extraction, identification et détermination des activités biologiques

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  • Rpublique Algrienne Dmocratique et Populaire

    Ministre de lEnseignement Suprieur et de la Recherche Scientifique

    Facult des sciences

    Dpartement de Biochimie

    Laboratoire de Biochimie et Microbiologie Applique

    Thse

    Prsente en vue de lobtention du diplme de Doctorat en Sciences

    Option

    Biochimie Applique

    Thme

    Par : BOUDJELAL Amel

    Devant le jury

    KIRANE D. Pr. Univ. Badji- Mokhtar Prsident

    HENCHIRI C. Pr. Univ. Badji- Mokhtar Rapporteur

    SOLTANE M. Pr. Univ. dEl Tarf Examinateur

    LEHOUEL M. Pr. Univ. Jijel Examinateur

    BORDJIBA O. Pr. Univ. Badji- Mokhtar Examinateur

    ZELLAGUI A. Pr. Univ. dOum-El-Bouaghi Examinateur

    Anne Universitaire : 2012 - 2013

    Extraction, identification et dtermination des activits

    biologiques de quelques extraits actifs de plantes spontanes

    (Ajuga iva, Artemisia herba alba et Marrubium vulgare) de la

    rgion de M'Sila, Algrie.

    Badji Mokhtar Annaba university

    Universit Badji Mokhtar Annaba

    -

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  • Rpublique Algrienne Dmocratique et Populaire

    Ministre de lEnseignement Suprieur et de la Recherche Scientifique

    Facult des sciences

    Dpartement de Biochimie

    Laboratoire de Biochimie et Microbiologie Applique

    Thse

    Prsente en vue de lobtention du diplme de Doctorat en Sciences

    Option

    Biochimie Applique

    Thme

    Par : BOUDJELAL Amel

    Devant le jury

    KIRANE D. Pr. Univ. Badji- Mokhtar Prsident

    HENCHIRI C. Pr. Univ. Badji- Mokhtar Rapporteur

    SOLTANE M. Pr. Univ. dEl Tarf Examinateur

    LEHOUEL M. Pr. Univ. Jijel Examinateur

    BORDJIBA O. Pr. Univ. Badji- Mokhtar Examinateur

    ZELLAGUI A. Pr. Univ. dOum-El-Bouaghi Examinateur

    Anne Universitaire : 2012 - 2013

    Extraction, identification et dtermination des activits

    biologiques de quelques extraits actifs de plantes spontanes

    (Ajuga iva, Artemisia herba alba et Marrubium vulgare) de la

    rgion de M'Sila, Algrie.

    Badji Mokhtar Annaba university

    Universit Badji Mokhtar Annaba

    -

  • DEDICACE

    Je ddie ce travail mes parents, quils trouvent ici ma plus profonde gratitude

    et tout mon amour pour leur soutien tout au long de mes tudes.

    A frres Mohamed Amine et Hichem.

    A mon frre Chemsseddine, sa femme Chahnez et leurs filles Yasmine, Racha et

    Imene.

    A ma sur Lamia, son mari Abdelaziz et leurs enfants Hiba, Minna et Azeddine

    A mon mari Kameleddine et mon fils Samy Isleme

  • R E M E R C I E M E N T S

    Je remercie chaleureusement madame Cherifa HENCHIRI, ma directrice de

    thse, et lui exprime toute ma reconnaissance de mavoir accueillie dans son quipe

    avec gentillesse et bienveillance, ainsi que pour ses qualits pdagogiques et

    lenthousiasme communicatif dont elle sait faire preuve. Cest la fois un privilge

    et une exprience exceptionnelle davoir pu bnficier de ses conseils.

    Jexprime mes remerciements les plus sincres au Docteur Giuseppe

    RUBERTO et au Docteur Laura SIRACUSA de lInstitut de Chimie

    Biomolculaire de Catania (ICB Catania /Italie) pour leur soutient et pour le temps

    quils ont pu consacrer dans lidentification phytochimique des diffrents extraits

    qui ont fait lobjet dune partie de ce travail de thse.

    Je remercie en particulier le Docteur Roberto ZENA de la Facult de

    Pharmacie (Universit de Messine/Italie) pour leur aide concernant la ralisation de

    lactivit antioxydante des extraits mthanoliques.

    Un grand merci au Docteur Zoubir HARRAT et au madame Nawel

    EDDAIKRA de lInstitut Pasteur Algrie (Laboratoire Ecoepidmiologie

    Parasitaire/ Dely Ibrahim Alger) pour linestimable aide dans la ralisation des tests

    de lactivit leishmanicide.

    Mes sincres remerciements vont au Professeur Djamila KIRANE davoir

    accept de prsider le jury de cette thse.

    Jaimerais galement remercier le r Mesbah LEHOUEL, Universit

    Mohamed Seddiki Ben Yahia/Jijel, le Professeur Ouahiba BORDJIBA, Universit

    Badji Mokhtar/ Annaba et le Professeur Ammar ZELLAGUI, Universit Oum El

    Bouaghi, pour avoir accept de faire partie de ce jury.

    Merci aussi mes collgues : Madani SARI, Noui HENDEL, Abdelkader

    CHERIEF, Djamel SARRI, Nourreddine MERNIZ, Abderrahim BENKHALED,

    Abdelkrim BOUDRISSA, Kamel SEGHIRI et Smail SERTI pour leurs aide et

    conseils tout le long de ce travail de thse.

    Je tiens remercier mes ex-tudiants devenus aujourdhui collgues : Faiza

    BAALI et Omar KERMICHE.

  • RESUME

    Le but de cette tude est de contribuer la valorisation et la protection de la flore

    mdicinale de la rgion de MSila. Les enqutes ethnobotaniques auprs des herboristes

    de la rgion ont permis dinventorier 58 plantes spontanes dont la majorit est utilis

    comme antidiabtique. Parmi ces espces, Artemisia herba alba, Ajuga iva et Marrubium

    vulgare, ont t retenues pour cette tude.

    Lanalyse qualitative et quantitative par LC-UV-vis-DAD-ESI-MS, a permis de

    constater la richesse des extraits aqueux et mthanoliques en principes actifs, en particulier

    polyphnols et flavonodes dans les extraits de lArtemisia herba alba et du Marrubium

    vulgare, alors que lAjuga iva pauvre en ces composs, est riche en iridodes.

    Ltude biologique a montr que les extraits des trois espces possdent des effets

    antidiabtique, antioxydants, leishmanicide et antimicrobien avec des diffrences au

    niveau de la puissance de ces effets. LArtemisia herba alba, la dose de 300 mg/Kg p.c.

    a entrain le pourcentage de rduction le plus important de la glycmie (73.88 %) ; le

    Marrubium vulgare cest rvl avoir le meilleur effet antioxydant avec une IC50/DPPH

    de 0.49 mg/ml.

    Pour les activits leishmanicide, lIC50 la plus leve a t obtenue avec le

    Marrubium vulgare (25 g/ml) suivi par Artemisia herba alba et Ajuga iva (10 g/ml) ;

    alors que pour les activits antimicrobiennes, lArtemisia herba alba sest avr tre un

    bon agent antimicrobien vis--vis de Staphylococcus aureus et Candida albicans avec un

    diamtre dinhibition de 18 et 15 mm respectivement compar aux deux autres espces.

    Mots cls : Phytothrapie, LC-UV-vis-DAD-ESI-MS, antidiabtique, antioxydant,

    leishmanicide, antimicrobien.

  • ." "

    . 85

    Marrubium vulgare Artemisia herba alba Ajuga iva

    .

    LC-UV-vis-DAD-ESI-MS

    Artemisia herba alba

    Marrubium vulgare Ajuga iva .

    Artemisia herba .

    alba ; (30,55 ) / 033

    Marrubium vulgare IC50/DPPH / 0..3 .

    Marrubium vulgare (25 IC50

    ( / Ajuga iva (10 Artemisia herba alba ( /

    Staphylococcus Artemisia herba alba

    aureus Candida albicans 88 85 : .

    LC-UV-vis-DAD-ESI-MS :

    .

  • ABSTRACT

    The aim of this study is to contribute to the valorization and protection of medicinal

    flora of M'Sila region. Ethnobotanical surveys with herbalists in the region have allowed

    an inventory of 58 wild plants, most of which are used as antidiabetic. Among these

    species, Artemisia herba alba, Ajuga iva and Marrubium vulgare, were selected for this

    study.

    The qualitative and quantitative analysis by LC-UV-vis-DAD-ESI-MS showed the

    richness of methanolic and aqueous extracts of active ingredients, particularly polyphenols

    and flavonoids in extracts of Artemisia herba alba and Marrubium vulgare, then Ajuga

    iva that is poor in these compounds but rich in iridoids.

    The biological study showed that extracts of the three species have antidiabetic

    effects, antioxidant, antimicrobial and leishmanicidal with differences in the strength of

    these effects. Artemisia herba alba, with a dose of 300 mg / kg bw resulted in the highest

    percentage of reduction of glycemia (73,88%); the Marrubium vulgare revealed to have

    the best antioxidant effect with an IC50/DPPH of 0,49 mg/ml.

    For leishmanicidal activity, the highest IC50 was obtained with Marrubium

    vulgare (25 mg/ml) followed by Artemisia herba alba and Ajuga iva (10 g/ml); whereas,

    for the antimicrobial activities, Artemisia herba alba can be a good antimicrobial agent

    against Staphylococcus aureus and Candida albicans with a diameter of inhibition of 18

    and 15 mm respectively, compared to the other two species.

    Keywords: Phytotherapy, LC-UV-vis-DAD-ESI-MS, antidiabetic, antioxidant,

    leishmanicidal, antimicrobial.

  • SOMMAIRE

    Liste des tableaux

    Liste des figures

    INTRODUCTION ..

    1

    1. IDENTIFICATION BOTANIQUE DES ESPECES VEGETALES ETUDIEES 3

    1.1. Ajuga iva L. 3

    1.1.1. Description botanique.. 3

    1.1.2. Composition chimique ... 4

    1.1.3. Util

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