguintes resultados apresentados embaixo nas tabelas e graficos. Valores dereferência de IGFBP-3 em amostrasneonatais.


Valores neonatal de IGFBP-3Valores de IGFBP-3 de 1–7 dias (n = 45):95%ile: 0,7 µg/mLValores de IGFBP-3 de 8–15 dias (n = 40):média: 0,9 µg/mL,zona de 95% : 0,5 – 1,4 µg/mL

Valores pediátricos de IGFBP-3IMMULITE Results for 793 Healthy Children

1 3 5 7 9 11 13 15 17 19

Age, years

12

48

IGFB

P-3

, mg/

L

Valores de referência pediátricos deIGFBP-3

IGFBP-3, µg/mL

Média,idades Mediana Zona de 95%

1 1,6 0,7 – 3,6

2 1,8 0,8 – 3,9

3 2,0 0,9 – 4,3

4 2,2 1,0 – 4,7

5 2,4 1,1 – 5,2

6 2,7 1,3 – 5,6

7 2,9 1,4 – 6,1

8 3,2 1,6 – 6,5

9 3,6 1,8 – 7,1

10 4,1 2,1 – 7,7

11 4,5 2,4 – 8,4

12 4,9 2,7 – 8,9

13 5,4 3,1 – 9,5

14 5,8 3,3 – 10

15 5,9 3,5 – 10

16 5,7 3,4 – 9,5

17 5,3 3,2 – 8,7

18 4,9 3,1 – 7,9

19 4,6 2,9 – 7,3

20 4,6 2,9 – 7,2

Valores de adultos saudáveis deIGFBP-3

IMMULITE Results for 706 Healthy Adults

25 35 45 55 65 75 85

Age, years

12

48

IGFB

P-3

, mg/

L

VaIores de referência de IGFBP-3 emadultos

IGFBP-3, µg/mL

Idade Mediana Zona de 95%

21-25 5,1 3,4 – 7,8

26-30 5,2 3,5 – 7,6

31-35 4,9 3,5 – 7,0

36-40 4,8 3,4 – 6,7

41-45 4,7 3,3 – 6,6

46-50 4,7 3,3 – 6,7

51-55 4,8 3,4 – 6,8

56-60 4,8 3,4 – 6,9

61-65 4,6 3,2 – 6,6

66-70 4,3 3,0 – 6,2

71-75 4,0 2,8 – 5,7

76-80 3,5 2,5 – 5,1

81-85 3,1 2,2 – 4,5


Valores de referência de IGFBP-3 noestadio de Tanner.

IGFBP-3, µg/mL

EstadiodeTanner Mediana Zona de 95%

misto, n = 420

1 3,6 1,3 – 6,3

2 4,2 2,4 – 6,7

3 5,3 3,3 – 9,1

4 6,2 3,5 – 8,6

5 5,4 2,7 – 8,9

Mulher, n = 226

1 3,6 1,2 – 6,4

2 4,5 2,8 – 6,9

3 5,3 3,9 – 9,4

4 5,9 3,3 – 8,1

5 5,6 2,7 – 9,1

Homem, n = 194

1 3,6 1,4 – 5,2

2 3,9 2,3 – 6,3

3 5,4 3,1 – 8,9

4 6,5 3,7 – 8,7

5 5,2 2,6 – 8,6

Considere estes limites apenas comodirectrizes. Cada laboratório deveestabelecer os seus próprios valores dereferência.

LimitaçãoOs anticorpos heterófilicos no sorohumano podem reagir com asimunoglobulinas presentes no ensaio,causando interferência com osimunoensaios in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Amostras de doentesexpostas em rotina a produtos ou sorosde animais podem demonstrar este tipode interferência, potencial causador deresultados anómalos. Estes reagentesforam formulados para minimizar o riscode interferência, contudo podem ocorrerpotenciais interacções entre soros (raros)e componentes do teste. Para fins dediagnóstico, os resultados obtidos nesteensaio devem ser sempre analisados emcombinação com o exame clínico, história

de medicação do doente e outrosachados que possam correlacionar.

Características do EnsaioConsulte Tabelas e Gráficos para dadosrepresentativos do desempenho dodoseamento. Os resultados sãoapresentados em µg/mL. (Salvoreferência em contrário, todos os dadosprovêm de amostras de soro colhidas emtubos sem anticoagulantes, barreiras degel ou aditivos promotores dacoagulação.)O IMMULITE 2500 utiliza o mesmo tipo dereagente e esferas que o IMMULITE2000. O desempenho é equivalente emambos os sistemas.Todos os dados do desempenho, exceptoo Método de Comparação 1, foramobtidos no sistema IMMULITE 2000.

Factor de conversão: µg/mL × 1 → mg/Lµg/mL × 34,78 → nmol/LCalibração: Até 16 µg/mL(556 nmol/L) [WHO NIBSC Reagente93/560)Sensibilidade Analítica: 0,1 µg/mL

Efeito Hook de Alta Dose: nenhum até340 µg/mL.Precisão: Amostras foram processadasem duplicado num período de 20 dias, doisensaios por dia, perfazendo um total de 40ensaios e 80 réplicas. (Vêr tabela de“Precision”.)Linearidade: As amostras foram diluidasseriadamente e processadas usando apré diluição automática de 1:100 noinstrumento. (Vêr tabela de “Linearity”.)Recuperação: As amostras foramadicionadas em 1 para 19 com trêssoluções de IGFBP-3 (32, 70 e140 µg/mL) foram ensaiadas. (Vêr tabelade “Recovery”.)

Especificidade: O ensaio é altamenteespecifico para IGFBP-3, com baixareação cruzada com outras substãnciasnaturais que possam ocorrer. (Vêr tabelade "Specificity".)

Bilirrubina: A presença de bilirubinaconjugada e não conjugada emconcentrações até 200 mg/L não temefeito no procedimento dentro da precisãodo ensaio.


Hemólise: A presença de hemoglobinaem concentrações até 550 mg/dL não temefeito em resultados, dentro da precisãodo ensaio.Lipémia: A presença de triglicéridos emconcentrações até 3 000 mg/dL não temefeito nos resultados, dentro da precisãodo ensaio.Comparação de métodos 1: O ensaioIGFBP-3 IMMULITE 2500 foi comparadocom o kit de IGFBP-3 no IMMULITE 2000em 98 samples. (Zona de trabalho:aproximadamente: 1,5 à 10 µg/mL.Consulte o gráfico 1.) Regressão linear:(IML 2500) = 1,07 (IML 2000) – 0,15 µg/mLr = 0,979

Médias:5,0 µg/mL (IMMULITE 2500)4,9 µg/mL (IMMULITE 2000)

Comparação de métodos 2: O ensaioIGFBP-3 IMMULITE 2000 foi comparadocom o kit de IGFBP-3 no IMMULITE em218 samples. (Zona de trabalho:aproximadamente: 0,6 à 12 µg/mL.Consulte o gráfico 2.) Regressão linear:(IML 2000) = 0,92 (IML) + 0,35 µg/mLr = 0,952

Médias:5,1 µg/mL (IMMULITE 2000)5,2 µg/mL (IMMULITE)

Assistência TécnicaPor favor contacte o seu DistribuidorNacional.Fabricado pela EURO/DPC Ltd. de acordo como Sistema de Qualidade registado segundo anorma ISO 13485:2003.

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