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NAD(P)+/NAD(P)Hをマーカーとした研究論文数

データ参照元：Google Scholar

各キットの詳細NEXT

NAD+/NADH

NAD/NADHミトコンドリア

：“NAD/NADH”：“NAD/NADH” mitochondria

：“NADP/NADPH”：“NADP/NADPH” mitochondria

NADP/NADPHミトコンドリア

がん肥満

：“NAD/NADH” cancer：“NAD/NADH“ obesity

がん酸化ストレス

：“NADP/NADPH” cancer：“NADP/NADPH“ “oxidative stress”

2500

2000

1500

1000

500

02005 2007 2009 2011 2013 2015

論文数

発行年

肥満

がん

ミトコンドリアNAD/NADH

細胞内のNAD(P)+とNAD(P)Hの量は、薬剤投与や遺伝子組み換え等により影響を受けたがん細胞やミトコンドリア機能を理解する際の重要な代謝マーカーとして評価されています。特に米国を中心に論文数の増加が見られており、細胞内代謝の評価は細胞の状態を理解するうえで重要視されています。

細胞内の代謝システムである、解糖系やTCA回路、電子伝達系の解析は、細胞状態を理解する上で重要であり、グルコースや乳酸、NAD(P)/NAD(P)Hなどのエネルギーおよび代謝産物を指標に評価されています。

細胞内代謝で理解する細胞状態

NADP+/NADPH

0

200

400

600

800

1000

2000 2002 2004 2006 2008 2010 2012 2014 2016

論文数

発行年

NADP/NADPH

ミトコンドリア

がん

酸化ストレス

＜検索ワード＞ ＜検索ワード＞

TCA回路

解糖系

Glucose Assay Kit-WST製品コード：G259

Lactate Assay Kit-WST製品コード：L256

NADP/NADPH Assay Kit-WST製品コード：N510

NAD/NADH Assay Kit-WST製品コード：N509

NAD+

NADHピルビン酸

G6P

乳酸

Ribose-5P

NAD+ NADH

NADP+ NADPHグルコース

検索細胞内代謝 同仁

NAD/NADH Assay Kit-WST 細胞内代謝測定キット

NADP/NADPH Assay Kit-WST

これからはじめるこれからはじめる

細胞内代謝測定細胞内代謝測定

0

0.4

0.8

1.2

1.6

0.5 1.0 1.5 2.0

Abso

rban

ce (4

50 n

m)

NAD+濃度 (μmol/l)

本キット同梱の標準液を同時に測定することで、0.03～2 μmol/lの総NAD+/NADHとNADHの定量解析が行えます。なお、サンプル中の総NAD+/NADH量が2 μmol/lより濃い濃度の場合は、サンプルを希釈することで評価できます。また、本キット（NAD/NADH Assay Kit-WST）は、NADPおよびNADPHとは反応しないことを確認しております。(右図)

NAD(P)+, NAD(P)H濃度 (μmol/l)0

0.5

1.0

1.5

2.0

0.5 1.0 1.5 2.0

Abso

rban

ce (4

50 n

m)

検量線 NAD+/NADHの選択性NAD+

NADHNADP+

NADPH

NAD/NADH Assay Kit-WSTNAD/NADH測定キット 試薬を通して最新研究をサポート

メーカーコードコード希望納入価格容 量品 名

100 tests N509347-09321NAD/NADH Assay Kit-WST

NAD+とNADHの測り分け

細胞の溶解および

除タンパク*

培養細胞

NAD+とNADHの測り分け操作

測定原理

Ethanol

Ethanal

EnzymeEnzyme ElectronmediatorElectronmediator

NAD+

NADH

WST formazan

WST

NAD+NAD+NADHNADH

NAD+NAD+NADHNADH

NAD+NAD+××NADHNADH

NAD+NAD+

NADHNADH 処理なし

加熱処理あり

0

2

4

6

8

10

12

14

Control 2-DG

NAD/NADH

0

1

2

3

4

56

7

8

Control 2-DG

乳酸濃度

(mm

ol/l)

減少

乳酸量の変化

増加

細胞を用いた測定例 (解糖系阻害剤 2-DGの添加 )

￥54,000-

NAD/NADH Assay Kit-WST は、細胞内の総 NAD+/NADH 量、NADH 量および NAD+ 量の定量、さらに NAD+ と NADH の比率を測定することができるキットです。本キットに含まれる抽出バッファーと、除タンパク質用チューブを用いて簡便に培養細胞から細胞ライセートを調製できます。また細胞ライセートを加熱処理することで、細胞内 NADH 量のみを定量することができ、別途測定した総 NAD+/NADH 量から NADH

量を差し引くことで、細胞内 NAD+ 量を求めることができます。

NAD+/NADH 比の変化

細胞

グルコース

ヘキソキナーゼ

ピルビン酸

乳酸

阻害NAD+

NADH

グルコース 6-リン酸

2-DG-6-リン酸

2-DG

HeLa 細胞（1×106 cells) に 2-Deoxy-D-glucose (2-DG)を最終濃度 6 mmol/lになるよう添加し、24 時間培養後に乳酸量およびNAD+/NADH比を確認しました。乳酸測定は、培養上清を用いて Lactate Assay Kit-WST（製品コード：L256）にて評価し、培養上清除去後の細胞を用いて本キットにて NAD+/NADH 比を評価しました。

結果、 2-Deoxy-D-glucose 添加により細胞内の解糖系が阻害されたことで乳酸量は減少し、NAD+/NADH 比は増加する結果が得られました。

プレートアッセイで確かなデータ

同仁化学だけ * 簡便に除タンパクできるチューブを同梱

NAD

+ /NAD

H R

atio

細胞ライセート

TCA回路

NAD+ NADH

NADP+濃度 (μmol/l)

0.4

0.8

1.2

1.6

2.0

0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0

本キット同梱の標準液を同時に測定することで、0.01～1 μmol/lの総NADP+/NADPHとNADPHの定量解析が行えます。なお、サンプル中の総NADP+/NADPH量が1 μmol/lより濃い濃度の場合は、サンプルを希釈することで評価できます。また本キット（NADP/NADPH Assay Kit-WST）は、NAD+およびNADHとは反応しないことを確認しております。（右図）　　　　　　　　

0

0.4

0.8

1.2

1.6

2.0

0.5 1.0 1.5 2.0 2.5

NAD(P)+, NAD(P)H濃度 (μmol/l)

NAD+

NADHNADP+

NADPH

Abso

rban

ce (4

50 n

m)

Abso

rban

ce (4

50 n

m)

NADP+/NADPHの選択性検量線

細胞を用いた測定例 (抗がん剤 Doxorubicinの添加 )

測定原理NADP+と NADPHの測り分け操作

NADP+と NADPHの測り分け

培養細胞

NADP+NADP+NADPHNADPH

NADP+NADP+××NADPHNADPH

NADP+NADP+

NADPHNADPH 処理なし

加熱処理あり

NADP/NADPH Assay Kit-WSTNADP/NADPH測定キット 試薬を通して最新研究をサポート

メーカーコードコード希望納入価格容 量品 名

100 tests N510NADP/NADPH Assay Kit-WST

0

10

20

30

40

50

60

Control DOX0

0.050.100.150.200.250.300.350.400.45

Control DOX

NADP+NADP+NADPHNADPH

NADP/NADPH Assay Kit-WST は、細胞内の総 NADP+/NADPH 量、NADPH 量 およびNADP+ 量の定量、さらに NADP+ と NADPH の比率を測定することができるキットです。本キットに含まれる抽出バッファーと、除タンパク質用チューブを用いて簡便に培養細胞から細胞ライセートを調製できます。また細胞ライセートを加熱処理することで、細胞内

NADPH量 のみを定量することができ、別途測定した総 NADP+/NADPH 量か ら NADPH

量を差し引くことで、細胞内 NADP+ 量を求めることができます。

GSH/GSSG 比の変化

関連製品のご紹介NEXT

Jurkat細胞（3×106 cells) にDoxorubicin (Dox)を最終濃度500 nmol/lになるよう添加し、24 時間培養後にNADP+/NADPH比および還元型/酸化型のグルタチオン比(GSH/GSSG)を確認しました。何れの測定もPBS洗浄後の細胞を用い、本キットにてNADP+/NADPH比を、GSSG/GSH Quantification Kit（製品コード：G257）にてグルタチオン比を評価しました。

DOX(doxorubicin)を細胞に添加すると酵素反応によりDOXラジカルと共にNADP+が生成される。DOXラジカルは活性酸素種（ROS）を生成し、DNAダメージやアポトーシスを誘導する。その一方で発生したROSを消去するため、還元型グルタチオン(GSH)が消費され酸化型グルタチオン(GSSG)が増加する。また、GSSGをGSHに還元するためにNADPHが用いられ、NADP+が増加する。今回得られたデータは、上記のような機構に基づくものと考えられます。

減少上昇

プレートアッセイで確かなデータ

NADP+/NADPH 比の変化

Glucose-6-phosphate

EnzymeEnzyme ElectronmediatorElectronmediator

NADP+

NADPH

WST formazan

WST6-Phospho-gluconolactone

細胞の溶解および

除タンパク*

同仁化学だけ * 簡便に除タンパクできるチューブを同梱

NAD

P+ /NAD

PH R

atio

GSH

/GSS

G R

atio

細胞ライセート

344-09331

DNA damage

ApoptosisNecrosisetc.

DOX・

DOX

NADPH

NADP+

O2

ROS

GSH

GSSG

NADP+

NADPH

DOX

細胞

・C. Henninger and G. Fritz, “Statins in anthracycline-induced cardiotoxicity: Rac and Rho, and the heartbreakers.” , Cell Death Dis. 2017, 8(1), e2564. ・S. Mandziuk, R. Gieroba, A. Korga, W. Matysiak, B. Jodlowska-Jedrych, F. Burdan, E. Poleszak, M. Kowalczyk, L. Grzycka-Kowalczyk, E. Korobowicz, A. Jozefczyk and

J. Dudka, “The differential effects of green tea on dose-dependent doxorubicin toxicity.” , Food Nutr Res., 2015, 59, 29754.

＜参考文献＞

￥54,000-

：0120 - 052099Free Dial：ffwk.fujifilm.co.jpURL ：0120 - 052806Free Fax

：www.dojindo.com：info@dojindo.com

30 W Gude Dr. Suite 260, Rockville, MD 20850, USAURLE-mail

：03-3578-9651（代表）Tel

製造委託元・国内問合せ先 開発元

国内販売元 取扱店

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URLFree Dial

：info@dojindo.co.jp：096-286-1515（代表）

E-mailTel

検索詳細はコチラ GSH　同仁

メーカーコード和光コード希望納入価格容 量品 名

200 tests G257342-09011￥53,200-GSSG/GSH Quantification Kit

Lactate Assay Kit-WST 200 tests L256349-09283￥68,000-50 tests 343-09281￥29,000-

検索詳細はコチラ 乳酸　同仁

Lactate Assay Kit-WST

乳酸測定キット

グルタチオン測定キット

グルタチオンは通常、生体内で還元型（GSH）として存在していますが、酸化ストレスなどの刺激によって還元型（GSH）から酸化型(GSSG) に変換されるため、GSH と GSSG の比率が酸化ストレスの指標として評価されています。本キットに含まれる GSH のマスキング剤により、GSH を隠蔽することで GSSG のみを定量でき、別途測定した総グルタチオン量からGSSG 量を差し引くことで、GSH 量を求めることが可能です。

GSSG

2 GSH

NADPH

NADP+

GPx

H2O2 R-OOHL-OOH

H2O ROHLOH

手軽にはじめる乳酸測定手軽にはじめる乳酸測定

各ウェルに標準液とサンプルを添加

Working solutionを各ウェルに添加

37℃で 30分間インキュベート

吸光度を測定

培養上清または細胞の破砕液をプレートに添加し、試薬を加えてインキュベートするだけの簡単操作です。

解糖系の代謝産物である乳酸を定量 ( 下限値 : 0.02 mmol/l ) することができます。96 ウェルマイクロプレートに対応しているため多検体測定が可能です。乳酸の定量は、細胞内代謝経路の変化をモニタリングするためのマーカーの 1 つとしてがん研究分野では広く使われていますが、最近では幹細胞の分化や糖尿病研究においても乳酸を指標とした評価の報告が増えています。

酸化ストレスの確かな指標酸化ストレスの確かな指標

酸化ストレス因子

無毒化

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関連製品の紹介

GSSG/GSH Quantification Kit

GR

GPx: Glutathione peroxidaseGR : Glutathione reductase