laoratorijske Životinje anestezija, analgezija,...
TRANSCRIPT
LABORATORIJSKE ŽIVOTINJE - ANESTEZIJA, ANALGEZIJA, KIRURŠKI
POSTUPCI, EUTANAZIJA
Dr. sc. Natalija Filipović, dr. med. vet.
Medicinski fakultet Sveučilišta u Splitu
RUKOVANJE SA ŠTAKORIMA
• Sprječavanje ozljeda čovjeka
• Sprječavanje ozljeda životinja
• Izbjegavanje stresa = varijacija u pokusnim uvjetima!
http://www.youtube.com/watch?v=kVwtJAbik2c&feature=related
RUKOVANJE SA ŠTAKORIMA
• RESTRAINT = obuzdavanje
• “ručno” – bez primjene pomoćnih sredstava
• Mehaničko obuzdavanje
• Kemijsko obuzdavanje: sedacija, anestezija
RUKOVANJE SA ŠTAKORIMA
• Neki sojevi pogodniji, bolje podnose manipulaciju: Sprague-Dawley, Wistar
• http://www.youtube.com/watch?v=KUPpyRwKZN8&NR=1
• Drugi teži za rukovanje (Fischer 344, Long Evans)
• Divlji štakori – potpuno drugačije rukovanje (vreće, žičani konusi…)
• Pridržavanje za rep – blizu korijena (svlačenje!)
RESTRAINT
RESTRAINT
RESTRAINT
RESTRAINT
RESTRAINT
RESTRAINT
OZNAČAVANJE
• Bušenje ušnih resica
• Raznobojne životinje – Long-Evans hooded rats
• Odsijecanje prstiju (???)
• Naušnice
• Tetoviranje (rep, uške, stopala…)
• Vodootporni markeri (oznaka traje do 2 tjedna)
• Elektronički mikročipovi
PRIKUPLJANJE UZORAKA (SAMPLING)
• KRV • MOKRAĆA • FECES • METABOLIČKI KAVEZI • KOŠTANA SRŽ • TEKUĆINE IZ OKA (OČNA VODICA, STAKLASTO TIJELO) • SUZE • PERITONEALNE STANICE ASCITESA • ŽUČ • PANKREASNI SOK • VAGINALNI RAZMAZ I TEKUĆINA • MLIJEKO • REPRODUKTIVNE IZLUČEVINE MUŽJAKA • STANICE I TEKUĆINA IZ PLUĆA • LIMFA • CEREBROSPINALNA TEKUĆINA • SLINA
UZIMANJE UZORAKA KRVI
IZBOR METODE OVISI O:
• POTREBNOM PREŽIVLJAVANJU: – Max. 1,25 mL/ 100 g tjelesne mase
– = ugrubo 10-15% volumena krvi
– do 40% volumena – ako se uzima u malim uzorcima tijekom 24 h
– Ako uzmemo 7,5% volumena odjednom barem 1 tjedan do ponovnog uzorkovanja!
– /različiti podaci!/
UZIMANJE UZORAKA KRVI
IZBOR METODE OVISI O:
• POTREBNOM VOLUMENU
• UČESTALOSTI UZORKOVANJA
• DA LI SE MOŽE PRIMIJENITI ANESTEZIJA
• UČINKU UZORKOVANJA NA FIZIOLOŠKE PARAMETRE*
• DA LI JE POTREBNA VENSKA, ARTERIJSKA KRV ILI SE MOŽE UZETI MIJEŠANI UZORAK
• JE LI POTREBNA ASEPTIČNA TEHNIKA
(hormoni-adrenalin, kortikosteron, prolaktin, GH, inzulin, renin; GUK; enzimi u
plazmi; hematološki parametri; )
UZIMANJE UZORAKA KRVI
• IZRAVNO PUNKCIJOM SRCA
• RETROORBITALNI VENSKI SPLET
• DORZALNA METATARZALNA VENA
• V. SAPHENA
• REPNE KRVNE ŽILE
• V. JUGULARIS
• A. CAROTIS – jako krvarenje, veliki gubitak krvi
• AORTE I V. CAVA
• DEKAPITACIJA
• OSTALE TEHNIKE
UZIMANJE UZORAKA KRVI
• IZRAVNO PUNKCIJOM SRCA
• Anestezirana ž.
• Leži na leđima
• Napipa se ictus cordis
• 21 g igla pod kutem 30° (u odn. na kožu) L od ksifoidnog nastavka
• Polako napredovati – naglo smanjenje otpora – znak da smo u srcu
• Aspiracija (brizgalica)
/modifikacije raznih autora/
• Vađenje krvi iz srca KOD MIŠA
• http://www.youtube.com/watch?v=cRx0E-bu95Q&NR=1
UZIMANJE UZORAKA KRVI
• RETROORBITALNI VENSKI SPLET
• Manje količine
• Anestezirati ž.
• Može češće uzorkovanje
• >CK i AST! ozljede oka
• Palcem i kažiprstom L ruke razmakne se koža oko orbite
protrudira očna jabučica
• (palcem se može pritisnuti iza čeljusti, da se pospješi nakupljanje krvi)
• Pipetom se preko medijalnog kuta ulazi u oko (splet je iza i medijalno od oka)
• Laganom rotacijom i retrakcijom pipete pospješiti izlazak krvi
• Nakon izvlačenja pipete pritisak na jabučicu preko kapaka, da bi se zaustavilo krvarenje (retroorbitalni hematom i egzoftalmus)
http://www.youtube.com/watch?v=D7aL02FhGN8
UZIMANJE UZORAKA KRVI
• DORZALNA METATARZALNA VENA
• Lakše ako jedna osoba drži ž., a druga uzorkuje
• Kaudalni dio tijela poduprt
• (brijanje, dezinfekcija!)
• Uz čvrsto držanje noge (operater) fleksija 1. zgloba falangi
lagana adukcija noge
• ~ 23 g igla
• 0,1 – 0,2 mL krvi
UZIMANJE UZORAKA KRVI
• V. SAPHENA (med. ili lat.)
• Površinski s med./lat. strane punkcija blizu tarzalnog zgloba
• (brijanje, dezinfekcija!)
• Kompresija – za med. – ingvinalno područje;
- za lat. – lat. dio bedra
• ~ 23 g igla
• 0,1 – 0,2 mL krvi
UZIMANJE UZORAKA KRVI
• REP
• VENTRALNO – ARTERIJA
• LATERALNO - VENE
• http://www.youtube.com/watch?v=QoGmUSOJSoM
• http://www.youtube.com/watch?v=xuZteOAh7Dw&feature=related
UZIMANJE UZORAKA KRVI
• Jugularna vena
• Sa ili bez anestezije
• Leži na leđima
• U kutu vrata i ramena
• Anestezija – ako se kirurški izlaže vena
UZIMANJE UZORAKA KRVI
• AORTA i V. CAVA
• Veliki volumen uzorka
• Anestezija – otvara se trbuh
• Aorta abdominalis – na mjestu ispred bifurkacije
• V. cava caudalis – u blizini bubrega (polako da ne kolabira!)
• Kateterizacija - aorta!
UZORKOVANJE MOKRAĆE
METABOLIČKI KAVEZI
METABOLIČKI KAVEZI
APLIKACIJA
• p/o
• i/v
• i/p
• s/c
• i/m
• Osmotske mini crpke
• i/v INJEKCIJA KOD MIŠA
• http://www.youtube.com/watch?v=wowjgOS8_VU&feature=related
• http://www.youtube.com/watch?v=zbqjZ2HL_-0&feature=related
• I/P INJEKCIJA
• http://www.youtube.com/watch?v=SjwWiEhAPrg&feature=related
• s/c INJEKCIJA KOD MIŠA
• http://www.youtube.com/watch?v=yeygoa25hoI&feature=related
APLIKACIJA
• Osmotske mini crpke
http://www.youtube.com/watch?v=Zolnr-bPQN0
• I/M INJEKCIJA KOD MIŠA
• http://www.youtube.com/watch?v=hk5iK9o82vU&NR=1
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - ŠTAKOR PRIPREMA:
• NE treba postiti (nemogućnost povraćanja)
• Voda – poželjno da bude dostupna do indukcije u anesteziju /dehidracija tijekom zahvata/
• Točno vaganje
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - ŠTAKOR PRIPREMA:
• Sprječavanje hipotermije:
– Tople podloge
– Omatanje u aluminijsku foliju
– Minimizirati obrijanu površinu
– Spriječiti prekomjerno vlaženje okolnog krzna
– Aplikacija tekućina – samo zagrijanih na tjelesnu temperaturu
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - ŠTAKOR
INHALACIJSKA ANESTEZIJA:
U kombinaciji s O2 ili O2:NO2 (1:1)
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - ŠTAKOR
INJEKCIJSKA ANESTEZIJA
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - ŠTAKOR
INJEKCIJSKA ANESTEZIJA
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - ŠTAKOR
SEDACIJA:
KETAMIN - 22 mg/kg i/m
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - ŠTAKOR
ANALGEZIJA
POSTOPERATIVNA NJEGA - ŠTAKOR
INHALACIJSKA ANESTEZIJA:
NADOKNADA TEKUĆINE:
5% glukoza u 0,9% NaCl (glucosaline) s/c
na tjel. T!!!
16-32 mL po životinji (NE > od 5 mL na jednom mjestu aplikacije)
SPRJEČAVANJE HIPOTERMIJE:
žarulja (zaštiti oči!)
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - MIŠ PRIPREMA:
• NE treba postiti (nemogućnost povraćanja)
• Voda – poželjno da bude dostupna do indukcije u anesteziju /dehidracija tijekom zahvata/
• Točno vaganje
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - MIŠ PRIPREMA:
• Sprječavanje hipotermije:
– Tople podloge
– Omatanje u aluminijsku foliju
– Minimizirati obrijanu površinu
– Spriječiti prekomjerno vlaženje okolnog krzna
– Aplikacija tekućina – samo zagrijanih na tjelesnu temperaturu
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - MIŠ
PREMEDIKACIJA:
ATROPIN: 40 µg/kg s/c ili i/m
– za redukciju salivacije
/atropin sulfat – može se razrijediti sterilnom vodom 1:10, da bi se omogućilo doziranje/
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - MIŠ
INHALACIJSKA ANESTEZIJA:
U kombinaciji s O2 ili O2:NO2 (1:1)
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - MIŠ
INJEKCIJSKA ANESTEZIJA
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - MIŠ
INJEKCIJSKA ANESTEZIJA
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - MIŠ
SEDACIJA:
KETAMIN - 40 mg/kg i/m
ANESTEZIJA I ANALGEZIJA - MIŠ
ANALGEZIJA
POSTOPERATIVNA NJEGA - MIŠ
INHALACIJSKA ANESTEZIJA:
NADOKNADA TEKUĆINE:
5% glukoza u 0,9% NaCl (glucosaline) s/c
na tjel. T!!!
1-2 mL po životinji (NE > od 0,5 mL na jednom mjestu aplikacije)
SPRJEČAVANJE HIPOTERMIJE:
žarulja (zaštiti oči!)
EUTANAZIJA 2010/63/EU
The killing of animals shall be completed by one of the following methods:
• (a) confirmation of permanent cessation of the circulation;
• (b) destruction of the brain;
• (c) dislocation of the neck;
• (d) exsanguination; or
• (e) confirmation of the onset of rigor mortis.
2010/63/EU
2010/63/EU
• 1. Shall, where appropriate, be used with prior sedation. • 2. Only to be used on large reptiles. • 3. Only to be used in gradual fill. Not to be used for foetal and neonate
rodents. • 4. Only to be used for birds under 1 kg. Birds over 250 g shall be sedated. • 5. Only to be used for rodents under 1 kg. Rodents over 150 g shall be
sedated. • 6. Only to be used for rabbits under 1 kg. Rabbits over 150 g shall be
sedated. • 7. Only to be used for birds under 5 kg. • 8. Only to be used for rodents under 1 kg. • 9. Only to be used for rabbits under 5 kg. • 10. Only to be used on neonates. • 11. Only to be used for birds under 250 g. • 12. Only to be used if other methods are not possible. • 13. Specialised equipment required. • 14. Only to be used on pigs. • 15. Only to be used in field conditions by experienced marksmen. • 16. Only to be used in field conditions by experienced marksmen when
other methods are not possible.
2010/63/EU
• Methods other than those listed in the table may be used:
• (a) on unconscious animals, providing the animal does not regain consciousness before death;
• (b) on animals used in agricultural research, when the aim of the project requires that the animals are kept under similar conditions to those under which commercial farm animals are kept; these animals may be killed in accordance with the requirements laid down in Annex I to Council Regulation (EC) No 1099/2009 of 24 September 2009 on the protection of animals at the time of killing ( 1 ).
EUTANAZIJA
• http://www.youtube.com/watch?v=XqdKwsIpxWI&feature=related
Marinović Guić, M., (2011): KARAKTERIZACIJA SPINALNIH AFERENTNIH NEURONA KOJI SE PROJICIRAJU U RAZLIČITE KOMORE SRCA MLADIH I STARIH ŠTAKORA Medicinski fakultet Split (disertacija)
