Q.F. Ernesto H. Q.F. Ernesto H. AvalosAvalos CorderoCorderoQuQuíímico Farmacmico Farmacééutico Forenseutico Forense

MaestrMaestríía Toxicologa Toxicologííaa

INSTITUTO DE MEDICINA LEGALINSTITUTO DE MEDICINA LEGALMINISTERIO PUBLICOMINISTERIO PUBLICO

FISCALFISCALÍÍA DE LA NACIA DE LA NACIÓÓNN

TOXICOLOGTOXICOLOGÍÍA ANALA ANALÍÍTICA Y SU TICA Y SU IMPORTANCIAIMPORTANCIA

EN LAS INTOXICACIONESEN LAS INTOXICACIONES

Subdisciplinas de la toxicología

ToxicologToxicologíía ambientala ambientalToxicologToxicologíía ocupacional (industrial)a ocupacional (industrial)ToxicologToxicologíía reglamentariaa reglamentariaToxicologToxicologíía de los alimentosa de los alimentosToxicologToxicologíía cla clíínica,nica,ToxicologToxicologíía descriptivaa descriptivaToxicologToxicologíía forensea forenseToxicologToxicologíía anala analííticatica

Toxicología analítica

Identifica la sustancia tIdentifica la sustancia tóóxica a travxica a travéés del s del ananáálisis de los llisis de los lííquidos corporales, el contenido quidos corporales, el contenido estomacal, los excrementos, la piel o envases estomacal, los excrementos, la piel o envases dudosos.dudosos.

Toxicología forense

Ayuda al establecimiento de relaciones causaAyuda al establecimiento de relaciones causa--efecto entre la exposiciefecto entre la exposicióón a un medicamento o n a un medicamento o a una sustancia qua una sustancia quíímica y los efectos tmica y los efectos tóóxicos o xicos o mortales que pueda causar esa exposicimortales que pueda causar esa exposicióón.n.

• GASEOSOS Y VOLATILES (CO, Etanol , Metanol).

• TOXICOS ORGANICOS FIJOS:NATURALEZA ACIDA (Marihuana, Barbituricos, Plaguicidas: -OF-, Carbamatos, Organoclorados, Cumarinas

NATURALEZA ALCALINA (Cocaína, Benzos, estricnina)

• METALES(PLOMO,ARSENICO,MERCURIO,CADMIO).

• CAUSTICOS Y CORROSIVOS

TIPOS DE TOXICOS

• SANGRE

• ORINA

• CONTENIDO GASTRICO

• VISCERAS (HIGADO, CEREBRO, PARED GASTRICA, ETC)

• OTROS: HUMOR VITREO, HISOPADO NASAL, HISOPADO DE MANOS, CABELLOS, RESTOS OSEOS, ALIMENTOS

TIPOS DE MUESTRA

GASEOSOS Y VOLATILES( Etanol , Metanol)

ALCOHOLEMIA

ESTRUCTURA ETANOL

Es un líquido incoloro aromático y combustible de olor penetrante característico, procede de la fermentación azucares almidón y celulosa con sabor ardiente, soluble en agua, éter y alcohol.

ETANOLETANOL

CH2OH

ALCOHOLEMIAALCOHOLEMIA

• Muestras de sangre provenientes de:– Suceso de tránsito– Tanatología– Particulares

ALCOHOLEMIAALCOHOLEMIA

• Ley de alcoholes: “Alcoholemia es la prueba legal para determinar la presencia de alcohol en un conductor”

LEY Nº 27753

Ley que modifica los ArtLey que modifica los Artíículos 111culos 111ºº, , 124124ºº y 274y 274ºº del Cdel Cóódigo Penal digo Penal referidos al homicidio culposo, referidos al homicidio culposo, lesiones culposas y conduccilesiones culposas y conduccióón en n en estado de ebriedad o drogadicciestado de ebriedad o drogadiccióón y n y el Art. 135el Art. 135ºº del Cdel Cóódigo Procesal digo Procesal Penal, sobre Mandato de DetenciPenal, sobre Mandato de Detencióónn

• 0,00 a 0,50 g %oSin repercusión legal

• Mayor a 0,50 g %o

ALCOHOLEMIAALCOHOLEMIAIMPLICANCIA LEGALIMPLICANCIA LEGAL

ALCOHOLEMIAALCOHOLEMIA

• Determinación analítica:– Cromatografía gaseosa

GC-FID– Espectrofotometría al

UV-VIS

– Enzimático

ESTADISTICA DOSAJE ETILICO

6165 5699

7445

9063 9119

0100020003000400050006000700080009000

10000

2000 2001 2002 2003 2004

FUENTE MINISTERIO PUBLICO – FISCALIA DE LA NACION INSTITUTO DE MEDICINA LEGAL

Es un líquido incoloro de olor penetrante característico, con sabor ardiente, soluble en agua, éter y alcohol. Es inflamable y tóxico tanto por inhalación, ingestión o contacto continuo

METANOLMETANOL

CH3 OH

SinSinóónimosnimos

Alcohol metílicoCarbinolAlcohol de maderaEspíritu de maderaHidroximetanoMetilolMetilhidróxidoMonohidroximetano

Disolvente

UsosUsos

Combustible

Anticongelante para automóviles

En síntesis química

Removedor de pinturas

Solvente de lacas y barnices

METANOL

Altamente tóxica.Acidosis metabólicaCegueraMuerteSíntomas aparecen 18-24 horasMal pronóstico acidosis metabólica severa,

convulsiones y muertepH<7

Metabolismo

CH3OH

HCHO

HCOO -

CO2

Alcohol deshidrogenasa

(Hígado)

Formaldehído deshidrogenasa

Vía Tetrahidrofolato dependiente (limitada en humanos)

Metanol

Formaldeído

Formiato

ESTADISTICA DE METANOL

600

337

732

1380 1417

0

200

400

600

800

1000

1200

1400

1600

2000 2001 2002 2003 2004

FUENTE MINISTERIO PUBLICO – FISCALIA DE LA NACION INSTITUTO DE MEDICINA LEGAL

MUESTRA

SangreSangre

HUMOR VITREO•• FACILIDAD EN LA OBTENCION DE FACILIDAD EN LA OBTENCION DE

LA MUESTRALA MUESTRA

•• PROTEGIDO DPROTEGIDO DE LOE LOS FENS FENÓÓMENOS MENOS DE PUTREFACCDE PUTREFACCION Y DE TRAUMASION Y DE TRAUMAS

•• FLUIDO CON BUENA ESTABILIDAD FLUIDO CON BUENA ESTABILIDAD QUQUÍÍMICA Y FMICA Y FÁÁCIL DE PROCESAR CIL DE PROCESAR ANALITICAMENTEANALITICAMENTE

•• REDUCIDA PROBABILIDAD DE REDUCIDA PROBABILIDAD DE CONTAMINACION PORCONTAMINACION POR SSÍÍNTESIS NTESIS POST MORTEMPOST MORTEM

•• LA MUESTRA PUEDE SERLA MUESTRA PUEDE SEROBTENIDA SIN NECESIDAD DE OBTENIDA SIN NECESIDAD DE NECROPSIANECROPSIA

ORINA•• FACILIDAD EN LA FACILIDAD EN LA

OBTENCION DE LA OBTENCION DE LA MUESTRAMUESTRA

•• GRAND CANTIDAD DE LA GRAND CANTIDAD DE LA MUESTRAMUESTRA

•• FFÁÁCIL DE PROCESAR CIL DE PROCESAR ANALITICAMENTEANALITICAMENTE

•• REDUCIDA REDUCIDA PROBABILIDAD DE PROBABILIDAD DE CONTAMINACION POR CONTAMINACION POR SSÍÍNTESINTESISS POST MORTEMPOST MORTEM

•• SIRVE SIRVE SIMULTANEAMENTE SIMULTANEAMENTE PARA PARA EL ESTUDIO DE EL ESTUDIO DE OTROS TOTROS TÓÓXICOSXICOS

Metodología

TomaToma de de muestramuestra: : frascofrasco limpiolimpio y y secoseco con con FNaFNa0.1%.0.1%.

Metodología

ProcesarProcesar con: con: --ClNaClNaanhidroanhidro..--SaponinasSaponinas..--Standard Standard internointerno..

DOSAJE ETILICO

• DETERMINACION DE ALCOHOL ETILICO

• DETERMINACION DE METANOL

GC-FIDGC-FID

Interpretación de resultados

Valores positivos:

> 0.50g 0/00 de alcohol etílico

> 0.08g 0/00 de alcohol metílico

TOXICOS ORGANICOS FIJOS

• DETERMINACION DE DROGAS

• SCREENING TOXCIOLOGICO

QUIMICO TOXICOLOGICOQUIMICO TOXICOLOGICO

TOXICOS ORGANICOS FIJOS:

NATURALEZA ACIDA (Marihuana, Barbituricos, Plaguicidas: -OF-, Carbamatos, Organoclorados, Cumarinas

NATURALEZA ALCALINA (Cocaína, Benzos, estricnina)

Muestras provenientes de:Muestras provenientes de:

1.-TANATOLOGIA (fallecidos)– vísceras

– contenido gástrico

– sangre

– orina

– muestras del lugar

2.-URGENCIAS (vivos)• contenido gástrico• sangre• orina

• DETERMINACION DE MISOPROSTOL

CROMATOGRAFIA EN CAPA FINA DE ALTA PERFORMANCIACROMATOGRAFIA EN CAPA FINA DE ALTA PERFORMANCIA

DROGASDROGAS

• Muestras de pelo• Muestras de orina

– cocaína

– marihuana

– amfetamina

– opiáceos

– barbitúricos

– benzodiazepinas

• DETERMINACION DE COCAINA Y METOBOLITOS

• DETERMINACION DE DEPRESORES DEL S.N.C.

CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA PERFORMANCIA

CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA PERFORMANCIA

CROMATOGRAFIA GASEOSA CON ESPECTROMETRO DE MASAS

GC-MS

CROMATOGRAFIA GASEOSA CON ESPECTROMETRO DE MASAS

GC-MS

• MICROSCOPIASPOLIGHT

• FIBRAS

• PELOS

MICROSCOPIO INFRAROJOMICROSCOPIO INFRAROJO

ANALISIS SOLICITADOS

14086 13098

19267

2511727175

0

5000

10000

15000

20000

25000

30000

2000 2001 2002 2003 2004FUENTE MINISTERIO PUBLICO – FISCALIA DE LA NACION INSTITUTO DE MEDICINA LEGAL

EXAMEN QUIMICO TOXICOLÓGICO

7235 7778

10831

1437815982

0

2000

4000

6000

8000

10000

12000

14000

16000

2000 2001 2002 2003 2004

FUENTE MINISTERIO PUBLICO – FISCALIA DE LA NACION INSTITUTO DE MEDICINA LEGAL

METALESMETALES

•PLOMO•MERCURIO•ARSENICO•CADMIO

•PLOMO•MERCURIO•ARSENICO•CADMIO

ENE 1999ENE 1999

IntoxicaciIntoxicacióón por Plomon por Plomo

Hg°(o)

Hg++ Bacterias

AnaerobiasHgHg dimetilodimetilo Atmosfera

Lluvia

Metil Hg

FitoplanctonZooplancton

Hg°

MercurioMercurioFuentes de IntoxicaciFuentes de Intoxicacióónn

MERCURIO

MERCURIO

ArsenicoArsenicoFuentes de IntoxicaciFuentes de Intoxicacióónn

ArsenicoArsenicoFuentes de IntoxicaciFuentes de Intoxicacióónn

CadmioCadmioItaiItai –– ItaiItai 19471947

•• RRáápido pido –– Unos pocos segundos Unos pocos segundos

por determinacipor determinacióón n –– Bajo costo por anBajo costo por anáálisislisis–– Mayor cantidad de Mayor cantidad de

muestra muestra –– Bajo consumo de gasBajo consumo de gas

•• DeterminaciDeterminacióón elemento n elemento por elementopor elemento

•• LLíímite de Deteccimite de Deteccióón partes n partes por millpor millóón (n (ppmppm))

•• FFáácil de usarcil de usar

AbsorciAbsorcióón Atn Atóómica por mica por FlamaFlama

Bajo lBajo líímite de deteccimite de deteccióón para la mayorn para la mayoríía a ..de de los elementos partes por billlos elementos partes por billóón (n (ppbppb). ).

Mas lento que anMas lento que anáálisis por Flama minutos lisis por Flama minutos ..por determinacipor determinacióón.n.

DeterminaciDeterminacióón elemento por elemento.n elemento por elemento.PequePequeñña cantidad de muestra (a cantidad de muestra (µµLL))Costo por anCosto por anáálisis mayor que Flama. lisis mayor que Flama. Se necesita de experiencia en la tSe necesita de experiencia en la téécnica.cnica.

AbsorciAbsorcióón Atn Atóómica por mica por Horno de GrafitoHorno de Grafito

Bajo LBajo Líímite de Deteccimite de Deteccióón n UltratrazasUltratrazas ((ppbppb --pptppt))Muy pocos elementos por este mMuy pocos elementos por este méétodotodo(Ars(Arséénico,Mercurio,Antimonio,Selenio,Estanico,Mercurio,Antimonio,Selenio,Estañño)o)Mayor volumen de muestra.Mayor volumen de muestra.Costo mayor que AbsorciCosto mayor que Absorcióón Atn Atóómica por Flama.mica por Flama.

AbsorciAbsorcióón Atn Atóómica por mica por Generador de HidrurosGenerador de Hidruros

AnAnáálisis muy rlisis muy ráápidopidoLLíímites de deteccimites de deteccióón superiorn superior

(Partes por trill(Partes por trillóón n -- Partes por Partes por cuatrillcuatrillóón)n)

Costo por anCosto por anáálisis es similar al lisis es similar al Horno de GrafitoHorno de GrafitoSe necesita un conocimiento avanzado Se necesita un conocimiento avanzado de la tde la téécnicacnica

Nuevas TécnicasICP - MS

ICP torch

Sample introduction

Ion lenses Quadrupole

Vacuum pumps

Detector

ICP - MS

Tinta de lapicero en papelLaser Parameters:Laser Parameters:

Wavelength: 213 nmPower: 0.08mJSpot Size: 150µmScan Speed: 75µm/sRepetition Rate: 4 Hz

Plasma Parameters:Plasma Parameters:Forward Power: 1350 WCarrier gas: 0.65L/minMake-up gas: 0.66L/min

Ablated Ink

Non-ablated Ink

Nuevas TécnicasICP - MS

0.00001 0.0001 0.001 0.01 0.1 1 10 100 1000

Límites de Detección, µg/L

AA Llama

ICP-Radial

ICP-Axial

GFAA

ICP-MS

DRC ICP-MS

CUADRO COMPARATIVOCUADRO COMPARATIVO

METALES

7 227

194

527

0

100

200

300

400

500

600

2000 2001 2002 2003 2004FUENTE MINISTERIO PUBLICO – FISCALIA DE LA NACION INSTITUTO DE MEDICINA LEGAL

Procedimientos de Análisis en la investigación de Restos de Disparos por Arma de fuego

TOMA DE MUESTRAToma de Muestra

Toma de Muestra

Toma de Muestra

Toma de Muestra

Toma de Muestra

Restos de Disparo por Arma de Fuego en Restos Óseos

Restos de Disparo por Arma de Fuego en Restos Óseos