troponina immulite 2000

8/18/2019 Troponina IMMULITE 2000

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Siemens Medical Solutions Diagnostics

Troponin I



IMMULITE® 2000 Troponin I

2 IMMULITE 2000 Troponin I (PIL2KTI-12, 2007-05-18)

English

Intended Use: For in vitro diagnostic usewith the IMMULITE 2000 Analyzer — forthe quantitative measurement of troponin Iin serum, heparinized or EDTA plasma, asan aid in the diagnosis of acutemyocardial infarction (AMI).

Catalog Number: L2KTI2 (200 tests),L2KTI6 (600 tests)

Test Code: TPI Color: Light Gray

Summary and ExplanationAcute myocardial infarction (AMI) isusually diagnosed on the basis of chestpain, electrocardiographic changes, andelevations of markers of myocardial injury.The MB isoenzyme of creatine kinase(CK-MB) has been the preferred markerfor two decades.2 A study by Wu, et al.found excellent clinical sensitivity of the

CK-MB assay between 6 and 24 hoursfollowing onset of AMI, with decreasedsensitivity beginning in the 24 to 48-hourinterval.13 However, CK-MB levels canalso increase in patients with acute orchronic muscle disease who lack apparentcardiac injury. In the same study,myoglobin, a muscle protein considered tobe an early marker of AMI, becameelevated within 6 hours of onset, achievedpeak clinical sensitivity in the interval 6 to

12 hours following onset, and no longeroffered diagnostic value by hour 24.13 Myoglobin, although valuable for the earlyinformation it provides, also lacksspecificity for cardiac injury. A markerspecific for myocardial injury is thereforehighly desirable.

Cummins, et al.6,7 reported the release ofcardiac troponin I (cTnI) in AMI. Manystudies have focused on cTnI as a

candidate marker with acceptablesensitivity and specificity for AMI and othercardiac diseases.

Troponin, a molecule that binds to the thinfilament (actin) of striated muscle fibers,acts with intracellular calcium to controlthe interaction of the thin filament with thethick filament (myosin), thus regulatingmuscle contraction. Troponin consists of

three subunits: T, which connects thetroponin complex and tropomyosin(another cardiac muscle regulatory

protein); I, which prevents musclecontraction in the absence of calcium; andC, which binds calcium.8 Cardiac troponinI (MW 22.5 kDa) and the two skeletalmuscle isoforms of troponin I haveconsiderable amino acid sequencehomology, but cTnI contains an additionalN-terminal sequence11 and is highlyspecific for myocardium.1

Clinical studies report several desirable

features of cTnI as a marker of myocardialinjury. cTnI rises early in AMI patients andattains levels that are clearly separatedfrom baseline values, so that by 7 hoursfollowing onset, the cTnI test detects95 percent of patients in whom AMI will beconfirmed.9 Plasma values of cTnI remainelevated for several days, providing a longwindow for detection of cardiac injury.3,13 cTnI has also demonstrated value forpredicting mortality risk in unstable angina

and in non-Q wave myocardial infarction.5

cTnI has demonstrated equivalentdiagnostic accuracy for AMI whencompared with lactate dehydrogenasetype 1 and CK-MB,3,10 and may clarifydiagnosis in contexts where elevated CK-MB cannot be attributed with certainty tocardiac injury alone.3 These includesurgery,4 traumatic injury, renal failure,seizures, and skeletal musclemyopathies.1 In addition, a study onpatients undergoing coronary arterybypass grafting (CABG) showed cTnI tobe a sensitive marker for perioperativemyocardial infarction (PMI); the peakconcentration and time of peak bothserved as diagnostic criteria.12

Principle of the ProcedureIMMULITE 2000 Troponin I is a solid-phase, enzyme-labeled chemiluminescent

immunometric assay. The solid phase(bead) is coated with monoclonal murineanti-troponin I antibody. The liquid phaseconsists of alkaline phosphatase (bovinecalf intestine) conjugated to polyclonalgoat anti-troponin I antibody.

The patient sample and the reagent areincubated together with the coated bead



IMMULITE 2000 Troponin I (PIL2KTI-12, 2007-05-18) 3

for 30 minutes. During this time, troponin Iin the sample forms the antibody sandwichcomplex with monoclonal murine anti-troponin I antibody on the bead and theenzyme conjugated polyclonal goat anti-troponin I antibody in the reagent.

Unbound patient sample and enzymeconjugate are then removed by centrifugalwashes. Finally, chemiluminescentsubstrate is added to the reaction tubecontaining the bead and the signal isgenerated in proportion to the boundenzyme.

Incubation Cycles: 1 × 30 minutes.Time to First Result: 35 minutes.

Specimen CollectionEDTA plasma yields lower assay results.When monitoring, the baseline sampleand all subsequent samples should becollected using the same type of tubes,either plain, or EDTA, or heparinized. Donot interchange the type of tubes. Pleasesee the Alternate Sample Type section forfurther information.

The use of an ultracentrifuge is

recommended to clear lipemic samples.Hemolyzed samples may indicatemistreatment of a specimen before receiptby the laboratory; hence the results shouldbe interpreted with caution.

Icteric or grossly contaminated samplesmay give erroneous results.

Centrifuging serum samples before acomplete clot forms may result in thepresence of fibrin. To prevent erroneous

results due to the presence of fibrin,ensure that complete clot formation hastaken place prior to centrifugation ofsamples. Some samples, particularlythose from patients receivinganticoagulant therapy, may requireincreased clotting time.

Blood collection tubes from differentmanufacturers may yield differing values,depending on materials and additives,

including gel or physical barriers, clotactivators and/or anticoagulants.IMMULITE 2000 Troponin I has not beentested with all possible variations of tubetypes. Consult the section on AlternateSample Types for details on tubes thathave been tested.

Volume Required: 100 µL serum orplasma.

Storage: 5 days at 2–8°C,16 or1 month at –20°C.17

Warnings and PrecautionsFor in vitro diagnostic use.

Reagents: Store at 2–8°C. Dispose of inaccordance with applicable laws.

Follow universal precautions, and handleall components as if capable oftransmitting infectious agents. Sourcematerials derived from human blood weretested and found nonreactive for syphilis;for antibodies to HIV 1 and 2; for hepatitisB surface antigen; and for antibodies tohepatitis C.

Sodium azide, at concentrations less than0.1 g/dL, has been added as apreservative. On disposal, flush with largevolumes of water to prevent the buildup ofpotentially explosive metal azides in leadand copper plumbing.

Chemiluminescent Substrate: Avoidcontamination and exposure to directsunlight. (See insert.)

Water: Use distilled or deionized water.

Materials SuppliedComponents are a matched set. Labels onthe inside box are needed for the assay.

Troponin I Bead Pack (L2TI12)With barcode. 200 beads, coated withmonoclonal murine anti-troponin I. Stableat 2–8°C until expiration date.L2KTI2: 1 pack. L2KTI6: 3 packs.

Troponin I Reagent Wedge (L2TIA2)With barcode. 18.5 mL alkalinephosphatase (bovine calf intestine)conjugated to polyclonal goat anti-troponinI antibody in buffer, with preservative.Stable at 2–8°C until expiration date.L2KTI2: 1 wedge. L2KTI6: 3 wedges.

Before use, tear off the top of the label atthe perforations, without damaging the

barcode. Remove the foil seal from the topof wedge; snap the sliding cover down intothe ramps on the reagent lid.

Troponin I Adjustors (LTIL, LTIH)Two vials (Low and High) of troponin I in alyophilized nonhuman serum matrix, withpreservative. Reconstitute each vial with3.0 mL distilled or deionized water.




Reconstitute each vial with 3.0 mL distilledor deionized water. Mix by gentle swirlingor inversion until the lyophilized material isfully dissolved. Let stand for 30 minutesand use immediately, or aliquot andfreeze. Stable at –20°C for 2 months

(aliquotted) after reconstitution.L2KTI2: 1 set. L2KTI6: 2 sets.

Before making an adjustment, place theappropriate Aliquot Labels (supplied withthe kit) on test tubes so that the barcodescan be read by the on-board reader.

Kit ComponentsSupplied Separately

Multi-Diluent 1For the on-board dilution of high samples.One vial of concentrated (ready-to-use)processed, normal human serum,containing undetectable to low levels oftroponin I, with preservative. Stable at 2– 8°C for 30 days after opening, or for6 months (aliquotted) at –20°C.L2M1Z: 25 mL.

Barcode labels are provided for use withthe diluent. Before use, place anappropriate label on a 16 × 100 mm testtube, so that the barcodes can be read bythe on-board reader.L2M1Z: 3 labels.

L2SUBM: Chemiluminescent SubstrateL2PWSM: Probe WashL2KPM: Probe Cleaning KitLRXT: Reaction Tubes (disposable)L2ZT: 250 Sample Diluent Test Tubes(16 × 100 mm)

L2ZC: 250 Sample Diluent Tube CapsCCCM: A bi-level, nonhuman serum-based Cardiac Marker Control Module,containing troponin I.

Also RequiredDistilled or deionized water; test tubes;controls.

Assay Procedure

Note that for optimal performance, it isimportant to perform all routinemaintenance procedures as defined in theIMMULITE 2000 Operator's Manual.

See the IMMULITE 2000 Operator'sManual for: preparation, setup, dilutions,adjustment, assay and quality controlprocedures.

Recommended Adjustment Interval: 2 weeks.

Quality Control Samples: Use controlsor sample pools with at least two levels(low and high) of troponin I.

Expected ValuesBased on its relationship to IMMULITETroponin I (see Method Comparison), theassay can be expected to have essentiallythe same reference ranges.

Two hundred and fifty-five serum samplesfrom healthy laboratory volunteers andfrom hospitalized patients that had beenshown to be negative for troponin I byanother immunometric method wereanalyzed using the IMMULITE Troponin Iassay. The median value for thesesamples was nondetectable; 98% of thevalues were below 1.0 ng/mL.

Consider these limits as guidelines only.Each laboratory should establish its ownreference ranges.

Limitations

The assay yields lower values when usedwith EDTA plasma. Please refer to theAlternate Sample Type section for moreinformation.

Heterophilic antibodies in human serumcan react with the immunoglobulinsincluded in the assay components causinginterference with in vitro immunoassays.[See Boscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Samples from patients routinelyexposed to animals or animal serumproducts can demonstrate this type ofinterference potentially causing ananomalous result. These reagents havebeen formulated to minimize the risk ofinterference; however, potentialinteractions between rare sera and testcomponents can occur. For diagnosticpurposes, the results obtained from this

assay should always be used incombination with the clinical examination,patient medical history, and other findings.

Performance DataSee Tables and Graphs for datarepresentative of the assay's performance.Results are expressed in ng/mL. (Unlessotherwise noted, all were generated on




serum samples collected in tubes withoutgel barriers or clot-promoting additives.)

Calibration Range: Up to 180 ng/mL.

Analyt ical Sensiti vi ty: 0.2 ng/mL

High Dose Hook Effect: None up to

90,000 ng/mL.Precision: Samples were assayed induplicate over the course of 20 days, tworuns per day, for a total of 40 runs and 80replicates. (See “Precision” table.)

Linearity: Samples were assayed undervarious dilutions. (See "Linearity" table forrepresentative data.)

Recovery: Samples spiked 1 to 19 with

three troponin I solutions (200, 400 and900 ng/mL) were assayed. (See"Recovery" table for representative data.)

Specificity: The antibody is highly specificfor troponin I. (See "Specificity" table.)

Al ternate Sample Type: Samples(n = 12) were collected using plain andheparinized vacutainer tubes. Matchedsamples were spiked with troponin I. Bylinear regression:

(Heparin) = 0.9 (Serum) + 1.84 ng/mLr = 0.980

Means: 40 ng/mL (Serum)37 ng/mL (Heparin)

In another study, samples (n = 13) werecollected using plain and EDTA vacutainertubes. Matched samples were spiked withtroponin I. By linear regression:

(EDTA) = 0.8 (Serum) – 3.1 ng/mL

r = 0.988Means:72 ng/mL (Serum)55 ng/mL (EDTA)

The results show that blood samplescollected in EDTA vacutainer tubes yieldlower troponin I results than bloodsamples collected in plain and heparinizedtubes.

Bilirubin: Would have an effect on the

assay, causing a depression of values.(See “Bilrubin” table.)

Hemolysis: Presence of hemoglobin inconcentrations up to 512 mg/dL has noeffect on results, within the precision of theassay.

Lipemia: Presence of triglycerides inconcentrations up to 3,000 mg/dL has no

effect on results, within the precision of theassay.

Method Comparison 1: The assay wascompared to IMMULITE Troponin I on 162patient samples. (Concentration range:approximately up to 120 ng/mL, as

measured by IMMULITE Troponin I. Seegraph 1.) By linear regression:

(IML 2000) = 0.91 (IML) + 0.73 ng/mLr = 0.996

Means:12.4 ng/mL (IMMULITE 2000)12.9 ng/mL (IMMULITE)

Method Comparison 2: The assay wascompared to IMMULITE Troponin I on 128samples out of 162 patient samples used

for Method Comparison 1. (Concentrationrange: approximately up to 15 ng/mL, asmeasured by IMMULITE Troponin I. Seegraph 2.) By linear regression:

(IML 2000) = 1.15 (IML) – 0.06 ng/mLr = 0.995

Means:3.0 ng/mL (IMMULITE 2000)2.7 ng/mL (IMMULITE)

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Tables and Graphs

Precision (ng/mL)

Within-Run1 Total2

Mean3 SD4 CV5 SD CV

1 0.50 0.05 10% 0.08 16%

2 1.33 0.05 3.8% 0.18 13.5%

3 7.6 0.27 3.6% 0.37 4.9%

4 16.2 0.53 3.3% 1.23 7.6%

5 164 6.45 3.9% 15.2 9.3%

Specifici ty (ng/mL)

Compound1

AmountAddedng/mL2

%Cross

reactivity3

Human Skeletal Troponin I 10 ND

Human Skeletal Troponin I 100 0.2%Human Skeletal Troponin I 1,000 0.1%

Human Skeletal Troponin T 10 ND

Human Skeletal Troponin T 100 ND

Human Skeletal Troponin T 1,000 ND

Human Cardiac Troponin T 10 ND

Human Cardiac Troponin T 100 ND

Human Cardiac Troponin T 1,000 0.1%

ND: Not detectable.4

Linearity (ng/mL)

Dilution1 Observed2 Expected3 %O/E4

1 8 in 85 5.0 — —

4 in 8 2.4 2.5 96%

2 in 8 1.2 1.3 92%

1 in 8 0.63 0.63 100%

2 8 in 8 11 — —

4 in 8 5.6 5.5 102%

2 in 8 2.8 2.8 100%

1 in 8 1.6 1.4 114%

3 8 in 8 20 — —

4 in 8 10 10.0 100%

2 in 8 4.5 5.0 90%

1 in 8 2.3 2.5 92%

4 8 in 8 51 — —

4 in 8 24 26 92%

2 in 8 13 13 100%

1 in 8 6.0 6.4 94%

5 8 in 8 60 — —

4 in 8 28 30 93%

2 in 8 13 15 87%

1 in 8 6.2 7.5 83%




Bilirubin

Conjugated1 Unconjugated2

Unspiked3 100mg/L

200mg/L

100mg/L

200mg/L

1 11.7 10.7 9.9 10.7 9.5

2 89 85 77 78 743 95 79 83 75 74

4 103 87 116 89 88

5 113 100 111 105 100

6 126 118 111 113 114

Recovery (ng/mL)

Solution1

Observed2

Expected3

%O/E4

1 — 3.9 — —

A 13 14 93%

B 25 24 104%

C 46 49 94%

2 — 6.3 — —

A 15 16 94%

B 29 26 112%

C 47 51 92%3 — 18 — —

A 28 27 103%

B 39 37 105%

C 62 62 100%

4 — 27 — —

A 37 36 103%

B 47 46 102%

C 72 71 101%5 — 45 — —

A 50 52 96%

B 60 63 95%

C 77 88 88%

Method Comparison 1

IMMULITE Troponin I, ng/mL

0 20 40 60 80 100 120

I M M U L I T E

2 0 0 0 T r o p o n i n I

0

20

40

60

80

100

120

(IML 2000) = 0.91 (IML) + 0.73 ng/mLr = 0.996

Method Comparison 2

IMMULITE Troponin I, ng/mL

0 5 10 15 20

I M M U L I T E 2

0 0 0 T r o p o n i n I

0

5

10

15

20

(IML 2000) = 1.15 (IML) – 0.06 ng/mLr = 0.995

Deutsch. Precision: 1Intra-Assay, 2Gesamt,3Mittelwert, 4SD (Standardbereich), 5CV(Variationskoeffizient). Linearity: 1Verdünnung,2Beobachtet (B), 3Erwartet (E), 4% B/E, 58 in 8.Recovery: 1Lösung, 2Beobachtet (B), 3Erwartet(E), 4% B/E. Specificity: 1Verbindung,2zugesetzte Menge, 3% Kreuzreaktivität, 4NN:Nicht nachweisbar. Bilirubin: 1Konjugiertes,2Unkonjugiertes, 3Ohne Zugabe von. MethodComparison: Troponin I: Troponin I.

Español. Precision: 1Intraensayo, 2Total,3

Media,4

DS,5

CV. Linearity:1

Dilución,2Observado (O), 3Esperado (E), 4%O/E, 58 en 8.Recovery: 1Solución, 2Observado (O),3Esperado (E), 4%O/E. Specificity:1Compuesto, 2Cantidad añadida, 3% Reaccióncruzada, 4ND: no detectable. Bilirubin:1conjugada, 2libre conjugada, 3Sin añadir.Method Comparison: Troponin I: Troponina I.

Français. Precision: 1Intraessai, 2Moyenne,3SD, 4CV. Linearity: 1Dilution, 2Observé (O),




3Attendu (A), 4%O/A, 58 dans 8. Recovery:1Solution, 2Observé (O), 3Attendu (A), 4%O/A.Specificity: 1Composé, 2ajouté, 3Réactioncroisée %. 4ND: non détectable. Bilirubin:1conjuguée, 2non conjuguée, 3Non chargés.Method Comparison : Troponin I: Troponine I.

Italiano. Precision: 1Intra-serie, 2Totale, 3Media,4SD (Deviazione Standard), 5CV (Coefficiente diVariazione). Linearity: 1Diluizione, 2Osservato(O), 3Atteso (A), 4%O/A, 58 in 8. Recovery:1Soluzione, 2Osservato (O), 3Atteso (A), 4%O/A.Specificity: 1Composto, 2quantità aggiunta,3Percentuale di Crossreattività, 4ND: nondeterminabile. Bilirubin: 1coniugata, 2nonconiugata, 3Semplice, senza. MethodComparison: Troponin I: Tropinina I.

Português. Precision: 1Entre-ensaios, 2Total,3Média, 4Desvio padrão, 5Coeficiente devariação. Linearity: 1Diluição, 2Observado (O),3Esperado (E), 4%O/E, 58 em 8. Recovery:1Solução, 2Observado (O), 3Esperado (E),4%O/E. Specificity: 1Composto, 2Quantidadeadicionada, 3Percentagem de reacção cruzada,4ND: não detectável. Bilirubin: 1conjugada, 2nãoconjugada, 3Não adicionada. MethodComparison: Troponin I: Troponina I.

Deutsch

IMMULITE 2000 Troponin I Anwendung: Für in-vitro-diagnostischeTests mit dem Analysegerät IMMULITE2000 – zur quantitativen Messung vonTroponin I im Serum, Heparin- und EDTA-Plasma, als Hilfestellung bei der Diagnoseeines akuten Myokardinfarktes (AMI).

Artikelnummern: L2KTI2 (200 tests),L2KTI6 (600 tests)

Testcode: TPI Farbe: hellgrau

Klinische RelevanzEin akuter Myokardinfarkt (AMI) wirdnormalerweise auf der Basis vonBrustschmerz, Veränderungen im EKGund Erhöhungen von Markern, diespezifisch für Herzmuskelschädigungen

sind diagnostiziert. Das MB-Isoenzym derCreatinkinase (CK-MB) war für zweiJahrzehnte der bevorzugte Marker.2 EineStudie von Wu, et al. ermittelte eineausgezeichnete klinische Sensitivität desCK-MB Assays zwischen 6 und 24Stunden nach Auftreten des AMI, mit einererniedrigten Sensitivität im 24 bis 48Stunden Zeitraum.13 Erhöhte CK-MB

Spiegel können jedoch ebenfalls beiPatienten mit akuten oder chronischenMuskelerkrankungen ohne nachweisbareHerzschädigungen nachgewiesen werden.In der gleichen Studie erwies sichMyoglobin, ein Muskelprotein, als

Frühmarker des AMI. Es stieg innerhalbvon 6 Stunden nach Auftreten des AMI anund errreichte die maximale klinischeSensitivität 6 bis 12 Stunden nachEinsetzen der klinischen Zeichen des AMI.Nach 24 Stunden erwies sich Myoglobinohne weiteren diagnostischen Wert.13 Obwohl Myoglobin wertvolleFrühinformationen liefert, ist es nichtspezifisch für Herzschädigungen. Ein fürHerzschädigungen spezifischer Marker ist

daher von großer Bedeutung.Cummins, et al.6,7 berichteten über dieFreisetzung von cardialem Troponin I(cTnI) beim akuter Myokardinfarkt. Inzahlreichen Studien hat sich inzwischencTnI als geeigneten Marker mitakzeptabler Sensitivität und Spezifität fürAMI und andere Herzerkrankungenerwiesen.

Troponin ist ein Molekül, welches am

dünnen Filament (Actin) derquergestreiften Muskelfasern bindet undmit dem intrazellulären Calcium an derInteraktion des dünnen Filaments mit demdicken Filament (Myosin) beteiligt ist.Dieser Vorgang reguliert dieMuskelkontraktion. Das Troponin bestehtaus drei Untereinheiten: T, das denTroponinkomplex mit dem Tropomyosinverbindet (ein weiteres regulierendesProtein für den Herzmuskel); I, das dieMuskelkontraktion bei Abwesenheit vonCalcium verhindert; und C, das Calciumbindet.8 Kardiales Troponin I (MM 22.5kDa) und die zwei Troponin I-Isoformendes Skelettmuskels besitzen eineerhebliche Aminosäuren-sequenzhomologie, aber cTnI enthält einezusätzliche N-terminale Sequenz11 und isthoch spezifisch für den Herzmuskel.1

Klinische Studien zeigen eindeutig die

positiven Eigenschaften des cTnI alseinen Marker für Myokardschädigungen.cTnI steigt früh bei AMI- Patienten an underlangt einen Spiegel, der eindeutig vonden Basalwerten unterschieden werdenkann, sodass nach 7 Stunden der cTnITest bei 95 Prozent der Patienten einenAMI detektiert, der sich klinisch bestätigt.9 Die cTnI-Plasmawerte bleiben für mehrere




Tage erhöht, damit ist ein langesZeitfenster für eine Detektion einerHerzschädigung gegeben.3,13 cTnI hatebenfalls seine Wertigkeit für dasprädiktive Sterberisiko bei instabilerAngina pectoris und beim Non-Q-Wave-

Myokardinfakt gezeigt.

5

cTnI hat eine äquivalente diagnostischeGenauigkeit wie die Laktatdehydrogenaseund CK-MB für AMI.3,10 Eine Klärung mitcTnI ist auf jeden Fall notwendig, da manmit erhöhten CK-MB-Werten nicht mitSicherheit alleine auf eineHerzschädigung schließen kann.3 Dieskann bei Operationen,4 traumatischenVerletzungen, Nierenversagen, Krämpfenund Myopathien des Skelettmuskelsauftreten.1 Des Weiteren zeigte eineStudie mit Patienten, die eine koronareBypassoperation hatten, dass cTnI einsensitiver Marker für perioperativenMyokardinfarkt ist; Die maximaleKonzentration und der Zeitpunkt desMaximalwertes dienen als diagnostischeKriterien.12

Methodik

IMMULITE 2000 Troponin I ist einFestphasen enzymmarkierterChemilumineszenz immunometrischerAssay.Die Festphase (Kugel) ist mit einemmonoklonalem Maus anti-Troponin IAntikörper beschichtet. Die Flüssigphasebesteht aus alkalischer Phosphatase(Rinderkalbsdarm) konjugiert an einenpolyklonalen Ziege anti-Troponin IAntikörper.

Die Patientenprobe und das Reagenzinkubieren zusammen mit derbeschichteten Kugel für 30 Minuten.Während dieser Zeit, bildet das Troponin Iin der Probe einen Antikörper-Sandwich-Komplex mit dem monoklonalen MausAnti-Troponin I Antikörper der Kugel unddem Enzym konjugierten polyklonalenZiege Anti-Troponin I Antikörper desReagenz. Ungebundene Patientenprobeund Enzymkonjugat werden durch einen

Zentrifugal-Waschschritt entfernt. Zuletztwird Chemilumineszenz-Substrat zurKugel hinzugefügt und das Messsignalwird proportional zum gebundenen Enzymgebildet.

Inkubationszyklen: 1 × 30 Minuten.Zeit zum ersten Ergebnis: 35 Minuten.

ProbengewinnungBei Verwendung von EDTA-Plasmawerden niedrigere Werte gefunden. BeimMonitoring von Patienten ist unbedingtdarauf zu achten, dass immer dasselbeProbenmaterial verwendet wird. (Weitere

Informationen entnehmen Sie bitte demAbschnitt „Alternate Sample Type“ //„ Alternative Probenarten “).

Der Einsatz einer Ultrazentrifuge wird zurKlärung von lipämischen Probenempfohlen.

Bei hämolysierten Proben besteht dieMöglichkeit einer unsachgemäßenHandhabung vor Eintreffen im Labor,daher sind die Ergebnisse zurückhaltend

zu interpretieren.Ikterische oder grob kontaminierte Probenkönnen zu fehlerhaften Ergebnissenführen.

Die Zentrifugation der Serumproben vordem völligen Abschluss der Gerinnungkann zu Fibringerinnseln führen. Umfehlerhaften Analysenergebnissen infolgevon Gerinnseln vorzubeugen, istsicherzustellen, dass die Gerinnung vorder Zentrifugation der Proben vollständigabgeschlossen ist. Insbesondere Probenvon Patienten unter Antikoagulantien-therapie können eine verlängerteGerinnungszeit aufweisen.

Blutentnahmeröhrchen von verschiedenenHerstellern können differierende Werteverursachen. Dies hängt von denverwendeten Materialien und Additiven(Gel oder physische Trennbarrieren,

Gerinnungsaktivatoren und /oderAntikoagulantien) ab. IMMULITE 2000Troponin I sind nicht mit allen möglichenRöhrchenvariationen ausgetestet worden.Details der getesteten Röhrchenarten sinddem Kapitel "Alternative Probenarten" zuentnehmen.

Erforderliche Menge: 100 µl Serum oderPlasma.

Lagerung: 5 Tage bei 2–8°C,16 oder

1 Monat bei –20°C. 17

Hinweise undVorsichtsmaßnahmenZur In-vitro-Diagnostik.




Reagenzien: Bei 2–8°C lagern. UnterEinhaltung der geltenden gesetzlichenVorschriften entsorgen.

Die generell geltendenVorsichtsmaßnahmen sind einzuhaltenund alle Komponenten als potenziell

infektiös zu behandeln. Alle ausmenschlichem Blut gewonnenenMaterialien wurden auf Syphilis,Antikörper gegen HIV-1 und HIV-2,Hepatitis-B-Oberflächenantigen undHepatitis-C-Antikörper untersucht undnegativ befundet.

Bestimmten Komponenten wurdeNatriumazid (<0,1 g/dl) hinzugefügt. Umdie Bildung von explosiven Metallaziden in

Blei- und Kupferrohren zu vermeiden,sollten die Reagenzien nur zusammen mitgroßen Wassermengen in die Kanalisationgespült werden.

Chemilumineszenz-Substrat: Kontamination und direkteSonneneinstrahlung vermeiden. SiehePackungsbeilage.

Wasser: Destilliertes oder deionisiertesWasser verwenden.

Im Lieferumfang enthaltenDie Bestandteile sind aufeinanderabgestimmt. Die Aufkleber auf derInnenverpackung werden zurTestdurchführung gebraucht.

Troponin I Kugel-Container (L2TI12)Der barcodierte Kugel-Container enthält200 Kugeln, beschichtet mit Troponin I-

Antikörpern (monoklonal, Maus). Bei 2– 8°C bis zum Ablaufdatum haltbar.L2KTI2: 1 Container. L2KTI6: 3 Container.

Troponin I Reagenzbehälter (L2TIA2)Mit Barcode. 18,5 ml mit alkalischerPhosphatase (Rinderkalbsdarm)konjugierte Anti-Troponin I Antikörper(polyklonal, Ziege) in Pufferlösung (mitKonservierungsmittel). Bei 2–8°C bis zum

Ablaufdatum haltbar.L2KTI2: 1 Behälter. L2KTI6: 3 Behälter.

Vor Gebrauch den Aufkleber an derPerforation abreißen, ohne dabei dieBarcodierung zu beschädigen. Die Folievon der Oberseite des Containersentfernen. Den Schiebedeckel nach unten

in die Führung des Reagenziendeckelseinrasten lassen.

Troponin I- Kalibratoren (LTIL, LTIH)Zwei Fläschchen (niedrig und hoch) mitlyophilisiertem Troponin I in einer

nichthumanen Serum-/Matrix, mitKonservierungsmittel. Fläschchen mit je3,0 ml destilliertem oder deionisiertemWasser rekonstituieren. Zum Mischenleicht schwenken oder umdrehen, bis sichdas lyophilisierte Material vollständigaufgelöst hat. Anschließend 30 Minutenstehen lassen und dann sofortverwenden oder aliquotieren undeinfrieren. Nach Rekonstitution bei -20°Cfür 2 Monate (portioniert) haltbar.

L2KTI2: 1 Set. L2KTI6: 2 Sets.Vor der Kalibrierung die entsprechendenAufkleber (dem Kit beiliegend) aufRöhrchen kleben, so daß die Barcodesvom Barcodereader des Systems gelesenwerden können.

Separat erhältl iche Testsystem-Komponenten

Multi-Diluent 1Zur on-board Verdünnung von Probenhoher Konzentration. Ein Fläschchenkonzentriertes (gebrauchsfertig)prozessiertes, normales Humanserum, mitnicht-nachweisbarem Gehalt an TroponinI, mit Konservierungsmittel. 30 Tage nachdem Öffnen bei 2–8°C haltbar oder6 Monate bei –20°C (aliquotiert).L2M1Z: 25 ml.

Zum Einsatz des Verdünnungsreagenz(Diluents) werden Barcode Etikettenmitgeliefert. Vor Verwendung einentsprechendes Etikett so auf ein16×100 mm Teströhrchen kleben, dass esvom eingebauten Barcode Readergelesen werden kann.L2M1Z: 3 Etiketten.

L2SUBM: Chemilumineszenz-Substratmodul

L2PWSM: WaschmodulL2KPM: ReinigungsmodulLRXT: (Einmal-) ReaktionsgefäßeL2ZT: 250 Teströhrchen (16 × 100 mm)für die ProbenverdünnungL2ZC: 250 Röhrchenverschlüsse für dieProbenverdünnung

CCCM: Das Kardiomarker-Kontrollmodulmit Troponin I (in zwei Konzentrationen).




Ebenfalls benötigtDestilliertes bzw. deionisiertes Wasser;Teströhrchen; Kontrollen.

TestdurchführungFür eine optimale Funktion des Gerätes ist

unbedingt zu beachten, dass dieWartungen, wie im IMMULITE 2000-Handbuch beschrieben, regelmäßigdurchgeführt werden.

Hinweise zur Vorbereitung, täglichenInbetriebnahme des Systems, derKalibrierung sowie Verfahren zur Test-und Qualitätskontrolle entnehmen Sie bittedem IMMULITE 2000-Handbuch.

Empfohlenes Kalibrationsintervall: 2 Wochen.

Proben zur Qualitätskontrolle: Kontrollen oder Poolseren mit Troponin Iin mindestens zwei Konzentrationen(niedrig und hoch) verwenden.

ReferenzwerteBasierend auf der guten Korrelation zumIMMULITE Troponin I (siehe

Methodenvergleich) kann für diesen Assayvon den selben Referenzbereichenausgegangen werden.

In einer Studie des Herstellers mit 255Probanden, ohne Hinweis auf eineErkrankung, die eine Troponin I Erhöhunginduzieren könnte, wurden folgende Wertemittels des Troponin I – IMMULITEAssays ermittelt:

Der Medianwert für diese Proben war

nicht nachweisbar; 98% der Werte waren<1,0 ng/ml.

Diese Grenzwerte sind lediglich alsRichtlinien aufzufassen. Jedes Laborsollte seine eigenen Referenzbereicheetablieren.

Grenzen der MethodeBei Verwendung von EDTA-Plasmawerden niedrigere Werte als in

Serumproben gefunden. WeitereInformationen entnehmen Sie bitte demAbschnitt „ Alternative Probenarten “ // „Alternative Probenarten “.

Heterophile Antikörper in Humanserenkönnen mit Immunglobulinen aus denAssaykomponenten reagieren undInterferenzerscheinungen innerhalb des in

vitro Immunoassays verursachen. (Clin.Chem. 1988:34:27-33) Proben vonPatienten, die häufig mit Tier- bzw.Tierserumprodukten zu tun haben, könnendie erwähnten Interferenzen verursachenund zu anomalen Resultaten führen. Die

verwendeten Reagenzien sind sokonzipiert, dass das Risiko einerInterferenz mit den zu messenden Probenminimiert ist. Dennoch können potentiellInteraktionen zwischen seltenen Serenund den Testkomponenten auftreten. Zudiagnostischen Zwecken sollten die mitdem Assay erhaltenen Ergebnisse immerin Kombination mit der klinischenUntersuchung, der Patientenanamneseund anderen Befunden gesehen werden.

LeistungsdatenSiehe Tabellen und Grafiken mitrepräsentativen Daten für den Assay. DieErgebnisse sind als ng/ml ausgedrückt.(Alle Daten wurden – sofern nicht andersangegeben – aus Serumproben inRöhrchen ohne Gelbarrieren odergerinnungsfördernde Zusätze gewonnen.)

Messbereich: Bis 180 ng/ml

Analyt ische Sens it ivi tät : 0,2 ng/ml

High-Dose-Hook-Effect: Bis90 000 ng/ml keiner.

Präzision: Proben wurden innerhalb von20 Tagen mit jeweils zwei Testansätzen inDoppelbestimmung gemessen (insgesamt40 Bestimmungen und 80Einzelmessungen; siehe Tabelle„Präzision“).

Linearität: Proben wurden inverschiedenen Verdünnungen getestet.(Repräsentative Daten entnehmen Siebitte der Tabelle „Linearität“.)

Wiederfindung: Die getesteten Probenwaren mit drei Troponin I-Lösungen 1:19versetzt (200, 400 und 900 ng/ml).(Repräsentative Daten entnehmen Siebitte der Tabelle „Recovery“.)

Spezifität: Hochspezifischer Troponin I-Antikörper (siehe Tabelle „Spezifität“).

Al ternat ive Probenarten: Die Proben(n = 12) wurden in unbehandelte undheparinisierte-behandelte Vacutainer-Röhrchen gefüllt. Gepoolte Probenwurden mit Troponin I gespikt. Durchlineare Regression:




(Heparin) = 0,9 (Serum) + 1,84 ng/mlr = 0,980

Mittelwert: 40 ng/ml (Serum)37 ng/ml (Heparin)

In einer weiteren Studie wurden die

Proben (n = 13) in unbehandelte undEDTA-behandelte Vacutainer-Röhrchengefüllt. Gepoolte Proben wurden mitTroponin I gespikt. Durch lineareRegression:

(EDTA) = 0,8 (Serum) – 3,1 ng/mlr = 0,988

Mittelwert:72 ng/ml (Serum)55 ng/ml (EDTA)

Die Ergebnisse zeigen, dass in EDTA-Röhrchen abgenommene Blutprobenniedrigere Troponin I Werte ergeben alsBlutproben, die in heparinisiertenRöhrchen oder unbehandelte Röhrchenabgenommen wurden.

Bilirubin: Eine Hyperbilirubinämie kannzu falsch erniedrigten Troponin I Wertenführen. (Siehe Tabelle „Bilirubin“.)

Hämolyse: Hämoglobin hat in

Konzentrationen bis zu 512 mg/dl keinenEinfluss auf die Ergebnisse, der größer alsdie Impräzision des Assays selbst ist.

Lipämie: Triglyceride hat inKonzentrationen bis zu 3 000 mg/dlkeinen Einfluss auf die Ergebnisse, dergrößer als die Impräzision des Assaysselbst ist.

Methodenvergleich 1: Der Assay wurdeunter Verwendung von 162

Patientenproben mit dem IMMULITETroponin I verglichen.(Konzentrationsbereich ca. bis zu120 ng/ml wie durch IMMULITE Troponin Igemessen. Siehe Grafik 1.) Durch lineareRegression:

(IML 2000) = 0,91 (IML) + 0,73 ng/mlr = 0,996

Mittelwert: 12,4 ng/ml (IMMULITE 2000)

12,9 ng/ml (IMMULITE)Methodenvergleich 2: Der Assay wurdeunter Verwendung von 128 aus 162Patientenproben mit dem IMMULITETroponin I verglichen.(Konzentrationsbereich ca. bis zu 15 ng/mlwie durch IMMULITE Troponin Igemessen. Siehe Grafik 2.) Durch lineareRegression:

(IML 2000) = 1,15 (IML) – 0,06 ng/mlr = 0,995

Mittelwert: 3,0 ng/ml (IMMULITE 2000)2,7 ng/ml (IMMULITE)

AnwendungsberatungBei Rückfragen wenden Sie sich bitte anIhre Siemens Medical SolutionsDiagnostics Niederlassung.

Das Qualitätsmanagement-System der SiemensMedical Solutions Diagnostics ist zertifiziert nachDIN EN ISO 13485:2003.

Español

IMMULITE 2000 Troponina IUtilidad del análisis: Para el diagnósticoin vitro con el Analizador IMMULITE 2000

— para la medición cuantitativa detroponina I en suero, plasma con EDTA oheparinizado, como ayuda en eldiagnóstico del infarto agudo de miocardio(IAM).

Números de Catálogo: L2KTI2 (200 tests),L2KTI6 (600 tests)

Código del Test: TPICódigo de Color: Gris claro

Resumen y Explicacióndel TestEl infarto agudo de miocardio (IAM) esnormalmente diagnosticado por dolor en

el pecho, cambios electrocardiográficos, yelevación de los marcadores de lesión demiocardio. La isoenzima MB de creatininaquinasa (CK-MB) ha sido el marcadorpreferido durante dos décadas.2 Unestudio realizado por Wu, et al. encontróuna sensibilidad clínica excelente en elensayo CK-MB entre 6 y 24 horasdespués del comienzo de un infarto agudode miocardio (IAM), con una sensibilidaddisminuida después de las 24–48 horas.13

Sin embargo, los niveles de CK-MBpueden también elevarse en pacientescon enfermedades crónicas y agudas delmúsculo, quienes no tienen una lesióncardiaca aparente. En el mismo estudio, lamioglobilina, una proteína muscular quese considera el marcador inicial de IAM,incrementa sus niveles a las 6 horassiguientes de un infarto de miocardio,




alcanzando su sensibilidad clínica máximaen el intervalo comprendido entre las 6– 12 horas siguientes, no mostrando unvalor diagnóstico a las 24 horas siguientesa un infarto de miocardio. 13 Lamioglobilina, valiosa por la información

que nos facilita en las primeras fases deun infarto agudo de miocardio, sinembargo pierde su especificidad para lalesión cardiaca. Por lo tanto, es muydeseable encontrar un marcadorespecífico para la lesión de miocardio.

Cummins, et al.6,7 informaron de laliberación de troponina I cardiaca (cTnI)en los casos de infartos agudo demiocardio. Se han enfocado muchosestudios en cTnI como un marcador deelección, con una buena sensibilidad yespecificidad en los infartos agudos demiocardio (IAM) y otras enfermedadescardiacas.

La troponina es una molécula que se uneal filamento delgado (actina) de las fibrasdel músculo estriado, actuando junto conel calcio intracelular, en el control de lainteracción del filamento grueso de actinacon el filamento delgado de miosina, y

regulando de este modo la contracciónmuscular. La troponina se compone detres subunidades: subunidad T, queconecta el complejo de troponina ytropomiosina (otra proteína reguladora delmúsculo cardiaco); subunidad I, quepreviene la contracción muscular enausencia de calcio; y subunidad C, queune calcio.8 La troponina I cardiaca (MW22,5 kDa) y las dos isoformas detroponina I en el músculo esqueléticomuestran una considerable homología enla secuencia de aminoácidos, pero cTnIcontiene una secuencia N-terminaladicional,11 y es altamente específica paramiocardio.1

Diversos estudios clínicos han informadosobre las características de cTnI, queconvierten a ésta proteína en un marcadorde la lesión de miocardio. Los niveles decTnI aumentan en las etapas tempranas

de pacientes que han sufrido un infartoagudo de miocardio (IAM) y alcanzaniveles que están claramente por encimade los valores base, de modo que en las 7horas siguientes el análisis detecta un95% de pacientes en los que seconfirmará un infarto agudo de miocardio.Los valores de cTnI en plasmapermanecen elevados durante varios

días, proporcionando un amplio margenpara la detección de la lesión cardiaca.3,13 cTnI también ha mostrado su valor parapredecir el riesgo de mortalidad de anginainestable y en infarto de miocardio onda-Q.5

cTnI ha mostrado una exactitud dediagnóstico en el infarto agudo demiocardio similar si la comparamos con lalactato deshidrogenasa tipo 1 y CK-MB,3,10 y puede aclarar el diagnóstico en loscasos en los que niveles elevados de CK-MB no pueden atribuirse con certeza sóloa lesión cardiaca.3 Estos incluyen cirugía,4 lesión traumática, fallo renal, convulsionesy miopatías del músculo esquelético.1 Además, un estudio realizado conpacientes a los que se les ha realizado unbypass de la arteria coronaria (CABG)demostró que cTnI es un marcadorsensitivo para el infarto de miocardioperioperatorio (IMP); la concentraciónmáxima y el tiempo de concentraciónmáxima sirvieron como criteriodiagnóstico.12

Principio del análisis

IMMULITE 2000 Troponina I es un ensayoinmunométrico quimiolumminiscente enfase sólida y conjugado enzimático. Lafase sólida (bola) está recubierta conanticuerpo monoclonal murino anti-troponina I. La fase líquida consiste enfostasa alcalina (intestino bovino)conjugada con anticuerpo policlonal decabra anti-troponina I.

La muestra del paciente y el reactivo se

incuban junto con la bola recubiertadurante 30 minutos. Durante este tiempo,la troponina I de la muestra formacomplejos sandwich entre el anticuerpomurino anti-troponina de la bola y elanticuerpo policlonal de cabra anti-troponina I marcado enzimáticamente delreactivo. La muestra del paciente y elconjugado enzimático no unido seeliminan mediante lavados porcentrifugación. Finalmente, se añade el

sustrato quimioluminiscente en la unidadde reacción que contiene la bola y laseñal generada es proporcional a laenzima unida.

Ciclos de incubación: 1 × 30 minutos.Tiempo hasta el primer resultado: 35 minutos




Recogida de la muestraEDTA dio resultados más bajos en elensayo. Cuando monitorizamos, lamuestra de la línea base y todas lasmuestras posteriores deberían recogerseusando el mismo tipo de tubos, sin

anticoagulante o con EDTA, oheparinizados. No intercambiar losdiferentes tipos de tubos. Por favor vea laSección Tipo alternativo de muestra parauna información más detallada.

Se recomienda el uso de unaultracentrífuga para aclarar las muestraslipémicas.

Las muestras hemolizadas podrían indicaruna mala manipulación de la muestra

antes de ser recibida por el laboratorio; eneste caso, los resultados debeninterpretarse con precaución.

Las muestras ictericas o ampliamentecontaminadas pueden dar resultadoserróneos.

La centrifugacion de las muestras desuero antes de que se forme el coagulopuede ocasionar la presencia de fibrina.Para evitar resultados erroneos debidos ala presencia de fibrina, asegurarse que seha formado el coagulo completamenteantes de centrifugar las muestras.Algunas muestras, particularmenteaquellas de pacientes sometidos a terapiaanticoagulante, pueden requerir mayortiempo de coagulacion.

Los tubos para recoger sangre dedistintos fabricantes pueden producirvalores diferentes, dependiendo del

material del tubo y de los aditivos,incluyendo barreras de gel o barrerasfísicas, activadores de la coagulación y/oanticoagulantes. El Troponina I IMMULITE2000 no ha sido analizado con todos losdistintos tipos de tubos. Para obtenerdetalles sobre los tipos tubos que se hananalizado, consulte la sección de Tipos deMuestras Alternativos.

Volumen requerido: 100 µl de suero o

plasma.Conservación: 5 días a 2–8°C,16 o 1 mesa –20°C.17

Advertencias y precaucionesPara uso diagnóstico in vitro.

Reactivos: Mantener a 2–8°C. Desecharde acuerdo con las normas aplicables.

Siga las precauciones universales ymanipule todos los componentes como sifueran capaces de transmitir agentesinfecciosos. Los materiales derivados desangre humana han sido analizados y sonnegativos para sífilis; para anticuerpos

frente al HIV 1 y 2; para el antígeno desuperficie de hepatitis B y para losanticuerpos de hepatitis C.

Se ha usado Azida sodica, enconcentraciones menores de 0,1 g/dl,como conservante. Para su eliminacion,lavar con grandes cantidades de aguapara evitar la constitucion de residuos deazidas metalicas, potencialmenteexplosivas, en las cañerías de cobre yplomo.

Sustrato quimioluminiscente: evite lacontaminación y exposición a la luzdirecta del sol. (Ver el prospecto.)

Agua: Use agua destilada o desionizada.

Materiales suministradosLos componentes representan un juegocompleto. Las etiquetas incluidas en lacaja son necesarias para el ensayo.

Cartucho de bolas de Troponina I(L2TI12)Con códigos de barras. 200 bolas,recubiertas con anticuerpo monoclonal deratón anti-troponina I. Estable a 2–8°Chasta la fecha de caducidad.L2KTI2: 1 cartucho. L2KTI6: 3 cartuchos.

Vial de reactivo de Troponina I (L2TIA2)Con códigos de barras. 18,5 ml defosfatasa alcalina (de intestino de ternera)conjugado a anticuerpo policlonal deoveja anti-troponina I, en una solucióntampón, con conservante. Estable a 2– 8°C hasta la fecha de caducidad.L2KTI2: 1 vial. L2KTI6: 3 viales.

Antes de usar, cortar la parte superior dela etiqueta en la perforación, sin dañar elcódigo de barras. Quitar el precinto delorificio del vial; encajar la cubierta

deslizante en las rampas de la tapa delreactivo.

Ajustadores de Troponina I (LTIL, LTIH)Dos viales (bajo y alto) de troponina Iliofilizada en una matriz de suero nohumano, con conservante. Reconstituyacada vial con 3,0 ml de agua destilada odesionizada. Mezclar mediante inversión o




agitación suave hasta que el materialliofilizado esté completamente disuelto.Dejar reposar durante 30 minutos yutilizar inmediatamente, o alicuotar ycongelar. Estable a –20°C durante 2meses (alicuotados) después de la

reconstitución.L2KTI2: 1 juego. L2KTI6: 2 juegos.

Antes de procesar adjustadores, colocarlas etiquetas a las alícuotas apropiadas(suministradas con el kit) sobre tubos deensayo, de forma tal que los códigos debarras puedan ser leídos por el lector.

Componentes del kit que sesuministran por separado

Multidiluyente 1Para la dilución de muestras de altaconcentración dentro del equipo. Un vialde un concentrado de suero humanonormal (listo para su uso) con nivelesindetectables troponina I, conconservante. Estable a 2–8°C durante30 días después de abrise, o hasta6 meses (alicuotados) a –20°C.L2M1Z: 25 ml.

Se suministran etiquetas con códigos debarras para usarse con este diluyente.Antes de uso, colocar la etiqueta con elcódigo de barras en un tubo de ensayo de16 X 100 mm, así los códigos de barraspueden ser identificados por el lector delinstrumento.L2M1Z: 3 etiquetas.

L2SUBM: Substrato quimioluminiscenteL2PWSM: Lavado de sonda

L2KPM: Kit de limpieza de sondaLRXT: Tubos de reacción (desechables)L2ZT: 250 Tubos del Diluyente de laMuestra (16 × 100 mm)L2ZC: 250 Taponess del Tubo delDiluyente de la Muestra

CCCM: Control de marcador cardíaco dedos niveles que contiene troponina I.

También necesariosAgua destilada o desionizada; tubos deensayo; controles.

EnsayoAviso: para obtener el funcionamientoóptimo, es importante realizar todos losprocedimientos del mantenimiento generalsegún lo definido en el manual deloperador de IMMULITE 2000.

Consulte el Manual del operador deIMMULITE 2000 para: la preparación,instalación, ajuste, ensayo yprocedimientos de control de calidad.

Intervalo de ajuste recomendado: 2 semanas.

Muestras de Control de Calidad: Utilizarcontroles o pooles de sueros con almenos dos niveles diferentes detroponina I (bajo y alto).

Valores EsperadosBasado en la relación con el kit IMMULITETroponin I (ver Comparación de Métodos),se puede esperar que este ensayo tengalos mismos rangos de normalidad.

Se analizaron con el ensayo troponina Ide IMMULITE doscientas cincuenta ycinco muestras de suero procedentes devoluntarios de laboratorio sanos, y depacientes hospitalizados que habían dadonegativo para troponina I por otrosmétodos inmunométricos. El valor de lamediana para estas muestras no fuedetectable; 98% de los valores estuvieronpor debajo de 1,0 ng/ml.

Estos límites han de considerarse sólocomo una guía. Cada Laboratorio deberáestablecer sus propios rangos dereferencia.

LimitacionesEl ensayo mostrará valores menorescuando sea usado con muestras deplasma EDTA. (Ver la sección de “Tipoalternativo de muestra”)

Los anticuerpos heterofílicos en el suerohumano pueden reaccionar con lasinmunoglobulinas de los componentes delensayo provocando interferencias con losinmunoanálisis in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Las muestras de lospacientes que frecuentemente estánexpuestos a animales o a productos

séricos animales pueden presentar estetipo de interferencia que potencialmenteocasione un resultado anómalo. Estosreactivos han sido formulados paraminimizar el riesgo de interferencia, noobstante, pueden darse interaccionesanómalas entre sueros conflictivos y loscomponentes del ensayo. Con fines dediagnóstico, los resultados obtenidos con




este ensayo siempre deben ser usados encombinación con el examen clínico, lahistoria médica del paciente y cualquierotro dato clínico relevante.

Características Analíticas

Para ver resultados representativos de lascualidades del ensayo, consulte las tablasy los gráficos. Los resultados se expresanen ng/ml. (A no ser que se indique locontrario, todos los resultados fuerongenerados en muestras de suerorecogidas en tubos sin geles oactivadores de la coagulación).

Intervalo de calibración: Hasta180 ng/ml.

Sensibilidad: 0,2 ng/ml

Efecto de gancho a altas dosis :Ninguno hasta 90 000 ng/ml.

Precisión: Las muestras fueronprocesadas por duplicado durante 20 días,en dos tandas de trabajo por día, para untotal de 40 tandas y 80 replicados. (Véasela tabla "Precisión").

Linealidad: las muestras fueron

analizadas con varias diluciones. (Véasela tabla "Linealidad" para resultadosrepresentativos).

Recuperación: Se han analizado lasmuestras cargadas 1 a 19 con tressoluciones de troponina I (200, 400 y900 ng/ml). (Véase la tabla "Recuperación" para resultadosrepresentativos).

Especificidad: El anticuerpo es altamente

específico para troponina I. (Véase latabla "Especificidad".)

Tipo alternativo de muestra: Se hanrecogido muestras (n = 12) en tubosVacutainers sin anticoagulante yheparinizados en tubos Vacutainers. Lasmuetras fueron cargadas con troponina I.Por regresión linear:

(Heparina) = 0,9 (Suero) + 1,84 ng/mlr = 0,980

Medias:40 ng/ml (Suero)37 ng/ml (Heparina)

En otro estudio, se han recogido muestras(n = 13) en tubos Vacutainers sinanticoagulante y en tubos Vacutainers conEDTA. Las muestras fueron cargadas controponina I. Por regresión linear:

(EDTA) = 0,8 (Suero) – 3,1 ng/mlr = 0,988

Medias:72 ng/ml (Suero)55 ng/ml (EDTA)

Los resultados muestran que las muestras

sanguíneas recogidas en tubos con EDTAdan lugar a resultados menores que lasrecogidas en tubos vacutainer óheparinizados.

Bilirrubina: La bilirrubina tendrá un efectosobre el ensayo provocando unadisminución de los valores. (Véase latabla "Bilirrubina".)

Hemolisis: La presencia de hemoglobina,en concentraciones hasta 512 mg/dl,no

tienen ningún efecto sobre los resultadosen términos de precisión.

Lipemia: La presencia de triglicéridos, enconcentraciones hasta 3 000 mg/dl, notienen ningún efecto sobre los resultadosen términos de precisión.

Comparación de los métodos 1: Elensayo se ha comparado con elTroponina I IMMULITE en 162 muestrasde pacientes. (Intervalo de concentración:

aproximadamente hasta 120 ng/ml, segúnla medida del ensayo IMMULITETroponina I. Véase el gráfico 1). Porregresión lineal:

(IML 2000) = 0,91 (IML) + 0,73 ng/mlr = 0,996

Medias: 12,4 ng/ml (IMMULITE 2000)12,9 ng/ml (IMMULITE)

Comparación de los métodos 2: El

ensayo se ha comparado con el kitTroponina I IMMULITE en 128 muestrasde los 162 pacientes utilizados en elestudio Comparación de los métodos 1.(Intervalo de concentración:aproximadamente hasta 15 ng/ml, segúnla medida del ensayo IMMULITETroponina I. Véase el gráfico 2). Porregresión lineal:

(IML 2000) = 1,15 (IML) – 0,06 ng/ml

r = 0,995Medias: 3,0 ng/ml (IMMULITE 2000)2,7 ng/ml (IMMULITE)

Asistencia técnicaPóngase en contacto con el distribuidornacional.




El Sistema de Calidad de Siemens MedicalSolutions Diagnostics está certificado por laISO 13485:2003.

Français

IMMULITE 2000 Troponine IDomaine d'utili sation : dosage quantitatifde la troponine I dans le sérum, le plasmahépariné ou EDTA. Ce test est réservé àun usage diagnostique in vitro avecl'analyseur IMMULITE 2000 et constitueune aide au diagnostic de l'infarctus aigudu myocarde (IDM).

Référence catalogue : L2KTI2 (200 tests),L2KTI6 (600 tests)

Code produit : TPICode couleur : gris clair

IntroductionLe diagnostic de l'infarctus aigu dumyocarde (IDM) associe des douleursthoraciques, des modifications de

l'électrocardiogramme et uneaugmentation des marqueurs desouffrance myocardique. L'isoenzyme MBde la créatine kinase (CK-MB) a été lemarqueur de prédilection pendant deuxdécennies.2 Une étude de Wu et al amontré une excellente sensibilité cliniquedu dosage de la CK-MB dans les 6 à 24heures suivant le début de l'IDM, avec unediminution de la sensibilité à partir de lapériode des 24 à 48 heures.13 Cependant,

les taux de CK-MB peuvent égalementaugmenter chez des patients atteints demaladies musculaires chroniques ouaiguës sans lésion cardiaque apparente.Dans la même étude, la myoglobine,protéine considérée comme un marqueurprécoce de l'IDM, augmente dans les 6premières heures et atteint un pic desensibilité clinique dans les 6 à 12premières heures, puis ne présente plusd'intérêt diagnostique à partir de la 24ème

heure.13 La myoglobine, bienqu'intéressante pour l'information précocequ'elle fournit, manque également despécificité pour les lésions cardiaques. Unmarqueur spécifique de la lésion dumyocarde est donc très souhaitable.

Cummins et al6,7 ont rapporté la libérationde troponine I cardiaque (cTnI) lors

d'infarctus aigu du myocarde. Denombreuses études se sont concentréessur la cTnI considérée comme lamarqueur ayant une sensibilité et unespécificité acceptables pour l'infarctusaigu du myocarde et les autres maladies

du cœur.La troponine, molécule qui lie le filamentfin (actine) des fibres des muscles striés,agit avec le calcium intracellulaire pourcontrôler l'interaction du filament fin avecle filament épais (myosine), régulant ainsila contraction musculaire. La troponine estconstituée de trois sous-unités : T, qui faitle lien entre le complexe troponine et latropomyosine (autre protéine régulatricedu muscle cardiaque) ; I, qui empêche lacontraction du muscle en l'absence decalcium ; C, qui lie le calcium.8 Latroponine I cardiaque (PM 22.5 kDa) et lesdeux isoforme*s de la troponine I dumuscle squelettique ont une grandehomologie de séquence en acidesaminés, mais la cTnI contient uneséquence N-terminale supplémentaire11 etest hautement spécifique du myocarde.1

Des études cliniques rapportent plusieurs

caractéristiques intéressantes de la cTnIcomme marqueur de souffrancemyocardique. La cTnI s'élèveprécocement chez les patients souffrantd'infarctus aigu du myocarde et atteint destaux nettement différenciables des valeursde base. Ainsi dans les 7 heures suivantl'infarctus, le test cTnI détecte 95 % despatients pour qui l'infarctus aigu dumyocarde sera confirmé.9 Les valeursplasmatiques de la cTnI restent élevéespendant plusieurs jours, fournissant unelongue période diagnostique pour détecterune lésion cardiaque.3,13 La cTnI aégalement démontré sa valeur prédictivedu risque de mortalité dans l'angorinstable et les infarctus du myocarde sansonde Q de nécrose.5

La cTnI a fait preuve d'une aussi bonneprécision diagnostique pour l'infarctus aigudu myocarde que la lactate

déhydrogénase type 1 et la CK-MB.3,10

Elle peut permettre de clarifier lediagnostic dans des cas où l'élévation dela CK-MB ne peut être attribuée aveccertitude à une lésion cardiaque,3 ce quiest le cas lors d'acte chirurgical,4 delésions traumatiques, d'insuffisance rénaleet de myopathies des musclessquelettiques.1 De plus, une étude sur les




patients ayant subit un pontagecoronarien a montré que la cTnI est unmarqueur sensible de l'infarctus dumyocarde en période périopératoire ; lepic de concentration et le momentd'apparition de celui-ci servent tous deux

de critères diagnostiques.

12

Principe du testIMMULITE 2000 Troponine I est undosage immunométriquechimiluminescent, enzymatique, en phasesolide. La phase solide (bille) est revêtued’un anticorps monoclonal murin anti-troponine I. La phase liquide consiste ende la phosphatase alcaline (intestins deveaux) conjuguée à un anticorpspolyclonal de chêvre anti-troponine I.

L’échantillon de patient et le réactif sontincubés ensemble avec la bille coatéependant 30 minutes. Durant cette périodela troponine I dans l’échantillon forme uncomplexe d’anticorps type sandwich avecl’anticorps monoclonal murin anti-troponine I sur la bille et l’enzymeconjuguée à l’anticorps polyclonal dechêvre anti-troponine I dans le réactif.

L’échantillon non lié du patient et leconjugué enzymatique sont alors éliminéspar lavage par centrifugation. Enfin, lesubstrat chimiluminescent est ajouté autube réactionnel contenant la bille, lesignal alors généré est proportionnel àl’enzyme liée.

Cycles d'incubation : 1 × 30 minutes.Temps de rendu du premier résultat : 35 minutes

Recueil des échanti llonsLes prélèvements sur EDTA donnent desrésultats plus bas. C'est pour cette raisonque lors du suivi d'un patient il estnécessaire de toujours prélever sur lemême type de tube (sec, hépariné ouEDTA). Ne pas alterner les tubes. (Voir lechapitre Performance, Utilisation dedifférents types d'échantillons pour plus

d'informations).Il est recommandé de clarifier leséchantillons hyperlipémiques parultracentrifugation.

Des échantillons hémolysés peuvent êtrerévélateurs d'une préparation inadéquatedu prélèvement avant son envoi au

laboratoire ; il faudra donc interpréter lesrésultats avec prudence.

Des échantillons ictériques ou fortementcontaminés peuvent donner des résultatsérronés.

La centrifugation des échantillonssériques avant la formation complète ducaillot peut entraîner la présence defibrine. Pour éviter les résultats erronésdûs à la présence de fibrine, s'assurer dela formation complète du caillot avant decentrifuger les échantillons. Certainséchantillons, en particulier ceux provenantde patients sous anti-coagulants, peuventnécessiter un temps plus long pour laformation du caillot.

Des tubes pour prélèvements sanguinsprovenant de fabricants différents peuventdonner des résultats différents, selon lesmatériaux et additifs utilisés, y comprisgels ou barrières physiques, activateursde la coagulation et/ou anticoagulants. Lecoffret Troponine I IMMULITE 2000 n'apas été testé sur tous les types de tubespossibles. Veuillez consulter le chapitreintitulé Autres Types d'Échantillons pourplus de renseignements sur les tubes quiont été évalués.

Volume nécessaire : 100 µl de sérum oude plasma.

Conservation : 5 jours à +2°C/+8°C16 ou1 mois à –20°C.17

Précautions d'emploiRéservé à un usage diagnostique in vitro.

Réactifs : conserver les réactifs à +2/+8°C. Eliminer les déchets conformémentà la réglementation en vigueur.

Respecter les précautions d'emploi etmanipuler tous les composants du coffretcomme des produits potentiellementinfectieux. Les réactifs dérivés de produitshumains et utilisés dans ce coffret ont subiun test sérologique pour la Syphilis et destests de dépistage pour les anticorps anti-VIH1 et 2, anti-VHC et pour l'antigène desurface de l'hépatite B, qui se sont tousavérés négatifs.

De l'azide de sodium à des concentrationsinférieures à 0,1 g/dl a été ajouté commeconservateur ; lors de l'élimination,l'évacuer avec de grandes quantités d'eaupour éviter une accumulation d'azides




métalliques explosifs dans lescanalisations.

Substrat chimiluminescent : éviter toutecontamination et l'exposition directe à lalumière solaire (voir la fiche technique).

Eau : utiliser uniquement de l'eau distilléeou désionisée.

Matériel fourniLes composants de la trousse ne peuventêtre utilisés que conjointement. Lesétiquettes à l'intérieur du coffret sontnécessaires au dosage.

Cartouche de Billes Troponine I(L2TI12)Avec code-barre. 200 billes revêtues d'unanticorps monoclonal murin anti-Troponine I. Stable à +2°C/+8°C jusqu'à ladate d'expiration.L2KTI2 : 1 cartouche. L2KTI6 : 3 cartouches.

Cartouche à réacti f Troponine I(L2TIA2)Avec code-barre. 18,5 ml d'anticorps

polyclonal de chèvre anti-Troponine Imarqué à la phosphatase acaline(intestins de veau) dans un tampon avecconservateur. Stable à +2°C/+8°C jusqu'àla date d'expiration.L2KTI2 : 1 cartouche.L2KTI6 : 3 cartouches.

Avant l'emploi, retirer la partie supérieurede l'étiquette au niveau des perforationsen ayant soin de ne pas endommager lecode-barres. Retirer le film protecteursitué sur la partie supérieure de lacartouche-réactif ; insérer le couverclecoulissant entre les glissières sur ledessus de la cartouche-réactif.

Ajusteurs Troponine I (LTIL, LTIH)Deux flacons (“Bas” et “Haut”) deTroponine I dans une matrice de sérumnon humain lyophilisée, avecconservateur. Reconstituer chaque flacon

avec 3,0 ml d'eau distillée ou désionisée.Mélanger par légers mouvements rotatifsou retournement jusqu’à complètedissolution du lyophilisat. Laisser reposerpendant 30 minutes et utiliserimmédiatement , ou aliquoter et congeler.Stable à –20°C pendant 2 mois (aliquoté)après reconstitution.L2KTI2 : 1 jeu. L2KTI6 : 2 jeux.

Avant de procéder à un ajustement, placerles étiquettes correspondant à l'aliquot(fournies avec le coffret) sur des tubes desorte que les code-barres soient lisiblespar le lecteur.

Composants du coffret fournisséparément

Multi-Diluant 1Pour la dilution à bord des échantillons deconcentration élevée. Un flacon desolution concentrée (prête à l'emploi) desérum humain normal contenant des tauxfaibles à indétectables de Troponine I,avec conservateur. Stable à +2/ +8 °Cpendant 30 jours après ouverture, ou6 mois (aliquoté) à –20 °C.L2M1Z : 25 ml

Les étiquettes code-barres sont fourniesavec le Diluant. Avant utilisation, placerl'étiquette appropriée sur un tube de16x100 mm de façon que le code-barrepuisse être lu par le lecteur de l'appareil.L2M1Z : 3 étiquettes

L2SUBM : Substrat chimiluminescentL2PWSM : Solution de lavageL2KPM : Coffret de décontamination del’aiguille de prélèvementLRXT : Godets réactionnels (jetables)L2ZT: 250 Tubes À essai De Diluantéchantillon (16 x 100 mm)L2ZC: 250 Bouchons pour tubes dediluants

CCCM : Contrôle Marqueurs Cardiaquesà deux niveaux de concentrationcontenant de la Troponine I.

Egalement requisEau distillée ou désionisée ; tubes ;contrôles

Protocole de dosageNoter que pour des performancesoptimales, il est important de réalisertoutes les procédures de maintenance deroutine selon les instructions du Manueld'Utilisation IMMULITE 2000.

Se reporter au manuel d'utilisation del'IMMULITE 2000 pour : la préparation, ledémarrage du système, les ajustements,le dosage et les procédures de contrôlede qualité.

Intervalle d'ajustement recommandé : 2 semaines.




Echantillons pour le contrôle de qualité : Utiliser des contrôles ou des pools desérums avec au moins deux niveaux deconcentration (faible ou élevé) deTroponine I.

Valeurs attenduesCompte-tenu de sa corrélation avec le testIMMULITE Troponine I (voir méthode decomparaison), on peut attendre de ce testqu’il ait, pour l’essentiel, les mêmesvaleurs de référence.

Deux cent cinquante cinq échantillonssériques provenant de volontaires sains etde patients hospitalisés, avérés négatifspour la troponine I par une autre méthode

immunométrique, ont été dosés avec laméthode IMMULITE Troponine I. Lavaleur médiane de ces échantillons setrouvait inférieure à la limite de détectiondu dosage ; 98 % des valeurs ont ététrouvées inférieures à 1,0 ng/ml.

Utiliser ces valeurs à titre indicatif uniquement. Chaque laboratoire devraitétablir ses propres valeurs de référence.

LimitesLa méthode donne des valeurs plusbasses avec le plasma EDTA. Se référerau chapitre sur les Utilisation de différentstypes d'échantillons pour plusd'informations.

Les anticorps hétérophiles du sérumhumain peuvent réagir avec lesimmunoglobulines faisant partie descomposants du coffret et interférer avec

les immunodosages in vitro. [Voir BoscatoLM, Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1998:34:27-33.] Les échantillonsprovenant de patients fréquemmentexposés aux animaux ou aux produitssériques d'origine animale peuventprésenter ce type d'interférence pouvantpotentiellement donner un résultatanormal. Ces réactifs ont été mis au pointafin de minimiser le risque d'interférence,

cependant des interactions potentiellesentre des sérums exceptionnels et lescomposants du test peuvent se produire.Dans un but diagnostique, les résultatsobtenus avec ce dosage doivent toujoursêtre utilisés en association avec unexamen clinique, l'histoire médicale dupatient et d'autres résultats.

Performances du testConsulter les tableaux et graphiques pourobtenir les données représentatives desperformances du test. Les résultats sontdonnés en ng/ml. (En l'absenced'indication contraire, les résultats ci-

dessous ont été obtenus avec deséchantillons sériques prélevés sur tubesans gel, ni activateur de coagulation).

Domaine de mesure : jusqu'à 180 ng/ml.

Sensibilité analytique : 0,2 ng/ml.

Effet-crochet :aucun jusqu'à 90 000 ng/ml.

Précision : Des échantillons ont étédosés en doublets pendant 20 jours, 2

séries par jour, pour un total de 40 sérieset 80 résultats. (Voir le tableau“Precision”.)

Linéarité : les échantillons ont été testésavec des taux de dilution variés. (Voir letableau “ Linearity ” pour des donnéesreprésentatives.)

Récupération : les échantillons testés ontété chargés dans un rapport de 1 à 19avec trois solutions de Troponine I (200,

400 et 900 ng/ml). (Voir le tableau“ Recovery ” pour des donnéesreprésentatives.)

Spécifici té : l'anticorps utilisé esthautement spécifique de la Troponine I.(Voir le tableau « Specificity ».)

Utilisation de différents typesd'échantillons : Des échantillons (n = 12)ont été prélevés sur tubes vacutainer secset héparinés. Les paires d'échantillons ontété chargés de Troponine I. Parrégression linéaire :

(Héparine) = 0,9 (Sérum) + 1,84 ng/mlr = 0,980

Moyennes : 40 ng/ml (Sérum)37 ng/ml (Héparine)

Dans une autre étude, des échantillons(n = 13) ont été prélevés sur tubesvacutainer secs et EDTA. Les pairesd'échantillons ont été chargés deTroponine I. Par régression linéaire :

(EDTA) = 0,8 (Sérum) – 3,1 ng/mlr = 0,988

Moyennes :72 ng/ml (Sérum)55 ng/ml (EDTA)




Les résultats montrent que leséchantillons sanguins prélevés sur tubesvacutainer EDTA donnent des résultatsplus bas que les échantillons prélevés surtubes secs ou héparinés.

Bilirubine : peut avoir un effet sur le

dosage en abaissant les valeurs. (Voir letableau « Bilirubin ».)

Hémolyse : La présence d'hémoglobinene présente aucun effet sur les résultats nisur la précision du dosage si laconcentration ne dépasse pas 512 mg/dl.

Lipémie : La présence de triglycérides neprésente aucun effet sur les résultats nisur la précision du dosage si laconcentration ne dépasse pas

3 000 mg/dl.Comparaison de méthode 1 : Le dosagea été comparé au test IMMULITETroponine I sur 162 échantillons depatients (dont les concentrations allaient

jusqu'à environ 120 ng/ml, selon ledosage IMMULITE Troponine I. Voir legraphique 1.) Par régression linéaire:

(IML 2000) = 0,91 (IML) + 0,73 ng/mlr = 0.996

Moyennes : 12.4 ng/ml (IMMULITE 2000)12.9 ng/ml (IMMULITE)

Comparaison de méthode 2: Le dosagea été comparé au test IMMULITETroponine I sur 128 échantillonsprovenant des 162 échantillons de patientutilisés pour la comparaison de méthode 1(dont les concentrations allaient jusqu'àenviron 15 ng/mL, selon le dosage

IMMULITE Troponin I. Voir le graphique2.) Par régression linéaire:

(IML 2000) = 1,15 (IML) – 0,06 ng/mlr = 0,995

Moyennes :3,0 ng/ml (IMMULITE 2000)2,7 ng/ml (IMMULITE)

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Troponina I

Uso: Ad uso diagnostico in vitro conl'analizzatore IMMULITE 2000 — per lamisurazione quantitativa della Troponina Inel siero, nel plasma eparinizzato o EDTA,quale ausilio nella diagnosi dell'infartoacuto del miocardio (AMI).

Codice: L2KTI2 (200 test), L2KTI6 (600test)

Codice del Test: TPIColore: Grigio Chiaro

Riassunto e Spiegazione delTestL'infarto acuto del miocardio (AMI) vienediagnosticato generalmente sulla base deldolore al petto, di cambiamentinell'elettrocardiogramma e di un aumentodei marcatori del danno miocardico.L'isoenzima MB della Creatin Chinasi (CK-MB) è stato il marcatore di elezione per

due decenni.2

Uno studio condotto da Wu,et al. ha trovato un'eccellente sensibilitàclinica del dosaggio CK-MB tra 6 e 24 oredopo l'inizio dell'AMI, con una sensibilitàminore a partire dalle 24–48 ore ed inpazienti con malattie muscolari acute ocroniche senza apparente dannocardiaco. Nello stesso studio, lamioglobina, una proteina muscolareconsiderata un marcatore precocedell'AMI, ha presentato valori elevati nelle

6 ore dopo l'inizio dell'infarto ed haraggiunto il picco massimo di sensibilitànell'intervallo 6–12 ore dopo l'inizio, nonpresentando però nessun valorediagnostico 24 ore dopo l'inizio.13 Benchèsia importante per le informazioni inizialiche fornisce, la mioglobina manca dellaspecificità per il danno cardiaco. Perquesto motivo un marcatore specifico peril danno miocardiaco è di grande utilità.

Cummins, et al.6,7

ha registrato il rilasciodella Troponina I cardiaca (cTnI) nell'AMI.Molti studi si sono concentrati sulla cTnIquale marcatore di interesse che presentauna sensibilità e specificità accettabili perl'AMI ed altre malattie cardiache.

La Troponina, una molecola che si lega alfilamento sottile (l'actina) dei muscolistriati, agisce con il calcio intracellulare




per controllare l'interazione del filamentosottile con il filamento largo (la miosina),regolando in questo modo la contrazionedei muscoli. La Troponina è composta datre sottounità: T, che collega il complessodella Troponina e la Tropomiosina I

(un'altra proteina regolatrice dei muscolicardiaci); che blocca la contrazione deimuscoli in assenza di calcio; e C, che legail calcio.8 La Troponina I cardiaca (pesomolecolare 22,5 kDa) e le due isoformescheletriche muscolari della Troponina Ipresentano una considerevole omologianella sequenza degli aminoacidi, ma lacTnI contiene una sequenza N-terminaleaggiuntiva11 ed è molto specifica per ilmiocardio.1

Studi clinici evidenziano alcunecaratteristiche auspicabili della cTnI qualemarcatore del danno miocardico. La cTnIaumenta presto nei pazienti colpiti dainfarto e raggiunge livelli lontani dai valoridi base, in modo che 7 ore dopo l'inizio, ildosaggio del cTnI rileva il 95% dei pazientinei quali sarà confermata la presenzadell'infarto9. I valori plasmatici della cTnIrimangono elevati per alcuni giorni,

fornendo una finestra lunga per larilevazione del danno cardiaco.3,13 La cTnIoffre anche un valore comprovato per laprevisione del rischio di mortalitànell'angina instabile e nell'infartomiocardico senza onda Q.5

La cTnI ha dimostrato un'accuratezzadiagnostica equivalente per l'AMI quandoviene paragonata alla lattato deidrogenasidi tipo 1 ed alla CK-MB,3,10 e può chiarirela diagnosi in contesti in cui la CK-MBelevata non può essere attribuita concertezza solamente al danno cardiaco.3 Questi casi includono interventi chirurgici,traumi, insufficienza renale, crisi, emiopatie scheletro-muscolari.1 Inoltre, unostudio condotto in pazienti sottoposti adinnesto di bypass alle coronarie (CABG)ha dimostrato che il cTnI è un marcatoresensibile per l'infarto miocardiacoperioperativo (PMI); la concentrazione

massima e l'ora in cui viene raggiuntaservono quali criteri di diagnosi.12

Principio del procedimentoIMMULITE 2000 Troponina I è undosaggio immunometrico inchemiluminescenza amplificatadall’enzima su fase solida. La fase solida(biglia) è coattato con anticorpo

monoclonale di topo anti-troponina I. Lafase liquida è costituita da anticorpopoliclonale di capra anti-troponina Iconiugata da fosfatasi alcalina (daintestino di vitello).

Il campione del paziente e il reagente

sono incubati insieme alla biglia coattataper 30 minuti. Durante questo tempo, latroponina I presente nel campione formaun immunocomplesso (sandwich) conl’anticorpo monoclonale di topo anti-troponina I presente sulla biglia el’anticorpo policlonale di capra coniugatoall’enzima presente nel reagente. Tutto ciòche non si è legato viene rimossoattraverso lavaggi centrifughi. Infine, ilsubstrato chemiluminescente vieneaggiunto alla test unit/cuvetta contenentela biglia con generazione del segnalechemiluminescente proporzionaleall’enzima legato.

Cicli d'incubazione: 1 × 30 minuti.Tempo al Primo Risultato: 35 minuti.

Raccolta dei CampioniCampioni di plasma EDTA provocano

risultati più bassi. Durante il monitoraggio,il campione con valore base e tutti icampioni successivi devono essereprelevati utilizzando lo stesso tipo diprovetta, semplice, EDTA o eparinizzata.Non interscambiare il tipo di provetta.Vedere la sezione “Tipo di CampioneAlternativo” per ulteriori informazioni.

Si consiglia l'utilizzo di un'ultracentrifugaper schiarire i campioni lipemici.

I campioni emolizzati posson indicare iltrattamento non idoneo del campioneprima dell'arrivo al laboratorio; per questomotivo, i risultati devono essereinterpretati con prudenza.

I campioni itterici o grossolamentecontaminati possono produrre risultatierrati.

La centrifugazione dei campioni di sieroprima che la coagulazione sia completa

può produrre fibrina. Per evitare risultatierrati dovuti alla presenza di fibrina,assicurarsi che il processo dicoagulazione sia completo prima dicentrifugare i campioni. Alcuni campioni,in modo particolare quelli di pazientisottoposti a terapia con anticoagulanti,possono richiedere tempi di coagulazionepiù lunghi.




Provette per il prelievo di sangue diproduttori diversi possono dare valoridifferenti, a seconda dei materiali e degliadditivi usati, incluso gel o barriere fisiche,attivatori di coaguli e/o anticoagulanti.L'IMMULITE 2000 Troponina I non é stato

verificato con tutte le possibili variazioni ditipi di provette. Consultare la sezioneriguardante Tipologia di CampioniAlternativi per dettagli sulle provettetestate.

Volume Richiesto: 100 µL di siero oplasma.

Conservazione: 5 giorni a 2–8°C16 o1 mese a –20°C.17

Avvertenze e precauzioniAd uso diagnostico in vitro.

Reagenti: Conservare a 2–8°C. Scartarein conformità alle leggi applicabili.

Seguire le precauzioni universali, emaneggiare tutti i componenti come sefossero capaci di trasmettere agentiinfettivi. Sono stati analizzati i materiali disorgente dal sangue umano e sono statitrovati non reattivi per sifilide; per anticorpiad HIV 1 e 2; per l'antigeno superficialedell'epatite B; e per anticorpi all'epatite C.

E' stata aggiunta Sodio Azide aconcentrazioni inferiori a 0,1 g/dL comeconservante. Al momentodell'eliminazione, irrorare con molta acquaper evitare la formazione di azidimetalliche potenzialmente esplosive nelletubature di piombo e di rame.

Sottostrato chemiluminescente: Evitarela contaminazione e l'esposizione alla lucedel sole diretta. (Vedere l'inserimento).

Acqua: Utilizzare acqua distillata odeionizzata.

Materiali fornit iI componenti costituiscono un unico set.Le etichette all'interno della confezionesono necessarie per eseguire i dosaggi.

Contenitore di Sferette Troponina I(L2TI12)Con codice a barre. 200 sferette coattatecoattate con un anticorpo monoclonale ditopo anti-Troponina I. Stabile a 2–8°C finoalla data di scadenza.L2KTI2: 1 confezione. L2KTI6: 3 confezioni.

Porta Reagente Troponina I (L2TIA2)Con codice a barre. 18,5 mL di fosfatasialcalina (intestino di vitello) coniugata conun anticorpo policlonale di capra anti-Troponina I in un tampone, conconservanti. Stabile a 2–8°C fino alla data

di scadenza.L2KTI2: 1 porta reagente.L2KTI6: 3 porta reagenti.

Prima dell'utilizzo rimuovere la partesuperiore dell'etichetta lungo laperforazione senza danneggiare il codicea barre. Togliere il foglio protettivo dallaparte superiore del flacone. Far scattarenella corretta posizione il coperchioscorrevole lungo le guide del coperchiodel reagente.

Aggiustator i Troponina I (LTIL, LTIH)Due flaconi (Basso ed Alto), ciascuno conTroponina I liofila in una matrice di sieronon umano, con conservanti. Ricostituireciascun flacone con 3,0 mL di acquadistillata o deionizzata. Mescolaredelicatamente fino a che il materiale liofilonon sia completamente sciolto. Attenderealmeno 30 minuti e usare

immediatamente, o aliquotare econgelare. Stabile a –20°C per 2 mesi(aliquotato) dopo ricostituzione.L2KTI2: 1 set. L2KTI6: 2 set.

Prima di eseguire i regolatori ricalibrarecollocare le etichette giuste sulle aliquote(fornite col kit) sulle provette cosicché icodici a barre possano essere registratidal lettore.

I componenti dei kit sonofornit i separatamente

Multi-Diluente 1Per la diluizione interna di campioni adelevata concentrazione. Una provetta disiero umano normale processato,concentrato (pronto all'uso), contenentelivelli da non rilevabili a bassi di troponinaI, con conservanti. Stabile a 2–8°C per30 giorni dopo l'apertura, e per 6 mesi

(aliquotato) a –20°C.L2M1Z: 25 mL.

Vengono Fornite Le provette da utilizzarsicon il diluente. Prima dell'utilizzo,collocare un'etichetta appropriata su unaprovetta 16 × 100 mm cosicchè i codici abarre possano essere letti dal lettore




interno.L2M1Z: 3 etichette.

L2SUBM: Substrato ChemiluminescenteL2PWSM: Tampone di lavaggio dell'AgoL2KPM: Kit di Pulizia dell'AgoLRXT: Tubi di Reazione (monouso)

L2ZT: 250 Provette (16 x 100 mm) perDiluente del CampioneL2ZC: 250 Tappini per Provette perDiluente del Campione

CCCM: controllo dei marcatori cardiaci è adue livelli che contiene Troponina I.

Materiali richiestiAcqua distillata o deionizzata; Provette;controlli.

Procedura del DosaggioAttenzione: per avere prestazioni ottimali,è importante effettuare le procedure dimanutenzione di routine cosiccomedefinito nel Manuale dell'Operatoredell'IMMULITE 2000.

Vedere il manuale dell'operatoreIMMULITE 2000 per: la preparazione, lamessa a punto, la regolazione, la prova edi procedimenti per il controllo della qualità.

Intervallo di Calibrazione Consigliato: 2 settimane.

Campioni per il controllo della qualità: Usare i controlli o campioni di campionicon almento due livelli (basso ed alto) ditroponina I.

I valor i attesiSulla base del suo rapporto con il kit

IMMULITE Troponina I (vediComparazione di Metodi), ci si attendeche il dosaggio abbia essenzialmente glistessi range di riferimento.

Sono stati dosati 255 campioni di sieroprovenienti da volontari sani dellaboratorio e da pazienti ricoverati inospedale e risultati negativi per laTroponina I mediante un altro dosaggioimmunometrico, utilizzando il dosaggio

IMMULITE Troponina I. Il valore medianoper questi campioni era non rilevabile; il98% dei valori erano inferiori a 1,0 ng/mL.

Considerare questi limiti soltanto comelinee guida. Ogni laboratorio dovrebbestabilire le proprie gamme di riferimento.

LimitazioniIl dosaggio fornisce risultati più bassi seutilizzato con plasma EDTA. (Vedi lasezione “Tipo di Campione Alternativo”.)

Gli anticorpi eterofili presenti nel siero

umano possono reagire con leimmunoglobuline presenti nellecomponenti del dosaggio provocandoun'interferenza con i dosaggi in vitro. [VediBoscato LM, Stuart MC. Heterophilicantibodies: a problem for allimmunoassays. Clin Chem 1988:34:27-33.] Campioni di pazienti routinariamenteesposti agli animali o a prodotti derivati dasiero di animali possono presentarequesto tipo di interferenza causa

potenziale di risultati anomali. Questireagenti sono stati formulati perminimizzare il rischio di interferenze,tuttavia, possono verificarsi interazionipotenziali tra sieri rari e componenti deltest. A scopo diagnostico, i risultati ottenutida questo dosaggio devono sempreessere utilizzati unitamente all'esameclinico, all'anamnesi del paziente e adaltre indagini di laboratorio.

Prestazioni del DosaggioVedere le tabelle e le grafiche per i datirappresentativi delle prestazioni dellaprova. I risultati sono espressi in ng/mL.(Se non è notato altrimenti, tutti i risultatisono stati generati nei campioni di sieroraccolti in tubi senza barriere di gelatina oadditivi che promuovono la coagulazione.)

Gamma di calibrazione: Fino a180 ng/mL.

Sensibili tà analitica: 0,2 ng/mL

Effetto di dosi fort i: Nessun effetto fino a 90 000 ng/mL.

Precisione: I campioni sono stati elaboratiin doppio da 20 giorni, due esecuzioni algiorno, per un totale di 40 esecuzioni e 80ripetizioni. (Vedere la tabella “Precisione”)

Linearità: I campioni sono stati provatisotto varie diluzioni (Vedere la tabella“Linearità per i dati rappresentativi).

Ricupero: Sono stati analizzati i campionietichettati da 1 a 19 con tre soluzioni diTroponina I (200, 400 e 900 ng/mL).(Vedere la tabella “Ricupero per i datirappresentativi).




Specificità: L'anticorpo è molto specificoper Troponina I. (Vedere la tabella"Specificità".)

Tipo di Campione Alternativo: Icampioni (n = 12) sono stati prelevati inprovette semplici o eparinizzate

vacutainer. Ai campioni è stata aggiuntaTroponina I. Mediante regressione lineare:

(Eparina) = 0,9 (Siero) + 1,84 ng/mLr = 0,980

Media: 40 ng/mL (Siero)37 ng/mL (Eparina)

In un altro studio, I campioni (n = 13) sonostati prelevati in provette semplici ovacutainer EDTA. Ai campioni è stata

aggiunta Troponina I. Medianteregressione lineare:

(EDTA) = 0,8 (Siero) – 3,1 ng/mLr = 0,988

Media:72 ng/mL (Siero)55 ng/mL (EDTA)

I risultati dimostrano che i campioni disangue raccolti in provette vacutainerEDTA hanno prodotto risultati di

Troponina I più bassi dei campioni disangue raccolti in provette semplici edeparinizzate.

Bilirubina: La bilirubina esercita un effettosulla prova, causando una depressionedei valori. (Vedere la tabella "Bilirubina".)

Emolisi: La presenza di emoglobina inconcentrazioni fino a 512 mg/dL non hanessun effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.

Lipemia: La presenza di trigliceridi inconcentrazioni fino a 3 000 mg/dL non hanessun Effetto sui risultati entro il range diprecisione del dosaggio.

Comparazione di Metodi 1: Il dosaggio èstato comparato all’IMMULITE Troponina Iin 162 campioni di pazienti. Medianteregressione lineare:

(IML 2000) = 0,91 (IML) + 0,73 ng/mLr = 0,996

Media: 12,4 ng/mL (IMMULITE 2000)12,9 ng/mL (IMMULITE)

Comparazione di Metodi 2: Il dosaggio èstato comparato al dosaggio IMMULITETroponina I su 128 campioni dei 162utilizzati per la Comparazione di Metodi 1.(Gamma di concentrazione fino a

15 ng/mL circa cosiccome misurato daldosaggio IMMULITE Troponina I. Vederela grafica 2.) Mediante regressionelineare:

(IML 2000) = 1,15 (IML) – 0,06 ng/mLr = 0,995

Media: 3,0 ng/mL (IMMULITE 2000)2,7 ng/mL (IMMULITE)

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Troponina IUtilização: Para o doseamentoquantitativo da troponina I em soro,plasma heparinizado ou plasma comEDTA. Para uso diagnóstico in vitro emconjunto com o analisador IMMULITE2000, como auxílio no diagnóstico deenfarte agudo do miocárdio.

Números de catálogo: L2KTI2 (200testes), L2KTI6 (600 testes)

Código do teste: TPICor: Cinzento claro

Sumário e explicação do teste

O enfarte agudo do miocárdio égeralmente diagnosticado com base emdores no peito, mudançaselectrocardiográficas, e elevação demarcadores de lesão ao miocárdio. Aisoenzima MB da creatina kinase (CK-MB)tem sido o marcador preferido há mais deduas décadas.2 Um estudo de Wu, et al.encontrou uma excelente sensibilidadeclínica no doseamento de CK-MB entre 6e 24 horas após a ocorrência do enfarteagudo de miocárdio, com sensibilidadediminuída no início do intervalo de 24 a 48horas. 13 Porém, os níveis de CK-MBtambém podem aumentar em doentescom doença muscular crónica ou aguda eque aparentemente não possuem lesãocardíaca. No mesmo estudo, amioglobina, uma proteína muscularconsiderada como um marcador precoce




de enfarte agudo do miocárdio, torna-seelevada no período de 6 horas após oataque, e alcançou sensibilidade clínicamáxima no intervalo de 6 a 12 horas apóso ataque, e ao fim de 24 horas já nãooferece um valor de diagnóstico.13 A

mioglobina, embora valiosa pelainformação prematura que proporciona,também carece de especificidade para alesão cardíaca. Um marcador específicopara a lesão cardíaca é, portanto,altamente desejável.

Cummins, et al.6,7 relatou a libertação detroponina I cardíaca (cTnI) em enfarteagudo do miocárdio. Vários estudosreferiram a cTnI como candidata amarcador com sensibilidade eespecifidade aceitáveis para enfarteagudo do miocárdio e outras doençascardíacas.

A Troponina, molécula que se liga aofilamento fino (actina) de fibrasmusculares estriadas, actua com o cálciointracelular para controlar a interacção dofilamento fino com o filamento grosso(miosina), regulando assim a contracçãomuscular. A troponina consiste de três

sub-unidades: T, que liga o complexo detroponina e tropomiosina (outra proteínareguladora do músculo cardíaco); I, queprevine a contracção muscular naausência de cálcio; e C, que liga o cálcio.8 A troponina I cardíaca (MW 22,5 kDa) eas duas isoformas de músculo esqueléticoda troponina I possuem uma considerávelhomologia na sequência de aminoácidos,mas cTnI contém uma sequênciaadicional de terminal-N11 e é altamenteespecífica para o miocárdio.1

Estudos clínicos relatam várias funçõesdesejáveis de cTnI como marcador delesão do miocárdio. O cTnI eleva-seprecocemente em doentes com enfarteagudo do miocárdio e atinge níveis quesão claramente diferentes dos valoresbasais de referência, logo nas 7 horasapós o ataque, o teste de cTnI detecta 95por cento dos doentes nos quais o enfarte

será confirmado.9

Os valores em plasmade cTnI permanecem elevados por váriosdias, proporcionando uma longaoportunidade de” janela” para a detecçãoda lesão cardíaca.3,13 O cTnI tambémdemonstrou o seu valor na predição derisco da mortalidade em angina instável eem enfarte do miocárdio de ondas não Q.5

O cTnI demonstrou uma precisãodiagnóstica equivalente para enfarteagudo do miocárdio quando comparadocom a lactato desidrogenase tipo 1 e CK-MB,3,10 e pode esclarecer diagnósitcos emcontextos onde níveis elevados de CK-MB

não podem ser atribuídos, com certeza,apenas à lesão cardícada.3 Estescontextos incluem cirurgia,4 lesãotraumática, insuficiência renal,convulsões, e miopatias do músculoesquelético.1 Além disso, um estudorealizado em doentes submetidos aenxerto de desvio de artéria coronária(CABG) demonstraram que cTnI é ummarcador sensível para enfarteperioperativo do miocárdio (PMI); tanto a

concentração máxima como o tempo dopico serviram como critério dediagnóstico.12

Princípio do ProcedimentoIMMULITE 2000 Troponina I é um ensaioimuno enzimático de fase sólida porquimioluminescência. A fase sólida(esfera) está revestida com um anticorpomonoclonal anti-troponina I de murino. A

fase líquida consiste em fosfatase alcalina(intestino de bezerro) conjugada com umanticorpo policlonal de cabra anti-troponina I.

A amostra do paciente e o reagente sãoincubados com a esfera durante 30minutos. Durante este período, atroponina I da amostra forma umasandwich com o anticorpo monoclonal demurino anti-troponina I da esfera e oanticorpo policlonal de cabra anti-trombinaI do reagente. A amostra do paciente quenão se ligou e o enzima conjugado sãoremovidos na lavagem por centrifugação.Finalmente o substratoquimioluminescente é adicionado àunidade de teste que contem a esferagerando-se um sinal proporcional aoenzima ligado.

Ciclos de Incubação: 1 × 30 minutos.Tempo para o Primeiro Resultado:

35 minutos.

ColheitaPlasmas colhidos com EDTA apresentamresultados inferiores de doseamento.Durante a monitorização, a amostra dereferência e todas as amostrassubsequentes devem ser colhidas usando




o mesmo tipo de tubo, seja simples, EDTAou heparinizado. Não permute o tipo detubo. Por favor, ver a secção de Tipo deamostras alternativas para informaçõesadicionais.

Recomenda-se o uso de uma ultra

centrífuga para clarear amostraslipémicas.

Amostras hemolisadas podem indicartratamento incorrecto de uma amostraantes do envio para o laboratório; portantoos resultados devem ser interpretadoscom cuidado.

Amostras ictéricas ou totalmentecontaminadas podem causar resultadoserrados.

A centrifugação de amostras de soroantes da formação completa do coágulopode resultar na presença de fibrina. Paraprevenir resultados errados devido àpresença de fibrina, certifique-se que aformação do coágulo foi completa antesda centrifugação das amostras. Algumasamostras, em especial as de doentes querecebem terapia anticoagulante podemrequerer um maior tempo de formação do

coágulo.Os tubos para colheita sanguínea dediferentes fabricantes, podem originardiferentes valores, dependendo dosmateriais e aditivos, incluíndo gel oubarreiras fisicas, activadores do coáguloe/ou anti coagulantes. IMMULITE 2000Troponin I não foram ainda testados comtodas as possiveis variações originadaspelos tipos de tubos. Consultar a secção

Tipos de Amostras Alternativas para obterdetalhes sobre os tubos que foramtestados.

Volume de amost ra: 100 µL de soro ouplasma.

Estabilidade: 5 dias a 2–8°C,16 ou 1 mêsa –20°C.17

PrecauçõesPara uso de diagnóstico in vitro.

Reagentes: Manter a 2–8°C. Elimine deacordo com as leis aplicáveis.

Manipule com as devidas precauçõestodos os materiais capazes de transmitirdoenças infecciosas. As matérias primas,obtidas de soro humano, foram testadas,revelando resultados negativos para asífilis, para os anticorpos do vírus da

imunodeficiência humana (HIV) 1 e 2;para o antigénio de superfície da hepatiteB (HBsAg) e para os anticorpos do vírusda hepatite C.

Azida de sódio foi adicionada comoconservante; para evitar acumulações de

azidas metálicas explosivas emcanalizações de cobre e alumínio, osreagentes devem ser rejeitados no esgotoapenas se estiverem diluídos e foremlavados com grandes volumes de água.

Substrato quimio luminescente: Evitecontaminação e exposição à luz directa(ver bula do substrato).

Água: Use água destilada ou deionizada.

Materiais FornecidosOs componentes formam um conjunto unoe indivisível. Os códigos de barras nointerior das caixas são necessárias para oensaio.

Embalagem de pérolas de Troponina I(L2TI12)Com código de barras. Contém 200pérolas revestidas com anticorpo

monoclonal de rato anti-troponina I.Estável até a data de validade a 2–8°C.L2KTI2: 1 embalagem. L2KTI6: 3 embalagens.

Embalagem de Reagente deTroponina I (L2TIA2)Com código de barras. Contém 18,5 mLde fosfatase alcalina (de intestino de vitela)conjugado com anticorpo policlonal decabra anti-troponina I tamponizado, comconservante. Estável até a data devalidade a 2–8°C.L2KTI2: 1 embalagem.L2KTI6: 3 embalagens.

Antes de utilizar, retire a etiqueta deprotecção da tampa deslizante; levante atampa,remova o remanescente daetiqueta com o cuidado de não danificar ocódigo de barras. Remova o selo dealumínio do topo da embalagem, encaixe

a tampa deslizante nas ranhuras everifique se a tampa desliza.

Ajustes Troponina I (LTIL, LTIH)Dois fracos (nível alto e baixo) detroponina I liofilizada numa matriz de soronão humano, com conservante.Reconstitua cada frasco com 3,0 mL deágua destilada ou deionizada. Misture por




inversão ou movimentos gentis até todo omaterial liofilizado estar dissolvido. Deixerepousar durante 30 minutos e utilizeimediatamente, ou aliquotar e congelar.Estável por 2 meses após reconstituição(aliquotada) a –20°C.

L2KTI2: 1 conjunto. L2KTI6: 2 conjuntos.Antes de realizar qualquer ajuste, coloqueas etiquetas de alíquota apropriadas(fornecidas com o "kit") em tubos deamostra de forma que os códigos debarras possam ser lidos pelo dispositivode leitura do aparelho.

Componentes do kit fornecidosseparadamente

Multi-Diluente 1Para diluição de amostras no aparelho.Um frasco de concentrado pronto a usar,constítuido por soro humano normal,processado, com níveis baixos ouindetectáveis de Troponina I, comconservante. Estável, após a abertura,durante 30 dias a 2–8°C, ou por 6 meses(aliquotado) a –20°C.L2M1Z: 25 mL.

Etiquetas de código de barras sãofornecidas para usar com o diluente.Antes de usar, colocar a etiquetaapropriada num tubo de teste(16 × 100 mm) de modo a que o códigode barras possa ser lido pelo dispositivode leitura do aparelho.L2M1Z: 3 etiquetas.

L2SUBM: Substrato quiomioluminescenteL2PWSM: Solução de lavagem

L2KPM: Kit de limpeza do pipetadorLRXT: Tubos de reacção (descartáveis)L2ZT: 250 Tubos de diluente da amostra(16 x 100 mm)L2ZC: 250 Tampas para tubos de diluenteda amostra

CCCM: Controlo de Marcador Cardíacode dois níveis, com troponina I.

Também necessárioÁgua destilada ou desionizada; tubos deamostra; controlos.

Procedimento do doseamentoTêr em atenção que para obter umdesempenho óptimo, é importanteefectuar todos os procedimentos demanutenção de rotina conforme definido

no Manual de Operador do IMMULITE2000.

Consulte o Manual do Operador deIMMULITE 2000 para para instruçõessobre preparação, ajuste, doseamento eprocedimentos de controlo de qualidade.

Intervalo entre ajustes aconselhável: 2 semanas.

Amostras de controlo de qualidade: Utilize controlos ou "pools" com, pelomenos, dois níveis (alto e baixo) detroponina I.

Valores de ReferênciaCom base na relação com o IMMULITE

Troponin I (ver comparação de métodos),deve esperar-se que o ensaio tenhaessencialmente os mesmos valores dereferência.

255 amostras de soro de voluntáriossaudáveis e de doentes hospitalizados quetestaram negativo para troponina I poroutro método imunométrico foramanalisados usando o doseamento deTroponina I IMMULITE. O valor médio paraestas amostras foi não-detectável; 98% dosvalores eram menores que 1,0 ng/mL.

Considere estes limites apenas comodirectrizes. Cada laboratório deveestabelecer os seus próprios valores dereferência.

LimitaçõesO ensaio fornece valores mais baixosquando se usa plasma com EDTA. (Vêr a

secção “Tipo de amostras alternativas”.)Os anticorpos heterófilicos no sorohumano podem reagir com asimunoglobulinas presentes no ensaio,causando interferência com osimunoensaios in vitro. [Ver Boscato LM,Stuart MC. Heterophilic antibodies: aproblem for all immunoassays. Clin Chem1988:34:27-33.] Amostras de doentesexpostas em rotina a produtos ou sorosde animais podem demonstrar este tipode interferência, potencial causador deresultados anómalos. Estes reagentesforam formulados para minimizar o riscode interferência, contudo podem ocorrerpotenciais interacções entre soros (raros)e componentes do teste. Para fins dediagnóstico, os resultados obtidos nesteensaio devem ser sempre analisados em




combinação com o exame clínico, históriade medicação do doente e outros factoresque possam ser correlacionar.

Características do EnsaioConsulte Tabelas e Gráficos para dadosrepresentativos do desempenho dodoseamento. Os resultados sãoapresentados em ng/mL. (Salvo referênciaem contrário, todos os dados provêm deamostras de soro colhidas em tubos semanticoagulantes, barreiras de gel ouaditivos promotores da coagulação.)

Calibração: Até 180 ng/mL.

Sensibilidade Analítica: 0,2 ng/mL

Efeito Hook de Alta Dose: nenhum até 90 000 ng/mL.

Precisão: Amostras foram processadasem duplicado num período de 20 dias, doisensaios por dia, perfazendo um total de 40ensaios e 80 réplicas. (Consulte a tabela“Precisão”.)

Linearidade: As amostras foramdoseadas sob várias diluições. (Consultea tabela "Linearidade" para dados

representativos.)Recuperação: As amostras foramadicionadas na relação de 1 para 19 comtrês soluções troponina I (200, 400 e900 ng/mL) antes do doseamento. (Vertabela de "Recovery" para dadosrepresentativos.)

Especificidade: O doseamento éespecífico para troponina I. (Ver tabela de"Specificity".)

Tipo de amostras alternativas: Asamostras (n = 12) foram extraídas paratubos de contenção a vácuoheparinizados e simples. Às amostras foiadicionada troponina I. Regressão linear:

(Heparina) = 0,9 (Soro) + 1,84 ng/mLr = 0,980

Médias: 40 ng/mL (Soro)37 ng/mL (Heparina)

Em outros estudos, as amostras (n = 13)foram extraídas para tubos de contençãoa vácuo EDTA e simples. Às amostras foiadicionada troponina I. Regressão linear:

(EDTA) = 0,8 (Soro) – 3,1 ng/mLr = 0,988

Médias:72 ng/mL (Soro)55 ng/mL (EDTA)

Os resultados de troponina I mostram queas amostras de sangue colhidas em tubosde vácuo com EDTA são inferiors ás das

amostras colhidas em tubos secos eheparanizados.

Bilirrubina: A bilirrubina possui um efeitono doseamento, causando umadepressão dos valores. (Ver tabela de"Bilirrubina".)

Hemolise: A presença de hemoglobinaem concentrações até 512 mg/dL não temefeito em resultados, dentro da precisãodo ensaio.

Lipémia: A presença de trigliceridos iemconcentrações até 3 000 mg/dL não temefeito em resultados, dentro da precisãodo ensaio.

Comparação de Métodos 1: Odoseamento foi comparado ao Troponina IIMMULITE em 162 amostras de doentes.(Zona de trabalho: aproximadamente até120 ng/mL, conforme medido pelodoseamento IMMULITE Troponin I.

Consulte o gráfico 1.) Regressão linear:(IML 2000) = 0,91 (IML) + 0,73 ng/mLr = 0,996

Médias: 12,4 ng/mL (IMMULITE 2000)12,9 ng/mL (IMMULITE)

Comparação de Métodos 2: Odoseamento foi comparado ao Troponina IIMMULITE em 128 amostras de doentesretiradas dos 162 doentes usados para o

método de comparação 1. (Zona detrabalho: aproximadamente até 15 ng/mL,conforme medido pelo doseamentoIMMULITE Troponin I. Consulte o gráfico2.) Regressão linear:

(IML 2000) = 1,15 (IML) – 0,06 ng/mLr = 0,995

Médias: 3,0 ng/mL (IMMULITE 2000)2,7 ng/mL (IMMULITE)

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2007-05-18

PIL2KTI – 12

troponina immulite 2000

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