Estación Experimental Agroindustrial Obispo Colombres

Resumen

• Almidón ingresa al proceso de fabricación de azúcar.

• Origina problemas en el proceso y en el producto final.

• En los procesos su cuantificación es común.• SGC actualiza o remplaza metodologías , mejores

resultados.• ‘’Draft Method No 3 ICUMSA’’• Repetibilidad, reproducibilidad e incertidumbre.• Método aceptable.

Introducción• Almidón en nudos del tallo de la caña.• Concentración: Variedad de la caña y su madurez.• Se integra al jugo en la molienda.• Gránulos 1 a 5 µm.• Insolubles y fácilmente removibles.• Gelatinizan por calor y cal.• Su presencia menor calidad del jugo de caña.

Problemas.• Junto a gomas y otros polisacáridos forman

flóculos en bebidas carbonatadas.• Turbidez en jarabe de azúcar.

Introducción• Importante su determinación rápida

y confiable.• Debe eliminarse si sobrepasa limites

de concentración.• Hidrolisis enzimática, α-amilasa.

Introducción• International Commission for Uniform

Methods of Sugar Analysis (ICUMSA) 2007

• SGC actualiza o remplaza metodologías , mejores resultados.

• método ”draft” para determinar almidón en productos azucarados

• No validado como “Método ICUMSA”,

Metodología• Almidón soluble pro análisis Carlo

Erba.• Agua destilada conductividad 5 µs• Espectrofotómetro UV-Visible Hewlett

Packard• Validación de métodos analíticos.

Validación de métodosProcedimiento para establecer pruebas

documentales que demuestren científicamente que un método

analítico tiene las características de desempeño que son adecuadas para

cumplir los requerimientos de las aplicaciones analíticas pretendidas.

Verificación de métodos

Procesos que lleva a cabo el laboratorio con el fin de demostrar su

capacidad para ejecutar correctamente un método normalizado cuando lo realiza exactamente como

está descrito en la norma.

¿ Cuáles son los tipos de métodos?.

1. Métodos Normalizados:Método analítico desarrollado por un organismo de normalización u otro organismo reconocido cuyos métodos songeneralmente aceptados por el sector técnico correspondiente. El desarrollo del método incluye la etapa de su validación.

¿ Cuáles son los tipos de métodos?

2. Métodos No Normalizados:Método analítico desarrollado por un tercero o que ha sido adaptado por el laboratorio a partir de un método normalizado. El desarrollo del método, así como su adaptación, incluyen la etapa de su validación.

¿ Cuáles son los tipos de métodos?

3. Métodos Desarrollados por el Laboratorio:

Método analítico que no se encuentra en normas u otras colecciones de métodos, ni en publicaciones de terceros, habiendo sido desarrollado por el propio laboratorio. El desarrollo del método incluye la etapa de su validación.

Parámetros del desempeño delmétodo analítico

Son las propiedades, características o capacidades cuantificables del método que indican su grado de calidad; entre estos están:

• Exactitud• efecto matricial• repetibilidad, • precisión intermedia, • reproducibilidad,• especificidad, • límite de detección, • límite de

cuantificación, • linealidad,• rango,

• Incertidumbre• Recuperación del

analito.• sensibilidad,• robustez, • fortaleza y otras

características relacionadas con los resultados obtenidos por el método.

Metodología• Almidón soluble pro análisis Carlo Erba.• Agua destilada conductividad 5 µs• Espectrofotómetro UV-Visible Hewlett

Packard• Validación de métodos analíticos.1. Linealidad e intervalo operativo2. Limite de detección3. Limite de cuantificación4. Precisión en condiciones de repetibilidad5. Precisión intermedia

Linealidad e intervalo operativo

Para determinar la linealidad y el intervalo operativo de este método se prepararon : • soluciones patrón, por triplicado, de

concentraciones comprendidas entre 0 mg/l y 1000 mg/l de almidón, y

• se graficó luego la absorbancia en función de la concentración.

• Empleando regresión lineal se obtuvo la ecuación de correlación, y

• su significancia en el intervalo mencionado fue comprobada mediante el análisis de la varianza y el gráfico de residuos.

Linealidad e intervalo operativo

Figura 1: Curva de calibración y limites de confianza.• Absorbancia en función de la concentración• Ecuación de correlación, R²= 0,995• Limites de confianza• Intervalo de confianza 0-500 mg/l definido ICUMSA

Limites de detección y Limites de cuantificación

El Laboratorio se adoptó el criterio de establecer que:• Lim. Detección, la mínima concentración

obtenida en condiciones de repetibilidad, donde el coeficiente de variación porcentual (CV%) fuera menor o igual a 10%.

• Lim. Cuantificación, la menor concentración obtenida en condiciones de repetibilidad, cuando el CV% y el error porcentual fueran menores o iguales a 10%.

Limites de detección y Limites de cuantificación

• De esta manera, el límite de detección quedó establecido en 6,25 mg/l

• El intervalo de trabajo quedó comprendido entre 43,75 mg/l y 500 mg/l de almidón.

Precisión en condiciones de repetibilidad

Para evaluar la precisión del método en condiciones de repetibilidad, dos analistas determinaron la concentración de almidón en ocho muestras de jugo de caña,

Precisión en condiciones de repetibilidad

• Precisión Aceptable• CV% entre 0.46 Y 4.16• 4.16 para el de menor concentración

Precisión intermediaPara la evaluación en condiciones de precisión intermedia, se empleó una muestra de jugo de caña de azúcar fortificado con 50 mg/l, 250 mg/l y 400 mg/l de almidón.

Precisión intermedia

• Recuperación dentro del rango de aceptación de FAO/OMS

• Para concentraciones mayores a 1 mg/Kg, la recuperación debería estar entre 70% y 110%.

ConclusionesLas cualidades a destacar del método “Draft Method Nº 3”, son su simpleza analítica, reducido tiempo de ejecución y bajos requerimientos de reactivos químicos. El no precipitar el almidón con alcohol ni emplear cloruro de calcio, tal como lo requieren las técnicas empleadas hasta ahora en este Laboratorio, representa claramente una ventaja económica.

ConclusionesEn base a los resultados obtenidos en cuanto a los parámetros determinados, se puede afirmar que estos cumplen con las condiciones establecidas por el Laboratorio de la Sección Química de la EEAOC para la validación de un método analítico.