SKRINING AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL 70% DARI BEBERAPA DAUN TANAMAN DI INDONESIA

TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus SERTA BIOAUTOGRAFINYA

SKRIPSI

Oleh:

IDA RAHMAWATI K100120080

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA 2016

ii

SKRINING AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK ETANOL 70% DARI BEBERAPA DAUN TANAMAN DI INDONESIA

TERHADAP BAKTERI Staphylococcus aureus SERTA BIOAUTOGRAFINYA

0BHalaman Sampul

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai Sarjana

Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta

di Surakarta

Oleh:

IDA RAHMAWATI K100 120 080

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA SURAKARTA

2016

iii

iv

v

KATA PENGANTAR

Assalamu’alaikum warohmatullahi wabarokatuh

Pertama, dengan menyebut nama Allah SWT yang Maha Pengasih lagi

Maha Penyayang. Syukur Alhamdulillah atas segala limpahan rahmat, taufik,

serta hidayah-Nya sehingga penulis bisa menyelesaikan skripsi yang berjudul

“Skrining Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol 70% dari Beberapa Daun

Tanaman di Indonesia terhadap Bakteri Staphylococcus aureus serta

Bioautografinya” sebagai syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.

Farm) di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta.

Dalam penyusunan skripsi ini tentunya tidak terlepas dari bantuan

berbagai pihak. Untuk itu penulis mengucapkan terima kasih kepada:

1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas

Muhammadiyah Surakarta dan Penguji I.

2. Ibu Nurcahyanti Wahyuningtyas, M.Biomed., Apt selaku penguji II.

3. Ibu Rima Munawaroh, M.Sc., Apt. selaku pembimbing.

4. Ibu Ika Trisharyanti D.K, M.Farm., Apt. selaku pembimbing akademik.

5. Kedua orang tua bapak Sujono dan ibu Muniro, dan juga semua keluarga yang

selalu mendoakan dan mendukung.

6. Teman tim antibakteri Selvy Sekti Noor Utari dan Binti Nuriyah.

Penulis sadar bahwa skripsi ini jauh dari sempurna. Namun, penulis

berharap skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak.

Wassalamu’alaikum warohmatullahi wabarokatuh

Surakarta, 13 Desember 2016

Penulis

vi

DAFTAR ISI

Halaman HALAMAN SAMPUL ........................................................................................... ii

HALAMAN PENGESAHAN ............................................................................... iii

HALAMAN DEKLARASI ....................................................................................iv

KATA PENGANTAR ............................................................................................. v

DAFTAR ISI ...........................................................................................................vi

DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... viii

DAFTAR TABEL ...................................................................................................ix

DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................................ x

DAFTAR SINGKATAN ........................................................................................xi

ABSTRAK ............................................................................................................ xii

BAB I. PENDAHULUAN ....................................................................................... 1

A. Latar Belakang Masalah ........................................................................ 1

B. Perumusan Masalah .............................................................................. 1

C. Tujuan Penelitian .................................................................................. 2

D. Tinjauan Pustaka ................................................................................... 2

1. Staphylococcus aureus ................................................................... 2

2. Daun Gandola atau Binahong (Basella alba L.) ............................ 3

3. Daun Spider Lily (Hymenocallis littoralis Salisb.) ........................ 3

4. Daun Jambu Biji (Psidium guajava L.) ......................................... 3

5. Daun Kenikir (Cosmos caudatus (L) H.B.K.) ............................... 4

6. Daun Sembukan (Paederia scandens (Lour.) Merr.) ..................... 4

7. Daun Beluntas (Pluchea indica L.) ................................................ 4

8. Daun Pandan Wangi (Pandanus amaryllifolius Roxb.) ................. 5

9. Daun Asam Jawa (Tamarindus indica L.) ..................................... 5

10. Daun Kelor (Moringa oleifera Lamk.) .......................................... 6

11. Daun Nilam (Pogostemon cablin (Blanco) Bth.) ........................... 6

12. Antibakteri ..................................................................................... 6

13. Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ................................................... 7

14. Bioautografi ................................................................................... 7

E. Landasan Teori ...................................................................................... 8

vii

F. Keterangan Empiris ............................................................................... 8

BAB II. METODE PENELITIAN ........................................................................... 9

A. Kategori dan Rancangan Penelitian ...................................................... 9

B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasionalnya ................................. 9

C. Alat dan Bahan ...................................................................................... 9

D. Tempat Penelitian................................................................................ 10

E. Jalannya Penelitian .............................................................................. 10

1. Determinasi Tanaman .................................................................. 10

2. Identifikasi Bakteri ....................................................................... 10

3. Uji Sensitivitas Bakteri dengan Metode Kirby Bauer .................. 11

4. Pembuatan Simplisia dan Ekstrak Etanol .................................... 11

5. Uji Mikrobiologi .......................................................................... 11

6. Identifikasi Senyawa Kimia ......................................................... 13

7. Uji Bioautografi ........................................................................... 14

F. Analisis Data ....................................................................................... 15

BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN .............................................................. 16

A. Hasil Determinasi Tanaman ................................................................ 16

B. Hasil Pengumpulan Bahan .................................................................. 16

C. Hasil Penyarian ................................................................................... 17

D. Hasil Identifikasi Bakteri .................................................................... 18

E. Hasil Uji Sensitivitas Bakteri Terhadap Antibiotik ............................ 19

F. Hasil Skrining Uji Aktivitas Antibakteri............................................. 20

G. Hasil Uji Skrining Fitokimia ............................................................... 22

H. Hasil Uji Kromatografi Lapis Tipis .................................................... 24

I. Hasil Uji Bioautografi ......................................................................... 26

BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN .............................................................. 27

A. Kesimpulan ......................................................................................... 27

B. Saran .................................................................................................... 27

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................................ 28

DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... 32

viii

DAFTAR GAMBAR

Halaman Gambar 1. Daun gandola atau binahong .............................................................. 3

Gambar 2. Daun spider lily................................................................................... 3

Gambar 3. Daun jambu biji .................................................................................. 4

Gambar 4. Daun kenikir ....................................................................................... 4

Gambar 5. Daun sembukan .................................................................................. 4

Gambar 6. Daun beluntas ..................................................................................... 5

Gambar 7. Daun pandan wangi ............................................................................ 5

Gambar 8. Daun asam jawa .................................................................................. 5

Gambar 9. Daun kelor .......................................................................................... 6

Gambar 10. Daun nilam.......................................................................................... 6

Gambar 11. Hasil uji pengecatan Gram Staphylococcus aureus dengan

perbesaran 1000x .............................................................................. 18

Gambar 12. Hasil uji identifikasi Staphylococcus aureus pada media MSA ....... 19

Gambar 13. Hasil uji sensitivitas Staphylococcus aureus terhadap

antibiotik. .......................................................................................... 19

Gambar 14. Hasil uji skrining aktivitas antibakteri ekstrak etanol 70% dari

beberapa daun tanaman di Indonesia terhadap bakteri

Staphylococcus aureus...................................................................... 21

Gambar 15. Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol 70% daun jambu biji .......... 23

Gambar 16. Hasil Kromatogram ekstrak etanol 70% daun jambu biji. ................ 25

Gambar 17. Hasil uji bioautografi ekstrak etanol 70% daun jambu biji

terhadap bakteri Staphylococcus aureus.................................

26

ix

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 1. Hasil penelitian sebelumnya .................................................................... 8

Tabel 2. Hasil pengumpulan bahan ..................................................................... 17

Tabel 3. Hasil penyarian ekstrak dan % rendemen ............................................. 17

Tabel 4. Hasil uji sensitivitas Staphylococcus aureus ......................................... 20

Tabel 5. Hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol 70% dari beberapa

daun tanaman di Indonesia terhadap bakteri Staphylococcus

aureus. ................................................................................................... 21

Tabel 6. Perbandingan hasil dengan penelitian sebelumnya ............................... 22

Tabel 7. Hasil skrining fitokimia ekstrak etanol 70% daun jambu biji ............... 23

Tabel 8. Hasil KLT ekstrak etanol 70% daun jambu biji .................................... 25

x

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1. Surat keterangan bakteri Staphylococcus aureus ............................. 32

Lampiran 2. Hasil dan keterangan determinasi sepuluh daun tanaman di

Indonesia ........................................................................................... 33

Lampiran 3. Perhitungan konsentrasi ekstrak etanol 70% sepuluh daun

tanaman di Indonesia ........................................................................ 41

Lampiran 4. Perhitungan rendemen sepuluh daun tanaman di Indonesia ............. 42

xi

DAFTAR SINGKATAN

BHI : Brain Heart Infusion

CFU : Colony Forming Unit

DMSO : Dimethyl sulfoxide

KHM : Konsentrasi Hambat Minimum

LAF : Laminar Air Flow

MH : Mueller Hinton

MSA : Manitol Salt Agar

xii

ABSTRAK

Bakteri merupakan salah satu penyebab infeksi. Salah satunya bakteri Staphylococcus aureus yang dapat menyebabkan infeksi. Beberapa tanaman mempunyai aktivitas antibakteri diantaranya daun sembukan, daun asam jawa, daun gandola atau binahong, daun spider lily, daun kenikir, daun jambu biji, daun pandan wangi, daun beluntas, daun nilam, dan daun kelor. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui aktivitas antibakteri terhadap Staphylococcus aureus dari ekstrak etanol 70% sepuluh daun tanaman dan yang mempunyai aktivitas paling tinggi, serta golongan senyawa yang bertanggung jawab terhadap aktivitas antibakteri.

Maserasi dipilih sebagai metode untuk pembuatan ekstrak dengan pelarut etanol 70%. Uji aktivitas antibakteri dilakukan dengan metode difusi padat (Kirby Bauer). Ekstrak dengan konsentrasi 20% diresapkan pada disk blank sebesar 15 µl/disk yang kemudian diletakkan pada media Muller Hinton Agar yang telah diinokulasi bakteri. Kontrol positif yang digunakan antibiotik kloramfenikol dan DMSO sebagai kontrol negatif. Bioautografi dilakukan dengan metode bioautografi kontak.

Hasil yang diperoleh dari uji aktivitas antibakteri menunjukkan ekstrak daun jambu biji mempunyai zona hambat paling tinggi sebesar 12,5 ± 1 mm dibandingkan dari ekstrak yang lain. Kromatografi Lapis Tipis (KLT) dilakukan dengan menggunakan fase diam silica gel GF254 dah fase gerak BAW (4:1:5 v/v/v fase atas). Hasil KLT dan skrining fitokimia menunjukkan adanya senyawa flavonoid, tanin, saponin, dan terpenoid. Hasil uji bioautografi diketahui bahwa senyawa yang bertanggung jawab terhadap aktivitas antibakteri adalah senyawa saponin.

Kata kunci: Antibakteri, Bioautografi, Ekstrak, KLT, Staphylococcus aureus

xiii

ABSTRACT

Bacteria is considered as one of the cause of infection. One kind of bacteria that cause infection is Staphylococcus aureus bacteria. Some plants have antibacterial activity such as sembukan, tamarind, gandola or binahong, spider lily, marigolds, guava, fragrant pandan, beluntas, patchouli, and Moringa. The purpose of this study was to determine the antibacterial activity on Staphylococcus aureus of 70% ethanol extract of ten leaves of plants with the highest activity, and the compound which play role for the antibacterial activity.

The maceration method was selected as the method in producing solvent extract by using ethanol 70%. The antibacterial activity test was conducted by using a solid diffusion (Kirby Bauer). 20% concentration extract was absorbed on blank disks as much as 15 mL/ disc which then placed on the media Agar Muller Hinton inoculated with bacteria. Positive control used for chloramphenicol antibiotic and DMSO as a negative control. The bioautografi was performed by the method of bioautografi contact.

Results obtained from the antibacterial activity test indicated that guava leaf extract has the highest inhibition zone at 12.5 ± 1 mm compared to other extracts. Thin Layer Chromatography (TLC) was performed by using silica gel stationary phase GF254 and mobile phase BAW (4:1:5 v/v/v upper phase). The TLC test was performed by using a stationary phase of silica gel GF254 and mobile phase BAW (4: 1: 5 v/v/v upper phase). The result of TLC and phytochemical screening test indicated any flavonoids, tannins, saponins, and terpenoids. The results of bioautografi indicated that the compounds which play role for the antibacterial activity is a compound of saponin. Keywords: Antibacterial, Bioautografi, extract, TLC, Staphylococcus aureus