Efusi Telinga Tengah dan FungiTujuan: Bakteri dan virus jarang diisolasi dari cairan telinga tengah dalam kasus otitis media dengan efusi (OME). Namun, karena endotoksin sering terdeteksi pada efusi tersebut, diduga bahwa pasien dengan OME memiliki riwayat infeksi gram negatif. Baru-baru ini, jamur telah menarik perhatian sebagai mikroorganisme yang menyebabkan kronis sinusitis. Kami menyelidiki keterlibatan jamur dalam pembentukan efusi telinga tengah pasien dengan OME dan otitis media eosinofilik, di mana pasien mengalami kental efusi telinga tengah dan riwayat asma bronkial dewasa menunjukkan pasti keterlibatan eosinofil.Metode: efusi telinga tengah dan sekret hidung dikumpulkan dari pasien dengan otitis media eosinofilik (7 pasien) atau OME (12 pasien),dan pap adalah siap untuk methenamin perak pewarnaan. Itu tersisa specimen adalah tertanam di Epon dan bernoda dengan toluidin biru untuk observasi di bawah sebuah cahaya mikroskop, dan ultrathin bagian adalah siap untuk pemeriksaan di bawah mikroskop elektron.Hasil: hifa jamur terdeteksi di telinga cairan dalam semua pasien dengan otitis media yang eosinofilik atau OME.Charcot-Leyden kristal (CLC) yang diamati pada 6 dari 7 pasien dengan otitis media eosinofilik. Sehubungan dengan temuan di itu sengau sekresi, jamur hifa adalah juga terdeteksi di itu sengau sekresi dari semua pasien, sedangkan CLC adalah terdeteksi hanya 1 pasien dengan otitis media eosinofilik.Kesimpulan: Ini diperjelas dengan menggunakan metode pewarnaan perak methenamine bahwa jamur yang hadir di telinga tengah cairan dalam 100% dari kasus yang diteliti dari otitis media yang eosinofilik atau OME. Apakah jamur juga hadir di telinga tengah rongga individu normal tidak diketahui, tetapi kemungkinan bahwa mereka dapat berkontribusi sebagai penyebab kedua penyakit tidak dapat dikecualikan. Khususnya dalam otitis media eosinofilik, pengamatan banyak CLC dalam cairan telinga tengah menunjukkan bahwa banyak eosinofil telah merosot. Protein granul eosinofil dilepaskan dari eosinofil merosot dapat menyebabkan cedera epitel dari telinga tengah. Kemungkinan bahwa jamur menginduksi eosinofil di telinga tengah juga tidak bisa dikecualikan.Rongga telinga tengah dan sinus paranasal yangsangat mirip, dalam bahwa mereka berdua terbuka langsung kesaluran pernapasan atas. Sebuah spektrum yang sama pathogen bakteri menyebabkan infeksi di ini rongga memiliki juga telah dilaporkan. 1,2 Bakteri termasuk Streptococcus coccus pneumoniae dan Haemophilus influenzae, dan Moraxella catarrhalis juga baru dimulai untuk mendapatkan perhatian dalam hal ini. patogen ini bakteri diyakini pertama menjajah nasofaring dan menulari rongga telinga tengah melalui eustachius tabung dan demikian menyebabkan akut otitis Media; kemudian mereka menulari itu paranasal sinus melalui itu ostia dari itu sinus, menyebabkan akut sinusitis. Itu nasofaring adalah demikian dianggap sebagai sumber infeksi dari atas saluran pernapasan. 3 Pada tahun 1999, Ponikau dkk 4 dilaporkan bahwa jamur diisolasi dalam sekresi nasal hampir semua subyek sehat, serta pasien dengan sinusitis kronisMereka menyarankan bahwa penyebab sinusitis kronis dalam semua kasus adalah induksi ini jamur migrasi lokal eosinofil, sehingga. eosinophilic peradangan. Karena, seperti disebutkan di atas, patogen yang sama bakteri penyebab infeksi rongga telinga tengah dan sinus paranasal, kedua yang memiliki bukaan ke dalam saluran pernapasan bagian atas dan histologi serupa, jamur yang terisolasi disekresi hidung dalam 100% kasus juga sangat mungkin untuk menjadi hadir di itu tengah telinga rongga. Itu kehadiran dari jamur DNA di tengah telinga efusi memiliki telah ditunjukkan oleh polymerase chain reaction (PCR). 5 Jika jamur yang hadir dalam efusi telinga tengah, mereka mungkin memainkan peran penting sebagai mikroorganisme pathogen di telinga tengah. Kami meneliti frekuensi isolasi jamur di efusi telinga tengah dikumpulkan dari pasien dengan otitis media dengan pengaliran cairan (OME) dan pasien dengan eosinophilic otitis media menunjukkan kental tengah telinga efusi dan sebuah sejarahasma bronkial dewasa, yang menunjukkan pasti keterlibatan eosinofil.

SUBYEK DAN METODEEfusi telinga tengah, yang diamati pada kedua belah pihak pada setiap pasien, dan sekresi nasaldikumpulkan dari pasien dengan eosinophilic otitis media dan pasien dengan Ome. Itu diagnose dari eosinophilic otitis media adalah terbuat oleh medis sejarah, 6 dan adanya banyak eosinofil dalam efusi telinga tengah ditentukan oleh mikroskopis pemeriksaan spesimen diwarnai dengan Eosino Stain TORII. Tujuh pasien (1 laki-laki dan 6 perempuan; berarti usia, 60,4 tahun) memiliki otitis media eosinofilik; semua pasien memiliki sebuah lalu sejarah dari asma untuk yang sistemik dosis tinggi steroid telah diberikan, meskipun tidak ada yang menerima steroid selama 6 bulan sebelum pengumpulan sampel. Empat dari 7 pasien memiliki aspirin induced asma. Hanya ada 1 pasien yang adalah positif untuk antibody untuk Aspergillus oleh radioallergosorbent uji (RAST) antara itu 7 pasien. Antara itu 12 pasien dengan OME, di sana adalah 7 (4 laki-laki dan 3 perempuan, usia rata-rata, 51 tahun) dengan efusi serosa dan 5 (4 laki-laki dan 1 perempuan; berarti usia, 15 tahun) dengan efusi lendir. Tengah efusi telinga yang bilateral di semua pasien OME. Tak satu pun dari pasien dengan eosinophilic otitis Media atau OME memiliki perforasi membran timpani pada saat pengumpulan sampel cairan efusi. Itu luar telinga kanal adalah dicuci 3 kali dengan air suling sebelum pengumpulan cairan efusi sampel. Efusi cairan diperoleh dengan hisap setelah myringotomy. Sampel dari sengau sekresi adalah juga diperoleh hisap. Bagian dari yang dikumpulkan tengah telinga pengaliran cairan dan sengau keluarnya specimen adalah langsung berlepotan di kaca slide, dan itu tersisa bagian adalah tetap di 2% glutaraldehid (0.1 mol / L cacodylate penyangga) selama 1 jam. yang terakhir Sampel dicuci 3 kali dengan 0,1 mol / L cacodylate penyangga, tetap di osmik asam untuk 40 menit, dan kemudian tertanam di Epon 812. Bagian dengan sebuah daerah dari 1 mm 2 dan ketebalan 1 um disiapkan dan ditempatkan pada slide kaca untuk toluidin biru pewarnaan. Setelah pewarnaan, 5 acak bagian adalah dipilih, dan Charcot-Leyden Kristal (CLC) dalam sebuah daerah dari 1 mm 2 dihitung. The Epon-tertanam blok juga diiris menjadi beberapa bagian ultrathin dan terjebak pada grid jala dengan lubang 117-m-square dan diperiksa dengan mikroskop elektron. Angka-angka eosinofil di 5 acak terpilih lubang adalah dihitung, dan itu struktur ultrafine dari CLC diamati.Spesimen langsung dioleskan pada slide kaca ternoda dengan methenamine perak selama 1 jam dan selanjutnya diwarnai dengan safranin O selama 5 menit;Gambar 5 buah dan Tabelsetiap spesimen diamati di bawah 400 x pembesaran di 5 bidang pandang, dan spesimen dengan jamur dalam setidaknya 1 dari 5 bidang pandang yang dinilai sebagai +, Sedangkan mereka dengan jamur dalam 2 atau lebih bidang pandangan yang dinilai sebagai + +. Tidak ada pemeriksaan oleh jamur budaya dilakukan. Meskipun tingkat deteksi oleh kultur jamur tampaknya sangat bervariasi antara fasilitas pengujian, tingkat oleh metode rutin bekas di Jepang adalah umumnya sangat rendah. Ponikau et al 4 menyatakan bahwa tingkat deteksi jamur rendah kecuali metode kultur khusus digunakan. Pada fasilitas kami, tingkat deteksi jamur rendah karena metode rutin digunakan untuk mendeteksi. Oleh karena itu, dalam penelitian ini, kami mengadopsi metode di mana pap benar-benar bernoda dan mikroskopis diamati untuk mendeteksi jamur.HasilOtitis Media eosinofilik. Beberapa jenis jamur hifa adalah diamati di itu mengolesi persiapan (Gambar 1) dari itu tengah telinga pengaliran cairan cairan di semua 7 pasien (lihat Tabel); 2 pasien diterima nilai dari + +, dan 5 pasien nilai dari +. Di Epon-embedded sec- 2 2 2 2 2 2 + - tions diiris untuk 1 pm, kami menemukan ada migrasi eosinofil untuk itu lingkar dari itu jamur atau eosinofil mengikat untuk itu jamur selama itu observasi periode (Gambar 2).Charcot-Leyden kristal yang diamati pada 6 7 pasien (lihat Tabel dan Gambar 3). mikroskop electron mengungkapkan bahwa itu CLC hadir di itu sitoplasma dari eosinofil dibebaskan dari sel bersama-sama dengan butiran tertentu melalui situs sel pecah ketuban disebabkan oleh eosinofil nekrosis (Gambar 4). tak satupun dari itu 7 pasien dengan eosinophilic otitis media adalah ditemukan untuk memiliki timpani selaput perforasi di mereka awal presentasi. Myringotomy adalah dilakukan di semua pasien, dan itu koloid pengaliran cairan ditahan di telinga tengah dikumpulkan selama prosedur. Sebuah ventilasi transtympanic tabung dimasukkan setelah koleksi. Pada 2 pasien (lihat Tabel, kelompok B), ventilasi transtympanic tabung tidak tersumbat dan memungkinkan relatif baik ventilasi rongga telinga tengah dengan membersihkan sekali setiap beberapa minggu. Di sisa 5 pasien (lihat Tabel, kelompok A), namun, yang transtympanic tabung ventilasi menjadi tersumbat segera, dan gejala tidak bisa dikendalikan oleh para transtympanic ventilasi tabung. Itu nomor dari CLC per satuan daerah adalah 0.6/mm 2 dalam kasus-kasus yang buruk dikontrol meskipun insersi dari sebuah ventilasi tabung, dan 4.57/mm 2 pada mereka yang dikendalikan secara memadai setelah insersi dari sebuah ventilasi tabung. A secara statistic penting perbedaan adalah ditemukan antara itu dua kelompok (Mahasiswa t-test, p < 0,01) meskipun itu statistic pengolahan mungkin tidak tepat, karena itu nomor dari pasien adalah rendah. Tidak penting korelasi bisa menjadi diakui antara itu nomor dari eosinofil dan itu nomor dari CLC, atau antara itu Jumlah eosinofil dan jumlah hifa di itu tengah telinga pengaliran cairan (Pearson korelasi koefisien). di sana adalah tidak kemerosotan dari pendengaran selama itu klinis kuliah di apa saja dari itu pasien. Itu laju dari deteksi dari jamur hifa adalah 100% di itu sengau smear; namun, CLC adalah diamati di itu sengau sekresi dari hanya 1 dari itu 7 pasien (lihat Tabel).Ome. The 7 pasien dengan efusi serosa yang 18-75 tahun, dan termasuk tidak ada anak-anak. Satu dari 5 pasien dengan efusi lendir adalah 51 tahun usia, sedangkan 4 lainnya adalah anak-anak 6 tahun usia atau lebih muda. Tingkat deteksi hifa jamur di methenamin perak bernoda mengolesi persiapan adalah 100% untuk efusi serosa baik dan lendir. Itu jenis dari terdeteksi jamur hifa adalah hamper itu sama sebagai itu di pasien dengan eosinophilic otitis media. Namun, tidak ada CLC terdeteksi di salah satu pasien. Pengamatan methenamine perak bernoda sengau mengolesi persiapan menghasilkan sebuah laju dari deteksi dari jamur hifa dari 100%. juga tidak eosinofil maupun CLC adalah diamati di itu sengau sekresi pasien dengan OME.

PembahasanKebudayaan efusi telinga tengah pasien dengan OME jarang menyebabkan isolasi bakteri. Namun, sebagai endotoksin sering terdeteksi dalam efusi, infeksi sebelumnya dengan H gram negatif influen- ZAE diduga. Di sisi lain, kemungkinan infeksi mikroorganisme patogen lainnya daripada bakteri tidak dapat dikesampingkan. Jamur telah ditarik perhatian sebagai mikroorganisme yang dapat menyebabkan kronis sinusitis. Kim et al 5 melaporkan bahwa kehadiran jamur di efusi telinga tengah tidak dapat dibuktikan oleh budaya, sedangkan jamur DNA adalah terdeteksi di 34% dari efusi dengan PCR. Isolasi jamur dengan PCR dalam sekresi hidung pasien dengan sinusitis kronis dan subyek normal juga telah telah dilaporkan. 7 Dalam penelitian tersebut, DNA jamur terdeteksi di sekret hidung dari sekitar 42% pasien dengan sinusitis dan 40% dari subyek normal. Karena jamur diisolasi dalam sekresi nasal dari hamper semua pasien dengan kronis radang dlm selaput lender dan normal subyek, menurut untuk Ponikau et al, itu temuan tingkat 34% deteksi DNA jamur pada efusi telinga tengah dengan PCR menunjukkan bahwa jamur mungkin telah hadir di hampir 100% dari menengah efusi telinga, juga, jika metode yang dijelaskan oleh Ponikau dkk 4 digunakan. Hal ini sesuai dengan kami isolasi jamur pada tingkat 100% oleh histologist metode. Rongga telinga tengah dimana jamur diisolasi dalam penelitian ini adalah rongga patologis dengan efusi. Tidak diketahui apakah jamur dapat terisolasi di telinga tengah normal tanpa telinga tengah lesi. Di telinga tengah normal, sampel bahan untuk pemeriksaan sulit karena kurangnya akumulasi cairan. Jika endapan dari solusi bekas untuk mencuci itu tengah telinga adalah diperiksa, bahkan meskipun itu myringotomy dan irigasi dari itu tengah telinga rongga di sehat orang mungkin tidak menjadi diijinkan di etis alasan, jamur yang berada di normal tengah telinga mungkin menjadi terisolasi. Namun, sejak fun-gal hifa terdeteksi pada 100% dari efusi pasien khas dengan OME, kemungkinan jamur menjadi penyebab OME tidak bisa dikesampingkan. Bagian dari jamur menjadi itu tengah telinga mungkin terjadi melalui itu eustachius tabung, di melihat dari itu fakta bahwa semua dikumpulkan tengah telinga efusi adalah dari pasien dengan tidak timpani selaput perforasi. Itu kemungkinan dari kontaminasi di itu waktu dari koleksi dari itu sampel adalah sedikit, karena itu myringotomy adalah dilakukan hati-hati, dengan tindakan pencegahan aseptik diambil setelah mencuci saluran telinga eksternal. Jamur mungkin telah dilakukan melalui udara atau aliran lendir dari nasofaring ke rongga telinga tengah, karena hubungan antara tekanan telinga tengah dan tekanan atmosfer. Penemuan jamur di hidung rongga di semua kasus menunjukkan bahwa mereka adalah mungkin juga sering hadir dalam nasofaring.Otitis media eosinofilik diusulkan pertama kali sebagai entitas penyakit baru pada tahun 1995 oleh Matsutani et al. Shambaugh dan Glasscock 9 telinga tengah dijelaskan peradangan yang terkait dengan penyakit alergi sebagai "alergi otitis media "dalam buku mereka, mendokumentasikan kehadiran berlendir efusi sangat kental di itu tengah telinga mengandung eosinofil. Namun, Matsutani et al 8 kondisi ini disebut "eosinophilic otitis media, " dan tidak "alergi otitis media, " karena hampir semua pasien mereka memiliki nonatopi asma. Nagamine dkk 6 menganjurkan sebagai kriteria diagnostic untuk eosinophilic otitis media 1) itu kehadiran dari kuning dan sangat kental tengah telinga efusi, terutama yang mengandung eosinofil, dan 2) prece lekuk dan terkait dewasa bronchial asma di kami penelitian, 6 dari 7 kasus otitis media eosinophilic yang RAST-negatif. Pasien asma dewasa dalam krisis biasanya RAST-negatif. Oleh karena itu, disarankan bahwa itu eosinophilic otitis media di kami belajar adalah sebuah nonallergic penyakit, sebagai runcing di luar oleh Matsutani et al. 8 Hal ini dianggap bahwa hormon steroid tidak mempengaruhi itu hasil dari itu RAST di ini penelitian, sebagai mereka memiliki tidak telah diberikan selama di paling sedikit 6 bulan sebelumnya untuk koleksi dari efusi telinga tengah cairan.

Ponikau dkk 4 menulis bahwa jamur di hidung secretionsinduce migrasi eosinofil dalam sekresi, sehingga eosinophilic radang sinus paranasal, dan mereka mengusulkan untuk memanggil penyakit ini entitas"eosinophilic rinosinusitis jamur." ini benar, jamur yang lewat ke telinga tengah rongga akan menyebabkan peradangan pada eosinophilic telinga tengah. Namun, eosinofil tidak bermigrasi ke efusi telinga tengah pada pasien khas dengan OME, meskipun kehadiran jamur. Saran oleh Ponikau dkk 4 bahwa jamur menginduksi migrasi eosinofil menarik, tetapi tidak dapat menjelaskan mengapa jamur di OME tidak menyebabkan migrasi eosinofil.Sebagai otitis media eosinofilik adalah penyakit yang sangat langka seperti dibandingkan dengan OME, induksi eosinofil oleh jamur harus menjadi langka. Bukti tambahan diperlukan untuk mendukung hipotesis bahwa jamur dapat memainkan peran sebagai mikroorganisme dalam pengembangan OME atau otitis media eosinofilik. Dalam studi ini, kita tidak bisa amati, baik OME atau otitis media eosinophilic, eosinofil atau neutrofil bermigrasi ke lingkar dari itu jamur dan mengikat untuk mereka, sebagai memiliki telah dilaporkan dalam sekresi hidung. 10 Apakah jamur memiliki patogenisitas atau menyebabkan reaktivitas kekebalan pada telinga tengah belum definitif ditentukan. Hanya sebagai itu adalah dikenal bahwa penduduk bakteri mungkin tiba-tiba mulai menunjukkan patogenisitas, adalah mungkin bahwa penduduk jamur mungkin juga tiba-tiba mulai untuk menunjukkan patogenisitas atau menyebabkan reaktivitas imun.Karakteristik otitis media eosinophilic termasuk kental telinga tengah efusi yang dominan mengandung eosinofil merosot. Kuncinya Faktor dalam menyampaikan viskositas mungkin merosot eosinofil, yang adalah tidak biasanya diamati di Ome. Itu memiliki telah dilaporkan bahwa itu viscoelasticity dari itu bernanah sekresi di kistik fibros adalah terutama karena untuk itu tinggi konsentrasi dari DNA dan aktin terlepas dari itu besar nomor dari nekrotik neutrofil akumulasi di itu saluran udara. Oleh karena itu, itu adalah mungkin bahwa telinga efusi kental disebabkan oleh dirilis DNA dari eosinofil merosot. Namun, itu sengau lender tidak tidak menunjukkan tinggi kelekatan di pasien dengan sengau rumah debu alergi, di dengki dari itu besar nomor dari terganggu eosinofil bahwa adalah diamati. 12 Mungkin sulit untuk definitif menyimpulkan bahwa telinga efusi kental mungkin disebabkan hanya dengan DNA dari eosinofil merosot. lebih lanjut penelitian diperlukan untuk memperjelas peran merosot eosinofil dalam karakteristik viskoelastik lender dalam kasus otitis media eosinofilik.Charcot-Leyden kristal heksagonal kolumnar kristal dengan tepi runcing yang sering diamati di situs dari eosinophilic peradangan. di sana memiliki laporan tentang deteksi kristal ini di kasus sinusitis jamur alergi, 13,14 Penyakit Kimura, 15 dan asma. 16 Charcot-Leyden Kristal dihasilkan dari protein dengan berat molekul dari 17,4 kd yang memiliki aktivitas lysophospholipase. Charcot-Leyden kristal protein yang hadir dalam jumlah besar jumlah dalam euchromatin nuklir dan sitoplasma. Charcot-Leyden kristal diyakini mengkristal secara bertahap dalam sitoplasma eosinofil. dalam hal ini Penelitian, CLC dibebaskan langsung dari terganggu eosinofil dapat diamati dengan mikroskop elektron. Oleh karena itu dapat didukung bahwa CLC diamati pada efusi telinga tengah yang dirilis langsung dari eosinofil terganggu. The patologis 18 17.peran CLC masih belum diketahui, meskipun telah melaporkan bahwa protein CLC mungkin terlibat dalam paru peradangan 19 atau menunjukkan efek protektif terhadap parasit 17 pada tikus. Investigasi apakah Protein CLC juga mungkin memiliki efek perlindungan terhadap infeksi jamur akan menjadi suatu hal yang menarik, karena ini Kristal adalah juga ditemukan di kasus.infeksi jamur. Kami menemukan CLC secara signifikan kelimpahan yang lebih besar dalam kasus-kasus di mana kontrol yang baik dari gejala telah diperoleh dengan menggunakan ventilasi tabung dari kasus kurang terkontrol. Oleh karena itu, jika CLC adalah berlimpah, itu penempatan dari sebuah transtympanic ventilasi tabung akan menjadi itu terapi dari pertama pilihan untuk otitis media eosinophilic