lap. sterilisasi irma

5/19/2018 Lap. Sterilisasi Irma

1/15

STERILISASI RUANGAN

IRMA LASMI DEWI BAI ATHUR RIDWAN15020120367

I. KOMPETENSI UMUM

Praktikan dapat mengetahui bagaimana tingkat sterilitas dari

Ruangan LAF, Enkas, dan Ruangan lampu UV.

II. KOMPETENSI KHUSUS

Praktikan dapat mengetahui cara menentukan sterilitas

ruangan yang disterilkan dengan menggunakan LAF, Enkas , dan

Lampu UV.

III. PRINSIP PERCOBAAN

Menentukan tingkat sterilitas suatu ruangan berdasarkan

penyemprotan alcohol 70 % pada LAF, Enkas dan UV kemudian

didiamkan selama 15 menit, setelah itu dimasukkan Cawan Petri yang

berisi medium kedalam LAF, Enkas dan UV pada posisi terbuka 1/3

bagian, dan dilihat pertumbuhan koloninya.

IV. Landasan Teori

Sterilisasi adalah suatu proses perlakuan terhadap bahan atau

barang dimana pada akhir proses tidak terdapat mikroorganisme pada

bahan atau barang tersebut (Arisanti, Diana 2004)

Sterilisasi dalam mikrobiologi merupakan proses penghilangan

semua jenis organism hidup, dalam hal ini adalah mikroorganisme

(protozoa, fungi, bakteri, mycoplasma, virus) yang terdapat pada/di

dalam suatu benda (Sylvia, 2006).

Sterilisasi disesain untuk membunuh atu menghilangkan

mikroorganisme. Target suatu metode inaktivasi tergantung dari


2/15

STERILISASI RUANGAN


metode dan tipe mikroorganismenya, yaitu tergantung dari asam

nukleat, protein, atau membrane mikroorganisme tersebut. Agen kimia

untuk sterilisasi disebut sterilant (Sylvia, 2006).

Ruangan steril adalah keadaan ruangan yang bebas dari

semua bentuk kehidupan bakteri pathogen maupun nonpatogen

termasuk sporanya. Untuk memperoleh ruangan steril dibutuhkan

cara-cara tertentu didalam proses pengendaliannya (Anonim, 2014).

Inframerah adalah cahaya yang berguna untuk konstituen

radiasi hanya meliputi fraksi kecil dari seluruh spektrum matahari.

Sinar inframerah (infrared ray IR) juga merupakan sinar tidak tampak

yang berada pada spectrum warna merah, mendekati spektrum sinar

tampak. Dapat dikatakan bahwa 80% cahaya matahari adalah sinar

inframerah karena lebarnya jangkauan gelombang sinar ini (4-1000

micron). Sinar inframerah dikelompokkan dalam 3 zona Near infrared

ray, Middle infrared ray dan Far infrared ray (FIR) (Ananta, 2005).

Menurut Susanto (2005), karakteristik FIR adalah tidak kasat mata

(tidak kelihatan), bersifat linear (menyebar), refraktif (dapat

dipantulkan), diserap oleh beberapa objek. Untuk mengetahui efek

dari radiasi pada bakteri diperlukam sejumlah faktor yang harus

diperhatikan, antara lain: panjang gelombang' intensitas radiasi, jenis

organisme, medium dimana organisme berada dan lamanya paparan

(Merchandt dan Parker, 1961 ).


3/15

STERILISASI RUANGAN


Otoklaf

Otoklaf adalah suatu bejana yang dapat ditutup, yang diisi

dengan uap panas dengan tekanan tinggi. suhu didalamnya dapat

mencapai 115'C hingga 125"C dan tekanan uapnya mencapai 2

hingga 4 ATM (Oswari, 2000).

Penerapan suhu tinggi untuk mematikan mikroorganisme

Prosedur praktis yang memanfaatkan panas untuk mematikan

mikroorganisme untuk mudahnya dibagi kedalam dua kategori: panas

lembap dan panas kering (Pelczaer, 2001).

Panas lembab

Uap bertekanan. Panas dalam bentuk uap jenuh bertekanan

adalah sarana paling praktis serta dapat diandalkan untuk sterilisasi

(Pelczaer, 2001).

Sterilisasi bertahap. Beberapa media bakteriologis dan zat kimia

tidak dapat dipanaskan pada suhu diatas 100 oC tanpa menjadi

rusak. Tetapi, bila bahan-bahan tersebut dapat menahan suhu uap

bebas (100 oC), maka akan dapat disterilkan dengan sterilisasi

bertahap (Pelczaer, 2001).

Air mendidih. Sel-sel vegetative mikroorganisme akan terbunuh

dalam waktu 10 menit dalam air mendidih (Pelczaer, 2001).

Pasteurisasi. Susu, rum (cream) dan beberapa minuman yang

mengandung alcohol (bird dan anggur) biasanya diberi perlakuan


4/15

STERILISASI RUANGAN


panas terkendali untuk mematikan tipe-tipe mikroorganisme tertentu

tetapi tidak mematikan yang lain (Pelczaer, 2001).

Panas kering

Sterilisasi dengan udara panas. Sterilisasi dengan panas kering

atau udara panas dianjurkan apabila penggunaan uap bertekanan

tidak dikehendaki atau bila tidak dapat terjadi kontak antara uap

bertekanan dengan benda yang akan disterilkan (Pelczaer, 2001).

Pembakaran. Pembakaran bahan yang mengandung

mikroorganisme berarti jiga membasmi mikroorganismenya (Pelczaer,

2001).

Suhu rendah

Suhu dibawah suhu optimum untuk pertumbuhn dapat

menekan laju metabolisme dan bila suhu itu cukup rendah, maks

metabolism dan pertumbuhan akan terhenti (Pelczaer, 2001).

Pengeringan

Pengeringan sel mikroba serta lingkungannya sangat

mengurangi, atau menghentikan aktivitas metbolik, diikuti dengan

matinya sejumlah sel (Pelczaer, 2001).

Tekanan osmotic

Osmosis aialah difusi melintasi membrane semipermeabel

yang memisahkan dua macam larutan dengan konsentrasi solute

yang berbeda (Pelczaer, 2001).


5/15

STERILISASI RUANGAN


V. METODE KERJA

a. Alat

Adapun alat yang digunakan dalam praktikum ini yaitu Cawan

petri, Enkas, Incubator, Laminary Air Flow (LAF), Lampu spiritus, Lampu

UV, Spoit dan Tabung Reaksi.

b. Bahan

Adapun bahan yang digunakan dalam praktikum ini yaitu Alkohol,

Erlenmeyer, Kertas label, Medium PDA (potato Dextrose Agar), Medium

NA (Nutrient Agar), dan Tissu.

c. Cara Kerja

1. Penyiapan Medium

a. Nutrient Agar (NA)

Disiapkan alat dan bahan

Diisi 3 cawan petri steril dengan medium Nutrient Agar (NA)

steril yang sudah dicairkan secara aseptik sebanyak 10 ml,

lalu dibiarkan memadat.

b. Potato Dextrose Agar (PDA)

Disiapkan alat dan bahan

Diisi sebanyak 3 cawan petri steril dengan medium PDA

steril yang sudah dicairkan secara aseptik sebanyak 10 ml,

lalu dibiarkan memadat.


6/15

STERILISASI RUANGAN


2. Penyiapan Ruang Sterilisasi

a. Lampu Ultraviolet

Disiapkan alat dan bahan.

Disemprot dengan menggunakan Alkohol 70 % lalu dibiarkan

selama 15 menit.

Dinyalakan lampunya

b. Laminary Air Flow (LAF)


Disemprotkan dengan menggunakan Alkohol 70 % lalu

dibiarkan selama 15 menit.

Dinyalakan perangkat laminar air flow (LAF).

c. Ruangan Terbuka (Meja Kelompok 3)


Disemprotkan pada ruangan terbuka (Meja Kelompok 3)

dengan menggunakan Alkohol 70 % lalu dibiarkan selama 15

menit.

3. Uji Sterilitas Ruangan

a. Lampu UV

Disiapkan cawan petri yang telah berisi medium.

Dibuka 1/3 bagian dari cawan petri yang telah berisi medium

dibawah sinar lampu UV.


7/15

STERILISASI RUANGAN


Diinkubasikan cawan petri secara terbalik pada inkubator

bersuhu 37C selama 1 x 24 jam untuk medium NA dan enkas

pada suhu 250C selama 3 x 24 jam untuk medium PDA.

Diamati ada tidaknya koloni mikroba

b. Laminary Air Flow (LAF)



didalam Laminary Air Flow (LAF).





c. Ruangan Terbuka (Meja Kelompok 3)



didalam ruangan terbuka (Meja Kelompok 3).






8/15

STERILISASI RUANGAN


VI. HASIL PRAKTIKUM

A. FOTO PENGAMATAN

a. UV- Medium NA

Keterangan gambar :

Cawan Petri

Koloni

Medium NA

b. LAF Medium NA

Keterangan Gambar:

Cawan Petri

Medium NA

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUSLIM INDONESIA

UVMedium NA

LABORATORIUM MIKROBIOLOGI

FAKULTAS FARMASI


LAF Medium NA


9/15

STERILISASI RUANGAN


c. Enkas Medium NA

Keterangan gambar :

Cawan petri

Koloni

Medium NA

d. UV Medium PDA

Keterangan gambar :

Cawan Petri

Koloni

Medium PDA

LABORATORIUM MIKROBILOGIFAKULTAS FARMASI


EnkasMedium NA

LABORATORIUM MIKROBILOGI

FAKULTAS FARMASI


EnkasMedium NA


10/15

STERILISASI RUANGAN


e. LAF Medium PDA

Keterangan gambar :

Cawan Petri

Koloni

Medium PDA

f. Enkas Medium PDA

Keterangan gambar :

Cawan Petri

Koloni

Medium PDA

LABORATORIUM MIKROBILOGI

FAKULTAS FARMASI


LABORATORIUM MIKROBILOGIFAKULTAS FARMASI


LAFMedium PDA


11/15

STERILISASI RUANGAN


B. TABEL PENGAMATAN

1. ANALISIS STERILITAS RUANGAN

NO. KELOMPOK

RUANGAN

KET.UV ENKAS LAF

NA PDA NA PDA NA PDA

1. I 22 29 22 12 3 14

2. II 43 47 Tidak bisadihitung 49 6 67

3. III 35 20 27 27 2 5

4. IV 23 53 7 69 6 243

5. V 22 45 16 32 3 36

JUMLAH (x) 145 194 72 189 20 365

RATA-RATA (x) 29 38.8 14.4 37.8 4 73

2. ANALISIS MUTU DESINFEKTAN

- Uji MIC

NO. PENGENCERAN PENGAMATAN KET.

1. 1 : 20 - Tidak ada

2. 1 : 40 - Tidak ada

3. 1 : 80 + Ada

4. 1 : 160 + Ada

5. 1 : 320 + Ada


12/15

STERILISASI RUANGAN


6. 1 :640 + Ada

7. 1 :1280 + Ada

Keterangan :

( + ) : tidak ada pertumbuhan

( - ) : ada pertumbuhan

VII. PEMBAHASAN

Sterilisasi adalah suatu proses perlakuan terhadap bahan atau

barang dimana pada akhir proses tidak terdapat mikroorganisme pada

bahan atau barang tersebut.

Ruangan steril adalah keadaan ruangan yang bebas dari semua

bentuk kehidupan bakteri pathogen maupun nonpatogen termasuk

sporanya. Untuk memperoleh ruangan steril dibutuhkan cara-cara

tertentu didalam proses pengendaliannya.

Adapu maksud dari percobaan ini adalah untuk mrnguki

kesterilan suatu ruangan dan tujuan percobaan ini adalah untuk

mrngetahui tingkat kesterilan suatu ruangan.

Adapun cara kerja dari percobaan ini yaitu pertama disiapkan 6

buah cawan petri, cawan petri 1-3 disi dengan medium NA kemudian

dibiakan memadat dan dimasukkan kedalam UV, enkas dan LAF,

kemudian dibuka 1/3 bagian capet dan ditunggu hingga 15 menit.

Setelah itu diinkubasi selama 1 x 24 jam. Sedangkan pada cawan


13/15

STERILISASI RUANGAN


petri 4-6 diisi dengan medium PDA dan dimasukkan pada UV, enkas

dan LAF, kemudian dibuka 1/3 bagian capet dan ditunggu hingga 15

menit. Setelah itu diinkubasi selama 3 x 24 jam.

Adapun hasil yang diperopeh yaitu medium NA pada UV

memperoleh 43 koloni, medium NA pada enkas tidak dapat dihitung

jumlah koloninya dan medium NA pada LAF terdapat 6 koloni.

Sedangkan pada medium PDA yang terdapat di UV yaitu 47 koloni,

pada enkas 49 dan pada LAF 67 koloni.

VIII. KESIMPULAN

Dari hasil pengamatan yang telah dilakukan maka dapat

disimpulkan bahwa pertumbuhan koloni jamur yang paling banyak

tumbuh adalah terdapat di Enkas yaitu tidak dapat dihitung jumlah

koloninya, karena terlalu banyak, sedangkan pertumbuhan bakteri

terbanyak terdapat di LAF yakni 67 koloni.


14/15

STERILISASI RUANGAN


IX. DAFTAR PUSTAKA

Anonim, 2014. Mikrobiologi Farmasi. Universitas MuslimIndonesia.Makassar.

Placzar, Mikhael J. Dkk. 2001. Dasar-Dasar Mikrobiologi I.Universitas Indonesia Press : Jakarta.

Sylvia, Pratiwi. 2006. Mikrobiologi Farmasi. Penertbit Erlangga:Jakarta

Arisanti. Diana. 2004. Efektivitas Sterilisasi menggunakan sinarUltraviolet terhadap penurunan angka kumanudara di ruang

operasi IBS RSUD Tugurejo: Semarang

DhirgoA djil dkk. 2007 Perbandingan efektifitas sterilisasi alcohol 7%, infra merah, otoklaf dan ozon terhadap bakteri Bacillussubtilis


15/15

STERILISASI RUANGAN


LAMPIRAN

I. Skema Kerja

1. Sterilisasi Ruangan

Medium Steril

Biarkan 15 menit

Letakkan medium steril

Buka 1/3 bagian

Biarkan 15 menit

Tutup cawan

Inkubasi terbalik1 x 24 jam, 37C (untuk medium NA)

3 x 24 jam, suhu kamar (untuk medium PDA)

Pengamatan

LampuUV LAF Enkas

lap. sterilisasi irma

Documents