VÉRCSOPORTOKVÉRCSOPORTOK

Vércsoport-szerológiai kompatibilitás

Dr. Nemes Nagy Zsuzsa

Vércsoportszerológia kezdetei

Karl Landsteiner

Vörösvérsejt antigének

Vércsoport antigének

• Örökletes tulajdonságok

• Genetikusan allélrendszerek és/ vagy kapcsolt gének határozzák meg

• Az egyedfejlődés során különböző időben jelennek meg

Vércsoportrendszerek• A vörösvérsejtek felületén található

antigéneket vércsoportrendszerekbe sorolták

• Jelenlegi rendszerezés: genetikai alapú• ISBT( International Sociaty for Blood

Transfusion)• 34 vércsoport rendszer- több száz

antigén

A vörösvérsejt antigének szerkezete

A vörösvérsejtmembrán alkotói

Kémiai tulajdonságukszerint:

szénhidrátok

proteinek glikoproteinek

glikolipidek

Vércsoport antitestek

Az antitestek osztályozása

• ALLOANTITESTEK idegen, de saját fajon belüli

antigénnel szemben termelődnek

• AUTOANTITESTEK saját antigénnel szemben

termelődnek

• XENOANTITESTEK más fajon belüli antigénnel

szemben termelődnek

Az antitestek IN VITRO reakció mód szerint

Komplett vagy direktagglutinálók IgM

Inkomplett antitestek

IgG

Az IgG típusú ellenanyag

• Az ellenanyagok 75%-a• 2 nehéz, 2 könnyű lánc• A placentán átjut

• Inkomplett, meleg típusú, immunantitest

Az IgM immunglobulin

• Az immunglobulin készlet 10% -a• Makromolekula: pentamer szerkezetű• A korai immunválaszra jellemző• Komplex, szénhidrát antigénekkel reagál• Természetes, hideg típusú antitest

A vörösvérsejt antigénekkel szemben kialakuló alloimmunizáció mechanizmusa

vörösvérsejt antigén → APC → specifikus B sejt aktiváció→ specifikus alloantitest → immunkomplex →komplement, fagocita rendszer aktiváció → antigén eliminálása

Vércsoport szerológiai vizsgálatok

• Ismeretlen vörösvérsejt antigén kimutatása ismert antitest tartalmú reagenssel

• Ismeretlen antitest kimutatása a savóból/ plazmából ismert

antigenitású teszt vörösvérsejtekkel

Vérminta(24 órán belüli)

• Natív• Citrátos• EDTA- s

Heparinos nem megfelelő!

Az antigén- antitest reakciókIN VITRO formái

• Precipitáció• Hemolízis • Agglutináció• Abszorbció• Elúció

Az agglutináció Specifikus fázis

Specifikus antigén-antitest kötődés

Az agglutináció Aspecifikus fázis

Az immunkomplexek összekapcsolódnak, térrács alakul ki.

Az agglutinációt befolyásoló tényezők

Reakció közeg Komplett agglutininek: fiz.sóInkomplett agglutininek:• LISS (alacsony ionerősségű közeg)• albumin és egyéb makromolekulák• proteolitikus enzimek (papain, bromelin)• AHG (Coombs) technikák

Az agglutinációs reakciók értékelése

1. Pozitív reakció agglutináció jelenléte

(++++ → +,+/-)2. Negatív reakció agglutináció hiánya

3. Kevert mező pozitív és negatív reakció

egyidejű jelenléte

Az agglutinációs reakciók értékelése

Kevert mező● nem csoport azonos vér transzfúzióját követően-szerológiai okok/ vérkészlet miatt a beteg nem csoport azonos vért kapott-transzfúziós szövődmény • csontvelő transzplantációt követően • haematológiai betegség esetén • chimerizmus

Autoagglutinációs kontroll 1.A vérminta sejtjének és savójának vizsgálata

reagens nélkül2. A vérminta sejtjének vizsgálata hatóanyag

nélküli közegben Értékelhető vizsgálat= autokontroll negatívAz autokontroll pozitív,ha• a vörösvérsejtek fedettek• autoantitesttel• alloantitesttel • gyógyszerellenes antitesttel • sympexis képző savó

AB0 vércsoportokAB0 vércsoportok

• A („A” antigén)• B („B” antigén)• AB („A” és „B” antigén)• 0 (nincs „A” és „B” antigén)

Az AB0 rendszer antigénjei

•Szénhidrátok •Glikoprotein, glikolipid molekulák oligoszaharid részei •Közös prekurzorból alakulnak ki

Az AB0 rendszer antitestjeiAz AB0 rendszer antitestjei

• Természetes antitestek• Főként IgM osztályú immunglobulinok (kevés IgG)• Hideg antitestek, vizsgálatuk

szobahőmérsékleten történik• +37 oC-n is aktívak• A komplement rendszert aktiválják, hemolízist

okoznak• Jelenlétük a Landsteiner szabálynak

megfelelő= reguláris antitestek

Landsteiner szabályLandsteiner szabály

Rh rendszer és jelentősége

• A legimmunogénebb vércsoport rendszer az AB0-t követően

• Legfontosabb antigénje az RhD protein• Rh pozitív= D antigén jelenléte(4+)• Az Rh negativitás az RhD protein hiánya• Variáns D-k(gyenge, parciális) (3+, +/-)

Rh rendszer és jelentősége

• A legfontosabb antigének: D, C, c, E,e• Rh fenotípusnak (C,c,E,e) megfelelő transzfúzió

bizonyos betegeknél elengedhetetlen• Transzfúziós jelentőség: Rh D kompatibilis

készítményt kell adni• Antitestek: immun eredetűek, IgG osztályúak,• Transzfúziós szövődményt, ÚHB-t okoznak

Rh rendszer antigénjeiSzám CDE/Rh Megjegy szám CDE/Rh Megjegy

Rh1 D / Rh0Erős im-munogén

Rh12 G/ rhG D-vel C-vel

Rh2 C/ rh’ Imm. Rh17 /Hr0Gyakori

Rh3 E/ rh” Imm. Rh18 /Hr Gyakori

Rh4 c/ hr’ Erős im-munogén

Rh19 /hrs E variáns

Rh5 e/ hr” 98% Rh20 VS, es / Feketék

Rh6 f, ce/ hr Össz. Rh21 CG / C-vel

Rh7 Ce/ rhi Össz. Rh22 cE / össz

Rh8 Cw/ rhw1 Ritka Rh23 Wiel, Dw / ritka

Rh9 Cx/ rhx Ritka

Rh10 V, ces/ hrv Feketék 20%

Rh25 LW/ Törölt!

Rh11 Ew/ rhw2 Ritka Rh26 Deal, c-like c-vel

Az RH gének

D variánsok a gyakorlatban

Gyenge D (korábban Du)

Parciális D

Rh rendszer antitestjei

• Általában immunantitestek (transzfúzió,terhesség)

• Természetes antitestek is lehetnek– (anti-D, anti-E, anti-C, anti-Cw)

• Autoantitestek is lehetnek (anti-e, anti-C)

• Általában IgG osztályúak, de lehetnek IgM vagy IgA osztályba tartozók

A humán vércsoport rendszerek (ISBT)

Szám Jelölés Név001 AB0 AB0002 MNS MNS003 P1Pk P1Pk004 RH RH005 LU Lutheran006 KEL Kell007 LE Lewis008 FY Duffy009 JK Kidd010 DI Diego

Az antigének immunogenitása

KompatibilitásKompatibilitás

Kompatibilitás: vércsoport szerológiai megfelelőség

A transzfundált készítmény túlélése a recipiens keringésében normális

Minden transzfúzió előtt kompatibilitási vizsgálatokat kell végezni

Kompatibilitási vizsgálatsorTranszfúziós Szabályzat (2008. 2010.)

Laboratóriumi vércsoport: 1.AB0, RhD

2.Direkt Coombs teszt(DAT) 3.Ellenanyagszűrés

Ellenanyag-azonosítás Laboratóriumi keresztpróba(LK)

AB0 kompatibilitásvörösvérsejt készítmények esetén

Lehetőleg AB0 csoport azonos, de mindenképpen AB0 kompatibilis készítményeket kell adni.

Figyelem: más a kompatibilitás sejtes- és plazmakészítmények esetén

AB0 kompatibilitásvörösvérsejt készítmények esetén

Recipiens vércsoportja

Kompatibilis vvs készítmények vércsoportja

A A és 0

B B és 0

AB AB, A, B és 0

0 0

A plazma(FFP) kompatibilitása

Kompatibilis Kompatibilis az a plazma tartalmú készítmény, amely a recipiens ellen nem tartalmaz ellenanyagot.

AB0 kompatibilitásplazma készítmények esetén

Recipiens vércsoportja

Kompatibilis plazma készítmények vércsoportja

A A és AB

B B és AB

AB AB

0 0,A,B és AB

RhD kompatibilitás

Lehetőleg RhD azonos, vagy kompatibilis készítményt kell adni.

Figyelem: RhD negatív gyermekek és szülőképes korú nők, csak RhD negatív vért kapjanak!

Antitest szűrésMinden vércsoport vizsgálat,vérválasztás során2 közegben végzendő:• LISS/Coombs• Enzim Negatív: a vizsgált savóban nincs kimutatható

irreguláris antitest Pozitív: a savóban lévő irreguláris antitest

jelenlétére utalhat

Antitest szűrés Irreguláris antitest: olyan antitest, amely (a Landsteiner

szabályt követő) AB0 antitesteken kívül kimutatható a savóból/plazmából, és/vagy vörösvérsejtihez kötötten.

Direkt Coombs teszt (DAT)

• Minden vércsoport meghatározás, vérválasztás kapcsán elvégzendő

• Pozitivitása a vvs-ek Ig és/vagy komplement fedettségére utal

Klinikailag jelentős antitestek

• Transzfúziós szövődményt okoznakHTR: hemolitikus transzfúziós reakció

• Újszülöttkori hemolitikus betegséget okoznak (ÚHB)

Irreguláris antitestek jelenléte

•Pozitív antitest szűrés esetén azonosítást kell végezni,

. abban a közegben,ahol a pozitivitás jelentkezett•Szükség esetén több közegű azonosítás is végzendő•Szükség esetén több hőmérsékleten is el kell végezni az azonosítást (hideg, szobahős,meleg panelek, hőamplitúdó meghatározás)•Szükség esetén többféle azonosító panel is használandó•Gondolni kell a dózis hatásra

Laboratóriumi keresztpróba

Donor vvs+ recipiens savó reakciójaPozitív antitest szűrés/veszélyeztetett recipiensNegatív antitest szűrést követően a keresztpróba többnyire

negatív,de nem feltétlenül

LISS/Coombs közegben • Keresztpróba pozitivitást okozhat : vércsoport

specifikus antitest, panantitest, aspecifikusan a vörösvérsejtek közös struktúráival reagáló antiest,gyógyszer, vegyszer, reagens elleni antitest, sympexis…

Nem választott és választott vér indikációi

Nem választott vér

•Ellenanyagszűrés,DAT negatív•Előzményben is•3 hónapon belüli immunizációsanamnesis negatív

Választott vér

•Ellenanyagszűrés,DAT pozitív•Előzményben antitest•3 hónapon belüli immunizációs anamnesis pozitív•Hypothermia•Csecsemők transzfúziója•Fokozott immunizálódási veszély

A kompatibilitás érvényessége

A kompatibilitási vizsgálat érvényessége függ:

A recipiens transzfúziós anamnesisétőltranszfúziós anamnesisétől ( kapott-e trafo-t, ha igen, akkor 3 hónapon belül

kapta-e, politranszfunált-e) A recipiens egyéb immunizációs anamnesisétőlimmunizációs anamnesisétől (terhesség, transzplantáció, immunizáció) A recipiens alapbetegségétől, gyógyszereitőlalapbetegségétől, gyógyszereitől (hematológiai, immunológiai betegségek, infekciók)

A kompatibilitás érvényessége

Feltételek Kompatibilitásérvényessége

3 hónapon belüli transzfúzió 72 h

2 héten belüli transzfúzió < 72 h

Negatív transzfúziós anamnesis /vagy 3 hónapon túli transzfúzió és negatívellenanyagszűrés

1 hét

• KOMPATIBILIS VÉRKÉSZÍTMÉNY KIVÁLASZTÁSA AB0 és RhD azonosság elve

A KOMPATIBILITÁS SZABÁLYAIT KELL KÖVETNIMINDEN KOMPATIBILIS KÉSZÍTMÉNY BEADHATÓ Nem csoportazonos, MOSOTT kompatibilis vvs: korlátlanmennyiségben beadhatóNem csoportazonos, NEM MOSOTT kompatibilis vvs: 2E beadható

vvs Kompatibilitási szabály plazma