In Vitro Anti-Bacterial and Anti-fungal Activity of select Essentials Oils

Master recherche: Valorisation des ressources naturelles Végétales

Année universitaires: 2016/2017

Présenté par: M. Saad Fettach M. Mohamed Nser

Sangeeta Soni, U.N.SONISchool of life, Jawaharlal Nehru University(JNU), New Delhi-110067 India, Kharvel Subharti college

of pharmacy, S.V.Subharti University, Meerut(U.P) 250005 India.

• Dans le souci constant de se préserver des maladies ou de trouver des méthodes afin de se soulager des douleurs, les humains ont chercher à extraire de leur biotope des substances que ce soit pour les transformer ou les utiliser en l’état.

• Généralement, les dernières années, les études ont menées sur l’exploitation des propriétés naturelles des huiles essentielles.

• Les huiles essentielles sont des puissant substances, extrait à partir des feuilles, fleurs, racine, bourgeon, rhizome, écorce, graines et fruit, etc … .

• Ils existe autour 3000 différents huiles essentielles partout dans le monde, 300 huiles essentielles couramment utilisés.

Introduction:

• Les études en prouvés que certains huiles essentielles ont montré une activité antimicrobienne contre un large éventail de bactéries, comprenant même les espèces résistantes aux antibiotiques, et les espèces fongiques .

• Premier secours utilisé par les soldats grecs pendant les guerre était des trousse contenant des huiles essentielles du myrrhe.

• En 1910, l’huiles essentielle d’origan, considérée comme étant la plus forte dérivée antiseptiques à connu le jour.

• Les huiles essentielles du citron et d’orange ont signalé avoir plus d’activité antiseptique que le phénol.

Introduction:

• Au cours des dernières années, il eu une augmentation de l’intéret envers les ressources végétales, à cause des la préoccupations de la sécurité des composés synthétiques, et ça a encouragé plus les études détaillé des ressources végétales.

• Les huiles essentielles ont étés utilisées aussi en alimentation comme agent aromatisant et sont généralement acceptés par la FDA comme additifs dans certains types d’aliments.

• Alors l’objectif de ce travail, est de déterminer in-vitro, l’activité antibactérienne et antifongique de certains huiles essentielles (celle des oranges, palmarosa et palmarosa CN-5), contre quelques bactéries et champignons et établir la cinétique du temps de survie des ces microorganismes, lorsqu'ils sont incubés avec des concentrations accrus des huiles essentielles.

Introduction:

Matériel: Les huiles essentielles utilisées

Méthode et Matériels

Palmarosa Cymbopogon martinii

Géranium des Indes

OrangeCitrus sinensis (L)

Orange douce

Palmarosa moha Palmarosa CN-5

Partie aérienne•Monoterpènols (géraniol, linalol)•Esters térpéniques(acétate de géranyle)•Monotérpènes et des sésquitepènes (Béta-caryophylles)

Poacées Rutacée

Zeste•Monoterpenes (60 à80% Limonène)•Monoterpenols•Cétone•Aldéhyde térpénique (1 à 3%) Coumarines et Furocoumarines

Matériel:

Bactéries: Champignons:

Méthode et Matériels

Staphylococcus aureus ( MTCC 1144)

Proteus vulgaris (MTCC 1771)

Aspergillus niger (MTCC 9652)

Penicillium chrysogenum (MTCC 6477)

Fusarium acuminatum (MTCC 1983)

Phanerochaete chrysosporium (reçus du ‘Department of pathology, Mayo hospital, Nagpur’)

Méthode

Méthode et Matériels

•Le stock de culture bactérienne est maintenue sur l’inclinaison du milieu de culture (agar nutritif).

•Incubation de la culture à 35°-37°C pendant 24 heures.

•Pour les champignons, ils sont maintenus dans un milieu PDA ( à base de pommes de terre, de dextrose, et d’agar. (acheté du ‘Himedia laboratories Pvt. Ltd, Mumbai, India).

•Incubation en 20°C, pendant 7jours

•Les microorganismes ont étés cultivés pendant la nuit dans les milieux de gélose nutritive et les milieux PDA.

Méthode

Méthode et Matériels

• Les activités antibactérienne et antifongique vont être déterminés par la méthode de diffusion sur disques

•La croissance des bactéries et des champignons est surveillé après l’exposition aux huiles essentielles.

•Le jour après, les cellules bactériennes (S.aureus et P.vulgaris), étaient inoculés sur la surface d’un milieu de gélose nutritive

Méthode

Méthode et Matériels

•Après, 10ml du milieu est versé dans les boites de pétri suivant la méthode du milieu coulé.

•En imprègne des papiers chromatographiques de Whattman ( 5mm), « stérile » dans 20, 30, 40, 50, 60 µl de huiles essentielles (individuellement), et en les ensemence dans le centre des boites de pétri

Méthode

Méthode et Matériels

Les halos d’inhibition ( zones d’inhibition) sont mesurés après 24h et 48h de l’incubation (à 37°C pour les cellules bactériennes et 30°C pour champignons).

Le Tween 80 (Surfactant & émulsifiant) considéré comme un contrôle négatif.

Les Neomycin(30µg/disc) et Cloxacillin(10µg/ disc) prisent comme des références standard(Himedia Laboratories.Pvt , Ltd, Mumbai, India)., et considérés comme étant des contrôles positifs pour les bactéries et les champignons.

Chaque essai est faite deuxfois.Les diamètre des zones claires (zones d’inhibition) autour des disques ont étés mesurés et exprimés en millimètre.

Disque des huiles essentielles

L'activité antimicrobienne in vitro de l'huile d'orange,

Palmarosa moha et Palmarosa CN-5 contre les

microorganismes utilisés et son potentiel d'activité a été

évaluée quantitativement par la présence ou l'absence

de zone d'inhibition.

Le résultat de l'essai de diffusion sur disques

antimicrobiens est résumé dans le tableau suivant :

Résultats et Discutions

Activité antibactérienne

L’activité antibacérienne de l’huile d’organe a été trouvé inférieure à celle de la Neomycin et Cloxacillin .

Résultats et Discutions

L’activité antibactérienne d’huile de palmarosa moha s’est avérée meilleur que celle de la néomycine(témoin positif) et de l’huile

d’organe

Résultats et Discutions

L’activité antibactérienne d’huile de Palmarosa CN-5 s’est avérée meilleur que celle de la néomycine(témoin positif) et de l’huile d’organe

Résultats et Discutions

Activité antifongique

L’huile de palmarosa moha représente une forte activité antifongique contre toutes les espèces fongiques testées ,a également montré une activité antifongique la plus élevée parmi les huiles essentielles séléctionnées.

Résultats et Discutions

L’activité antébactérienne et antifongique de l’huile de Palmarosa CN-5 s’est révélée significative que celle de l’huile

d’orange mais elle était moins importante que l’huile palmarosa moha .

Résultats et Discutions

Conclusions

• Les huiles essentielles sélectionnées ( Celle d’Orange, Palmarosa moha et Palmarosa CN-5) ont développés une très forte activité antibactérienne vis-vis des organismes testés (Staphylococcus aureus et Proteus vulgaris), qui sont considérés parmi les causes de certains pathologies humaines.

• Les huiles essentielles du Palmarosa CN-5 ont présentées le maximum d’activité contre les S.aureus & P.vulgaris

• Par contre l’huile essentielle d’orange a présenté l’activité la plus faible contre ces espèces.

• H.E de Palmarosa moha ont eu le plus d’effet sur les P.vulgaris

• Toutes les espèces fongiques testées ont étés considérées comme étant sensible à toutes les huiles essentielles sélectionnées, avec l’H.E de P. moha, présente le plus d’effet antifongique.

Merci Pour votre attention