การเปรยบเทยบผลของน ามะละกอสกทมตอการปกปองระบบประสาท

ของแบบจาลองการเกดโรคสมองเสอมระยะแรกในสตวทดลอง

ฉตราภรณ สวสดยภานนท

วทยานพนธน เปนสวนหนงของการศกษาตามหลกสตรวทยาศาสตรมหาบณฑต สาขาวชาการวจยและสถตทางวทยาการปญญา

วทยาลยวทยาการวจยและวทยาการปญญา มหาวทยาลยบรพา สงหาคม 2558

ลขสทธเปนของมหาวทยาลยบรพา

ประกาศคณปการ ผวจยขอกราบขอบพระคณเปนอยางสงในความกรณาของ ดร.ปรชญา แกวแกน อาจารยทปรกษาหลก ทท าใหวทยานพนธฉบบนส าเรจลลวงได ดวยความกรณาทไดเสยสละเวลาอนมคา ทงใหความร ความเมตตา ชวยสอน ชวยฝก อนเคราะหอปกรณ ใหค าแนะน าตลอดระยะเวลาในการท าวทยานพนธดวยความเอาใจใสจนกระทงส าเรจเปนวทยานพนธฉบบน รวมทงตรวจแกไขขอบกพรองตาง ๆ สนบสนนใหก าลงใจ และชวยเหลอในทก ๆ สงเปนอยางดตลอดมา ผวจยทราบซงเปนอยางยง จงขอกราบขอบพระคณเปนอยางสงไว ณ โอกาสน ขอกราบขอบพระคณคณะกรรมการสอบเคาโครง และสอบปากเปลาวทยานพนธทกทาน ทไดใหค าแนะน า และชแนะแนวทางแกไขใหวทยานพนธสมบรณยงขน รวมทง รศ.ดร.เสร ชดแชม ดร.ภทราวด มากม ดร.กนก พานทอง ดร.ปรญญา เรองทพย และ ดร.พลพงศ สขสวาง ทใหค าชแนะในการวเคราะหขอมลทเปนประโยชนอยางยงในการท าวทยานพนธฉบบนใหไดตรงตามวตถประสงค การวจย ขอขอบพระคณ คณอนช แซเลา และ คณวฒนาร อมมวรรธน ทใหค าปรกษา แนะน า ตลอดการทดลอง จนท าใหการท าวทยานพนธฉบบนส าเรจลลวง และขอขอบคณ คณปาณสรา ชยรตน และ Mr.Seesamai Douangmany ทเปนผชวยนกวจยจนกระทงงานวจยนส าเรจได และขาดไมไดเลย คณปราจต สภาผล ทใหความกรณาใหวตถดบทส าคญ คอ มะละกอพนธศรสภา มาใชในการวจยครงน คณสชาดา สกลกจรงโรจน และ คณพนธกานต ออนนาค ทใหความอนเคราะหสารสโคโพลามนทใชในการวจย จงขอขอบคณอยางสดซงมา ณ โอกาสน เหนอสงอนใดขอขอบคณ ครอบครวของผวจยทใหความสนบสนนในทก ๆ ดานอยางดทสดเสมอมา และ พ นอง เพอน ๆ ชาว RMCS ทกทานทไดชวยเหลอ และเปนก าลงใจอยางดเสมอมา คณคา และคณประโยชนอนพงจะมจากวทยานพนธฉบบน ผวจยขอมอบ และอทศแดผมพระคณทกทาน ผวจยหวงเปนอยางยงวา งานวจยนอาจเปนประโยชนตอการใชเปนทางเลอกในการดแล และปองกนโรคสมองเสอมระยะแรกใหแกผทสนใจบางไมมากกนอย ฉตราภรณ สวสดยภานนท

ง

55910382: สาขาวชา: การวจยและสถตทางวทยาการปญญา วท.ม. (การวจยและสถตทางวทยาการปญญา) ค าส าคญ: น ามะละกอสก/ การปกปองระบบประสาท/ แบบจ าลองการเกดโรคสมองเสอมระยะแรก/ สตวทดลอง ฉตราภรณ สวสดยภานนท: การเปรยบเทยบผลของน ามะละกอสกทมตอการปกปองระบบประสาทของแบบจ าลองการเกดโรคสมองเสอมระยะแรกในสตวทดลอง (NEUROPROTECTIVE EFFECT OF Carica papaya Linn. JUICE IN ANIMAL MODEL OF MILD COGNITIVE IMPAIRMENT) อาจารยผควบคมวทยานพนธ: ปรชญา แกวแกน, ปร.ด. 124 หนา. ป พ.ศ. 2558. การวจยน มวตถประสงคเพอ 1) เพอทดสอบผลของการไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน 2) เพอเปรยบเทยบผลของการไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคมทถกเหนยวน าดวยสโคโพลามน 3) เพอเปรยบเทยบผลของการไดรบ น ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กอนกบหลงการเหนยวน าดวยสโคโพลามน โดยการทด สอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน ไดแก 1) การเรยนรและความจ า (Learning and Memory) 2) ความวตกกงวล (Anxiety) 3) การควบคมการเคลอนไหว (Motor Control) และ 4) ระบบประสาทรบความรสก (Sensory System) กลมตวอยางเปนหนเมาสเพศผท งหมด 28 ตว แบงเปน 4 กลม ๆ ละ 7 ตว โดยกลมท 1 ไดรบน ากลน กลมท 2, 3 และ 4 ไดรบน ามะละกอสกขนาด 2.5, 5.0 และ 7.5 กรมตอกโลกรมน าหนกตว ตามล าดบ แตละกลมไดรบน ากลน และน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะ เวลา 21 วน หลงจากน นท าการเหนยวน าความจ าเสอมระยะแรกดวยสโคโพลามนขนาด 2.0 มลลกรมตอกโลกรมน าหนกตวทชองทอง จากน นทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน ผลการวจย ปรากฏวา หลงไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กอนกบหลง การเหนยวน าความจ าเสอมดวยสโคโพลามน ผลการเรยนรและความจ า ปรากฏวา การเรยนรและความจ าดานการเรยกคนความจ าเกา ดวยอปกรณ MWM และการจดจ าวตถสงของ ดวยอปกรณ NOR ปรากฏวา หนเมาสกลมทไดรบน ามะละกอสกมความจ าทดกวาหนเมาสกลมทไดรบน ากลนอยางมนย ส าคญทางสถตทระดบ p<.05, p<.01 ผลตอความวตกกงวล ปรากฏวา หนเมาสกลมทไดรบน ามะละกอสกมความวตกกงวลนอยกวาหนเมาสกลมทไดรบน ากลน อยางมนยส าคญทางสถตทระดบ p<.01 ผลตอการควบคมการเคลอนไหว โดยสงเกตพฤตกรรม 3 แบบ ปรากฏวา หนเมาสกลมทไดรบน ามะละกอสกมพฤตกรรม Rearing ไมแตกตางกบหนเมาสกลมทไดรบน ากลน และหนเมาสกลมทไดรบน ามะละกอสกมพฤตกรรมตกแตงขน และพฤตกรรมเลยขนมากกวาหนเมาสกลมทไดรบน ากลน อยางมนยส าคญทางสถตทระดบ p<.05 และผลตอระบบประสาทรบความรสก ดวยอปกรณ Tail Immersion Test ปรากฏวา หนเมาสทกกลมมการตอบสนองตอความเจบปวดไมแตกตางกน

จ

55910382: MOJOR: RESEARCH AND STATISTICS IN COGNITIVE SCIENCE; M.Sc. (RESEARCH AND STATISTICS IN COGNITIVE SCIENCE) KEYWORDS: Carica Papaya Linn. JUICE/ NEUROPROTECTIVE/ MODEL OF MILD COGNITIVE IMPAIRMENT/ ANIMAL TEST CHATTRAPORN SAWATDIYAPHANON: NEUROPROTECTIVE EFFECT OF Carica papaya Linn. JUICE IN ANIMAL MODEL OF MILD COGNITIVE IMPAIRMENT ADVISORY COMMITTEE: PRATCHAYA KAEWKAEN, Ph.D. 124 P. 2015 The objectives of the research were 1) to investigate the effect of using papaya juice (Carica papaya Linn.) for 21 days on neurobehavioral mechanism, 2) to compare the neurobehavioral mechanism between treatment group (received papaya juice) and control group after inducing Scopolamine in order to prove the nervous system protection effect, and 3) to compare the effect of papaya juice (Carica papaya Linn.) on neurobehavioral mechanism before and after inducing cognitive impairment by Scopolamine. The neurobehavioral assessments were used to evaluate the mechanisms of learning and memory, anxiety, motor control, and sensory system. The sample was 28 male mice separated into 4 groups (7 mice per group). The first group was feed with distilled water. The second, the third, and the fourth groups were feed with 2.5, 5.0, and 7.5 g/kg BW papaya juice respectively. All groups were feed consecutively for 21 days. After 21 days, intraperitoneal injections of 2.0 mg/kg BW Scopolamine were conducted to induce cognitive impairment. In addition, the four neurobehavioral mechanisms were assessed. The results revealed that 1) the treatment group (received papaya juice) significantly performed better than the control group (received distilled water) in learning and memory mechanism as shown in the retention time from Morris Water Maze Test (MWM) and the exploration time from object recognition task (p<.05 and p<.01, respectively) 2) the treatment group significantly felt less anxious than the control group (p<.05) when tested with Elevated Plus Maze (EPM), 3) the treatment group and the control group were not different in rearing motion; anyway, the treatment group significantly spent a lot of time grooming and licking than the control group (p<.05), and 4) There were no different of sensory system mechanism among each group when measured with tail immersion test.

สารบญ

หนา บทคดยอภาษาไทย…………………………………………………………………………………………………. บทคดยอภาษาองกฤษ......................................................................................................... สารบญ.................................................................................................................................

ง จ ฉ

สารบญตาราง…………………………………………………………………………………………………………. สารบญภาพ..........................................................................................................................

ฌ ฐ

บทท 1 บทน า…………………………………………………………………………………………………………….... 1 ความเปนมาและความส าคญของปญหา …………………………………………………….. 1 วตถประสงคของการวจย ……………………………………………………………………….... 2 กรอบแนวคดในการวจย …………………………………………………………………………...

สมมตฐานของการวจย …………………………………………………………………………….. 3 5

ประโยชนทคาดวาจะไดรบจากการวจย ……………………………………………………... 5 ขอบเขตของการวจย ……………………………………………………………………………….. 5 นยามศพทเฉพาะ …………………………………………………………………………………….. 6 2 เอกสารและงานวจยทเกยวของ…………………………………………………………………………... 9 ตอนท 1 มะละกอ (Carica Papaya Linn.)....................................................... 10 ตอนท 2 สารแคโรทนอยด (Carotenoids).......................................................... 13 ตอนท 3 ภาวะเครยดออกซเดชน (Oxidation Stress)........................................ 17 ตอนท 4 ภาวะสมองเสอม (Dementia)..............................................................

ตอนท 5 แบบจ าลองภาวะสมองเสอมระยะแรกในหนทดลองดวยสโคโพลามน (Models Mild Cognitive Impairment in Mice with Scopolamine)..................................................................................... ตอนท 6 การทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในหนเมาส (Neurological Behavioral Test in Mice)………………………………………………………....

20 25 27

3 4

วธด าเนนการวจย........................................................................................................... ตอนท 1 การเตรยมตวอยาง……………………………………………………………………... ตอนท 2 เครองมอในการวจย.............................................................................. ตอนท 3 การด าเนนการวจย................................................................................ ตอนท 4 การเกบรวบรวมขอมล.......................................................................... ตอนท 5 การวเคราะหขอมล............................................................................... ตอนท 6 กระบวนการจดการเกยวกบซากสตว.................................................... ผลการวจย...................................................................................................................... ตอนท 1 ผลการวเคราะหระดบสารเบตาแคโรทนในมะละกอสกพนธศรสภา.....

29 30 32 34 42 43 44 45 45

ช

สารบญ (ตอ)

บทท หนา 4 ผลการวจย (ตอ) ตอนท 2 ผลการวเคราะหคาสถตพนฐาน และเปรยบเทยบคาเฉลยของขอมล…... 46 ตอนท 3 ผลของการไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน.............

ตอนท 4 ผลการเปรยบเทยบการไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคมทถกเหนยวน าดวยสโคโพลามน. ตอนท 5 ผลการเปรยบเทยบการไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กอนกบหลงการเหนยวน าดวยสโคโพลามน……………..................

50 61 74

5 สรปและอภปรายผล………………………………………………………………………………………… 82

สรปผลการวจย...................................................................................................... อภปรายผลการวจย............................................................................................... ขอเสนอแนะในการน าไปใช................................................................................... ขอเสนอแนะในการวจยตอไป................................................................................

82 85 90 90

บรรณานกรม............................................................................................................................ 91 ภาคผนวก................................................................................................................................. ภาคผนวก ก แบบบนทกขอมลการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท......................... ภาคผนวก ข อปกรณทใชในการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน…………….. ภาคผนวก ค ตวอยางการค านวณ..................................................................................... ภาคผนวก ง ภาพวธการปอนน ามะละกอสก..................................................................... ภาคผนวก จ การเตรยมน ามะละกอสก............................................................................. ภาคผนวก ฉ ผลการวเคราะหสารเบตาแคโรทน............................................................... ภาคผนวก ช ใบรบรองการอนมตใหด าเนนการเลยงสตวและใชสตว................................

ประวตยอผวจย.........................................................................................................................

98 99 105 111

115 117 120 122 124

สารบญตาราง ตารางท หนา

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15

สรปขนตอนการด าเนนการทดลอง............................................................................................. คาเฉลย สวนเบยงเบนมาตรฐาน คาสงสด และคาต าสดของขอมล จ าแนกตามกลมทดลองกบกลมควบคม ตามการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง ยกเวน การควบคมการเคลอนไหว............................................................................................................... คาเฉลย สวนเบยงเบนมาตรฐาน คาสงสด และคาต าสดของขอมล จ าแนกตามกลมทดลองกบกลมควบคม หลงการเหนยวน าดวยสโคโพลามน ตามการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง ยกเวนการควบคมการเคลอนไหว......................................................... คาสงสด และคาต าสดของขอมลของการควบคมการเคลอนไหวแบงตามพฤตกรรม 3 แบบ คอ Grooming, Rearing และ Licking จ าแนกตามกลมทดลองกบกลมควบคม กอนกบหลงการเหนยวน าดวยสโคโพลามน................................................................................................... การเปรยบเทยบคาเฉลย สวนเบยงเบนมาตรฐาน คาความแตกตาง ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคมกอนกบหลงการเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามนโดยประเมนจากพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง ยกเวน การควบคมการเคลอนไหว…………….. คาสถตพนฐานการทดสอบการเรยนรและความจ า วดดวยอปกรณ MWM ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบน ามะละกอสกตดตอกนปนระยะเวลา 21 วน.......................การวเคราะหความแปรปรวนของการทดสอบความจ าแบบ Retention ของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบน ามะละกอสกเปนระยะเวลา 21 วน............................. คาเฉลย คาเบยงเบนมาตรฐาน และสหสมพนธของความจ าแบบ Retention ของหนเมาสกลมตาง ๆ หลงจากไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน..................................คาสถตพนฐานการทดสอบการเรยนรและความจ า วดดวยอปกรณ NOR ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน.................................. แสดงการวเคราะหความแปรปรวนของการทดสอบความสามารถในการจดจ าวตถสงของของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงจากไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปน ระยะเวลา 21 วน.......................................................................................................................คาเฉลย คาเบยงเบนมาตรฐาน และสหสมพนธความสามารถในการจดจ าวตถสงของของหนเมาสกลมตาง ๆ หลงไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน................................. คาสถตพนฐานการทดสอบความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน.............................................. แสดงการวเคราะหความแปรปรวนของการทดสอบความวตกกงวลของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคมหลงจากไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน.................คาเฉลย คาเบยงเบนมาตรฐาน และสหสมพธของระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) ของหนเมาสกลมตาง ๆ หลงไดรบสารทดสอบตดตอกนเปนระยะเวลา 21วน…………….. คาสถตพนฐานของการควบคมการเคลอนไหวแบงตามพฤตกรรม 3 แบบ คอ Grooming, Rearing และ Licking จ าแนกตามกลมทดลองกบกลมควบคม.................................................

42 46 47 48 49 50 51 51 52 53 53 54 55 55 56

ญ

สารบญตาราง (ตอ) ตารางท หนา

16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30

การเปรยบเทยบการทดสอบการควบคมการเคลอนไหว ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคมแบงตามพฤตกรรม 3 แบบ คอ Grooming Rearing และ Licking หลงไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน..........................................................................................คาเฉลย และสหสมพนธการทดสอบพฤตกรรม Licking ระหวางกลมทดลองและกลมควบคมหลงไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน............................................คาสถตพนฐานของตอบสนองตอความเจบปวดดวยความรอน จ าแนกตามกลมทดลองกบกลมควบคม........................................................................................................................... แสดงการวเคราะหความแปรปรวนของระยะเวลาการตอบสนองตอความเจบปวดดวยความรอนของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม.............................................................คาสถตพนฐานการทดสอบการเรยนรและความจ า วดดวยอปกรณ MWM ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมดวยสโคโพลามน...........................การวเคราะหความแปรปรวนของการทดสอบความจ าแบบ Retention ของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมดวยสโคโพลามน.......คาเฉลย คาเบยงเบนมาตรฐาน และสหสมพนธของความจ าแบบ Retention ของหนเมาสกลมตาง ๆ หลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมดวยสโคโพลามน..............................................คาสถตพนฐานการทดสอบการเรยนรและความจ า วดดวยอปกรณ NOR ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมดวยสโคโพลามน........................... แสดงการวเคราะหความแปรปรวนของการทดสอบความสามารถในการจดจ าวตถสงของของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงจากหนเมาสทกกลมถกเหนยวน าใหความจ าเสอมดวยสโคโพลามน หลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมดวยสโคโพลามน...............คาเฉลย คาเบยงเบนมาตรฐาน และสหสมพนธความสามารถในการจดจ าวตถสงของของหนเมาสกลมตาง ๆ หลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมดวยสโคโพลามน.................................คาสถตพนฐานการทดสอบความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมดวยสโคโพลามน.......................................... แสดงการวเคราะหความแปรปรวนของการทดสอบความวตกกงวลของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมดวยสโคโพลามน....................คาเฉลย คาเบยงเบนมาตรฐาน และสหสมพนธของระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) ของหนเมาสกลมตาง ๆ หลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมดวยสโคโพลามน… การเปรยบเทยบการทดสอบการควบคมการเคลอนไหว ระหวางกลมทดลองและกลมควบคมแบงตามพฤตกรรม 3 แบบ คอ Grooming Rearing และ Licking หลงถกเหนยว น าใหความจ าเสอมดวยสโคโพลามน....................................................................................... คาเฉลย และสหสมพนธการทดสอบพฤตกรรม Grooming ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคมหลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมดวยสโคโพลามน....................................................

57 58 60 60 61 62 62 63 64 65 66 67 67 68 69

ฎ

สารบญตาราง (ตอ)

ตารางท หนา

31 32 33 34 35 36 37 38

คาเฉลย และสหสมพนธการทดสอบพฤตกรรม Licking ระหวางกลมทดลองและกลมควบคมหลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมดวยสโคโพลามน....................................................คาสถตพนฐานของตอบสนองตอความเจบปวดดวยความรอน จ าแนกตามกลมทดลองกบกลมควบคม หลงการเหนยวน าดวยสโคโพลามน....................................................................แสดงการวเคราะหความแปรปรวนของระยะเวลาการตอบสนองตอความเจบปวดดวยความรอนของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมดวย สโคโพลามน............................................................................................................................แสดงคาเฉลยระยะเวลา (Sec) การทดสอบความจ าแบบ Retention ของหนเมาสกลม ตาง ๆ เปรยบเทยบระหวางกอนกบหลงการเหนยวน าดวยสโคโพลามน................................คาดชนความจ า (Recognition Index) ของหนเมาสกลมตาง ๆ เปรยบเทยบ กอนกบหลงการเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน.......... ...............................................แสดงคาเฉลยของระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) เปรยบเทยบระหวางกอนกบหลงการเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน.....................................แสดงคาการเปรยบเทยบการทดสอบการควบคมเคลอนไหว โดยสงเกตพฤตกรรม 3 แบบ Grooming, Rearing และ Licking ของหนเมาสกลมทดลองกบกลมควบคม กอนกบหลงการเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน……………………….............................. คาเฉลยของระยะเวลาทหางของหนเมาสแชอยในน าอนเปรยบเทยบ กอนกบหลงการเหนยวน าดวยสโคโพลามน......................................................................................................

69 73 74 75 76 77 78 80

สารบญภาพ ภาพท หนา

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21

กรอบแนวคดการศกษาการทดสอบฤทธแคโรทนอยดในมะละกอทมผลตอการปองกนระบบประสาทในแบบจ าลองทเหนยวน าดวยสโคโพลา (Scopolamine)........................................ มะละกอศรสภาเปนพนธผสมระหวางมะละกอพนธแขกนวล และมะละกอพนธฮอลแลนด...สตรโครงสรางแคโรทนอยดทพบบอยในพช............................................................................แสดงการเปลยนเบตาแคโรทน (β-Carotene) ไปเปนวตามนเอ (Retinol)…………............... แผนภาพขนตอนการด าเนนงานวจย………………………………………………………………………….... หนเมาส (ICR Mouse) เพศผจากศนยสตวทดลองแหงชาต มหาวทยาลยมหดล ต าบลศาลายา อ าเภอพทธมณฑล จงหวดนครปฐม…………………....................................................... มะละกอพนธศรสภา (Srisupa Papaya) เปนพนธผสมระหวางมะละกอพนธแขกนวล และมะละกอพนธฮอลแลนด........................................................................................................... แบบแผนการทดลอง Experimental Research utilizing a 2x4 Mixed-factorial design...................................................................................................................................... ขนตอนการด าเนนการทดลอง ระยะกอนการทดลอง………….... ............................................. .. ขนตอนการด าเนนการทดลอง ระยะการทดลอง.. ................................................................. ... อปกรณการทดสอบการเรยนรและความจ าเกยวกบทศทาง และสถานทโดยการวายน า (Morris Water Maze Test). .................................................................................................. อปกรณการทดสอบการเรยนร และความจ าการทดสอบความคนเคยตอวตถทเคยเหน หรอสมผสกอนหนาในเวลาผานไปเพยง 10 นาท (Novel Object Recognition Test)……………. อปกรณการทดสอบความวตกกงวลโดยใชทางเดนรปกากบาท (Elevated Plus Maze)........ อปกรณการทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหว (Exploratory Box Behavior Test)............... อปกรณการทดสอบประสาทรบความรสกดานการตอบสนองตอความเจบปวดโดยใชหาง หนเมาสในน าอน (Tail Immersion Test)………………………………………………………………….... ขนตอนการด าเนนการทดลอง ระยะหลงการทดลอง.. ........................................................... .. เปรยบเทยบคาเฉลยระยะเวลาการทดสอบความจ าแบบ Retention ของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน............. เปรยบเทยบคาเฉลยความสามารถในการจดจ าวตถสงของโดยใชคาดชนความจ า (Retention Index) ของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน........................................................................................... เปรยบเทยบคาเฉลยระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 12 วน............................... เปรยบเทยบคาเฉลยจ านวนครงทหนเมาสท าพฤตกรรม Grooming ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงจากไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน.............................. เปรยบเทยบคาเฉลยจ านวนครงทหนเมาสท าพฤตกรรม Rearing ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงจากไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวล 21 วน................................

4 10 15 15 29 31 31 34 36 36 37 38 39 40 40 41 52 54 56 58 59

ฑ

สารบญภาพ (ตอ)

ภาพท หนา 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33 34 35 36 37

เปรยบเทยบคาเฉลยจ านวนครงทหนเมาสท าพฤตกรรม Licking ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงจากไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน............................. เปรยบเทยบคาเฉลยของระยะเวลาทหางหนเมาสแชอยในน าอนระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน................................... คาเฉลยระยะเวลาการทดสอบความจ าแบบ Retention ของหนเมาสกลมตาง ๆ หลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน............................................................... เปรยบเทยบคาเฉลยระยะเวลาการทดสอบความจ าแบบ Retention ของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงเหนยวน าใหความจ าความเสอมดวยสโคโพลามน.............. คาเฉลยความสามารถในการจดจ าวตถสงของโดยใชดชนความจ า (Recognition Index) หลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน........................................................ เปรยบเทยบคาเฉลยความสามารถในการจดจ าวตถสงของโดยใชดชนความจ า (Recognition Index) ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน....................................................................................................... คาเฉลยระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) หลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน .................................................................................... .................... เปรยบเทยบคาเฉลยระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน............................... คาเฉลยจ านวนครงทหนเมาสท าพฤตกรรม Grooming ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน........................................................ เปรยบเทยบคาเฉลยจ านวนครงทหนเมาสท าพฤตกรรม Grooming ระหวางกลมทดลองและกลมควบคม หลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน............................ คาเฉลยจ านวนครงทหนเมาสท าพฤตกรรม Rearing ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน........................................................ เปรยบเทยบคาเฉลยจ านวนครงทหนเมาสท าพฤตกรรม Rearing ระหวางกลมทดลองและกลมควบคม หลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน.................................... คาเฉลยจ านวนครงทหนเมาสท าพฤตกรรม Licking ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน........................................................ เปรยบเทยบคาเฉลยจ านวนครงทหนเมาสท าพฤตกรรม Licking ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน............................... คาเฉลยระยะเวลาทหางหนเมาสแชอยในน าอน ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคมหลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน……………………………………...................... เปรยบเทยบคาเฉลยระยะเวลาทหางหนเมาสแชอยในน าอนระหวางกลมทดลองกบกลมควบคมหลงถกเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน……..................................

59 60 61 63 64 65 66 68 70 70 71 71 72 72 73 74

ฒ

สารบญภาพ (ตอ) ภาพท หนา

38 39 40 41 42 43 44

เปรยบเทยบคาเฉลยระยะเวลาการทดสอบความจ าแบบ Retention ของหนเมาสกลม ตาง ๆ กอนกบหลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน................................. เปรยบเทยบคาเฉลยความสามารถในการจดจ าวตถสงของโดยใชดชนความจ า(Recognition Index) ของหนเมาสกลมตาง ๆ กอนกบหลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน........................................................................................................ เปรยบเทยบคาเฉลยระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) ของหนเมาสกลม ตาง ๆ กอนกบหลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน................................. เปรยบเทยบคาเฉลยจ านวนครงทหนเมาสท าพฤตกรรม Grooming ของหนเมาสกลม ตาง ๆ กอนกบหลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน............................... เปรยบเทยบคาเฉลยจ านวนครงทหนเมาสท าพฤตกรรม Rearing ของหนเมาสกลมตาง ๆ กอนกบหลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน............................................ เปรยบเทยบคาเฉลยจ านวนครงทหนเมาสท าพฤตกรรม Licking ของหนเมาสกลมตาง ๆ กอนกบหลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน……………….......................... เปรยบเทยบคาเฉลยระยะเวลาทหางหนเมาสแชอยในน าอนของหนเมาสกลมตาง ๆ กอนกบหลงเหนยวน าใหความจ าเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน...................................................

75 76 77 79 79 80 81

บทท 1 บทน ำ

ควำมเปนมำและควำมส ำคญของปญหำ ภาวะสมองเสอม (Dementia) เปนปญหาทางการแพทย และสาธารณสขทส าคญท าใหเกดคาใชจายในการรกษา จนกระทบตอภาวะทางเศรษฐกจสงคมมากขน ยาทใชรกษาตองน าเขามาจากตางประเทศซงมราคาสง เชน Denepezil, Rivastigmine และ Galantamine ปจจบนทวโลกพบผปวยสมองเสอมประมาณ 47.5 ลานคน โดยคาดการณวาในป ค.ศ. 2030 จะปรากฏผปวยถงเกอบ 75.6 ลานคน และ ป ค.ศ. 2050 จะเพมขนเปน 135.5 ลานคน (World Health Organization, 2015)อาการเรมแรกทจะเปลยนแปลงไปเปนภาวะสมองเสอม คอ ภาวะสมองเสอมระยะแรก (Mild Cognitive Impairment: MCI) ซงเปนภาวะทอยระหวางการหลงลมปกตของผสงอาย (Normal Aging) กบภาวะสมองเสอม (Dementia) ชนดโรคอลไซเมอร (Alzheimer’s Disease: AD) MCI เปนสญญาณแรกของโรคสมองเสอมซงเปนอาการสมองเสอมอยางออน ๆ MCI พบมากประมาณรอยละ 20 ของประชากรอาย 65-75 ป และรอยละ 40 ของประชากรอายเกน 85 ป (อรวรรณ ศลปกจ, 2556, หนา 36-38) ความส าคญ คอ ภาวะนจะเพมความเสยงในการเกดโรคสมองเสอมมากกวา ปกต จากการวจยปรากฏวา ผปวย MCI รอยละ 10 จะพฒนาไปเปนโรคอลซลเมอร หรออาการสมองเสอมรปแบบอน ๆ ภายใน 5 ป แตถาผปวย MCI ไดรบการรกษา และการดแลทถกตอง จะสามารถกลบไปเปนปกตได (Gauthier et al., 2006, p. 367; John & Breitner, 2014, pp. 34-35) ผปวย MCI จะมการสญเสยความสามารถของสมองในดานกระบวนการรคด (Cognitive Process) เกยวของกบความสามารถดานการเรยนร (Learning Ability) ความจ า (Memory) การคด (Thinking) การรบร (Perception) ความสนใจ (Attention) จนตภาพ (Imagery) ภาษา (Language) ไดลดลงไป ซงพฤตกรรมดงกลาว เรมกระทบตอการใชชวตประจ าวน แตยงสามารถด าเนนกจกรรมในชวตไดอยในเกณฑปกต แตเมอมการเปลยนแปลงทางระบบประสาททท าใหเกดความผดปกต มหลายประการเปนผลมาจากกลไกทางโครงสราง และหนาทของเซลลประสาท (Neuronal Degeneration) ทเสยไป มหลกฐานทปรากฏปจจยทสงผลตออบตการณการเกดความผดปกต คอ เพศ (Gender) อาย (Age) ความเครยด (Stress) ความดนเลอดสง (Hypertension) รวมถงผลกระทบทางระบบประสาทอน ๆ อาท โรคพารกนสน (Parkinson’s Disease: PD) โรคอลซลเมอร (Alzheimer’s Disease: AD) โรคจตเภท (Schizophrenia) (Dharam, Amrit, Tanveer, & Balgangadhar, 2012, p. 690) เนองจากผปวยภาวะ MCI เปนภาวะทสามารถรกษาใหหายได จงมงานวจยหลายงานท า การศกษาวธปกปองระบบประสาท หรอวธรกษาภาวะสมองเสอมระยะแรก มการศกษาวจยในสตว ทดลอง (Animal Experimental Research) มอาการทสามารถเทยบเคยงความผดปกตทเกดในมนษย ไดเปนอาการแสดงทางคลนก (Clinical Manifestation) กลาวคอ เมอสตวทดลองถกเหนยวน า ท าใหเกดพยาธสภาพ (Pathological Lesion) ดวยวธการตาง ๆ ของการท าใหเกดการบกพรองทางการรคด จะท าใหเขาใจถงกลไกของการเกดภาวะสมองเสอมระยะแรก เพอน าไปพฒนายารกษาในมนษยตอไป (Giancarlo, 2004, p. 369)

2

การปองกนภาวะสมองเสอมระยะแรก เพอไมใหเปลยนแปลงไปเปนโรคอลซลเมอร หรอ วธปองกนภาวะสมองเสอมรปแบบอน ๆ มหลายวธ เชน การออกก าลงกาย การพกผอนใหเพยงพอ การรบประทานอาหารทมประโยชน รวมถงวตามนใหเพยงพอกบความตองการของรางกายในการวจยนเนนการปองกนภาวะสมองเสอมจากการบรโภคอาหารทมสารตานอนมลอสระโดยเฉพาะอยางยงผก และผลไมซงเปนแหลงทมสารตานอนมลอสระจ านวนมาก ในงานวจยผวจยไดศกษาการเปรยบเทยบผลของน ามะละกอสกทมผลตอการปกปองระบบประสาท เนองจากมะละกอเปนผลไมมคณคาทางโภชนาการสง การบรโภคทงผลสก และผลดบเปนพชทปลกไดงาย โดยเฉพาะเขตรอนชน (Tropical Zone) ในมะละกอสก 100 กรม ปรากฏ สารส าคญ เบตาแคโรทน (β-Carotene) 276 ไมโครกรม ไลโคปน (Lycopene) 182 ไมโครกรม ลทน (Lutein) และซแซนทน (Zeaxanthin) 89 ไมโครกรม วตามน (Vitamin) และแรธาต (Mineral) อกหลายชนด เปนตน (USDA Nutrient Database, 2010) โดยเฉพาะสารกลมแคโรทนอยดทเปนสารตานอนมลอสระทมประสทธภาพสง มะละกอพนธทผวจยเลอกทจะศกษา คอ มะละกอพนธศรสภาซงเปนพนธทถกคดคนผสมพนธ โดยเกษตรกร ต าบลหวยใหญ อ าเภอบางละมง จงหวดชลบร เปนสายพนธใหมทผสมระหวางมะละกอพนธแขกนวลซงเปนพนธทเหมาะแกการบรโภคดบ และมะละกอพนธฮอลแลนดทเปนพนธเหมาะแกการบรโภคสก มะละกอสกทมสแดง จะมเบตาแคโรทน (β-Carotene) มากกวาสเหลอง (วนย ดะหลน, 2550, หนา 760) ในงานวจยผวจยไดศกษาการเปรยบเทยบผลของน ามะละกอสกทมตอการปกปองระบบประสาทของแบบจ าลองการเกดโรคสมองเสอมระยะแรกในสตวทดลอง ดวยการเหนยวน าสมองเสอมระยะแรกดวยสโคโพลามน (Scopolamine) ผวจยใชการทดสอบพฤตกรรมในสตวทดลอง(Behavioral Assessment) เปนตววดผลทมตอระบบประสาทใน 4 ดาน ดงน 1) ผลตอการเรยนรและความจ า (Learning and Memory) วดดวยอปกรณ Morris Water Maze Test (MWM) และวดดวยอปกรณ Novel Object Recognition Test (NOR) 2) ผลตอความวตกกงวล (Anxiety) วดดวยอปกรณ Elevated Plus Maze (EPM) 3) ผลตอการควบคมการเคลอนไหว (Motor Control) วดดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test และ 4) ผลตอระบบประสาทรบความรสก (Sensory System) วดดวยอปกรณ Tail Immersion Test วตถประสงคของกำรวจย

1. เพอทดสอบผลของการไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน โดยการทด สอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน ไดแก 1.1 การเรยนรและความจ า (Learning and Memory) 1.2 ความวตกกงวล (Anxiety) 1.3 การควบคมการเคลอนไหว (Motor Control) 1.4 ระบบประสาทรบความรสก (Sensory System) 2. เพอเปรยบเทยบผลของการไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคมทถกเหนยวน าดวยสโคโพลามน โดยการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน ไดแก 2.1 การเรยนรและความจ า (Learning and Memory)

3

2.2 ความวตกกงวล (Anxiety) 2.3 การควบคมการเคลอนไหว (Motor Control) 2.4 ระบบประสาทรบความรสก (Sensory System) 3. เพอเปรยบเทยบผลของการไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กอนกบหลงการเหนยวน าดวยสโคโพลามน โดยการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน ไดแก 3.1 การเรยนรและความจ า (Learning and Memory) 3.2 ความวตกกงวล (Anxiety) 3.3 การควบคมการเคลอนไหว (Motor Control) 3.4 ระบบประสาทรบความรสก (Sensory System) กรอบแนวคดในกำรวจย การศกษาปกปองภาวะสมองเสอมระยะแรกดวยน ามะละกอสก โดยใชแบบจ าลองการเกด ภาวะสมองเสอมระยะแรกในสตวทดลอง (Animal Model of Mild Cognitive Impairment) ทถกเหนยวน าดวยสโคโพลามน (Scopolamine) ซงมกลไกการเกดโรค คอ สโคโพลามนท าใหเกดอนมลอสระมากขน จนท าใหเนอเยอประสาท (Nervous Tissue) ขาดสมดลของอนมลอสระ และสารตานอนมลอสระ ท าใหสมองเกดภาวะเครยดออกซเดชน (Oxidative Stress) และสโคโพลามนไปปดกน มสคารนกรเซปเตอร (Muscarinic Receptor) ไมใหถกกระตนดวย อะเซทลโคลน (Acetylcholine: ACh) ท าใหอะเซทลโคลนในสมองลดลง ทง 2 กลไก ท าใหเกดการลดลงของกระบวนการรคด (Cognitive Process) ในดานตาง ๆ เชน การเรยนรและความจ า ความวตกกงวล การควบคมการเคลอนไหว และระบบประสาทรบความรสก หรอเรยกวา เกดภาวะสมองเสอมระยะแรก (Mild Cognitive Impairment) (Klinkenberg & Blokland, 2010, pp. 1311-1341; Jeong, Lee, Kim, Sung, & Kim, 2008, pp. 78-84) เมอหนเมาสไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กอนเกดการเหนยวน าดวย สโคโพลามน ซงเปนการปกปองเซลลประสาท (Neuroprotection) ดวยกลไกการออกฤทธของสารตานอนมลอสระในน ามะละกอสกเขาไปจบกบอนมลอสระ (Free Radical) ทเกดจากการเหนยวน าของ สโคโพลามน เมอเนอเยอประสาทมอนมลอสระ และสารตานอนมลอสระทอยในภาวะสมดล จงไมเกดภาวะเครยดออกซเดชน และสารตานอนมลอสระในน ามะละกอสกยงไปแยงจบกบสโคโพลามนท มสคารนกรเซปเตอร ท าใหอะเซทลโคลน สามารถจบกบมสคารนกรเซปเตอรไดตามปกต ปรมาณของ อะเซทลโคลนในสมองจงมปรมาณทเพยงพอ จงไมท าใหเกดการเสอมสลายของเซลลประสาทจงปกปองภาวะสมองเสอมระยะแรกได (ชาญชย สาดแสงจนทร, 2556, หนา 556-557; Shakti et al., 2011, pp. 1-8; Esmail, Marjan, Mehdi, & Mahsa, 2013, pp. 184-189)

ภาพท

1

กรอบ

แนวค

ดการ

ทดสอ

บฤทธ

แคโร

ทนอย

ดในม

ะละก

อทมผ

ลตอก

ารปก

ปองร

ะบบป

ระสา

ทของ

แบบจ

าลอง

การเก

ดโรค

สมอง

เสอม

ระยะ

แรก

ใน

สตวท

ดลอง

ทถก

เหนย

วน าด

วยสโ

คโพล

ามน

(Scop

olam

ine)

Scop

olam

ine

Redu

cing

of A

cety

lcho

line

(K

linke

nber

g & B

lokla

nd, 2

010,

pp. 1

307-

1350

)

Cogn

itive

Def

icit

(Kum

ar &

Juya

l, 20

10, p

. 235

9)

Mem

ory

Impa

irmen

t

Oxid

ative

Stre

ss

(Fan

Y e

t al.,

200

5, p

p. 2

22-2

26)

Free

Rad

ical

Caro

teno

ids

of C

arica

pa

paya

Lin

n.

Spat

ial M

emor

y (

)

Anx

iety

( )

Mot

or C

ontro

l (

)

Ther

mal

Sen

satio

n (

)

4

5

สมมตฐำนของกำรวจย 1. หนเมาสกลมทไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน มการเรยนรและความจ า (Learning and Memory) มากกวาหนเมาสกลมทไดรบน ากลน กอนกบหลงการเหนยวน าดวยสโคโพลามน 2. หนเมาสกลมทไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน มความวตกกงวล (Anxiety) นอยกวาหนเมาสกลมทไดรบน ากลน กอนกบหลงการเหนยวน าดวยสโคโพลามน 3. หนเมาสกลมทไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน มการควบคม การเคลอนไหว (Motor Control) หรอมพฤตกรรมการเคลอนไหว มากกวาหนเมาสกลมทไดรบน ากลน กอนกบหลงการเหนยวน าดวยสโคโพลามน 4. หนเมาสกลมทไดรบน ามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน มระบบประสาทรบความรสก (Sensory System) ในการตอบสนองตอความรอน มากกวาหนเมาสกลมทไดรบน ากลน กอนกบหลงการเหนยวน าดวยสโคโพลามน ประโยชนทคำดวำจะไดรบจำกกำรวจย 1. ท าใหทราบประโยชนของน ามะละกอสกทมตอการปกปองระบบประสาท (Neuroprotection) ขอมลทไดนาจะเปนประโยชนตอบคคลทวไปโดยเฉพาะผสงอาย และผปวยภาวะสมองเสอมระยะแรก เพอเปนทางเลอกในการปองกน และดแลสขภาพกอนทจะเกดภาวะสมองเสอม 2. เปนนวตกรรมอาหารเพอสขภาพจากการวจยพนฐานในสตวทดลอง (Basic-Preclinical Research) สการน าไปใชประโยชนในมนษย (Translation to Human) และเพอสนบสนนใหม การบรโภคมะละกอสกเพมขน ขอบเขตของกำรวจย 1. มะละกอสกพนธศรสภา จากสวนเกษตรอนทรย ต าบลหวยใหญ อ าเภอบางละมง จงหวดชลบร 2. หนเมาส (Imprinting Control Region: ICR Mouse) สายพนธทาง เพศผ (Male Mouse) อาย 8 สปดาห น าหนกตวเฉลยประมาณ 30-50 กรม จากศนยสตวทดลองแหงชาต มหาวทยาลยมหดล ต าบลศาลายา อ าเภอพทธมณฑล จ านวน 30 ตว จงหวดนครปฐม เมอวนท 21 กนยายน 2557 และทกตวตองอยในสภาพสภาวะแวดลอมเดยวกน ไดรบอาหาร และน าสะอาดอยางอสระ (add libitum) ในปรมาณทเทากนกอนการทดลอง 3. การเปรยบเทยบผลของน ามะละกอสกทมตอระบบประสาท โดยใชการทดสอบดวยเครองมอวดพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง (Behavioral Activities Assessment) ทงหมด 4 ดาน 1) การเรยนรและความจ า (Learning and Memory) 2) ความวตกกงวล (Anxiety) 3) การควบคมการเคลอนไหว (Motor Control) และ 4) ระบบประสาทรบความรสก (Sensory System) 4. การเหนยวน าการเกดโรคสมองเสอมระยะแรกแบบชวคราว (Irreversible Memory) ในสตวทดลอง ดวยสโคโพลามน (Scopolamine) ขนาด 2 มลลกรมตอกโลกรมน าหนกตว (mg/kgBW)

6

5. ตวแปรทศกษา ตวแปรทดลอง ไดแก 5.1 ขนาดของน ามะละกอสก 4 ขนาด ไดแก 5.1.1 กลมขนาดต า (Low Dose 2.5) ไดรบน ามะละกอสกขนาด 2.5 g/kgBW 5.1.2 กลมขนาดปานกลาง (Medium Dose 5.0) ไดรบน ามะละกอสกขนาด 5.0 g/kgBW 5.1.3 กลมขนาดสง (High Dose 7.5) ไดรบน ามะละกอสกขนาด 7.5 g/kgBW 5.1.4 กลมควบคม (Control Group) ไมไดรบน ามะละกอสก 5.2 ขนาดของสโคโพลามน 2 ขนาด ไดแก 5.2.1 ไมไดรบสโคโพลามน 5.2.2 ไดรบสโคโพลามน (Scopolamine) ขนาด 2.0 mg/kgBW ตวแปรตาม ไดแก การประเมนพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง 4 ดาน 1. การเรยนรและความจ า วดดวยอปกรณ MWM และ NOR 2. ความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM 3. การควบคมการเคลอนไหว วดดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test 4. ระบบประสาทรบความรสก วดดวยอปกรณ Tail Immersion Test นยำมศพทเฉพำะ มะละกอ (Carica papaya Linn.) หมายถง พชลมลกชนดหนงมล าตนตรง ใบมลกษณะเปนแฉก ยางมสขาวเหนยว เปนไดทงไมผล และพชผก บรโภคไดทงผลสก และผลดบ ผลดบจะมสเขยว ผลสกจะมสสม มะละกอทใชในการวจยเปนมะละกอพนธศรสภาผลสก แคโรทนอยด (Carotenoids) หมายถง กลมของสารมส หรอรงควตถ (Pigments) เชน สเหลอง สสม หรอ สแดง ทพบไดในพชทวไป ชวยปองกนการกอตวของอนมลอสระทเปนอนตรายในปจจบนมการคนพบแคโรทนอยดถง 600 ชนด และประมาณ 50 ชนด พบไดในผก และ ผลไม แคโรทนอยด 6 ชนดทกลายมาเปนสารตานอนมลอสระทส าคญ คอ แอลฟาแคโรทน (α-Carotene) เบตาแคโรทน (β-Carotene) ครบโตแซนทน (Crytoxanthin) ไลโคปน (Lycopene) ลทน (Lutein) และ ซแซนทน (Zeaxanthin) กำรปกปองระบบประสำท (Neuroprotective Effect) หมายถง วธการชะลอการเสอมของเซลลประสาททงดานโครงสราง และหนาทดวยวธการหลายรปแบบ เชน การบ ารงสมองดวยโภชนาการ และสารอาหารทเปนประโยชน การใชสารพฤษเคม (Phytochemicals) เปนวธการหนงในการปกปองระบบประสาท ภำวะสมองเสอมระยะแรก (Mild Cognitive Impairment: MCI) หมายถง ภาวะการสญเสยความสามารถของสมองในดานกระบวนการรคด (Cognitive) ซงมสวนเกยวของกบความสามารถดานการเรยนร (Learning) ความจ า (Memory) การคด (Thinking) การรบร (Perception) ความสนใจ (Attention) จนตภาพ (Imagery) และภาษา (Language) แตอาการมกจะไมเปนอปสรรคมากนกตอชวตประจ าวน

7

แบบจ ำลองกำรเกดโรคภำวะสมองเสอมระยะแรกในสตวทดลอง (Animal Model of Mild Cognitive Impairment) หมายถง การท าใหสตวทดลองเกดความจ าบกพรองโดยการเหนยวน า ดวยสโคโพลามนขนาด 2 มลลกรมตอกโลกรมน าหนกตว (mg/kg BW) เขาทชองทอง (Intraperitoneal Injection) หลงการฉดสโคโพลามนแลว น ามาทดสอบทางพฤตกรรมทางระบบประสาท โดยใชเครอง มอวดการสญเสยความทรงจ าโดยทดสอบ การเรยนรและความจ า เกยวกบทศทางและสถานท โดย การวายน าดวยอปกรณ Morris Water Maze Test หนเมำส (Imprinting Control Region: ICR Mouse) หมายถง หนถบจกร สายพนธทาง รปรางลกษณะขนาดเลกสขาว ขนเกรยนสะอาดเปนมน เชองไมกด เลยงงาย ขยายพนธอยางรวดเรว น าหนกเพศผโตเตมท (Wt., Adult Male) 25–40 กรม อายขยเฉลยของหนเมาสเฉลยราว 1.5-2 ป สโคโพลำมน (Scopolamine) หมายถง สารอลคาลอยดทมฤทธสวนใหญกดการท างานของสมอง และอาจท าใหเกดอาการเคลม หรออาการประสาทหลอนได เปนการเหนยวน าใหเกดความจ าเสอมชวคราว สำรตำนอนมลอสระ (Antioxidant) หมายถง สารทสามารถปองกน หรอท าลายการเกด ปฏกรยาออกซเดชนของอนมลอสระทกอตวขน โดยการยบยงปฏกรยาลกโซของอนมลอสระ หยด การกอตวใหมของอนมลอสระ และชวยซอมแซมความเสยหายทเกดจากตวอนมลอสระทไปท าลายเซลลตาง ๆ ในรางกายรวมทงแทนทโมเลกลทถกท าลาย อนมลอสระ (Free Radical หรอ Oxidant) หมายถง โมเลกล (Molecule) หรออะตอม (Atom) ทมอเลกตรอนทไมมค หรออเลกตรอนคโดดเดยว (Unpaired Electron) มความไมเสถยร (Unstable) วองไวมาก (Reactive) สามารถเกดปฏกรยากบอะตอม หรอโมเลกลอนไดงายเปนสาเหตของการท าลาย หรอภาวะบาดเจบในเซลลรางกาย กลมทดลอง (Experimental Group) หมายถง กลมตวอยางทไดรบน ามะละกอสกตด ตอกนเปนระยะเวลา 21 วน แบงเปน 3 กลม 1) กลมขนาดต า (Low Dose 2.5) หมายถง กลมทได รบน ามะละกอสกขนาด 2.5 g/kgBW 2) กลมขนาดปานกลาง (Medium Dose 5.0) หมายถง กลมทไดรบน ามะละกอสกขนาด 5.0 g/kgBW 3) กลมขนาดสง (High Dose 7.5) หมายถง กลมทไดรบน ามะละกอสกขนาด 7.5 g/kgBW กลมควบคม (Control Group) หมายถง กลมตวอยางทไดรบน ากลนขนาด 2.5 g/kgBW ตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กำรเรยนร (Learning) หมายถง การไดมา (Acquisition) การจดระเบยบ หรอการจดหมวด หมใหม (Reorganization) ของสมองทเกยวของกบกระบวนการรบร และการคดโดยผานกระบวนการประมวลผลของขอมล และการเกบรกษาขอมล ควำมจ ำ (Memory) หมายถง ความสามารถของสมองทจะเกบขอมลตาง ๆ ได และระลกไดในโอกาสตอมาสามารถแบงความจ าไดเปน 2 ชนด คอ 1) ความจ าชวขณะ (Short-term Memory หรอ Recent Memory) เปนความจ าระยะสน ๆ เกบไวไดไมนานเพยง 2-3 นาทกลม และ 2) ความจ าถาวร (Long-term Memory หรอ Remote Memory) เปนความจ าทเกบไวไดนานเปน เดอน ป ความจ าชนดนลมไดยาก ถงแมสมองจะเกดภาวะการขาดออกซเจน (Hypoxia) หรอไดรบยาสลบ ซงท าใหเกดการท างานของสมองหยดชวคราวความจ าชนดนกยงคงจ าไดเมอสมองกลบมาท างานไดเหมอนเดม

8

ควำมวตกกงวล (Anxiety) หมายถง เปนการตอบสนองของรางกาย และจตใจตอการหวน เกรงอนตรายทคาดวาจะเกดขนจากสภาพรอบตว หรอเปนภาวะทรสกตงเครยดหวาดหวน รสกไมปลอดภย กงวลใจ และมการเปลยนแปลงการท างานของระบบประสาทอตโนมตใหมลกษณะสหรอหน กำรควบคมกำรเคลอนไหว (Motor Control) หมายถง เปนระบบควบคมการเคลอนไหวทประมวลผลดวยกลไกภายใตอ านาจจตใจ อยบรเวณ สมองนอย (Cerebellum) รวมถงสมองใหญซงเปนสวนส าคญของการควบคมการท างานใหเกดการเคลอนไหวทราบเรยบ และใหมการประสานสมพนธกน (Co-ordination) กบขอตอตาง ๆ ในรางกาย เปนระบบควบคมการท างานของกลามเนอทบงคบได รวมทงการตอบสนองตอสงเราภายนอก ระบบประสำทรบควำมรสก (Sensory System) หมายถง ระบบการน ากระแสประสาท (Nerve Impulse) ทถกกระตนโดยสงกระตน หรอสงเรา (Stimulus) ตวอยางเชน แรงกด หรอ การสมผส ซงเปนพลงงานกระตนรปตาง ๆ โดยสงเราเหลานจะกระตนผานตวรบความรสก (Sensory Receptor) ซงเปนองคประกอบหนงของระบบประสาท ทท าหนาส าคญในการรบขอมล และเปลยนพลงงานกระตนในรปแบบตาง ๆ ใหเปนกระแสประสาท น าไปสระบบประสาทรบความรสก หรอสมองสวนรบความรสก (Primary Sensory Area) ซงมต าแหนงเฉพาะในสมอง Morris Water Maze Test (MWM) หมายถง อปกรณทใชทดสอบการเรยนรและความจ า เกยวกบทศทาง และสถานท (Spatial Memory) โดยใหหนวายน าในอางทรงกลมเพอหาแทนใตน าใหเจออางทรงกลมจะถกแบงเปน 4 โชน (Zone) แตละโซนจะมสญลกษณบอกทศทาง (Visual Cue) แตกตางกน 3 จดยกเวน จดทมแทนใตน าอย โดยจบเวลาทหนเมาสหาแทนใตน าใหเจอ Novel Object Recognition Test (NOR) หมายถง อปกรณทใชวดการเรยนร และ ความจ าในเรองความคนเคยตอวตถทเคยเหน หรอสมผสกอนหนาในเวลาผานไปเพยง 10 นาท วา สามารถจ าไดหรอไม โดยแบงการทดสอบเปน 2 ชวง ชวงแรกมวตถ 2 ชนทเหมอนกนวางไวในกลองศกษาพฤตกรรม ปลอยหนเมาสตรงกลางวตถทงสอง ใหหนเมาสส ารวจวตถแตละอนในเวลา 5 นาท จากนนน าหนเมาสไปพกในกรงพกเปนเวลา 10 นาท ในชวงท 2 เอาวตถใหม และวตถเดมวางในกลองศกษาพฤตกรรม ปลอยหนเมาสตวเดมทพกแลว 10 นาท ตรงกลางวตถทงสอง จบเวลาทหนเมาสสนใจวตถใหมและวตถเกา ในเวลา 5 นาท น าเวลาทหนเมาสสนใจวตถแตละอน มาหาคาดชนความจ า (Recognition Index) Elevated Plus Maze (EPM) หมายถง อปกรณทใชวดความวตกกงวลในหนเมาส โดยใชอปกรณทางเดนรปกากบาทม 2 ทางเดนทตรงขามกนมผนงสงปดมดชด (Closed Arms) และอก 2 ทางเดนทตรงกนขามเปดโลงไมมผนง (Open Arms) แลวปลอยใหหนเมาสเดนบนทางเดนรปกากบาท จบเวลาทหนเมาสอยในแตละทางเดน Exploratory Box Behavior Test หมายถง อปกรณทใชวดพฤตกรรมการเคลอนไหวของหนเมาสในสงแวดลอมใหม สงเกตพฤตกรรม Grooming Rearing และ Licking จ านวนกครงในเวลา 3 นาท Tail Immersion Test หมายถง อปกรณทใชทดสอบระบบประสาทรบความรสกในหนเมาสดานการตอบสนองตอความเจบปวด โดยการน าหางของหนเมาสแชในน าอนทอณหภมท 45-50 องศาเซลเซยส (oC) จบเวลาตงแตน าหางของหนเมาสแชในน าอนจนกระทงหนเมาสสะบดหาง บนทกเวลาทตอบสนอง

บทท 2 เอกสารและงานวจยทเกยวของ

การวจยนเปนการวจยเชงทดลอง (Experimental Research Design) เพอเปรยบเทยบผลของนามะละกอสกทมผลตอการปกปองระบบประสาทในแบบจาลองการเกดโรคสมองเสอมระยะแรก ในสตวทดลองโดยการทดสอบการแสดงออกทางพฤตกรรมของสตวทดลอง (Neurobehavioral Assessment) ในดานการปกปองระบบประสาท (Neuroprotection) และชะลอความเสอมของเซลลประสาท รวมทงเซลลตาง ๆ ในรางกาย จากการทาลายของอนมลอสระทงทเกดขนเองภายในรางกาย และจากปจจยภายนอกรางกาย ซงเปนสาเหตหลกททาใหเกดภาวะสมองเสอม โดยมแนวคด ทฤษฏ และงานวจยทเกยวของดงตอไปน ตอนท 1 มะละกอ (Carica Papaya Linn.) 1. ลกษณะทวไปของมะละกอ 2. งานวจยทเกยวของกบการศกษาประโยชนทางชวภาพของมะละกอ ตอนท 2 สารแคโรทนอยด (Carotenoids) 1. ชนด และสตรโครงสรางของแคโรทนอยดทพบไดบอย 2. งานวจยทเกยวของกบการศกษาฤทธของสารแคโรทนอยด ตอนท 3 ภาวะเครยดออดซเดชน (Oxidation Stress) 1. สารตานอนมลอสระ 2. กลไกการทางานของสารตานอนมลอสระ 3. อนมลอสระ 4. แหลงกาเนดอนมลอสระ 5. งานวจยทเกยวของกบการศกษาอนมลอสระ และสารตานอนมลอสระ ตอนท 4 ภาวะสมองเสอม (Dementia) 1. ภาวะสมองเสอมระยะแรก 2. สาเหตทสาคญของการเกดภาวะสมองเสอมระยะแรก 3. การปองกนภาวะสมองเสอม 4. งานวจยทเกยวของกบการศกษาการปองกนภาวะสมองเสอม

ตอนท 5 แบบจาลองภาวะสมองเสอมระยะแรกในหนทดลองดวยสโคโพลามน (Models Mild Cognitive Impairment in Mice with Scopolamine) 1. งานวจยทเกยวของกบการเหนยวนาใหเกดภาวะสมองเสอมระยะแรกดวย สโคโพลามนในสตวทดลอง ตอนท 6 การทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในหนเมาส (Neurological Behavioral Tests in Mice) 1. การทดสอบการเรยนรและความจา 2. การทดสอบความวตกกงวล 3. การทดสอบการควบคมการเคลอนไหว

10

4. การทดสอบระบบประสาทรบความรสก ตอนท 1 มะละกอ (Carica papaya Linn.) 1. ลกษณะทวไปของมะละกอ (General Characteristics of Papaya) มะละกอมชอวทยาศาสตรคอ Carica papaya Linn. ชอสามญ Papaya, Pawpaw และ Tree melon อยในวงศ Caricaceae ชออนทปรากฏในภมภาคในประเทศไทย มะกวยเทศ (ภาคเหนอ) หมกหง (ลาว นครราชสมา เลย) ลอกอ (ภาคใต) กลวยลา (ยะลา) แตงตน (สตล) ลกษณะทางพฤกษศาสตร เปนไดทงไมผล และ พชผก เปนไมลมลก ลาตนตรง ไมมแกน แตกกงกานนอย เปนใบเดยว ออกเรยงสลบรอบตนหนาแนนทปลายยอด ขอบใบเวาเปนแฉกลกถงแกนกาน กานใบเปนหลอด ใบมยางเหนยว สขาวอย ผลดบมสเขยว และมนายางสขาวสะสมอยทเปลอกมะละกอเปนพชทชอบนา ระยะเวลาใน การปลกจนถงเกบเกยวผลสกใชเวลาประมาณ 8 เดอน หรอ 255 วน ถานบจากวนออกดอกจนถงเกบเกยวประมาณ 4 เดอน หรอ 135 วน ผลสกเนอในจะมสเหลองถงสม มเมลดสดาเลก ๆ อยภายในรบประทานไมได (สธาทพ ภมรประวต, 2552)

ก. ข. ภาพท 2 มะละกอพนธศรสภา เปนพนธผสมระหวางมะละกอพนธแขกนวล และมะละกอพนธ ฮอลแลนด (จากสวนเกษตรอนทรย คณปราจต สภาผล ท ต.หวยใหญ อ.บางละมง จ.ชลบร) ก. ตนมะละกอพนธศรสภา ข. ผลมะละกอสกพนธศรสภา องคประกอบทางเคมทสาคญในมะละกอสก 100 กรม โปรตน 0.47 กรม ไขมน 0.26 กรม แคลเซยม 20 มลลกรม ฟอสฟอรส 10 มลลกรม เหลก 0.25 มลลกรม โซเดยม 8 มลลกรม แมกนเซยม 21 มลลกรม แมงกานส 0.04 มลลกรม โพแทสเซยม 182 มลลกรม สงกะส 0.08 มลลกรม ไลโคปน 1,828 ไมโครกรม เบตาแคโรทน 274 ไมโครกรม ลทน และ ซแซนทน 89 ไมโครกรม วตามน บ 1 0.023 มลลกรม วตามนบ 2 0.027 มลลกรม วตามนบ 3 0.357 มลลกรม วตามนบ 5 0.191 มลลกรม

11

วตามนบ 6 0.038 มลลกรม วตามนบ 9 38 ไมโครกรม วตามนซ 62 มลลกรม วตามนอ 0.3 มลลกรม วตามนเค 2.6 ไมโครกรม และวตามนเอ 47 ไมโครกรม (กระทรวงเกษตร และสหกรณ, 2553; Krishna, Paridhavi, Patel, & Jagruti, 2008, pp. 364-373) 2. งานวจยทเกยวของกบการศกษาประโยชนทางชวภาพของมะละกอ การศกษาเกยวกบสรรพคณของสวนตาง ๆ ของมะละกอ ปรากฏวา สารสกดจากใบมะละกอสามารถทจะยบยงการเจรญเตบโตของเซลลมะเรง และมคณสมบตเสรมภมคมกน (Otsuki et al., 2010, pp. 760-767) นามนทสกดจากเมลดมะละกอมคณสมบตในการเปนสารตานอนมลอสระ และลดปรมาณโคเลสเตอรอลในหลอดเลอดสมอง นามะละกอมฤทธในการลดความดนโลหต ลดอตราการเตนของหวใจ และทาการปรบความตงตวของหลอดเลอด (Vascular Tone) (Eno, OwoOl, Itam, & Konya, 2000, pp. 235-239) สวนผวมะละกอสก (Epicarp Extract) มฤทธในการสงเสรมกระบวนการรกษาแผลเชนเดยวกน และสารสกดจากรากมะละกอมฤทธในการขบปสสาวะ (Gurung & Skalko, 2009, pp. 338-341; Sripanidkulchai, Wongpanich, Laupattarakasem, Suwansaksri, & Jirakulsomchok, 2001, pp. 185-190) การศกษาผลของการเตรยมมะละกอทผานการหมก (Fermented Papaya Preparation: FPP) ซงเปนสารทไดจากการหมกของยสตในมะละกอ ปรากฏวา มะละกอทผานการหมกมฤทธในการลดโปรตนทเปนสาเหตของการเกดโรคสมองเสอม (β-Amyloid Precursor Protein) ลดการสะสมของออกซเจนสปชส (Reactive Oxygen Species: ROS) ลดระดบของไขมนสะสมภายในเซลล (Lipid Peroxide) ลดการสะสมของไนตรกออกไซด (Nitric Oxide) ในเซลลยบยงกลไกการเกดความ เครยดจากอะพอพโตซส (Apoptosis Stress) (Zhang, Mori, Chen, & Zhao, 2006, pp. 63-72) นวต เทพาวราพฤกษ และคณะ (2554) ไดศกษาผลบารงระบบประสาทของมะมวง (Mangifera indica Linn.) มะละกอ (Carica Papaya Linn.) และนามะพราวออน (Cocos nucifera Linn.) ตอความจา และสมรรถภาพทางกายในหนขาว (Rats) จากการศกษา ปรากฏวา 1) ผลตอนาหนกตวเมอปอนมะมวงพนธนาดอกไมสก หรอ มะละกอพนธฮอลแลนด (Holland Papaya) สกใหหนขาวแกทกวน ๆ ละครงตดตอกนเปนระยะเวลานาน 3 เดอนไมทาใหหนขาวแกมนาหนกเพมขนแตหนขาวแกทไดรบนามะพราวออน ทกวนตดตอกนนาน 3 เดอนมนาหนกตวเพมขนเลกนอย 2) ผลการทดสอบสมรรถภาพทางกาย ไดแก การไตบนคานไมแรงยดเหนยวขององเทา และการทรงตวบนแกนหมน ปรากฏวา หลงจากหนแกไดรบผลไมทง 3 ชนดทกวนตดตอกนนาน 3 เดอน ไมไดมผลชวยเสรมสมรรถภาพทางกายใหดขนกวาในชวงกอนปอน 3) ผลการทดสอบความสามารถในการเรยนรและความจา ปรากฏวา หนแกทงสองเพศทไดรบมะมวงสก และหนแกเพศเมยทไดรบนามะพราวออนมความสามารถในการจาดานสถานททดขน และเฉพาะหนแกเพศผทไดรบมะมวงสกสามารถจดจาวตถสง ของไดดกวาหนแกกลมควบคมอยางมนยสาคญ 4) ผลของการปอนผลไมตอระดบเอนไซมตานอนมลอสระในสมองสวนฮปโปแคมปส (Hippocampus) ปรากฏวา ในหนแกทงสองเพศทไดรบมะมวงสกมการเพมการทางานของระดบเอนไซมดงกลาวสงขนอยางมนยสาคญเมอเปรยบเทยบกบหนแกกลมควบคม 5) ผลตอการเปลยนแปลงระดบสารสอประสาทชนดกรดอะมโนในสมองสวนฮปโปแคมปส ปรากฏวา มะมวงสกทาใหเพมระดบของกลตาเมท (Glutamate) ในสมองหนแกเพศเมย และมะละกอสกทาใหเพมระดบของกลตาเมท และกาบา (Gamma Amino Butyric Acid: GABA) ในสมองหนแกเพศเมย และนามะพราวออนทาใหระดบของกลตาเมท และกาบาในสมองหนแกทงสองเพศเพมขน

12

6) ผลตอจานวนเซลลประสาทในสมองสวนฮปโปแคมปส ปรากฏวา หนแกเพศผทไดรบมะมวงสกมจานวนเซลลประสาทพรามด (Pyramidal Neuron) มากกวาหนขาวแกกลมควบคม และในหนขาวแกเพศเมยทไดรบผลไมแตละชนดมการเพมจานวนเซลลประสาทพรามดมากกวาหนกลมควบคมหนแกเพศเมยทไดรบมะละกอสก หรอนามะพราวออนมการเพมจานวนเซลลประสาททเดนเทตไจรส (Dentate Gyrus) มากกวาหนขาวกลมควบคม 7) สาหรบผลการวเคราะหปรมาณสารตานอนมลอสระบางชนดในผลไมทงสามชนด ปรากฏวา มะมวงนาดอกไมสกมเบตาแคโรทน และ กรดแกลค (Gallic acid) มากทสด มะละกอพนธฮอลแลนดสกมวตามนซมากทสด และนามะพราวออนมคาเทชน (Catechin) และ กรดคาเฟอค (Caffeic Acid) มากทสด Kadry (2012) ไดศกษาการตานอนมลอสระ และการกระตนภมคมกนของสารสกดมะละกอดวยตวทาละลายนา โดยการเหนยวนาดวยอะครายลาไมด (Acrylamide) ใหเกดจากความเครยดออกซเดชน และการพฒนาการทางานของระบบภมคมกนทไดรบผลกระทบจากอนมลอสระทถกเหนยวนาดวย Acrylamide ในหนแรทผลการทดลอง ปรากฏวา Acrylamide เปนสาเหตของการเพมขนอยางมนยสาคญของ MDA และการลดลงของระดบ GSH, SOD และ CAT เนองจากความเครยดออกซเดชนทเกดจากการเหนยวนาโดย Acrylamide ในกรดไขมนไมอมตวในเยอหมเซลลในทองหน ตบ และ ไตใน ขณะทสารสกดมะละกอทาใหมการเพมขนอยางมนยสาคญในระดบของ MDA และการลดลงของ GSH, SOD และ CAT ในกระเพาะอาหาร เนอเยอตบ และ ไต ทเกดจากพษ Acrylamide ในการทางานของระบบภมคมกนสารสกดมะละกอมการเพมขนอยางมนยสาคญของ IgG และ IgM ในขณะท Acrylamide ลดลงอยางมนยสาคญ ดงนนการศกษาครงนแสดงใหเหนวา Acrylamide ททาใหเกดความเครยด ออกซเดชนในหนสามารถดขนโดยสารสกดจากมะละกอโดยใชนาเปนตวทาละลาย Sule, Elekwa, and Joeea (2012) ไดศกษาผลของใบมะละกอตอการเปลยนแปลงทาง โครงสราง (Morphology) และสารชวเคมในตบ (Biochemistry) ในหนขาว ปรากฏวา การตรวจสอบบทบาทของมะละกอเพอปองกนการเหนยวนาดวยคารบอนเตรตระคลอไรด (Carbon tetrachloride: CCl4) ททาใหเกดความเสยหายของเซลลตบ หนขาว 30 ตว ถกแบงเปน 6 กลม กลม 1 ถกเลยงดวยอาหารอยางเดยว และกลม 2, 3 และ 4 ไดรบสารสกดจากใบมะละกอรอยละ 10 รอยละ 30 และรอยละ 50 ตามลาดบ ทงกลม 1, 2, 3 และ 4 มการให CCl4 หนกลมท 5 และ 6 ไดรบสารสกดจากใบมะละกอรอยละ 30 และอาหารอยางเดยว ตามลาดบ และไมมการให CCl4 การเหนยวนา CCl4 จะทาในวนท 29 ของการศกษา (0.5 มลลลตรตอกโลกรมนาหนกตว ใน 0.5 มลลลตรในนามนมะกอก โดยการฉดเขาชอง ทองของหนทดลอง) หนขาวถกอดอาหาร 24 ชวโมง ในวนท 30 ทมการผาเพอศกษาเอนไซมของเซลลตบโดยการยอมส (ALT, AST, ALP, CPK และ LDH) ผลการทดลองนามาวเคราะหโดยใชสถตเชงอนมาน การวเคราะหความแปรปรวนมการเพมขนอยางมนยสาคญ (p<.05) ระดบของเอนไซมในซรม (ALT, AST, ALP, CPK และ LDH) ในหนทไดรบ CCl4 เมอเทยบกบกลมหนทไดรบสารสกดมะละกอ รอยละ 10, 30 และรอยละ 50 เมอเปรยบเทยบกบกลมทให CCl4 อยางเดยว อยางไรกตามมการลดลงอยางมนยสาคญ (p<.05) ระดบของ ALT, AST, ALP, CPK และ LDH ในหนทไดรบสารสกดมะละกอ รอยละ 10, 30 และ 50 เมอเทยบกบหนทไดรบ CCl4 อยางเดยว ในลกษณะทขนอยกบปรมาณของสารทไดรบ นาหนกตบลดลงอยางมนยสาคญ (p<.05) ในหนทไดรบ CCl4 เทานน แตมการเพมขนอยางมนยสาคญ (p<.05) ของนาหนกตบของหนทไดรบสารสกดมะละกอรอยละ 10, 30 และ 50 เมอเทยบกบหนทได รบ CCl4

13

Omotade et al. (2012) ไดศกษาศกยภาพของการตานอนมลอสระจากสารสกดผลมะละกอดบ ฤทธตานอนมลอสระของสารสกดมะละกอดบดวยตวทาละลายเอทลอะซเตท (Ethyl-acetate) และตวทาละลายนา นามาเปรยบเทยบ และตรวจสอบในหลอดทดลอง (in vitro) โดย การวเคราะหหาสารฟนอลรวม (Phenolic Compound) การประเมนผลของการขจด ROS เหลกไอออน และ DPPH ในไมโทคอนเดรย (Mitochondria) ทเซลลตบ ปรากฏวา สารสกดจากมะละกอดบมคณสมบตตานอนมลอสระสงมผลยบยง เหลกไอออน โซเดยมไนโตรเปอรออกไซด และลปดเปอรออกไซด ในเซลลตบ การสกดมะละกอดบดวย Ethyl-acetate และการสกดดวยนา ปรากฏวามฟนอลรวม 4.50 ± 2.26 และ 1.21 ± 3.12 มลลกรมตอกรมตามลาดบ สารสกดทงสองใหผลสงสดทความเขมขนตาสด (15 ไมโครกรมตอมลลลตร สกดดวย Ethyl-acetate และ 150 ไมโครกรมตอมลลลตร สกดดวยนา) การสกดดวย Ethyl-acetate แสดงใหเหนวา คาสงสดของสารตานอนมลอสระอาจจะเกยวของกบสาร ฟนอลทมปรมาณสง การขจดเหลกไอออน และ DPPH ดงนน จงสรปไดวาสารสกดมะละกอดวย Ethyl-acetate มฤทธยบยงลปดเปอรออกซเดชนในระดบทนอยกวามะละกอทสกดดวยนา จากหลายงานวจยขางตน แสดงใหเหนวา สวนตาง ๆ ของมะละกอมประโยชนตอรางกาย และระบบประสาท เชน สารสกดจากใบมะละกอ สามารถยบยงเซลลมะเรง เสรมภมคมกน บารงตบ สารสกดจากเมลดมะละกอ สามารถลดปรมาณโคเลสเตอรอลในหลอดเลอดสมอง รากมะละกอสามารถขบปสสาวะ มะละกอทผานการหมก สามารถลดโปรตนทเปนสาเหตภาวะสมองเสอมได และผลมะละกอสก สามารถตานอนมลอสระในรางกายได เนองจากมปรมาณสารตานอนมลอสระในปรมาณสง แตงานวจยททดสอบฤทธ แคโรทนอยดในมะละกอสกทมผลตอการปกปองระบบประสาททถกเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน ยงไมมใครศกษา ดงนนผวจยจงเลอกศกษาเพอนาจะเปนประโยชนในการใชเปนทางเลอก โดยเฉพาะผสงอาย และผปวยภาวะสมองเสอมระยะแรก ในการปกปอง และดแลผปวยภาวะสมองเสอมในอนาคต ตอนท 2 สารแคโรทนอยด (Carotenoids) แคโรทนอยด คอ สารมสทเปนสารพฤกษเคม (Phytochemicals) ทมคณสมบตเปนทงสารตานอนมลอสระ และสารตานมะเรงทมประสทธภาพ แคโรทนอยด มมากในผก และผลไมทมสสม เหลอง แดง และ เขยว ทาหนาทปกปองพชจากรงสอลตราไวโอเลต (Ultraviolet: UV) ในแสงแดด และสารกอมะเรงในสงแวดลอม ชวยปองกนการกอตวของอนมลอสระทเปนอนตราย ในปจจบนมการคน พบแคโรทนอยดถง 600 ชนด และประมาณ 50 ชนดพบไดในผก และผลไมทเรารบประทาน แคโรทนอยด 6 ชนดทกลายมาเปนสารตานอนมลอสระทมการศกษาเปนจานวนมาก คอ แอลฟาแคโรทน (α -Carotene) เบตาแคโรทน (β-Carotene) ครบโตแซนทน (Cryptoxanthin) ไลโคปน (Lycopene) ลทน (Lutein) และ ซแซนทน (Zeaxanthin) 1. ชนดและสตรโครงสรางของแคโรทนอยดทพบไดบอย 1.1 แอลฟาแคโรทน (α -Carotene) รางกายสามารถเปลยนแปลงเปน วตามนเอ เพอนาไป ใชได มการศกษา แครอท และ ฟกทอง มสารแอลฟาแคโรทนสามารถลดขนาดของเนองอกในสตวไดชดเจน และยงมประสทธภาพมากกวา เบตาแคโรทน ถง 10 เทา ในการปกปองผว ดวงตา ตบ และ เนอเยอปอด จากการถกทาลายโดยอนมลอสระ

14

1.2 เบตาแคโรทน (β-Carotene) ไดจากผกทมสสนสดใส เชน บรอกโคล แคนตาลป ฟกทอง แครอท มะมวง มะละกอ พช มนเทศ และ ผกขม เบตาแคโรทนถกเปลยนเปนวตามนเอไดในยามทรางกายตองการ และสวนทไมถกเปลยนเปนวตามนเอ จะทาหนาทเปนสารตานอนมลอสระมการศกษา ปรากฏวา เบตาแคโรทนมบทบาทสาคญในการปองกนมะเรง โดยยบยงสารสรางอนมลอสระ และยงชวยเสรมสรางความแขงแรงของระบบภมคมกนลดความเสยงของการเกดโรคหลอดเลอดแดงแขง กลามเนอหวใจตายเฉยบพลน เสนโลหตในสมองตบ และยงชวยปองกนโรคตอกระจกไดอกดวย 1.3 ครบโตแซนทน (Cryptoxanthin) มมากใน ลกพช มะละกอ และ สม ครบโตแซนทนมการศกษาในเลอดของผหญงทเปนมะเรงปากมดลกกบผหญงทไมไดเปนมะเรงปากมดลก ปรากฏวา ผหญงทไมเปนมะเรงมระดบของครบโตแซนทนในเลอดสงอยางมนยสาคญ 1.4 ไลโคปน (Lycopene) เปนสารททาให มะเขอเทศ แตงโม องน และผลไมอกหลายชนด มสแดง ไลโคปนไมมคณสมบตเปน โปรวตามนเอ (Provitamin A) หมายถง รางกายของเราไมสามารถเปลยนใหเปนวตามนเอได ไลโคปนมความสามารถในการตานอนมลอสระสง ชวยยบยงเซลลมะเรงหลายชนด เชน มะเรงตอมลกหมากในผชาย ชวยปกปองเราจากสารกอมะเรงจากควนบหร และตานอนมลอสระจากรงสยว (UV) ในแสงแดด จากงานวจยในปจจบน ปรากฏวา ไลโคปนยงชวยปองกนการเกดโรคหวใจได 1.5 ลทน (Lutein) มมากใน ผกขม กะหลาใบ และ ดอกดาวเรอง ไมมคณสมบตเปน โปรวตามนเอ เหมอนไลโคปนแตมคณสมบตเปนสารตานอนมลอสระ โดยเฉพาะอยางยงในการปกปองดวงตา ปรากฏวา ลทนชวยจดการกบอนมลอสระทเกดจากรงสยว (UV) ทเปนอนตรายตอดวงตา และ ชวยชะลอการเสอมของศนยกลางจอประสาทตาอนเปนสาเหตอนดบหนงของการตาบอดในผทมอาย 65 ปขนไป 1.6 ซแซนทน (Zeaxanthin) เชนเดยวกบ ลทน แคโรทนอยดชนดนชวยปกปองดวงตาจากโรคจอประสาทตาเสอม เนองจากถกอนมลอสระทาลาย ซแซนทนยงชวยปองกนมะเรงอกหลายชนด ชวยลดการเจรญเตบโตของเซลลเนอราย ซแซนทนมมากใน ผกขม และ กระเจยบเขยว (ไมตร สทธจตต และคณะ, 2555, หนา 17-39; Krinsky & Johnson, 2005, pp. 459-516; Rao & Rao, 2007, pp. 207-216)

15

ภาพท 3 สตรโครงสรางแคโรทนอยดทพบบอยในพช (เขาถงไดจาก :http://www.foodnetworksolution.com/wiki/word/1228/ carotenoid)

ภาพท 4 แสดงการเปลยน บตา-แคโรทน (β-carotene) ไปเปนวตามนเอ (Retinol) ภายในรางกาย (เขาถงไดจาก: http://katrixa.blogspot.com/2011/04/vitamin.html)

16

2. งานวจยทเกยวของกบการศกษาฤทธของสารแคโรทนอยด วระศกด สาม (2548) ไดศกษาโครงสรางทางเคม และกลไกของแคโรทนอยดทมผลตอ การทาหนาทของรางกายจากผลการศกษา ปรากฏวา แคโรทนอยดเปนสารธรรมชาตทพบอยทวไปใน พช ผก ผลไม และ จลชพ รางกายมนษยไมสามารถสรางแคโรทนอยดได แตมความจาเปนทจะใชในรางกายมนษย จากการศกษาแสดงใหเหนวาแคโรทนอยดมความสาคญตอสขภาพ โดยชวยลดความ เสยงในการเกดโรคเรอรงตาง ๆ เชน โรคมะเรง และ โรคหวใจ การรบประทานอาหารทมองคประกอบของแคโรทนอยดจงชวยสรางเสรมสขภาพของมนษยได พฒนยา ปรางทพย, เอมอร วสนตวสทธ และแฮรอลด ซ เฟอร (2553) ไดศกษา แคโรทนอยด โพรวตามนเอ ฤทธในการตานอนมลอสระ และประโยชนเชงสขภาพ ปรากฏวา แคโรทนอยดเปนสารสกลมโพล-ไอโซพรนอยดทมมากในพช มบทบาทเปนสารตงตนของเรตนอล หรอโพรวตามนเอในรางกาย สกญญา เขยวสะอาด (2555) ไดศกษากะเพรากบการตานอนมลอสระ ปรากฏวา อนมลอสระ เกดจากปจจยทงภายในรางกาย และจากสงแวดลอมซงเปนสาเหตหลกของการเกดโรครายตาง ๆ เชน โรคมะเรง โรคหวใจ โรคความดนโลหตสง โรคเบาหวาน โรครมาตอยด และ โรคภาวะชรา เปนตน ผก ผลไม และ พชสมนไพร สวนใหญเปนแหลงสาคญของสารตานอนมลอสระในธรรมชาต กะเพราเปนผกสวนครว ทนยมนามาปรงอาหาร และมสรรพคณทางยาใชรกษาโรคหลายชนดกะเพราเปนแหลงของวตามนซ เบตาแคโรทน และ สารประกอบฟนอลก รวมถงสารฟลาโวนอยดหลายชนด ซงเปนททราบกนดวาสารเหลานมบทบาทสาคญในการตานอนมลอสระ ปจจบนมนกวจยหลายกลมรายงานถงฤทธตานอนมลอสระของกะเพรา ดงนน กะเพราจงเปนพชทนาสนใจในการปองกนอนมลอสระ และยงมประโยชนตอรางกายในการเปนอาหารเพอสขภาพ Marcela et al., (2012) ไดศกษาผลของแคโรทนอยดจากสารสกดพรกไทย (Piper nigrum) แหง ตอการตานอนมลอสระ ตานความเจบปวด และ ตานการอกเสบ จากผลการศกษา ปรากฏวา พรกไทยแหงมแคโรทนอยด Guajillo 3,406 ± 4 ไมโครกรมตอกรม Pasilla 2,933 ± 1 ไมโครกรมตอกรม และ Ancho 1,437 ± 6 ไมโครกรมตอกรมของนาหนกแหงของพรกไทย การวเคราะหโดย ทนเลเยอรโครมาโตกราฟ (Thin Layer Chromatography: TLC) แสดงใหเหนรงควตถคลอโรฟลล Pasilla และ Ancho ในสารสกดจากพรกไทยแหง แคโรทนอยดทไดจากพรกไทยแหงมฤทธตานอนมลอสระทด และมความสามารถในการขบ DPPH+ (รอยละ 24.2) ดทสด และสารสกดพรกไทยแหง แสดงใหเหนฤทธเปนยาแกปวดอยางมนยสาคญท 5, 20 และ 80 มลลกรมตอกโลกรม และเกดความรสกเจบ ปวดท 80 มลลกรมตอกโลกรม ผลทไดชใหเหนวาแคโรทนอยดในพรกไทยแหง Guajillo มประโยชนตอการใชเปนยาแกปวด และตานการอกเสบอยางมนยสาคญ จากหลายงานวจยขางตน แสดงใหเหนวา สารแคโรทนอยดมประโยชนในเชงสขภาพ โดยชวย ลดความเสยงในการเกดโรคตาง ๆ เชน โรคมะเรง โรคหวใจ โรคภาวะชรา โรคทเกยวกบระบบประสาท และโรคทเกดจากอนมลอสระไมสมดลในรางกาย เปนตน โดยกลไกหลกของแคโรทนอยด คอ การเปนสารตานอนมลอสระทสาคญในธรรมชาต แหลงทพบของแคโรทนอยดทสาคญมาจาก ผก และผลไมทมส

17

ตอนท 3 ภาวะเครยดออกซเดชน (Oxidation Stress) ภาวะเครยดออกซเดชน (Oxidation Stress) เปนภาวะทรางกายมการเสยสมดลของอนมลอสระ และ สารตานอนมลอสระ โดยมอนมลอสระมากเกนกวาทรางกายจะสามารถทาลายไดหรอ เมแทบอลซม (Metabolism) ของอนมลอสระกลมออกซเจนลดลง (Briones & Touyz, 2010, p. 135) เมอรางกายเกดภาวะเครยดออกซเดชนจะสงผลใหเกดการทาลายดเอนเอ โปรตน ไขมน และโมเลกลอน ๆ โดยเฉพาะเปนสาเหตของการเกดโรค และพยาธสภาพ เชน การอกเสบ (Inflammation) กระบวน การชราภาพ (Aging Process) โรคทเกยวของกบความเสอม (Degenerative Disease) เชน ความดนโลหตสง (Hypertension) ภาวะสมองขาดเลอด (Cerbral Ischemia) โรคอลซลเมอร (Alzheimer’s Disease) โรคพารกนสน (Parkinson’s Disease) โรคมะเรง (Cancer) โรคทางระบบภมคมกน (Immune’s Diseases) โรคตา (Eye Diseases) เปนตน ภาวะเครยดออกซเดชนไมใชโรค แตเปนผล กระทบไมพงประสงคของความสมดลทางชวเคม ผลกระทบของภาวะดงกลาวเปนพนฐานของการเกดโรคมากมาย การลด หรอการปองกนภาวะเครยดออกซเดชนโดยการลดสาร หรอสงทจะทาใหเกดอนมลอสระ และการเพมสารตอตานอนมลอสระเปนประจาจะปองกนการเกดโรคได (Regano et al., 2008, pp. 149-162) 1. สารตานอนมลอสระ (Antioxidants) สารตานอนมลอสระ คอ สารทสามารถปองกน หรอทาลายการเกดปฏกรยาออกซเดชนของอนมลอสระทกอตวขน โดยการยบยงปฏกรยาลกโซของอนมลอสระ หยดการกอตวใหมของอนมลอสระ และชวยซอมแซมความเสยหายทเกดจากตวอนมลอสระทไปทาลายเซลลตาง ๆ ในรางกาย รวมทงแทนทโมเลกลทถกทาลาย (Halliwell, 2009, pp. 531-542) แหลงทมาของสารตานอนมลอสระทสาคญไดจากผก ผลไม ไดรบความสนใจ และศกษาวจยอยางเปนระบบในกลไกการปองกนการเกดภาวะเครยออกซเดชน จากสารสกดธรรมชาต (Natural Antioxidants Extract) ทมากกวาสารตานอนมลอสระทถกสงเคราะหขน สารตานอนมลอสระเหลานปรากฏไดทงในจลชพสตว และ พช ซงมทงทเปนวตามน เชน วตามนซ วตามนอ เบตาแคโรทน และสารทไมใหคณคาทางโภชนาการ (Non-Nutrient) ซงมโครงสรางเปนสาร ประกอบฟนอลลค (Phenolic Compounds) โดยเฉพาะกลมสารประกอบโพลฟนอล (Polyphenols Compounds) และสารประกอบกลมแคโรทนอยด (Carotenoids Compounds) สารเหลานมบทบาทสาคญในการดกจบอนมลอสระไมใหไปกระตน หรอกอใหเกดปฏกรยาออกซเดชนไดโดยการใหอนมลไฮโดรเจน (H•) แกอนมลอสระเหลานน (Sanchez, Jimenez, & Saura, 2000, pp. 941-953) 2. กลไกการท างานของสารตานอนมลอสระ จากรายงานวจยมกลไกการทางานของสารตานอนมลอสระ คอ ดกจบอนมลอสระ (Radical Scavenging) สารตานอนมลอสระสามารถยบยงอนมลอสระไดโดยการทาใหโมเลกลของอนมลอสระมความเสถยรขน ซงกลไกของปฏกรยาเกดโดยการใหไฮโดรเจน หรออเลกตรอนแกอนมลอสระ (Valacchi et al., 2004, pp. 673-681) ดงสมการ R• + AH -------------> RH + A• RO• + AH -------------> ROH + A• R• + A• -------------> RA RO• + A• --------------> ROA

18

ยบยงการทางานของซงเกลทออกซเจน (Singlet Oxygen Quenching: 1O2*) สารกลม

แคโรทนอยด (Carotenoids) สามารถยบยงการทางานของซงเกลทออกซเจนโดยการเปลยน (1O2*) ใหอยในรปทรปเปรท (Triplet Oxygen: 3O2

*) และปลอยพลงงานทไดรบออกไปในรปความรอน โดยท แคโรทนอยด (Car) จานวน 1 โมเลกลสามารถทาปฏกรยากบซงเกลทออกซเจนไดถง 1,000 โมเลกล (Sies, Stahl, & Sundquist, 1992, pp. 7-19) 1O•

2 + 1Car -------------> 3O2 + 3Car• 3Car• -------------> 1Car + thermal energy 3. อนมลอสระ (Free Radicals หรอ Oxidants) อนมลอสระ (Free Radicals หรอ Oxidants) คอ โมเลกล (Molecule) หรอ อะตอม (Atom) ทมอเลกตรอนทไมมค หรอ อเลกตรอนคโดดเดยว (Unpaired Electron) มความไมเสถยร (Unstable) วองไวมาก (Reactive) (Halliwell, 2009, pp. 531-542) สามารถเกดปฏกรยากบอะตอม หรอโมเลกลอนไดงายเปนสาเหตของการทาลาย หรอภาวะบาดเจบในเซลลรางกายในลกษณะปฏกรยาลกโซสามารถเขาทากบสารชวโมเลกลตาง ๆ ทอยรอบขางในทนททถกสรางขน กอเกดความเสยหายแกเซลลตาง ๆ ในรางกาย เชน การทาลายโครงสรางดเอนเอ (Destruction of DNA Structure) การเปลยนสภาพโปรตน (Protein Denaturation) และเกดการเสยหายทโมเลกลไขมน (Lipid Peroxidation) เปนตน 4. แหลงก าเนดอนมลอสระ (Sources of Free Radical) พบไดทกแหงทงในสงแวดลอมและในสงมชวต โดยทวไปรางกายของสงมชวตสามารถเปลยนออกซเจนไปเปนสารอนมลออกซล (Oxyl Radicals) และ ออกซเจนสปชส (Reactive Oxygen Species: ROS) ทเปนอนตรายตอรางกายมากกวาออกซเจนในเซลลรางกายจะมอนมลอสระของออกซเจนเกดขน อยตลอดเวลาการเกดอนมลอสระเหลาน มสาเหตมาจากปจจยทงภายในและภายนอกรางกายดงน 4.1 ปจจยภายในรางกาย 4.1.1 การผลตพลงงานจากไมโทคอนเดรย (Mitochondria) ซงเปนศนยกลางการผลตสารตาง ๆ ใหแกเซลลในรางกายโดยปกตในไมโตคอนเดรยมสารตานอนมลอสระททาลายอนมลอสระซปเปอรออกไซด (O2

.) แตกจะมบางตวหลดจากการทาลาย และเปนอนตรายตอเซลล ความเรวของ การเกดภาวะชราภาพ (Aging Process) จะแปลผนตามการเกดกระบวนการเมแทบอลซมของรางกาย เมอใชออกซเจนในการเผาผลาญกลโคสมากขน จะทาใหเกดอนมลอสระ และ ROS ทเปนสารพษมากขนดวย 4.1.2 การผลตอนมลอสระในระบบภมคมกน เมอจลชพ (Microbes) เชน แบคทเรยหรอไวรสเขาสรางกายเซลลในระบบภมคมกนจะเขาทาหนาท สรางอนมลอสระ และ ROS ทาใหสามารถทา ลายจลชพเหลานได 4.1.3 ภาวะเครยด และภาวะเครยดออกซเดชน (Stress and Oxidative Stress) เปนภาวะทเกดจากความไมสมดลของอนมลอสระ และสารตานอนมลอสระโดยเมอรางกายสรางอนมลอสระมากกวาสารตานอนมลอสระ จะสงผลเสยตอสารชวโมเลกลในรางกาย กลาวคอ มผลตอโปรตน ทาใหเกดครอสลงคของกรดอะมโนซสเตอน (Cysteine) สรางเปนพนธะไดซลไฟดมผลตอไขมนทาใหเกดเปอรออกไซดของไขมน และมผลตอดเอนเอ ทาใหเกดกรดนวคลอคแอดดกสขนกอใหเกดการกลายพนธ

19

(Gene mutation) สารพนธกรรมมการเปลยนแปลง เหนยวนาใหเกดการแสดงออกเปนโรงมะเรงได ภมตานทานลดลง เกดโรคเสอม (Degenerative Disease) เกดกระบวนการชราภาพ (Aging) และนาไปสการตายของเซลล (Neuronal Death) ในทสด (ไมตร สทธจตต และคณะ, 2555, หนา 17-39) 4.2 ปจจยภายนอกรางกาย 4.2.1 ยารกษาโรค ยาบางชนดทรบประทานเขาไปรางกายสามารถกอใหเกด อนมลอสระได โดยเฉพาะอยางยงยาในกลมตานจลชพ และ ตานมะเรง เชน บลโอไมซน (Bleomycin) แอนทราไซลนส (Antracyclines) (Voest, Vreugdenhil, & Marx, 1994, pp. 490-499) และ เมโธทรเสต (Methotrexate) (Gressier, Lebegue, & Brunet, 1994, pp. 679-681)

4.2.2 รงส เชน รงสแมเหลกไฟฟา (Electromagnetic Radiation) แสงจากอลตราไวโอเลตจากแสงอาทตย (Ultraviolet) รงสเอกซเรย และ รงสรกษา (ใชรกษาโรคมะเรง) เปนสาเหตทาใหเกดอนมลอสระขนในรางกายทาใหเปนพษตอเซลลในรางกาย (ไมตร สทธจตต และคณะ, 2555, หนา 17-39) 4.2.3 ควนบหร มสวนประกอบของไนตรกออกไซด (NO) ไนโตรเจนออกไซด (NO2) และ เพอรอกซไนไตรท (ONOO-) รวมทงสารมลพษไดแก ซลเฟอรไดออกไซด (SO2) และคารบอนเตรตระคลอไรด (CCl4) ซงจะถกกาจดออกจากรางกายโดยการทางานของเอนไซมไซโทโครม P-450 ไฮดรอกซเลส (Cytochrome P-450 Hydroxylase) ทมอยมากในเซลลตบ และพบไดบางในเซลลปอด และ ลาไสเลก ทาใหเปนสาเหตของการสรางอนมลซเปอรออกไซดภายในเซลลดงกลาว (Bast, Haeren, & Doelmen, 1991, pp. 2-13) 4.2.4 โอโซน โอโซนไมไดเปนอนมลอสระแตจดเปนสารออกซไดสแรงสงซงสามารถเปลยนรปเปนอนมลไฮดรอกซลไดจากการกระตนของคลนแสง (Valacchi et al., 2004, pp. 673-681) 5. งานวจยทเกยวของกบอนมลอสระและสารตานอนมลอสระ นนทยา สมภาร, จรญญาพร เนาวบตร, ศภเกต แสนทวสข และอจฉราพร แถวหมอ (2556) ไดศกษาฤทธตานอนมลอสระของสารสกดผกแพว (Polygonum odoratum Lour.) ในหลอดทดลอง และในรางกายของหนแรท ปรากฏวา ผกแพวมฤทธตานอนมลอสระทด และมสารตานอนมลอสระมากมายเปนสวนประกอบ วตถประสงคเพอศกษาฤทธตานอนมลอสระ และผลตอระดบสารตานอนมลอสระของสารสกดผกแพวซงเปนผกสมนไพรพนบานทพบในแถบเอเชยตะวนออกเฉยงใต ผลการศกษาฤทธตานอนมลอสระดวยวธ DPPH ปรากฏวา สารสกดผกแพวมคา EC50 เทากบ 50.25 ± 0.61 มลลกรมตอมลลลตร ในขณะท Vitamin E และ Butylatedhydroxytoluene (BHT) มคา EC50 เทากบ 14.79 ± 0.78 และ 19.71 ± 0.79 มลลกรมตอมลลลตร ตามลาดบ ทงนไมพบการเปลยนแปลงของลกษณะทางจลกายวภาคศาสตรของตบ ไต และการวดระดบเอนไซม AST, ALT และ Cr ในซรมของสตวทดลองไมเปลยนแปลง แสดงใหเหนวา สารสกดผกแพวไมเปนพษตอตบ และไตของสตวทดลอง นอกจากนสารสกดผกแพวขนาดสง (800 มลลกรมตอกโลกรมนาหนกตวตอวน) สามารถกระตนการแสดงออกของยน และโปรตนทเกยวของกบการสรางสารตานอนมลอสระทสาคญในรางกาย คอ Heme Oxygenase (HO-1) และ γ-glutamylcysteine ligase (γ-GCL) ไดอยางมนยสาคญทางสถต การไดรบสารสกดผกแพวนาจะมประโยชนในการเพมระดบสารตานอนมลอสระในรางกาย

20

อยางไรกตามจาเปนตองมการศกษาถงผลของการไดรบสารสกดในระยะยาว และการศกษาดานพษวทยาเพมเตม มงคล คงเสน, อจฉรา นยมเดชา, วาฟาอ หาญณรงค และพนม สขจนทร (2556) ไดศกษาการรวบรวมคณสมบต และประโยชนของตนลกใตใบ (Phyllanthus niruri L.) ปรากฏวา ตนลกใตใบเปนวชพชสมนไพรทมคณคาอยางยง มสารทเปนประโยชน เชน ไกลโคไซด ซาโพนน ฟลาโวนอยด อลคาลอยด แทนนน และ ลกแนน เปนตน มฤทธตานไวรสตบอกเสบ ยบยงเชอเอดส ตานเชอไวรส ลดการอกเสบ ยบยงการเกดอนมลอสระ ลดการเกดแผลในกระเพาะอาหาร แก อาการทองเสย ตานเนองอก มะเรง การกอกลายพนธ คมกาเนด และปองกนพษจากพาราเซตามอนได ตนลกใตใบเปนสมนไพรทมสารสกดทมคณคา และประโยชนตอรางกายในดานการปองกนโรค และสามารถนามาประยกตใชในสตวได จราภรณ นคมทศน (2556) ไดศกษาการตานอนมลอสระ และปรมาณฟนอลคของผกพนบานบางชนดในอาเภอลบแล จงหวดอตรดตถ วตถประสงคเพอศกษาการตานอนมลอสระ และตรวจสอบปรมาณสารฟนอลคจากยอดผกหนาม (Lasia spinosa ) ตม และ ใบขงแมงดา (Zingiber kerrii Craib) สด และ ตม ในอาเภอลบแล จงหวดอตรดตถ ผกพนบานถกนามาวเคราะหสารตานอนมลอสระ 3 วธ ไดแก 1,1-Diphenyl-2-Picrylhydrazyl scavenging assay (DPPH Method), 2, 2’-Azino-Bis (3-Methylbenzothiazoline-6-sulphonic acid) scavenging assay (ABTS Method) และ Ferric Reducing Antioxidant Power (FRAP Method) จากนนตรวจสอบปรมาณฟนอลคในผกพนบานโดยวธ Folin-Ciocalteu Colorimetric Method (FCR) ปรากฏวา ในขงแมงดาสดมการตานอนมลอสระดทสด โดยการตานอนมลอสระเทากบ 0.074 ± 0.02 mg gallic acid/ ml, 0.459 ± 0.03 mg Trolox / ml และ 5.898 ± 0.04 mg FeSO4 / ml ตามลาดบ ขณะทใบขงแมงดาตม แสดงการตานอนมลอสระสอดคลองกบการตานอนมลอสระ ดงนนพชทบรโภคสดจงจะมระดบของสารตานอนมลอสระสงกวา จากหลายงานวจยขางตน แสดงใหเหนวา สารตานอนมลอสระทไดจากธรรมชาต เชน แคโรทนอยด ไกลโคไซด ซาโพนน ฟลาโวนอยด อลคาลอยด แทนนน และ ลกแนน เปนตน ลวนไดจากธรรมชาต โดยเฉพาะ ผก และ ผลไม สารตานอนมลอสระเหลานมฤทธในการตานอนมลอสระทมความสาคญตอรางกาย ทาใหระดบของสารสอประสาททสาคญในรางกายเพม และทา งานไดอยางมประสทธภาพ ทาใหเปนการปองกนโรคตาง ๆ ทเกดจากการทาลายจากอนมลอสระได ตอนท 4 ภาวะสมองเสอม (Dementia) ภาวะสมองเสอม (Dementia) หมายถง กลมอาการเรอรงทางระบบประสาท และจตเวชทเกดจากความผดปกตของเปลอกสมอง (Cerebral Cortex) หรอวถประสาททเกยวของอยางตอเนองเปนมากขนเรอย ๆ ทาใหเกดความผดปกตทางดานสตปญญา ความคด ความจาบกพรองหลงลมทงความจาระยะสน และ ระยะยาว การตดสนใจผดพลาด ความคดทางนามธรรมผดไป มปญหาในการพดซาคาเดม ไมเขาใจคาพด ไมสามารถปฏบตงานตาง ๆ ในชวตประจาวนมความสบสนในเรองของเวลา สถานท บคคลมความผดปกตทางจต และพฤตกรรมโดยทผปวยมสตสมปชญญะสมบรณ และไมใชภาวะทเปน

21

แตกาเนด (อรวรรณ ศลปะกจ, 2556, หนา 34-47) อาการเรมแรกทจะเปลยนแปลงไปเปนภาวะสมองเสอม คอ ภาวะสมองเสอมระยะแรก (Mild Cognitive Impairment: MCI) โดยทวไปในการศกษาพยาธกาเนด (Pathogenesis) ของการเกดภาวะสมองเสอมสามารถศกษาทเกดขนไดในแบบจาลองในสตว ทดลอง 1. ภาวะสมองเสอมระยะแรก (Mild Cognitive Impairment: MCI) ภาวะสมองเสอมระยะแรก (Mild Cognitive Impairment) เปนภาวะทอยระหวางการหลง ลมปกตของผสงอาย (Normal Aging) กบภาวะสมองเสอม (Dementia ) ชนดอลไซเมอร (Alzheimer’s) MCI เกดจากการเสอมของเซลลประสาทในสมอง (Neurodegeneration) โดยเฉพาะสมองสวน ฮบโปแคมปส (Hippocampus) ททาหนาทเกยวกบกระบวนการรคด (Cognitive Function) ซงมสวนเกยวของกบความสามารถดานการเรยนร (Learning) ความจา (Memory) การคด (Thinking) การรบร (Perception) ความสนใจ (Attention) จนตภาพ (Imagery) และ ภาษา (Language) ไดลดลงไป โดย เฉพาะเรองความจาหลกทเรยกวา ภาวะการสญเสยความสามารถของสมองดานความจาเลกนอย (Amnestic Mild Cognitive Impairment–Amnestic MCI) ซงญาต หรอแพทยผดแลสามารถบอกไดวามจรง จากการทบทวนเอกสาร และรายงานการศกษาทเกยวของกบโรคอลไซเมอร ปรากฏวา ลกษณะการดาเนนเขาสโรคอลไซเมอรเรมจากภาวะการสญเสยความสามารถของสมองดานความจาเลก นอยรวมกบพฤตกรรมบกพรองอนเกดจากความผดปกตจากการทางานของสมอง ซงพฤตกรรมดงกลาวเรมกระทบตอการใชชวตประจาวน แตยงสามารถดาเนนกจกรรมในชวตไดอยในเกณฑปกต (อรรถสทธ เวชชาชวะ, 2550, หนา 543-552; Chertkow et al., 2008, pp. 1273-1285) ลกษณะของ MCI อาจจาแนกได 3 ลกษณะดงน (Artero et al., 2006, p. 467) 1.1 ลกษณะแรก ภาวะการสญเสยความสามารถทางสมองทเกดจากความบกพรองดานความจา (Amnestic MCI) โดยในระยะนจะเกดขนกบการบกพรองในดานความจาเปนหลกในผสงอายทมลกษณะหลงลม และคลายคลงกบผสงอายปกตทวไป (Normal Aging) มการบกพรองในเรองความจาทมการเปลยนแปลงไปสภาวะสมองเสอมชนดโรคอลไซเมอรได แตการเปลยนแปลงดงกลาว อาจจะไมเปนทกรายขนอยกบ อาย และ การศกษา 1.2 ลกษณะทสอง ภาวะการสญเสยความสามารถทางสมองทเกดจากความบกพรองทางสมองหลายดาน (Multiple Domain Slightly Impairment MCI) เกดจากการบกพรองหลายชนดไมวาจะเปนการบกพรองในดานความคด หรอความสนใจตาง ๆ โดยพฤตกรรม และอาการทแสดงออกอาจจะเปนผสงอายทมภาวะปกตกได หรออาจจะเปลยนแปลงไปเปนภาวะสมองเสอมทเกดจากความผดปกตของหลอดเลอด (Vascular Dementia) และเกดพฤตกรรมทรนแรงเพมมากขน ในโรคดงกลาวนน สามารถเปลยนแปลงเขาสการเปนโรคอลไซเมอรไดเชนเดยวกน 1.3 ลกษณะทสาม ภาวะการสญเสยความสามารถทางสมองทเกดจากความบกพรองทมสาเหตเดยวซงไมใชความจา (Single Non-memory Domain MCI) เปนการบกพรองทมลกษณะ เฉพาะในการเกดโรคชนดตาง ๆ เชน โรคสมองเสอมจากหลอดเลอดในสมองอดตน (Vascular Dementia) โรคพารกนสน (Parkinson’s Disease) สมองเสอม 2 กลบ (Fronto-Temporal Dementia) ซงโรคทมการขาดสารโดปามน (Dopamine) ในเซลลประสาทททาหนาทควบคมระบบการเคลอนไหวของรางกาย ทาใหเกดพฤตกรรม และอาการทมการผดปกต

22

2. สาเหตทส าคญของการเกดภาวะสมองเสอมระยะแรก 2.1 เกดจากการเสอมสลายของเนอเยอสมอง เนองจากเนอเยอสมองมการเสอมสลาย หรอ ตาย สวนใหญยงไมทราบสาเหตปรากฏบอยในกลม โรคอลไซเมอร โรคพารกนสน และโรคอน ๆ 2.2 เกดจากหลอดเลอดสมอง เนองจากหลอดเลอดทไปเลยงสมองหนาตว แขงตว หรอมการบบตวผดปกตสงผลใหปรมาณเลอดทไปเลยงสมองลดลง ถาลดลงมากถงระดบทไมเพยงพอกบ การใชงานของสมองกจะทาใหเนอเยอสมองตายไปผปวยทมแนวโนมวาจะมหลอดเลอดสมองตบผดปกตมกจะอยในกลมทมความดนโลหตสง เบาหวาน ผทมระดบไขมนโคเลสเตอรอล (Cholesterol) สง หรอผทสบบหร 2.3 เกดจากการตดเชอในเนอเยอสมอง เชอไวรสหลายชนดทาใหเกด การอกเสบในเนอ เยอสมอง เชน ไวรสสมองอกเสบทเกดจากไวรสชนดหนงทอยในหม โดยมยงเปนพาหะนาโรคผปวยจะมไขสง และไวรสขนสมองผปวยอาจเสยชวต หรอรอดชวตแตมการเกดความเสยหายของเนอเยอสมองทาใหเนอเยอสมองบางสวนตายสงผลใหเกดอาการสมองเสอมตามมาได 2.4 เกดจากการขาดสารอาหารบางชนด โดยเฉพาะวตามน เชน วตามนบ 1 บ 12 ผท ขาดวตามนบ 1 มกปรากฏในผปวยทตดเหลา หรอ โรคพษสราเรอรง เมอไดรบวตามนบ 1 ไมเพยงพอทาใหเซลลประสาททางานไมไดตามปกต หรออาจถงขนเซลลประสาทตายไป วตามนบ 12 จะไดจากนาปลา หรอ อาหารจากเนอสตว ผปวยทขาดวตามนบ 12 มกปรากฏในผทกนมงสวรตอยางเครงครด และอาจพบในผปวยทไดรบการผาตดกระเพาะอาหาร และลาไสเลกสวนตนซงเปนสวนทดดซมวตามนบ 12 เขาสระบบรางกาย 2.5 เกดจากการแปรเปลยนของระบบเมตาบอลกของรางกาย เชน การทางานของตอม ไรทอบางชนดผดปกต ทาใหเกดของเสยคงในรางกายสงผลใหสมองไมสามารถสงการไดตามปกต 2.6 เกดจากการไดรบบาดเจบทศรษะ (Head Injury) (กรมสขภาพจต กระทรวงสาธารณสข, 2552) 3. การปองกนภาวะสมองเสอม (Dementia Prevention) การปองกนภาวะสมองเสอมมดวยกนหลายวธ ในงานวจยนเนนการปกปองสมองเสอมจากอาหารทมสารบารงสมอง โดยเฉพาะ ผก ผลไม ทมสารตานอนมลอสระ สมองตองการสารอาหารทง 5 หม ไมวาจะเปน คารโบไฮเดรต โปรตน ไขมน วตามน และ เกลอแร ยกตวอยาง ผกผลไม และ อาหาร ทมสารสาคญทมสวนชวยปกปองระบบประสาท ไดแก 3.1 ผลไมรสเปรยวตระกลเบอรรซงมสารสาคญ คอ แอนไทโอไซยานน (Anthocyanins) ไดแก บลเบอร สตรอวเบอร เชอร จะชวยเสรม สขภาพสมอง ระบบหมนเวยนเลอดไปเลยงสมอง ชวยลดความดนโลหตทสงใหสมดล มวตามน และสารตานอนมลอสระสง ชวยเพมความสามารถในการคด และ ระดบสตปญญา (Intelligence Quotient: IQ) ได ทงยงปองกนการสญเสยความจาระยะสน ชวยเพมจานวนเซลลประสาทในฮปโปแคมปส ททาหนาทรบผดชอบโดยตรงตอความทรงจา โดยเฉพาะ บลเบอรรสดดตอความจาระยะยาวมากทสด (Plantinga et al., 2007, pp. 392-397) 3.2 ผกโขม (Amaranthus lividus L.) ชวยลดอาการความจาเสอมโดยเฉพาะในผหญง มการศกษาวจย ปรากฏวา หญงวยกลางคนทรบประทานผกโขมรวมกบผกใบเขยวชนดอน ๆ เปนประจา ชวยลดอาการความจาเสอมไดถง 2 ป ผกโขมมเอนไซมทดตอความแขงแรงของปลายเซลล

23

ประสาท และเสรมความแขงแรงตวรบสงขอมลระหวางเซลลประสาท ทงยงมกรดโฟลกสงทดตอการจาชวยรกษาสมดลของนาในรางกาย 3.3 ไข ชวยพฒนาระบบการทางานของสมอง โดยสารโคลน (Choline) ในไขไกจะทาหนาทสาคญตอการพฒนาการทางานของสมอง และ ความจา 3.4 ผกผลไมทมสแดง สม เหลอง และ เขยว เชน มะเขอเทศ พรก มะละกอ ฟกทอง แครอท สม กลวย เปนตน ซงผกผลไมเหลานจะมรงควตถกลมแคโรทนอยดซงเปนสารพฤกษเคมทเปนสารตานอนมลอสระทสาคญชวยบารงเซลลประสาทใหทางานไดตามปกต ลดความเสยงของการเกดโรคหลอดเลอดสมองตบตน และจะชวยกระตนใหมความจาทดขน 3.5 พชตระกลถว เชน ฮาเซลนท อลมอนด ถวลสง แมคคาเดเมย และ วอลนท เปนแหลงรวมโปรตน มไฟเบอรสง และมไขมนดมาก เปนคารโบไฮเดรตเชงซอนทชวยทาใหรสกกระฉบกระเฉง ขณะทโปรตน และไขมนชวยใหรางกายสมดล สงบ ผอนคลาย อกทงยงมวตามนอ ทสาคญตอกระบวนการคด และ จา 3.6 อาหารประเภทธญพช เชน เมลดดอกทานตะวน เมลดงา เมลดแฟลกซ ทมโปรตนสง มไขมนด และ วตามนเอสง ขณะเดยวกนกมสารตานอนมลอสระทชวยเพมสารอาหารกระตนสมองอยางแมกนเซยมทาใหเลอดไปไหลเวยนในสมองไดด 3.7 แอปเปล (Malus domestica) มสวนชวยเพมการสรางสารสอประสาทในสมองทมชอวา อะเซทลโคลน ซงเปนตวกาหนดความสามารถในการจาและการเรยนร และยงเพมประสทธภาพความจาของสมองสวนฮปโปแคมปส จงชวยชะลอภาวะสมองเสอมได 3.8 โกโก (Theobroma cacao Linn.) โกโกเปนแหลงสาคญของ Polyphenol ซงเปนสารตานอนมลอสระทเปนประโยชนตอสขภาพ ชวยกระตนสมอง ชวยระบบหมนเวยนเลอด และเพมประสทธภาพการทางานของสมองได ทสาคญชวยพฒนาความจาไดถงรอยละ 20 ชวยบรรเทาภาวะของโรคเครยด โรคซมเศรา ชวยลดระดบไขมนในเลอด ชวยระดบลดนาตาลในเลอด นอกจากน ยงผลตสารเอนดอรฟน (Endophin) และ ซโทโรนน (Serotonin) ทเปนสารแหงความสขในสมอง 3.9 แปะกวย (Ginkgo flavoneglycosides) เปนพชสมนไพรทใชในการรกษาโรคสมองเสอม โรคซมเศรา อาการความจาเสอม โดยแปะกวยไปชวยระบบไหลเวยนโลหตในสมอง เพราะเมอสมองขาดเลอดไปหลอเลยง ยอมเสอมสมรรถภาพ และฝอไปในทสดสงผลตอการทางาน และประสทธภาพของสมอง (กรมสขภาพจต กระทรวงสาธารณสข, 2552) 4. งานวจยทเกยวของกบการปองกนภาวะสมองเสอม พรนรนทร เทพาวราพฤกษ และคณะ (2552) ไดศกษาการทดสอบฤทธของสารสกดจากกากชาเขยว (Camellia sinensis) ตอการเรยนร และ ความจา วตถประสงคเพอทดสอบฤทธของสารสกดกากชาเขยว (GTB) เปรยบเทยบกบชาเขยว (GT) เมอไดรบตดตอกนทกวนนาน 3 เดอนตอการเรยนรและความจา การเปลยนแปลงของระดบการทางานของเอนไซม Superoxide Dismutase (SOD) และ Glutathione Peroxidase (GPX) Activity ในสมองสวนฮปโปแคมปส ในหนหนมทถกชกนาใหเกดความจาบกพรองดวย Amyliod-β Peptides (Young-Aβ) และในหนแกธรรมชาตรวมทงผลการฟนฟความจานเปนผลจากการตานอนมลอสระ หรอเปนผลจากสารคาเฟอนทเปนสวนประกอบอยางหนงของชาเขยว และกากชาเขยว จากการศกษาน ปรากฏวา การไดรบสารสกดกากชาเขยวตดตอกนเปนเวลา 90 วน ดวยขนาด 300 มลลกรมตอกโลกรม ชวยเพมความสามารถในการเรยนร และความจาใน

24

สตวทดลองทมอายมาก และในสตวทดลองทเหนยวนาอลไซเมอร โดยชาเขยว และกากชาเขยวอาจเกยวของกบการเพมระดบการทางานของเอนไซมตานอนมลอสระในสมองสวนฮปโปแคมปสมากวาเกดจากสารคาเฟอนทมฤทธในการกระตนประสาท พรนรนทร เทพาวราพฤกษ และคณะ (2553) ไดศกษาการทดสอบฤทธของกลวยนาวา (Musa sapientum L.) ในการฟนฟภาวะความจาบกพรอง และฤทธตานความกงวลในหนแรท วตถประสงคเพอศกษาผลของการบรโภคกลวยตดตอกนเปนระยะเวลานาน 3 เดอน ตอการฟนฟความจาบกพรองจากการเหนยวนาดวยการฉดอะไมลอยดเบตาเปปไตท (Aβ25-35) และศกษาการเปลยน แปลงของระดบสารสอประสาทชนดกรดอะมโน และ แคททโคลามน ในสมองสวนฮปโปแคมปส และเปลอกสมองซรบรม ปรากฏวา การฉดอะไมลอยดเบตาเปปไทด เขาทโพรงสมองสามารถเหนยวนาใหเกดความบกพรองในการจดจา และความจาเกยวกบสถานท รวมทงการลดระดบของสารสอประสาทชนดแอสปาเตต และ กลตาเมต การไดรบกลวยทขนาดสงเปนเวลานาน 3 เดอน สามารถชวยฟนฟภาวะความจาบกพรองทเหนยวนาดวยอะไมลอยดเบตาเปปไทดได ซงการฟนฟความจาบกพรองนอาจเกดจากการเพมระดบสารสอประสาทชนดกรดอะมโน คอ แอสปาเตต และ กลตาเมท ในสมองสวน ฮปโปแคมปส ปรชญา แกวแกน และคณะ (2555) ไดศกษาสารสกดผลหมอน (Morus alba Linn.) ตอการปกปองความบกพรองของความจา และการทาลายสมองสวนฮปโปแคมปสในแบบจาลองการเกดโรคความจาเสอมจากหลอดเลอดของสตวทดลอง หมอนเปนผลไมทมคณคาทางการแพทยรวมทง มฤทธตานอนมลอสระจงอาจมฤทธปกปองสมอง และลดความบกพรองของสมองในภาวะสมองขาดเลอด เนองจากหลอดเลอดสมองผดปกต เพอทดสอบสมมตฐานน หนขาวเพศผนาหนกประมาณ 350-400 กรม จะไดรบการปอนผงผลหมอนแหงในขนาด 2, 10 และ 50 มลลกรมตอกโลกรมนาหนกตว วนละครงนาน 1 สปดาหแลวนามาเหนยวนาภาวะสมองขาดเลอดดวยการทาใหหลอดเลอดเฉพาะทดานขวาอดตน (Middle Cerebral Artery) จากนนนาสตวทดลองมาวดระดบการตอบสนองของระบบประสาท (Neurological Score) เวลาทใชในการตอบสนองตอความรอน ตลอดจนการเรยนร และ ความจา ทเวลา 1, 2 และ 3 สปดาห นอกจากนนยงทาการประเมนฤทธผลหมอนตอปรมาตรสมองทขาดเลอด และความหนาแนนของสมองในบรเวณตาง ๆ ปรากฏวา ผลหมอนสามารถลดปรมาณสมองทขาดเลอดในคอรเทกซสตรยอะตรม และ ฮปโปแคมปส เพมความหนาแนนของเซลลประสาทในคอรเทกซสวน Frontal, Parietal และ Temporal ตลอดจน CA2 และ CA3 ในฮปโปแคมปสนอกจากนนยงลดความบกพรองในเรองการรบความรสก การเรยนรและความจา ชาญชย สาดแสงจนทร (2556) ไดศกษาพรมม (Bacopa monnieri) สมนไพรเพอสขภาพสมอง พรมมเปนผกพนบานทมถนกาเนดอยในประเทศเนปาล และ อนเดย มการแพรกระจายพนธอยทวไปในประเทศไทย ซงปรากฏไดตามบรเวณทชมนาจนถงนาทวมขง การแพทยแผนไทย และแผนอายรเวทมการนาพรมมมาใชในการรกษาอาการผดปรกตทางสมอง เชน แกลมชก แกปวดประสาท ชวยในการนอนหลบ เปนตน จากรายงานการวจยถงองคประกอบทางเคมของพรมม ปรากฏวา สารกลม Saponins ทชอวา Bacosides เปนสารทออกฤทธเพมการเรยนร และ ความจาไดเปนอยางดนอกจาก นนยงชวยลดความวตกกงวล อาการซมเศรา และอาการชกไดอกดวย การศกษาความเปนพษภายใตขอกาหนดของการศกษาฤทธทางเภสชวทยา และพษวทยา ปรากฏวา ไมมปฏกรยาอนไมพงประสงค และผลขางเคยงแตอยางใด

25

จนตนาภรณ วฒนธร และคณะ (2557) ไดศกษาการสารวจศกยภาพของมะมวง (Mangifera indica Linn.) ในการปกปอง และเพมประสทธภาพการทางานสมอง โดยการปอนสารสกดมะมวงนาดอกไมสกขนาดตาง ๆ แกหนขาวเพศผพนธ (Wistar) แลวนามาประเมนฤทธตานความกงวล ฤทธตานการซมเศรา ฤทธตอการเรยนรและความจา ทงทเกยวและไมเกยวของกบทศทาง ปรากฏวา หนขาวเพศผทไดรบสารสกดนาของมะมวงนาดอกไมสกขนาด 50, 100 และ 200 มลลกรมตอกโลกรมนาหนกตว และสารสกดแอลกอฮอลของมะมวงนาดอกไมสกขนาด 12.5, 50 มลลกรมตอกโลกรมนาหนกตว มฤทธเพมการเรยนรแบบเกยวของกบทศทางในภาวะปกตนอกจากนนยง ปรากฏวา หนกลมทไดรบสารสกดนามะมวงนาดอกไมสกขนาด 100 และ 200 มลลกรมตอกโลกรมนาหนกตว และหนทไดรบสารสกดแอลกอฮอลของมะมวงนาดอกไมสกขนาด 12.5, 50 และ 200 มลลกรมตอกโลกรมนาหนกตว มความหนาแนนของเซลลประสาทของสมองสวนฮปโปแคมปสเพมขน กลไกหลกในการออกฤทธผานการยบยงการทางานของเอนไซมอะซลทลโคลนเอสเตอเลส และการเพมการทางานของเอนไซมตานอนมลอสระทาใหลดการทาลายโครงสรางของเซลลโดยเฉพาะเยอหมเซลลทาใหมผลเพมความหนาแนนของเซลลประสาททยงมชวตในสมองบรเวณฮปโปแคมปส ซงเปนบรเวณทมบทบาทสาคญเกยวของกบการเรยนร สวนกลไกหลกการออกฤทธของสารสกดแอลกอฮอลของมะมวงนาดอกไมสกนาจะผานการเพมการทางานของเอนไซมตานอนมลอสระทาใหมความความหนาแนนของเซลลประสาทในสมองบรเวณฮปโปแคมปสเพมขน ในการศกษาน ปรากฏวา สารสกดนามะมวงนาดอกไมสกจะมปรมาณ สารประกอบฟนอลกรวม 413.61 ± 17.28 mg of Gallic Acid Equivalent (GAE)/mg นาหนกผลไมมปรมาณเบตาแคโรทน 6.19 µg/g ในขณะทสารสกดแอลกอฮอลของมะมวงนาดอกไมสกมปรมาณสารประกอบฟนอลกรวม513.79 ± 27.17 mg of Gallic Acid Equivalent (GAE)/mg นาหนกผลไม และมปรมาณเบตาแคโรทน 47.21 มลลกรมตอกรม ดงนนผลจากการศกษาครงน จงเปนรายงานทางวทยาศาสตรทแสดงใหเหนวามะมวงนาดอกไมเปนอาหารเสรมสขภาพทมศกยภาพสามารถนามาสรางเสรมประสทธภาพการเรยนรและความจาทงในภาวะปกต และปองกนความจาบกพรองเชนเดยวกบทพบในโรคสมองเสอม

จากหลายงานวจยขางตน แสดงใหเหนวา สารตานอนมลอสระในผก และผลไม มผลตอระบบประสาท ในดานการเรยนรและความจา ความวตกกงวล ภาวะซมเศรา และมผลในการปกปองระบบประสาททเกดจากแบบจาลองการเกดภาวะสมองเสอมในสตวทดลองได เพอใชเปนขอมลตอยอดงานวจยในมนษยตอไป ตอนท 5 แบบจ าลองภาวะสมองเสอมระยะแรกในหนทดลองดวยสโคโพลามน (Models Mild Cognitive Impairment in Mice with Scopolamine) ในการศกษาภาวะสมองเสอมระยะแรกในหนเมาส โดยการสรางแบบจาลองภาวะสมองเสอมระยะแรกใหมลกษณะคลายกบคนทเปน MCI เพอใหเขาใจกลไกททาใหเกดโรคของ MCI และพฒนายาสาหรบการรกษาโรค MCI ซงมดวยกนหลายวธ ในงานวจยนเลอกใชวธการเหนยวนาใหเกดภาวะสมองเสอมระยะแรกดวยสโคโพลามน โดยการฉดสโคโพลามนทชองทองของหนเมาส ซงมงานวจยหลายงานทใช สารสโคโพลามนเปนยาพนฐานทใชสาหรบการเหนยวนาใหเกดการลดลงของกระบวนรคด (Cognitive) ในมนษย และสตวทมสขภาพด กลไกการออกฤทธของสโคโพลามนจะเรมออกฤทธแยงทกบอะซลทลโคลน (Acetylcholine: ACh) ในการจบกบตวรบมสคารนก (Muscarinic Receptor) แบบ

26

แขงขน (Competitive Inhibition) ทาใหเซลลประสาทบรเวณนนมปรมาณอะซลทลโคลนลดลง ทาใหหนเมาสมความสามารถในการเรยนร และความจาลดลง (Esmail, Marjan, Mehdi, & Mahsa, 2013, p. 185) หลงจากการเหนยวนาดวยสโคโพลามนแลวนาหนเมาส มาทดสอบทางพฤตกรรมทางระบบประสาทโดย Morris Water Maze Test ซงเปนอปกรณทดสอบความจาเกยวกบทศทาง และสถานท (Spatial Memory) โดยการวายนาซงในการทดสอบนจะปลอยใหหนเมาสวายนาในอางทรงกลมโดยนา เอาแทนใตนาออก (Retention Test) เพอทดสอบการดงความจาเกากลบคน (Recognition) จบเวลาทหนวายอยในโซนทมแทนใตนาอย ถาหนเมาสวายวนทกโซนใกลเคยงกนหรอลอยนง ๆ อยในโซนใดโซนหนง แสดงวาไมสามารถจาไดวาโซนใดเคยมแทนใตนาอย จงสรปไดวาหนเมาสเรมเกดอาการสมองเสอมระยะแรก (ชาญชย สาดแสงจนทร, 2556, หนา 554-560; พรนรนทร เทพาวราพฤกษ, นวต เทพาวราพฤกษ และสภาพรรณ เอกอฬารพนธ, 2553, หนา 20-21; Piccart & Hooge, 2008, pp. 271-272) 1. งานวจยทเกยวของกบการเหนยวน าใหเกดภาวะสมองเสอมระยะแรกดวย สโคโพลามนในหนทดลอง Piccart and Hooge (2008) ไดศกษาผลของสโคโพลามนโดยการทดสอบการเรยนร และความจาเกยวกบทศทาง และสถานท (MWM) ในดานการเรยนร และการเรยกคนความจาเกากลบคนของหนเมาสสายพนธ C57BL ปรากฏวา หนเมาสทไดรบการเหนยวนาภาวะสมองเสอมชวคราวดวยสโคโพลามนขนาด 1 mg/kg BW ทชองทอง ผลการเรยนร และการทดสอบการเรยกคนความจาเกา (Retention Trial) มคาเทากน โดยมการเรยนร และการเรยกคนความจาเกากลบคนไดนอยกวากลมควบคมอยางมนยสาคญทางสถตทระดบนยสาคญ p<.01 ซงกลาวไดวาสารสโคโพลามนมฤทธใน การเหนยวนาใหมการเรยนรและความจาทลดลง Kumar and Juyal (2010) ไดศกษาผลของชาเขยว (Camellia sinensis) เมอหนเมาสถกเหนยวนาดวยสโคโพลามน ปรากฏวา นาสกดชาเขยวทสกดดวยตวทาละลายนา (รอยละ 0.05 ในนาดมเปนเวลาสองเดอน) ทาการเปรยบเทยบกบ Metrifonate นาสกดชาเขยวมฤทธยบยงการทางานของเอนไซมโคลนเอสเตอรเลส (Cholinesterase) ในสมอง และตรงกนขามกบการลดลงของความจา Metrifonate 50 มลลกรมตอกโลกรม ฉดเขาชองทองมการเปลยนแปลงอยางมนยสาคญของการเปลยน แปลงการเรยนร และความจาทถกเหนยวนาดวยสโคโพลามนททาใหเกดการสญเสยความจาในหนเมาส Esmail, Marjan, Mehdi, and Mahsa (2013) ไดศกษาฤทธของวทซน (Vitexin) ทมผลตอการเหนยวนาความจาเสอมระยะแรกดวยสโคโพลามน การศกษามวตถประสงคเพอศกษาฤทธของ Vitexin (5, 7, 4-Trihydroxyflavone-8-glucoside) ซงเปนสารในกลม Flavonoid ในหนขาว (Rats) ทถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน ในงานวจยนใชอปกรณทดสอบการเรยนรและความจา ดวย Passive Avoidance Test ในการทดสอบแรกใหสาร Vitexin (25, 50, และ 100 µM) โดยการฉดสาร Vitexin เขาเสนเลอดทโพรงสมอง (Intracerebroventricularly: i.c.v) กอนทจะทาการทดสอบดวย Passive Avoidance Test ในการทดสอบตอมาใหสาร Vitexin ในปรมาณเดยวกนกบการทดสอบแรกโดยเพมสารเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสารสโคโพลามนขนาด 10 µM เขาเสนเลอดทโพรงสมองกอนการทดสอบ ในการทดสอบการเรยกคนความจาเกากลบคน ปรากฏวา หนขาวทไดรบ Vitexin ขนาด 100 µM ทไมถกเหนยวนาดวยสโคโพลามนมการเพมขนของการจาไดแตกตาง

27

อยางมนยสาคญทางสถตทระดบนยสาคญ p<.05 เมอเทยบกบกลมทไดรบ Vitexin ขนาดเดยวกนแตถกเหนยวนาดวยสโคโพลามน สรปไดวา Vitexin 100 µM มศกยภาพในการดงเอาความจาเกากลบคน จากหลายงานวจยขางตน แสดงใหเหนวา สโคโพลามนสามารถเหนยวนาให สตวทดลองมภาวะสมองเสอมชวคราวได โดยมผลตอการเรยนรและความจาลดลง และสโคโพลามนเปนยาตนแบบ ททาใหมการศกษาสารทไดจากธรรมชาต ในการปองกน และรกษาภาวะสมองเสอมระยะแรกในมนษย ซงเปนระยะทสามารถรกษาใหหายขาดได ถาดแลอยางถกตอง เพอปองกนการเกดภาวะสมองเสอมรปแบบอน ๆ ตอไป ตอนท 6 การทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในหนเมาส (Neurological Behavioral Tests in Mice) การวจยทางระบบประสาทในสตวทดลองนยมใชสตวฟนแทะ (Rodents) คอ หนเมาส (Mouse) และ หนแรท (Rat) ทงหนเมาส และ หนแรท เปนสตวเลยงลกดวยนมทมรปแบบพฤตกรรมทหลากหลายทเกยวของกบโรคทเกดกบมนษย ในยคแรกของการวจยพฤตกรรมทางระบบประสาท หนเปนสงมชวตทถกใชในการวจยมากทสด และกลายเปนเครองมอทสาคญในการวจยทางเภสชวทยาทางระบบประสาทการทดสอบพฤตกรรมทนยมใชกนอยางมากในการศกษาทางสรรวทยาทางระบบประสาท คอ การทดสอบพฤตกรรมเกยวของกบการเรยนรและความจา มหลายวธแตละวธมความจาเพาะตอลกษณะของกระบวนการจาทแตกตางกนอาท เชน Passive Avoidance Test, Morris Water Maze Test, Radial Arm Maze Test, Spotaneous Alternation Test และ Novel Object Recognition Test เปนตน การทดสอบพฤตกรรมเกยวของกบความวตกกงวลมหลายวธอาท เชน Elevated Plus Maze, Dark-light Box Test, Elevate Platform Test, Forced Swim Test เปนตน การทดสอบพฤตกรรมเกยวของกบการควบคมการเคลอนไหวมหลายวธอาท เชน Exploratory Activity Box Test, Roto-rod, Balance Beam, Tail Suspension เปนตน การทดสอบพฤตกรรมเกยวของกบประสาทรบความรสกมหลายวธอาท เชน Hot Plate Test, Tail Immersion Test, Penlight Vision Test เปนตน ในการวจยนใชวธการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทดงน 1. การทดสอบการเรยนรและความจ า 1.1 Morris Water Maze Test เปนอปกรณทดสอบความจาเกยวกบทศทาง และ สถานท (Spatial Memory) โดยการวายนา ซงเปนความจาระยะยาวถกคดคนโดย Richard Morris ในป ค.ศ.1984 ซงในการทดสอบนจะปลอยใหหนวายนาในอางทรงกลมเพอหาแทนใตนา โดยแบงอางทรงกลมออกเปน 4 โซน (Zone) และมสญลกษณบอกทศทาง (Visual Cue) ตดไวทอางทรงกลม 3 โซน ยกเวน โซนทมแทนใตนาอย การวดความสามารถในการเรยนรและความจา โดยการจบเวลาทหนหาแทนใตนาเจอ หลงจากนนวนสดทายของการทดสอบจะนาเอาแทนใตนาออก (Retention Test) เพอทดสอบการเรยกคนความจาเกากลบคน (Recognition) จบเวลาทหนวายอยในโซนทมแทนใตนาอย (Morris, 1984, pp. 47-80) 1.2 Novel Object Recognition Test เปนอปกรณทดสอบนเปนการทดสอบความ คนเคยตอวตถทเคยเหน หรอสมผสกอนหนาในเวลาผานไปเพยง 10 นาท วาสามารถจาไดหรอไม ถกคดคนโดย Ennaceur and Delacour ในป ค.ศ. 1988 โดยการทดสอบจะม 2 ชวง ใชวตถทมรปราง และสสนแตกตางกน ชวงแรกเปนชวงการฝก (Training Phase) นาวตถทเหมอนกน 2 วตถ มาวางใน

28

กลองศกษาพฤตกรรม ปลอยหนใหสารวจวตถเปนเวลา 5 นาท จากนนนาหนกลบเขาไปไวในกรงพกประมาณ 10 นาท ชวงทสองเปนชวงทดสอบ (Testing Phase) เปลยนวตถอนใดอนหนงเปนวตถใหม หลกจากนนนาหนตวเดมทพกแลวมาปลอยจบเวลาทหนสารวจวตถแตละวตถ นาเวลาทหนสารวจวตถใหม และวตถเกามาหาคาดชนการจาได (Recognition Index) คอ การนาระยะเวลาทหนใชในการสารวจวตถชนใหม (TC) หารดวยผลรวมของระยะเวลาทหนใชในการสารวจวตถทงสองชนในชวง Testing Phase (TC+TA) และคณดวย 100 (Hoge & Kesner, 2007, pp. 225-231; Mumby, 2001, pp. 159-181) ดงสมการ

Object Recognition Index = [TC/ (TA + TC)] x 100 เมอ TA เปนเวลาทหนทดลองสารวจวตถชนเกาในชวงทดสอบ Testing Phase TC เปนเวลาทหนทดลองสารวจวตถชนใหมในชวงทดสอบ Testing Phase 2. การทดสอบฤทธตานความวตกกงวล 2.1 Elevated Plus Maze Test เปนอปกรณทดสอบฤทธตานความกงวลในหนทดลอง ซงถกคดคนโดย File และคณะในป ค.ศ. 1985 โดยใชอปกรณทเปนทางเดนรปกากบาท (Plus Maze) ขนาดความกวางทางเดนเทากบ 5 ซม. มผนงสง 15 ซม. กนเฉพาะทางเดน 2 ทางทอยตรงกนขาม (Closed Arms) สวนทางเดนอก 2 ทางไมมผนงกน (Open Arms) อปกรณจะสงจากพนโดยประมาณ 50 ซม. การทดลองจะใชเวลา 3 นาท เรมตนจากการปลอยหนบรเวณตรงกลางของกากบาท บนทกระยะเวลาการเขาแขนทมผนงกน และไมมผนงกน (Pellow, Chopin, File, & Briley, 1985, pp. 149-167) 3. การทดสอบการควบคมการเคลอนไหว 3.1 Exploratory Box Behavior Test เปนอปกรณทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหวโดยจะทาการปลอยหนเมาสในกลองศกษาพฤตกรรม ใหหนเมาสเคลอนไหวอยางอสระ จบเวลาตงแตเรมปลอยจนกระทงครบ 3 นาท ในการทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหวนจะศกษาพฤตกรรมทงหมด 3 แบบ คอ การตกแตงขน (Grooming) การเลย (Licking) การยก 2 ขาหนา (Rearing) สงเกต พฤตกรรมแตละแบบกครงใน 3 นาท (Blanchard, Griebel, & Blanchard, 2001, pp. 205-218; Hughes, Desmond, & Fisher, 2004, pp. 173-181) 4. การทดสอบประสาทรบความรสก 4.1 Tail Immersion Test เปนอปกรณทดสอบประสาทรบความรสกดวยความรอน ในหนเมาสดานการตอบสนองตอความเจบปวด โดยการตงนาบนแผนใหความรอนโดยใหนามอณหภม 45- 50 องศาเซลเซยส โดยวดดวยเทอรโมมเตอร จากนนนาหนเมาสทจะทดสอบจบหางจมในนาอนสงเกตเมอหนเมาสสะบดหางนาหนเมาสออกทนท บนทกเวลาทหางตอบสนองตอความรอน (Latency) ตงแตเรมจมจนกระทงหนเมาสสะบดหาง (Kuhad & Chopra, 2007, pp. 108-111)

บทท 3 วธด ำเนนกำรวจย

การวจยนใชแบบแผนการวจยเชงทดลอง (Experimental Research Design) เพอเปรยบเทยบผลของนามะละกอสกทมตอการปกปองระบบประสาทของแบบจาลองการเกดโรคสมองเสอมระยะแรกในสตวทดลอง ในการดาเนนการวจยม 6 ขนตอน ดงน ตอนท 1 การเตรยมตวอยาง ตอนท 2 เครองมอในการวจย ตอนท 3 การดาเนนการวจย ตอนท 4 การเกบรวบรวมขอมล ตอนท 5 การวเคราะหขอมล ตอนท 6 กระบวนการจดการเกยวกบซากสตว งานวจยนไดผานการพจารณา และไดรบการรบรองจากคณะกรรมการจรยธรรมการใชสตว ทดลอง มหาวทยาลยบรพา แบบเตมรปแบบ ตงแตวนท 8 ตลาคม พ.ศ. 2556 รหสอางอง (ID #) 29/2556 ขนตอนกำรด ำเนนกำรวจย

1. การเตรยมตวอยาง

3. การดาเนนการวจย

4. การเกบรวบรวมขอมล

2. เครองมอในการวจย

1. การเตรยมสตวทดลอง 2. การเตรยมนามะละกอสก 3. การเตรยมสโคโพลามน

1. เครองมอทใชทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทใน สตวทดลอง 2. เครองมอทใชในการเกบรวบรวมขอมล

1. กาหนดแบบแผนการทดลอง 2. การทดลอง ม 3 ระยะ 1) ระยะกอนการทดลอง 2) ระยะทดลอง 3) ระยะหลงการทดลอง 3. ระยะหลงการทดลอง 1. บนทกขอมลการทดสอบการเรยนรและความจา 2. บนทกขอมลการทดสอบความวตกกงวล 3. บนทกขอมลการทดสอบการควบคมการเคลอนไหว 4. บนทกขอมลการทดสอบระบบประสาทรบความรสก

30

ขนตอนกำรด ำเนนกำรวจย (ตอ) ภำพท 5 แผนภาพขนตอนการดาเนนการวจย ตอนท 1 กำรเตรยมตวอยำง ในการเตรยมตวอยางในการวจยม 3 ขนตอน คอ การเตรยมสตวทดลอง การเตรยม นามะละกอสก และการเตรยมสโคโพลามน กำรเตรยมสตวทดลอง 1. หลงจากทไดรบหนเมาสจากสานกสตวทดลองแหงชาต เมอวนท 21 กนยายน พ.ศ.2557 หนเมาสทกตวจะตองไดพก และปรบตวใหคนเคยกบสภาพแวดลอมใหมเปนเวลา 10 วน (ตงแตวนท 21 - 30 กนยายน พ.ศ. 2557) 2. หนเมาสทกตวถกนาไปเลยงไวในหองเลยงสตวทดลองของ วทยาลยวทยาการวจยและวทยาการปญญา มหาวทยาลยบรพา ภายใตสภาพแวดลอมทมอากาศถายเท และมพดลมในการชวยระบายอากาศ โดยมการควบคมการปดเปดแสงสวาง 12 ชวโมงตอวน หนเมาสทกตวจะไดรบอาหารเมด จากสานกสตวทดลองแหงชาต มหาวทยาลยมหดล และนาสะอาดอยางบรบรณ การเปลยนวสดรองนอนเปลยนใหมวนเวนวน หรอเมอตรวจสอบพบวา วสดรองนอนมความชน หรอ สกปรก โดยวสดรองนอนทใช คอ ขเลอยอบแหงปราศจากเชอ 3. การแบงกลมหนเมาส โดยการสมอยางงาย (Simple Random Assignment) เขากลมทดลองกบกลมควบคมดวยวธจบฉลากแบบไมคนท จานวน 4 กลม กลมละ 7 ตว ดงน 3.1 กลมควบคม (Control) กลมทไดรบนากลน 3.2 กลมขนาดตา (Low Dose 2.5) กลมทไดรบนามะละกอสกขนาด 2.5 g/kg BW 3.3 กลมขนาดปานกลาง (Medium Dose 5.0) กลมทไดรบนามะละกอสกขนาด 5.0 g/kg BW 3.4 กลมขนาดสง (High Dose 7.5) กลมทไดรบนามะละกอสกขนาด 7.5 g/kg BW

การวเคราะหขอมล

กระบวนการจดการเกยวกบซากสตว

1. การวเคราะหขอมลการทดสอบการเรยนรและความจา 2. การวเคราะหขอมลการทดสอบความวตกกงวล 3. การวเคราะหขอมลการทดสอบการควบคมการ เคลอนไหว 4. การวเคราะหขอมลการทดสอบระบบประสาทรบ ความรสก

1. หนเมาสทกตวจะถกทาสลบ (Anesthesia) 2. ทดสอบความเจบปวด (Areflexia) 3. ใชนาเกลอ (Normal Saline) ไลเลอด (Perfusion) 4. ทาการการณยฆาต (Euthanasia) 5. ซากหนเมาสทกตวนาไปกาจดดวยวธการเผา

31

(ดดแปลงมาจาก นวต เทพาวราพฤกษ และคณะ, 2554, หนา 23) อยางไรกตาม เมอการทดลองสนสด ขนาดของกลมทดลองกบกลมควบคมลดลงเหลอ กลมละ 5 ตว เนองจากระหวางการทดลองมการสญเสยหนเมาสระหวางการทดลอง ผวจยจงนาเฉพาะขอมลของหนเมาสตวททาการทดลองไดตอเนองตลอดการทดลองมาใชในการวเคราะหขอมล

ภำพท 6 หนเมาส (ICR Mouse) เพศผจากศนยสตวทดลองแหงชาต มหาวทยาลยมหดล ตาบลศาลายา อาเภอพทธมณฑล จงหวดนครปฐม กำรเตรยมน ำมะละกอสก 1. มะละกอสกทนามาทดลองเปนมะละกอสกพนธศรสภา 2. เรมจากการนามะละกอสกมาปลอกเปลอกออก ลางใหสะอาด แลวนามาหนเปนชนเลก ๆ นามาปนละเอยดในเครองปนนาผลไม 3. นาเนอมะละกอสกปนเหลวผสมกบนากลนในอตราสวน 3 : 2 โดยเนอมะละกอสกปนเหลว 60 มลลลตร (ml) นากลน 40 มลลลตร (ml) (นามะละกอสกจะถกเตรยมใหมทกวน) 4. หนเมาสกลมทดลองทไดรบนามะละกอสก โดยการปอนทางปากดวยเขมปอน (Oral Administrator by Gavage) ขนาด 1.5 นว ทกวน วนละ 1 ครง เปนระยะเวลา 21 วน

ก ข ภำพท 7 มะละกอพนธศรสภา (Srisupa Papaya) เปนพนธผสมระหวางมะละกอพนธแขกนวล กบมะละกอพนธฮอลแลนด ภาพ ก. เปนผลสกของมะละกอพนธศรสภา ภาพ ข. นามะละกอสกพนธศรสภา

32

กำรเตรยมสโคโพลำมน 1. นาสโคโพลามน 1 ml/20 mg มาผสมกบนากลน 49 ml 2. จะไดสารละลายสโคโพลามน 50 ml ตอนท 2 เครองมอในกำรวจย เครองมอทใชในการวจยม 2 ชนดดงน 1. เครองมอทดลอง ไดแก 1.1 สารทดสอบ คอ นามะละกอสก และ สโคโพลามน 1.2 อปกรณทใชทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน 1.2.1 การเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ Morris Water Maze Test (MWM) และ Novel Object Recognition Test (NOR) 1.2.2 ความวตกกงวล วดดวยอปกรณ Elevated Plus Maze Test (EPM) 1.2.3 การควบคมการเคลอนไหว วดดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test 1.2.4 ระบบประสาทรบความรสก วดดวยอปกรณ Tail Immersion Test 2. เครองมอทใชในการเกบรวบรวมขอมล 2.1 แบบบนทกขอมลการทดสอบการเรยนรและความจา สาหรบอปกรณ MWM และ NOR 2.2 แบบบนทกขอมลการทดสอบความวตกกงวล สาหรบอปกรณ EPM 2.3 แบบบนทกขอมลการทดสอบการควบคมการเคลอนไหว สาหรบอปกรณ Exploratory Box Behavior Test 2.4 แบบบนทกขอมลการทดสอบระบบประสาทรบความรสก สาหรบอปกรณ Tail Immersion Test 1. เครองมอทดลอง 1.1 สารทดสอบ คอ นามะละกอสก และ สโคโพลามน นามะละกอสก แบงเปน 3 ขนาด 1) นามะละกอสกขนาด 2.5 g/kg BW 2) นามะละกอสกขนาด 5.0 g/kg BW 3) นามะละกอสกขนาด 7.5 g/kg BW สโคโพลามนขนาด 2.0 mg/kgBW 1.2 อปกรณทใชทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน 1.2.1 การทดสอบการเรยนรและความจา Morris Water Maze Test (MWM) เปนการทดสอบการเรยนรและความจาเกยวกบทศทาง และสถานท (Spatial Memory) โดยการวายหาแทนใตนาในอางทรงกลมขนาดเสนผาศนยกลาง 60 cm ความสงอาง 25 cm ความลกของนา 20 cm แบงอางทรงกลมเปน 4 โซนและมสญลกษณ (Visual Cue) ทขอบอางแตกตางกน 3 จด ยกเวน จดทมแทนใตนา (Platform) แทนใตนามความสง 19 cm ขนาดเสนผาศนยกลางของแทน 6 cm นามอณหภมเทากบอณหภมหอง บนผวนามผงแปง

33

ทไมเปนพษ (Nontoxic Powder) สขาวโรยบนผวนาเพอปดแทนใตนาระหวางการทดลอง (Dinesh & Varun, 2012, pp. 3-4) Novel Object Recognition Test (NOR) เปนการทดสอบการเรยนรและความจาดานการจดจาวตถสงของทเคยเหน หรอสมผสกอนหนาในเวลาผานไปเพยง 10 นาท วาสามารถจาไดหรอไม ซงตามธรรมชาตของหนเมาสจะเปนสตวทมนสยอยากรอยากเหนในสงใหม ๆ เปรยบเสมอนกบพฤตกรรมทชอบสารวจ (Exploratory Behavior) อยางหนง โดยการทดสอบจะใชวตถ 3 วตถ โดย 2 วตถมรปรางและสสนเหมอนกน ในงานวจยใชวตถทเปนทรงกระบอกสขาว 2 วตถ และวตถทรงกลม สเหลอง 1 วตถ นาวตถวางในกลองศกษาพฤตกรรม ขนาดกวาง x ยาว x สง (50x50x50 cm) บนทกดวยกลองวดทศนตลอดการทดลอง (ดดแปลงมาจาก พรนรนทร เทพาวราพฤกษ และคณะ, 2553, หนา 28) 1.2.2 การทดสอบความวตกกงวล Elevated Plus Maze Test (EPM) เปนการทดสอบความวตกกงวลในหนเมาสธรรม ชาตหนจะชอบอยในทแคบ เมอหนอยในทโลงจะมความวตกกงวลมากขน ในการเหนยวนาใหหนเมาสมความวตกกงวล โดยใชอปกรณทางเดนรปกากบาท (Plus Maze) โดยปกตหนเมาสแสดงพฤตกรรมสารวจโดยเดนเขาทก ๆ แขน ซงเมอหนเมาสเดนบนแขนทไมมผนงกน (Open Arms) หนเมาสจะรสกวตกกงวล (Anxiety) และจะไมเลอกเขาแขนทไมมผนงกน ขนาดความกวางทางเดนเทากบ 5 cm มผนงสง 15 cm กนเฉพาะทางเดน 2 ทางทอยตรงกนขาม (Closed Arms) สวนทางเดนอก 2 ทางไมมผนงกน (Open Arms) ความยาวของทางเดน 30 cm อปกรณจะสงจากพนประมาณ 50 cm บนทกดวยกลองวดทศนตลอดการทดลอง (Dinesh & Varun, 2012, p. 3) 1.2.3 การทดสอบการควบคมการเคลอนไหว Exploratory Box Behavior Test การทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหวนจะทา การทดสอบโดยการสงเกตพฤตกรรมของหนเมาสแตละตวทปลอยใหเคลอนไหวอยางอสระภายในกลองศกษาพฤตกรรมซงทาดวยแผนอะครลกขนาดกวาง 50 cm ยาว 50 cm และสง 50 cm บนทกดวยกลองวดทศนตลอดการทดลอง (ดดแปลงมาจาก Blanchard, Griebel, & Blanchard, 2001, pp. 205-218) 1.2.4 การทดสอบระบบประสาทรบความรสก Tail Immersion Test เปนการทดสอบการตอบสนองตอความเจบปวด โดยใชความรอนเปนตวกระตนใหเกดความเจบปวด ทาการทดสอบโดยใชอปกรณ อางใสนาแลวนาไปตงทแผนใหความรอน ควบคมอณหภมนาใหอยระหวาง 45-50 องศาเซลเซยส โดยวดดวยเทอรโมมเตอร (Kuhad & Chopra, 2007, pp. 108-111) 2. เครองมอทใชในกำรเกบรวบรวมขอมล 2.1 แบบบนทกขอมลการเรยนรและความจา สาหรบอปกรณ MWM และ NOR 2.1.1 ขอมลเกยวกบนาหนกหนเมาส 2.1.2 ขอมลระยะเวลาการหาแทนใตนาของหนเมาสในอปกรณ MWM 2.1.3 ขอมลระยะเวลาทอยในโซนทเคยมแทนใตนาของหนเมาสในอปกรณ MWM 2.1.4 ขอมลระยะเวลาทหนสารวจวตถใหมและวตถเกาของหนเมาสในอปกรณ NOR ในชวงทดสอบ (Test Phase)

34

2.2 แบบบนทกขอมลความวตกกงวล สาหรบอปกรณ EPM 2.2.1 ขอมลเกยวกบนาหนกหนเมาส 2.2.2 ขอมลระยะเวลาทอยในแตละแขนของอปกรณ EPM 2.3 แบบบนทกขอมลการควบคมการเคลอนไหว สาหรบอปกรณ Exploratory Box Behavior Test 2.3.1 ขอมลเกยวกบนาหนกหนเมาส 2.3.2 ขอมลจานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Grooming, Rearing และ Licking 2.4 แบบบนทกขอมลระบบประสาทรบความรสก สาหรบอปกรณ Tail Immersion Test 2.4.1 ขอมลเกยวกบนาหนกหนเมาส 2.4.2 ขอมลเกยวกบระยะเวลาทหางของหนเมาสตอบสนองตอความรอน ตอนท 3 กำรด ำเนนกำรวจย ผวจยดาเนนการวจยตามขนตอนตอไปน 1. ก ำหนดแบบแผนกำรทดลอง การเปรยบเทยบผลของนามะละกอสกทมผลตอการปกปองระบบประสาทของแบบจาลองการเกดโรคสมองเสอมระยะแรกในสตวทดลอง โดยมแบบแผนการทดลองแบบการผสมระหวาง 2 ปจจยทเปน 2x4 เมทรกซ โดยปจจยแรกม 2 ระดบทมการทดสอบแบบภายในกลมเดยวกนระหวางกอนกบหลงไดรบสโคโพลามน และปจจยท 2 ม 4 ระดบทมการทดสอบระหวางกลมควบคมกบกลมทดลอง (Experimental Research utilizing a 2x4 Mixed-factorial design: Within-and Between-Subjects Factor) (Edmonds & Kennedy, 2013, pp. 58-73) ภาพท 8 ภำพท 8 แบบแผนการทดลอง Experimental Research utilizing a 2x4 Mixed-factorial design R แทน การสมตวอยางเขากลมทดลองกบกลมควบคม (Random Assignment) E1 แทน กลมขนาดตา (Low Dose 2.5) (ไดรบนามะละกอสกขนาด 2.5 g/kgBW) E2 แทน กลมขนาดปานกลาง (Medium Dose 5.0) (ไดรบนามะละกอสกขนาด 5.0 g/kgBW) E3 แทน กลมขนาดสง (High Dose 7.5) (ไดรบนามะละกอสกขนาด 7.5 g/kgBW) C แทน กลมควบคม (ไดรบนากลน)

R

E1

E2

E3

C

X1

X2

X3

X4

O1

O2

O3

O4

X5

X5

X5

X5

O5

O6 O7 O8 5ถ%%%5

%%

๔๔

35

X1 แทน ไดรบนามะละกอสกขนาด 2.5 g/kgBw ตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน X2 แทน ไดรบนามะละกอสกขนาด 5.0 g/kgBw ตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน X3 แทน ไดรบนามะละกอสกขนาด 7.5 g/kgBw ตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน X4 แทน ไดรบนากลนตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน X5 แทน ไดรบสโคโพลามนขนาด 2.0 mg/kgBW O1 แทน หนเมาสกลมขนาดตา ทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน ดงน

1) การเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ MWM และ NOR 2) ความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM 3) การควบคมการเคลอนไหว วดดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test และ 4) ระบบประสาทรบความรสก วดดวยอปกรณ Tail Immersion Test

O2 แทน หนเมาสกลมขนาดปานกลาง ทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน ดงท แสดงใน O1

O3 แทน หนเมาสกลมขนาดสง ทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน ดงทแสดงใน O1 O4 แทน หนเมาสกลมควบคม ทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน ดงทแสดงใน O1 O5 แทน หนเมาสกลมขนาดตา ทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน ดงทแสดงใน O1

O6 แทน หนเมาสกลมขนาดปานกลาง ทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน ดงท แสดงใน O1 O7 แทน หนเมาสกลมขนาดสง ทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน ดงทแสดงใน O1 O8 แทน หนเมาสกลมควบคม ทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน ดงทแสดงใน O1 2. กำรทดลอง แบงเปน 3 ระยะ ดงน (ตงแตวนท 21 - 7 พฤศจกายน พ.ศ.2557) ระยะกอนกำรทดลอง (ตงแตวนท 21 - 8 ตลาคม พ.ศ. 2557) 1. พกหนเมาสเปนเวลา 10 วน (ตงแตวนท 21 - 30 กนยายน พ.ศ. 2557) 2. ทาการฝกการเรยนรและความจาโดยการวายนาหาแทนใตนาดวยอปกรณ MWM เปนระยะเวลา 7 วน (ตงแตวนท 1 - 7 ตลาคม พ.ศ. 2557) 2.1 ทาการปลอยหนเมาสในอางทรงกลมตามสญลกษณใดกได 1 จด (ยกเวนจดทมแทนใตนาอย) ปลอยใหหนเมาสวายนาหาแทนใตนาในเวลา 60 วนาท 2.2 เมอหนเมาสหาแทนใตนาเจอ จะปลอยใหอยบนแทนเปนเวลาไมเกน 10 วนาท ถาหนเมาสตวใดไมสามารถหาแทนใตนาเจอ ผวจยจะจบหนเมาสวางบนแทนใตนาเปนเวลา 10 วนาท 2.3 บนทกคาเวลาทหนเมาสวายหาแทนใตนา ตงแตปลอยหนเมาสจนกระทงหนเมาสคนหาแทนใตนาเจอเปนคาเวลาทหาแทนใตนาเจอ (Escape Latency) ซงจะกาหนดเวลาไมเกน 60 วนาท 2.4 ทาการทดลองแบบเดมซา 4 ครงตอ 1 ตว ทาจนครบทกกลม 3. ทาการทดสอบการเรยกคนความจาเกากลบคน (Retention Test) โดยการนาแทนใตนาออก (วนท 8 ตลาคม พ.ศ. 2557) 3.1 ปลอยหนเมาสในโซนทไมมแทนใตนาใชเวลา 60 วนาท 3.2 บนทกเวลาทหนเมาสวายในโซนทเคยมแทนใตนา

36

ภำพท 9 ขนตอนการดาเนนการทดลอง ระยะกอนการทดลอง ระยะกำรทดลอง (ตงแตวนท 9 - 31 ตลาคม พ.ศ. 2557) 1. เรมปอนสารทดสอบใหหนเมาสทกกลมตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน (ตงแตวนท 9 - 29 ตลาคม พ.ศ. 2557) 2. ในระหวาง 21 วนจะมการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 3 ดาน 4 อปกรณ ในการปอนครงแรก (Single Dose) หลงจากนนทกครงทครบ 7, 14 และ 21 วน (วนท 9, 15, 22, 29 ตลาคม พ.ศ. 2557) การทดลอง คอ 1) การเรยนรและความจา ดวยอปกรณ MWM และ NOR 2) ความวตกกงวล ดวยอปกรณ EPM 3) การควบคมการเคลอนไหว ดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test 3. เมอครบ 21 วนของการปอนจะทาการทดสอบการเรยกคนความจาเกากลบคน(Retention Test) ดวยอปกรณ MWM และการทดสอบ Tail Immersion Test เปนอปกรณสดทาย (วนท 30 ตลาคม พ.ศ. 2557) 4. วนตอมาหนเมาสทกกลมถกเหนยวนาสมองเสอมระยะแรก ดวยการฉดสโคโพลามนทชองทอง (2 mg/kg BW i.p) (วนท 31 ตลาคม พ.ศ. 2557) ภำพท 10 ขนตอนการดาเนนการทดลอง ระยะการทดลอง

พกหนเมาสทกกลมเปนเวลา 10 วน

ฝกการเรยนรและความจาดวยอปกรณ MWM เปนเวลา 7 วน

ทาการทดสอบการเรยกคนความจาเกากลบคน (Retention Test) ในวนท 8 ดวยอปกรณ MWM

ทาการปอนสารทดสอบใหหนเมาสตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน

ในระหวางการปอน 21 วนมการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 3 ดาน

ในวนท 1, 7, 14, 21 ของการปอน

หลงจากการปอนสารทดสอบครบ 21 วน มการทดสอบการเรยกคนความจาเกากลบคน ดวยอปกรณ MWM และการทดสอบระบบประสาทรบความรสก

ทาการเหนยวนาความจาเสอมดวยสโคโพลามนขนาด 2.0 mg/kg BW

37

กำรทดสอบพฤตกรรมทำงระบบประสำท การทดสอบการเรยนรและความจา 1. Morris Water Maze Test (MWM) เปนการทดสอบการเรยนรและความจา เกยวกบทศทางและสถานท (Spatial Memory) (Dinesh & Varun, 2012, pp. 3-4) 1.1 ทาการปลอยหนเมาสในอางทรงกลมตามสญลกษณใดกได 1 จด (ยกเวน จดทมแทนใตนาอย) ปลอยใหหนเมาสวายนาหาแทนใตนาในเวลา 60 วนาท 1.2 เมอหนเมาสหาแทนใตนาเจอ จะปลอยใหอยบนแทนเปนเวลาไมเกน 10 วนาท ถาหนเมาสตวใดไมสามารถหาแทนใตนาเจอ ผวจยจะจบหนเมาสวางบนแทนใตนาเปนเวลา 10 วนาท 1.3 บนทกคาเวลาทหนเมาสวายหาแทนใตนาตงแตปลอยหนเมาสจนกระทงหนเมาสคนหาแทนใตนาเจอเปนคาเวลาทหาแทนใตนาเจอ (Escape Latency) ซงจะกาหนดเวลาไมเกน 60 วนาท 1.4 ทาการทดลองแบบเดมซา 4 ครงตอ 1 ตว ทาจนครบทกกลม 1.5 ทาการทดสอบการเรยกคนความจาเกากลบคน (Retention Test) โดยการนาแทนใตนาออก ทาหลงจากการปอนสารทดสอบตดตอเปนระยะเวลา 21 วน 1.5.1 ปลอยหนเมาสในโซนทไมมแทนใตนาใชเวลา 60 วนาท 1.5.2 บนทกเวลาทหนเมาสวายในโซนทเคยมแทนใตนา

ภำพท 11 อปกรณทดสอบการเรยนรและความจา เกยวกบทศทางและสถานท (Morris Water Maze Test) 2. Novel Object Recognition Test (NOR) เปนการทดสอบความคนเคยตอวตถทเคยเหน หรอสมผสกอนหนาในเวลาผานไปเพยง 10 นาท 2.1 ชวงการฝก (Training Phase) 2.1.1 นาวตถทรงกระบอกสขาวทเหมอนกน 2 ชนมาวางในกลองศกษาพฤตกรรมโดยมระยะหางของวตถประมาณ 20 เซนตเมตร 2.1.2 เรมปลอยหนเมาสตรงกลางของทง 2 วตถโดยหนหนาของหนเมาสออกมาดานหนากลองศกษาพฤตกรรม 2.1.3 ปลอยหนเมาสใหสารวจวตถเปนระยะเวลา 5 นาท

Platform

Visual Cues

38

2.1.4 เมอครบ 5 นาท นาหนเมาสกลบเขาไปไวในกรงพกประมาณ 10 นาท 2.1.5 ระหวางทหนเมาสอยในกรงพก ผวจยทาความสะอาดวตถทงสอง และกลองศกษาพฤตกรรม ดวยแอลกอฮอล 2.2 ชวงการทดสอบ (Testing Phase) 2.2.1 นาวตถทรงกระบอกสขาว 1 ชน และวตถทรงกลมสเหลองมาวางในกลองศกษาพฤตกรรมโดยมระยะหางของวตถประมาณ 20 เซนตเมตร 2.2.2 เรมปลอยหนเมาสตรงกลางของทง 2 วตถโดยหนหนาของหนเมาสออกมาดานหนากลองศกษาพฤตกรรม 2.2.3 บนทกคาเวลาทหนเมาสสารวจวตถแตละชน (เรมจบเวลาเมอหนเมาสใชจมกเขาใกลวตถนอยกวา 2 ซม. ไมจบเวลาทเดนรอบ ๆ หรอ นงบนวตถ) ใชเวลาทงหมด 5 นาท ผลการทดสอบจะถกบนทกอยางตอเนองดวยกลองวดทศน (Hoge & Kesner, 2007, pp. 225-231; Mumby, 2001, pp. 159-181)

ก. ข. ภำพท 12 อปกรณทดสอบความคนเคยตอวตถทเคยเหนหรอสมผสกอนหนาในเวลาผานไป เพยง 10 นาท (Novel Object Recognition Test) โดยแบงออกเปน 2 ชวง ก. ชวงการฝก (Training Phase) ข. ชวงการทดสอบ (Testing Phase) ผวจยนาขอมลระยะเวลาในการสารวจวตถเดม (A) และวตถใหม (C) ในชวงทดสอบมาคานวณคาดชนความจา (Object Recognition Index) ของหนเมาสแตละตว ซงคาดชนความจา คอ เวลาทหนเมาสสามารถจาไดวาวตถทรงกระบอกสขาวเคยเหนหรอสมผสมาแลว ถาหนเมาสตวใดจาไดกจะสนใจวตถทรงกลมสเหลองมากกวาวตถทรงกระบอกสขาว ซงดชนความจา คดไดจากสตรโดยท TA เปนเวลาทหนเมาสสารวจวตถชน A และ TC เปนเวลาทหนเมาสสารวจวตถชน C ในชวงระยะทดสอบ (Testing Phase) ดงสมการ

10 min

39

Object Recognition Index = [TC/ (TA + TC)] x 100 เมอ TA เปนเวลาทหนเมาสสารวจวตถชนเกาในชวง Testing Phase TC เปนเวลาทหนเมาสสารวจวตถชนใหมในชวง Testing Phase การทดสอบความวตกกงวล

1. Elevated Plus Maze Test (EPM) เปนการทดสอบความวตกกงวลในหนเมาสทเหนยว นาใหเกดความวตกกงวล ดวยอปกรณทางเดนรปกากบาท 1.1 ปลอยหนเมาสบรเวณตรงกลางของทางเดนรปกากบาท 1.2 บนทกเวลาทหนเมาสเขาแขนแตละแขนภายในเวลา 3 นาท ผลการทดสอบจะถกบนทกอยางตอเนองดวยกลองวดทศน (Pellow et al., 1985, pp. 149-167

ภำพท 13 อปกรณทดสอบความวตกกงวล (Elevated Plus Maze) การทดสอบการควบคมการเคลอนไหว

1. Exploratory Box Behavior Test การทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหวนจะทา การทดสอบ โดยการสงเกตพฤตกรรม 3 แบบ คอ การตกแตงขน (Grooming) การยก 2 ขาหนา (Rearing) การเลย (Licking) 1.1 ปลอยหนเมาสใหเคลอนไหวอยางอสระภายในกลองศกษาพฤตกรรม 1.2 บนทกขอมลจานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรมแตละแบบ จานวนกครง 1.3 เวลาทใชในการสงเกตพฤตกรรม 3 นาท ผลการทดสอบจะถกบนทกอยางตอเนองดวยกลองวดทศน (Blanchard, Griebel, & Blanchard, 2001, pp. 205-218; Hughes, Desmond, & Fisher, 2004, pp. 173-181)

40

ภำพท 14 อปกรณทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหว (Exploratory Box Behavior Test) การทดสอบระบบประสาทรบความรสก 1. Tail Immersion Test เปนการทดสอบการตอบสนองตอความเจบปวด โดยใชความรอนเปนตวกระตนใหเกดความเจบปวด (Kuhad & Chopra, 2007, pp. 108-111) 1.1 นาอางทรงกลมใสนาสะอาด นาไปตงบนแผนความรอน ใหนามอณหภม 45-50 องศาเซลเซยส โดยใชเทอรโมมเตอรวดอณหภม 1.2 นาหางหนเมาสจมลงในนาอณหภม 45-50 องศาเซลเซยส เมอหนเมาสสะบดหางนาหนเมาสขนจากนาอนทนท 1.3 ทาการบนทกเวลา (Response Time) ทหนเมาสตอบสนองตอความรอนโดยไมสะบดหางหน ตงแตเรมจมหางหนเมาสจนกระทงหนเมาสสะบดหาง

ภำพท 15 อปกรณทดสอบระบบประสาทรบความรสก ระยะหลงกำรทดลอง (วนท 31 - 8 พฤศจกายน พ.ศ. 2557) 1. พกหนเมาสทกกลมหลงจากเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามนเปนเวลา 60 นาท (วนท 31 ตลาคม พ.ศ. 2557)

41

2. ทาการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาททงหมด 4 ดาน 5 อปกรณ เรยงลาดบ การทดสอบดงน (วนท 31 ตลาคม พ.ศ. 2557) 2.1 การเรยนรและความจา ดวยอปกรณ MWM และ NOR (MWM จะทดสอบ การเรยกคนความจาเกากลบคน (Retention Test)) 2.2 ความวตกกงวล ดวยอปกรณ EPM 2.3 การควบคมการเคลอนไหว ดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test 2.4 ระบบประสาทรบความรสก ดวยอปกรณ Tail Immersion Test (หมายเหต: วธการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทแตละดาน ทาเหมอนวธการทดสอบในระยะการทดลอง) 3. กระบวนการจดการเกยวกบซากสตว (วนท 8 พฤศจกายน พ.ศ. 2557) ภำพท 16 ขนตอนการดาเนนการทดลอง ระยะหลงการทดลอง

พกหนเมาสทกกลมเปนระยะเวลา 60 นาทหลงการเหนยวนา

ทาการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน โดย การเรยนรและความจา ดวย MWM จะทดสอบการเรยกคนความจาเกากลบคน

กระบวนการจดการเกยวกบซากสตว

42

ตำรำงท 1 สรปขนตอนการดาเนนการทดลอง (หนเมาสทกกลมจะไดรบการทดสอบเหมอนกน ตลอดการทดลอง)

ระยะเวลาการทดลองรวม 49 วน (ตงแตวนท 21 - 8 พฤศจกายน พ.ศ. 2557)

ระยะกอนการทดลอง ระยะทดลอง ระยะหลงการทดลอง วนท 1-17

วนท 18

วนท 19-39

วนท 40

วนท 41 และ 48

พกหนเมาสเปนเวลา 10 วน ทาการฝก การเรยนรและความจา ดวยMWM

ทดสอบการเรยกคน ความจาเกากลบคนดวย MWM

ปอนสารทดสอบตดตอกน 21 วน ทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในวนท (1,7,14, 21 การปอน) ยกเวน ระบบประสาทรบความรสก

ทดสอบการเรยกคนความจาเกากลบคน ดวย MWM และ ระบบประสาทรบความรสก ดวย Tail Immersion Test

เหนยวนาความจาเสอมดวย สโคโพลามน (วนท 41) หลงจากนน 60 นาท ทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท ทง 4 ดาน (การเรยนรและความจาดวย MWM จะทดสอบการเรยกคนความจาเกากลบคน) และ กระบวนการจดการเกยวกบซากสตว (วนท 48)

หมายเหต : MWM คอ Morris Water Maze NOR คอ Novel Object Recognition Index EPM คอ Elevated Plus Maze สารทดสอบ คอ นากลน และนามะละกอสกขนาดตาง ๆ ตอนท 4 กำรเกบรวบรวมขอมล ผวจยเกบขอมลจากการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน ตามการดาเนน การทดลอง ดงน ระยะกอนการทดลอง (วนท 1 - 8 ตลาคม พ.ศ. 2557) 1. บนทกขอมลพฤตกรรมการเรยนรและความจา 1.1 บนทกขอมลพฤตกรรมการเรยนรและความจา ดวยอปกรณ MWM ขอมลไดจาก ระยะเวลาทหนเมาสวายนาหาแทนใตนาใหเจอในชวงการฝก ทง 7 วน และระยะเวลาทหนเมาสวายอยในโซนทเคยมแทนใตนา (Retention Test) (ภาคผนวก ก) ระยะการทดลอง (วนท 9 - 31 ตลาคม พ.ศ. 2558) 1. บนทกขอมลพฤตกรรมการเรยนรและความจา 1.1 บนทกขอมลพฤตกรรมการเรยนรและความจา ดวยอปกรณ MWM ขอมลไดจากระยะเวลาทหนเมาสวายนาหาแทนใตนาใหเจอทกชวงของการปอน (1, 7, 14, 21 การปอน) และระยะ เวลาทหนเมาสวายอยในโซนทเคยมแทนใตนา เฉพาะหลงไดรบสารทดสอบตดตอกนเปนเวลา 21 วน (ภาคผนวก ก)

43

1.2 บนทกขอมลพฤตกรรมการเรยนรและความจาของหนเมาสดวยอปกรณ NOR ขอมลไดจากระยะเวลาทหนเมาสสารวจวตถใหมและวตถเกาในชวงของการทดสอบ (Testing Phase) แลวนาคาระยะเวลาการสารวจวตถมาหาคาดชนความจา (Recognition Index) ทกชวงของการปอน (1, 7, 14, 21 การปอน) (ภาคผนวก ก) 2. บนทกขอมลพฤตกรรมความวตกกงวลในหนเมาสดวยอปกรณ EPM ขอมลไดจากระยะ เวลาทหนเมาสอยในทางเดนแขนเปด (Open Arms) และทางเดนแขนปด (Close Arms) ทกชวงของการปอน (1, 7, 14, 21 การปอน) (ภาคผนวก ก) 3. บนทกขอมลพฤตกรรมการควบคมการเคลอนไหวดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test ขอมลไดจาก จานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Grooming Rearing และ Licking ทกชวงของการปอน (1, 7, 14, 21 การปอน) (ภาคผนวก ก) 4. วดพฤตกรรมระบบประสาทรบความรสกดานการตอบสนองตอความเจบปวดดวยอปกรณ Tail Immersion Test ขอมลไดจาก ระยะเวลาทหางของหนเมาสตอบสนองตอความรอนโดย การสะบดหาง เฉพาะหลงไดรบสารทดสอบตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน (ภาคผนวก ก) ระยะหลงการทดลอง (วนท 31 ตลาคม พ.ศ. 2558) 1. บนทกขอมลพฤตกรรมการเรยนรและความจา 1.1 บนทกขอมลพฤตกรรมการเรยนรและความจา ดวยอปกรณ MWM ขอมลไดจากระยะเวลาทหนเมาสวายอยในโซนทเคยมแทนใตนา (ภาคผนวก ก) 1.2 บนทกขอมลพฤตกรรมการเรยนรและความจาของหนเมาสดวยอปกรณ NOR ขอมลไดจากระยะเวลาทหนเมาสสารวจวตถใหมและวตถเกาในชวงของการทดสอบ (Testing Phase) แลวนาคาระยะเวลาการสารวจวตถมาหาคาดชนความจา (Recognition Index) (ภาคผนวก ก) 2. บนทกขอมลพฤตกรรมความวตกกงวลในหนเมาสดวยอปกรณ EPM ขอมลไดจากระยะ เวลาทหนเมาสอยในทางเดนแขนเปด (Open Arms) และทางเดนแขนปด (Close Arms) (ภาคผนวก ก) 3. บนทกขอมลพฤตกรรมการควบคมการเคลอนไหวดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test ขอมลไดจาก จานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Grooming Rearing และ Licking (ภาคผนวก ก) 4. บนทกขอมลพฤตกรรมระบบประสาทรบความรสกดานการตอบสนองตอความเจบปวดดวยอปกรณ Tail Immersion Test ขอมลไดจาก ระยะเวลาทหางของหนเมาสตอบสนองตอความรอนโดยการสะบดหาง (ภาคผนวก ก) ตอนท 5 กำรวเครำะหขอมล การวเคราะหขอมลการเปรยบเทยบผลของนามะละกอสกทมตอการปกปองระบบประสาทของแบบจาลองการเกดโรคสมองเสอมระยะแรกในสตวทดลอง ตามการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง เปน 4 ตอน ดงน ตอนท 1 การวเคราะหขอมลการทดสอบการเรยนรและความจา โดยวเคราะหขอมลเบอง ตนของกลมตวอยางกบกลมควบคมโดยใชคาสถตพนฐาน และเปรยบเทยบคาเฉลยขอมลหลงไดรบสารทดสอบตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน และเปรยบเทยบคาเฉลยขอมลหลงไดรบการเหนยวนาสมองเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน โดยใชสถตทดสอบ One-way ANOVA และวเคราะหคาสถตของขอมล

44

เปรยบเทยบกอนกบหลงการเหนยวนาสมองเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน โดยใชสถตทดสอบท (Pair t-test) ตอนท 2 การวเคราะหขอมลการทดสอบความวตกกงวล โดยวเคราะหขอมลเบองตนของกลมตวอยางกบกลมควบคมโดยใชคาสถตพนฐาน และเปรยบเทยบคาเฉลยขอมลหลงไดรบสารทดสอบตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน และเปรยบเทยบคาเฉลยขอมลหลงไดรบการเหนยวนาสมองเสอมชวคราว ดวยสโคโพลามน โดยใชสถตทดสอบ One-way ANOVA และวเคราะหคาสถตของขอมลเปรยบเทยบกอนกบหลงการเหนยวนาสมองเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน โดยใชสถตทดสอบท (Pair t-test) ตอนท 3 การวเคราะหขอมลการทดสอบการควบคมการเคลอนไหว โดยวเคราะหขอมลเบองตนของกลมตวอยางกบกลมควบคมโดยใชคาสถตพนฐาน และเปรยบเทยบคาเฉลยขอมลหลงไดรบสารทดสอบตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน และเปรยบเทยบคาเฉลยขอมลหลงไดรบการเหนยวนาสมองเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน โดยใชสถตทดสอบ Nonparametric ดวย K Independent Sample และวเคราะหคาสถตของขอมลเปรยบเทยบกอนกบหลง การเหนยวนาสมองเสอมชวคราวดวย สโคโพลามน Nonparametric ดวย Related-Samples Test ตอนท 4 การวเคราะหขอมลการทดสอบระบบประสาทรบความรสก โดยวเคราะหขอมลเบองตนของกลมตวอยางกบกลมควบคมโดยใชคาสถตพนฐาน และเปรยบเทยบคาเฉลยขอมลหลงไดรบสารทดสอบตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน และเปรยบเทยบคาเฉลยขอมลหลงไดรบการเหนยวนาสมองเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน โดยใชสถตทดสอบ One-way ANOVA และวเคราะหคาสถตของขอมลเปรยบเทยบกอนกบหลงการเหนยวนาสมองเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน โดยใชสถตทดสอบท (Pair t-test) ตอนท 6 กระบวนกำรจดกำรเกยวกบซำกสตว (วนท 8 พฤศจกำยน พ.ศ. 2557) เมอสนสดการทดสอบทางดานพฤตกรรมแลว 1. หนเมาสทกตวจะถกทาสลบ (Anesthesia) โดยการฉด Nembutal® ขนาด 50 มลลกรมตอกโลกรมนาหนกตว เขาทชองทอง 2. เมอหนเมาสสลบดแลวนามาทดสอบความเจบปวด (Areflexia) 3. หลงจากนนใชนาเกลอ (Normal Saline) ไลเลอด (Perfusion) ทางหลอดเลอดดา 4. ทาการการณยฆาตหนเมาสทกตว (Euthnasia) 5. ซากหนเมาสทกตวจะถกนาไปใสในถงอยางมดชด และนาไปเกบไวในตแชแขง ณ อณหภม -20 องศาเซลเซยส เพอนาไปกาจดดวยวธการเผาดวยเตาความรอนสงทศนยสตวทดลองแหงชาต มหาวทยาลยมหดล (วนท 14 พฤศจกายน พ.ศ. 2557)

บทท 4 ผลการวจย

การวจยนเปนการเปรยบเทยบผลของนามะละกอสกทมตอการปกปองระบบประสาทของแบบจาลองการเกดโรคสมองเสอมระยะแรกในสตวทดลองมวตถประสงค 1) เพอทดสอบผลของการไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน 2) เพอเปรยบเทยบผลของการไดรบนามะละกอสกตดตอ กนเปนระยะเวลา 21 วน ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคมทถกเหนยวนาดวยสโคโพลามน 3) เพอเปรยบเทยบผลของการไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กอนกบหลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน โดยทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง 4 ดาน 1) การเรยนรและความจา (Learning and Memory) 2) ความวตกกงวล (Anxiety) 3) การควบคมการเคลอนไหว (Motor Control) และ 4) ระบบประสาทรบความรสก (Sensory System) ผลการวจยแบงเปน 5 ตอน ดงน ตอนท 1 ผลการวเคราะหระดบสารเบตาแคโรทนในมะละกอสกพนธศรสภา ตอนท 2 ผลการวเคราะหคาสถตพนฐาน และเปรยบเทยบคาเฉลยของขอมล ตอนท 3 ผลของการไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ตอนท 4 ผลการเปรยบเทยบการไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคมทถกเหนยวนาดวยสโคโพลามน ตอนท 5 ผลการเปรยบเทยบการไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กอนกบหลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน ความหมายและสญลกษณทใชในการนาเสนอผลการวเคราะหขอมล มดงน M หมายถง คาเฉลยของขอมล SD หมายถง สวนเบยงเบนมาตรฐาน t หมายถง คาสถตท F หมายถง คาสถตเอฟ p หมายถง คาความนาจะเปน ss หมายถง ผลบวกของคะแนนเบยงเบนยกกาลงสอง df หมายถง คาองศาอสระ MS หมายถง ความแปรปรวน Min หมายถง คาตาสดของขอมล Max หมายถง คาสงสดของขอมล ตอนท 1 ผลการวเคราะหระดบสารเบตาแคโรทนในมะละกอสกพนธศรสภา จากการวเคราะหสารเบตาแคโรทน (β-Carotene) ในมะละกอสกพนธศรสภา 100 กรมดวยเครอง High Performance Liquid Chromatography (HPLC) โดยใชสารละลายมาตรฐาน เบตาแคโรทน (Standard β-Carotene) ทความยาวคลน 450 นาโนเมตร ทหองปฏบตการสถาบน

46

โภชนาการ มหาวทยาลยมหดล ปรากฏวามะละกอสกพนธศรสภา 100 กรม มปรมาณเบตาแคโรทน 326 ไมโครกรม (ภาคผนวก ฉ) ตอนท 2 ผลการวเคราะหคาสถตพนฐาน และเปรยบเทยบคาเฉลยของขอมล ผลการวเคราะหคาสถตพนฐาน จาแนกตามกลมทดลองกบกลมควบคม ตามการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง 4 ดาน ดงตารางท 2, 3, 4 และ 5 ตารางท 2 คาเฉลย สวนเบยงเบนมาตรฐาน คาสงสด และคาตาสดของขอมล จาแนกตามกลมทดลอง กบกลมควบคม ตามการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง ยกเวน การควบคมการเคลอนไหว

การเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ MWM (Sec) Group n min max M SD Control 5 4.67 20.67 14.53 6.30 Low Dose 2.5 4 19.67 22.33 20.92 1.29 Medium Dose 5.0 5 20.33 24.67 22.00 1.75 High Dose 7.5 5 22.33 25.33 23.80 1.07

การเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ NOR (% Recognition Index) Group n min max M SD Control 5 16.67 53.85 37.01 15.57 Low Dose 2.5 4 40.00 65.00 55.23 10.81 Medium Dose 5.0 5 63.33 86.25 76.82 9.34 High Dose 7.5 5 70.00 97.86 80.96 11.76

ความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM (Sec) Group n min max M SD Control 5 23.00 42.00 28.40 8.35 Low Dose 2.5 4 50.00 62.00 57.25 5.50 Medium Dose 5.0 5 38.00 60.00 46.80 8.23 High Dose 7.5 5 44.00 57.00 47.80 5.26

ระบบประสาทรบความรสก วดดวยอปกรณ Tail Immersion Test (Sec) Group n min max M SD Control 5 1.80 4.20 2.40 1.01 Low Dose 2.5 4 1.50 1.80 1.66 .14 Medium Dose 5.0 5 2.00 4.20 3.04 .92 High Dose 7.5 5 1.00 2.40 1.80 .58

47

จากตารางท 2 แสดงใหเหนวา หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วนกลมทดลองมคาเฉลยการทดสอบการเรยนรและความจา กบคาเฉลยเวลาการอยในแขนเปดในอปกรณการทดสอบความวตกกงวลมากกวากลมควบคม สวนคาเฉลยการทดสอบระบบประสาทรบความรสก ปรากฏวา กลมควบคมมคาเฉลยการตอบสนองตอความเจบปวดมากกวากลมทดลองขนาดตา และขนาดสงมเฉพาะกลมทดลองขนาดปานกลางเทานนทมการตอบตอบสนองตอความเจบปวดมากกวากลมควบคม ตารางท 3 คาเฉลย สวนเบยงเบนมาตรฐาน คาสงสด และคาตาสดของขอมล จาแนกตามกลมทดลอง กบกลมควบคมหลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน ตามการทดสอบพฤตกรรมทางระบบ ประสาทในสตวทดลอง ยกเวน การควบคมการเคลอนไหว

การเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ MWM (Sec) Group n min max M SD Control 5 1.33 20.33 11.79 7.64 Low Dose 2.5 4 14.33 21.67 18.33 3.21 Medium Dose 5.0 5 18.00 23.33 21.27 2.18 High Dose 7.5 5 20.33 24.33 22.27 1.77

การเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ NOR (% Recognition Index) Group n min max M SD Control 5 6.67 30.00 20.00 11.05 Low Dose 2.5 4 46.67 65.10 58.82 8.27 Medium Dose 5.0 5 42.00 68.00 55.68 9.55 High Dose 7.5 5 30.00 64.78 48.03 13.21

ความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM (Sec) Group n min max M SD Control 5 17.00 38.00 22.60 8.96 Low Dose 2.5 4 39.00 50.00 46.00 5.23 Medium Dose 5.0 5 36.00 59.00 46.00 9.35 High Dose 7.5 5 47.00 63.00 51.40 6.66

ระบบประสาทรบความรสก วดดวยอปกรณ Tail Immersion Test (Sec) Group n min max M SD Control 5 1.60 4.40 2.56 1.11 Low Dose 2.5 4 2.00 2.45 2.16 .21 Medium Dose 5.0 5 1.40 1.80 1.48 .18 High Dose 7.5 5 1.60 2.20 1.96 .33

48

จากตารางท 3 แสดงใหเหนวา หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน หลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน กลมทดลองมคาเฉลยการทดสอบการเรยนรและความจา กบคาเฉลยเวลาในการอยในแขนเปดในอปกรณการทดสอบความวตกกงวลมากกวากลมควบคม สวนคาเฉลยการทดสอบระบบประสาทรบความรสก ปรากฏวา กลมควบคมมคาเฉลยการตอบสนองตอความเจบปวดมากกวากลมทดลอง ตารางท 4 คาเฉลย คาสงสด และคาตาสดของขอมลของการควบคมการเคลอนไหวแบงตามพฤตกรรม 3 แบบ คอ Grooming, Rearing และ Licking จาแนกตามกลมทดลองกบกลมควบคม กอนกบหลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน

การควบคมการเคลอนไหว วดดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test (Counts) Grooming Pre-Scopolamine Post-Scopolamine

Group n min max M n Min max M Control 5 2 16 7.20 5 0 4 1.40 Low Dose 2.5 4 1 8 4.25 4 3 8 6.75 Medium Dose 5.0 5 2 6 4.00 5 5 7 6.40 High Dose 7.5 5 1 13 5.60 5 1 7 4.20

Rearing Pre-Scopolamine Post-Scopolamine Group n min max M n min max M Control 5 9 23 15.40 5 4 19 13.20 Low Dose 2.5 4 14 25 20.25 4 3 18 11.25 Medium Dose 5.0 5 8 25 14.60 5 3 13 8.40 High Dose 7.5 5 8 25 15.20 5 3 17 11.60

Licking Pre-Scopolamine Post-Scopolamine Group n min max M n min max M Control 5 0 4 2.40 5 0 3 1.40 Low Dose 2.5 4 3 5 4.25 4 5 10 7.25 Medium Dose 5.0 5 4 12 6.20 5 3 11 6.40 High Dose 7.5 5 0 5 2.20 5 0 5 1.40

จากตารางท 4 แสดงใหเหนวา หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วนกอนการเหนยวนาดวยสโคโพลามน กลมทดลองมคาเฉลยพฤตกรรม Grooming นอยกวากลมควบคม กลมทดลองขนาดปานกลางกบขนาดสงมคาเฉลยพฤตกรรม Rearing ไมแตกตางจากกลมควบคม ยกเวน กลมทดลองขนาดตามคาเฉลยพฤตกรรม Rearing มากกวากลมควบคม และ กลมทดลองขนาดตากบขนาดสงมคาเฉลยพฤตกรรม Licking ไมแตกตางจากกลมควบคม ตรงกนขามกบกลมทดลองขนาดปานกลางมคาเฉลยพฤตกรรม Licking มากกวากลมควบคม หลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน กลมทดลองมคาเฉลยพฤตกรรม Grooming มากกวากลมควบคม กลมทดลองมคาเฉลยพฤตกรรม Rearing นอย

49

กวากลมควบคม และ กลมทดลองขนาดสงมคาเฉลยพฤตกรรม Licking ไมแตกตางจากกลมควบคม ตรงกนขามกบขนาดตากบขนาดปานกลางมคาเฉลยพฤตกรรม Licking มากกวากลมควบคม ตารางท 5 การเปรยบเทยบคาเฉลย สวนเบยงเบนมาตรฐาน คาความแตกตาง ระหวางกลมทดลองกบ กลมควบคม กอนกบหลงการเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามนโดย ประเมนจากพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง ยกเวน การควบคมการเคลอนไหว

การเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ MWM (Sec) Pre-Sco.* Post-Sco.* Mean

diff df t p

Group M SD M SD Control 14.53 7.44 11.79 7.64 2.74 4 14.09 .000 Low Dose 2.5 20.92 4.84 18.33 4.63 2.59 3 12.31 .001 Medium Dose 5.0 22.00 2.59 21.27 3.38 .74 4 1.18 .305 High Dose 7.5 23.80 4.30 22.27 4.45 1.53 4 3.06 .038

การเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ NOR (% Recognition Index) Pre-Sco.* Post-Sco.* Mean

diff df t p

Group M SD M SD Control 37.01 15.57 20.00 11.05 17.01 4 6.07 .004 Low Dose 2.5 55.23 10.81 58.82 8.27 -3.59 3 -1.74 .180 Medium Dose 5.0 76.82 9.34 55.68 9.55 21.13 4 8.78 .001 High Dose 7.5 80.96 11.76 48.03 13.21 32.93 4 12.77 .000

ความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM (Sec) Pre-Sco.* Post-Sco.* Mean

diff df t p

Group M SD M SD Control 28.40 8.35 22.60 8.96 5.80 4 8.74 .001 Low Dose 2.5 57.25 5.50 46.00 5.23 11.25 3 45 .000 Medium Dose 5.0 46.80 8.23 46.00 9.35 .80 4 .389 .717 High Dose 7.5 47.80 5.26 51.40 6.66 -3.6 4 -5.31 .006

ระบบประสาทรบความรสก วดดวยอปกรณ Tail Immersion Test (Sec) Pre-Sco.* Post-Sco.* Mean

Diff. df t p

Group M SD M SD Control 2.40 1.01 2.56 1.11 -.16 4 -.78 .477 Low Dose 2.5 1.66 .14 2.16 .21 -.50 3 -3.74 .033 Medium Dose 5.0 3.04 .92 1.48 .18 1.56 4 4.33 .012 High Dose 7.5 1.80 .58 1.96 .33 -.16 4 -.41 .700

*p<.05, **p<.01, Sco.* หมายถง สโคโพลามน (Scopolamine)

50

จากตารางท 5 แสดงใหเหนวา กลมทดลองกบกลมควบคมมคาเฉลยการทดสอบการเรยนรและความจา ดวยอปกรณ MWM ลดลงจากกอนเหนยวนาดวยสโคโพลามน แตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 หลงเหนยวนาดวยสโคโพลามน กลมทดลองกบกลมควบคมมคาเฉลยการทดสอบการเรยนรและความจา ดวยอปกรณ NOR ลดลงจากกอนเหนยวนาดวยสโคโพลามนแตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 หลงเหนยวนาดวยสโคโพลามน ยกเวน กลมทดลองขนาดตามการเรยนรและความจาไมแตกตางจากกอนเหนยวนาดวยสโคโพลามน กลมทดลองกบกลมควบคมมคาเฉลยเวลาในการอยในแขนเปดในอปกรณการทดสอบความวตกกงวลลดลงจากกอนเหนยวนาดวยสโคโพลามนแตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 ยกเวน กลมทดลองขนาดปานกลาง มคาเฉลยเวลาในการอยในแขนเปดในอปกรณการทดสอบความวตกกงวลไมแตกตาง เมอเทยบกบกอนเหนยวนาดวย สโคโพลามน และคาเฉลยการทดสอบระบบประสาทรบความรสก กลมทดลองขนาดสงกบกลมควบคมมคาเฉลยการตอบสนองตอความเจบปวดไมแตกตางจากกอนเหนยวนาดวยสโคโพลามน กลมทดลองขนาด ตามคาเฉลยการตอบสนองตอความเจบปวดเพมขนจากกอนเหนยวนาดวยสโคโพลามน แตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 ยกเวน ขนาดปานกลางเทานนทมการตอบสนองตอความเจบปวดลดลงจากกอนเหนยวนาดวยสโคโพลามนแตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 ตอนท 3 ผลของการไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน 1. ผลการทดสอบการเรยนรและความจา 1.1 ผลการเปรยบเทยบการทดสอบการเรยนรและความจา เกยวกบทศทางและสถานท วดดวยอปกรณ MWM จากคาเฉลยระยะเวลาการทดสอบการเรยกคนความจาเกากลบคน (Retention Test) โดยการนาแทนใตนาออก หลงจากหนเมาสไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ระหวางหนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลอง ดงตารางท 6 ตารางท 6 คาสถตพนฐานการทดสอบการเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ MWM ระหวางกลม ทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน

การเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ MWM (Sec) Group n min Max M SD Control 5 4.67 20.67 14.53 6.30 Low Dose 2.5 4 19.67 22.33 20.92 1.29 Medium Dose 5.0 5 20.33 24.67 22.00 1.75 High Dose 7.5 5 22.33 25.33 23.80 1.07

จากตารางท 6 แสดงใหเหนวาหลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กลมทดลองมคาเฉลยการทดสอบการเรยนรและความจา มากกวากลมควบคม

51

ตารางท 7 การวเคราะหความแปรปรวนของการทดสอบความจาแบบ Retention ของหนเมาส ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงจากไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน แหลง df ss MS F p ระหวางกลม ภายในกลม

3.000 15.000

243.487 180.518

81.162 12.035

6.744* .004

รวม 424.005 424.005 **p<.01 จากการวเคราะหคาเฉลยระยะเวลาความจาแบบ Retention ปรากฏวา หนเมาสแตละกลมทไดรบนามะละกอสกทตางกน มผลทาใหหนเมาสแตละกลมมความจาแตกตางกนอยางมนย สาคญทางสถตทระดบ p<.01 (F=6.744*, p<.004) ซงตองมการทดสอบรายคตอไปนดงตารางท 8 ตารางท 8 คาเฉลย คาเบยงเบนมาตรฐาน และสหสมพนธของความจาแบบ Retention ของหน เมาสกลมตาง ๆ หลงจากไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กลม

M

(Sec)

กลม SD ควบคม ขนาดตา ขนาด

ปานกลาง ขนาดสง

ควบคม 14.534 6.30 - ขนาดตา 20.918 1.29 -6.459** - ขนาดปานกลาง 22.002 1.75 -8.468** -2.009 - ขนาดสง 23.800 1.07 -9.867** -3.408* -1.399 -

*p<.05, **p<.01 การเปรยบเทยบรายคคาเฉลยของความจาของหนเมาสแตละกลม ปรากฏวา กลมทดลองมการเรยนรและความจาทมากกวากลมควบคม และแตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 และ p<.01

52

**p<.01 ภาพท 17 เปรยบเทยบคาเฉลยระยะเวลาการทดสอบความจาแบบ Retention ของหนเมาสระหวาง กลมทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน 1.2 ผลการเปรยบเทยบการทดสอบการเรยนรและความจาเกยวกบการจดจาวตถสงของ วดดวยอปกรณ NOR โดยใชคาเฉลยดชนความจา (Recognition Index) ในหนเมาสกลมทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน คาสถตพนฐานแสดงดงตารางท 9 ตารางท 9 คาสถตพนฐานการทดสอบการเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ NOR ระหวางกลม ทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน

การเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ NOR (% Recognition Index) Group n min max M SD Control 5 16.67 53.85 37.01 15.57 Low Dose 2.5 4 40.00 65.00 55.23 10.81 Medium Dose 5.0 5 63.33 86.25 76.82 9.34 High Dose 7.5 5 70.00 97.86 80.96 11.76

จากตารางท 9 แสดงใหเหนวาหลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กลมทดลองมคาเฉลยการทดสอบการเรยนรและความจา มากกวากลมควบคม

0.00

5.00

10.00

15.00

20.00

25.00

30.00

Group 1 vs 2 Group 1 vs 3 Group 1 vs 4

Rete

ntio

n Ti

me

in T

arge

t Zon

e (S

ec)

Post Days-21 Feeding

Group 1 (ควบคม) Group 2 (ขนาดตา), Group 3 (ขนาดปานกลาง), Group 4 (ขนาดสง)

****

**

53

ตารางท 10 แสดงการวเคราะหความแปรปรวนของการทดสอบความสามารถในการจดจาวตถสง ของของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงจากไดรบนามะละกอสก ตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน แหลงความแปรปรวน ss df MS F p ระหวางกลม ภายในกลม

6186.154 2222.505

3 15

2062.048 148.167

13.917** .000

รวม 8408.649 18 **p<.01 ตารางท 10 การวเคราะหความแปรปรวนของการทดสอบความสามารถในการจดจาวตถสง ของหลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ปรากฏวา หนเมาสแตละกลมทไดรบนามะละกอสกทตางกน มคาความสามารถในการจดจาวตถสงของแตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 (F=13.917**, p<.00) ซงตองมการทดสอบรายคตอไปนดงตารางท 11 ตารางท 11 คาเฉลย คาเบยงเบนมาตรฐาน และสหสมพนธความสามารถในการจดจาวตถสงของ ของหนเมาสกลมตาง ๆ หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กลม

M

(Sec)

กลม SD ควบคม ขนาดตา ขนาด

ปานกลาง ขนาดสง

ควบคม 37.010 15.57 - ขนาดตา 55.230 10.81 -18.22* - ขนาดปานกลาง 76.818 9.34 -39.81** -21.59* - ขนาดสง 80.960 61.61 -43.95** -25.73** -4.142 -

*p<.05, **p<.01 จากตารางท 11 การเปรยบเทยบรายคคาเฉลยความสามารถในการจดจาวตถสงของ หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ปรากฏวา กลมทดลองมความสามารถในการจดจาวตถสงของมากกวากลมควบคม โดยแตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 และ p<.01

54

*p<.05, **p<.01 ภาพท 18 เปรยบเทยบคาเฉลยความสามารถในการจดจาวตถสงของ โดยใชคาดชนความจา (Recognition Index) ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอ กนเปนระยะเวลา 21 วน 2. ผลการทดสอบความวตกกงวล (Anxiety) 2.1 ผลการทดสอบความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM หลงจากหนเมาสไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ระหวางหนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลอง คาสถตพนฐานแสดงดงตารางท 12 ตารางท 12 คาสถตพนฐานการทดสอบความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM ระหวางกลมทดลอง กบกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน

ความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM (Sec) Group n min max M SD Control 5 23.00 42.00 28.40 8.35 Low Dose 2.5 4 50.00 62.00 57.25 5.50 Medium Dose 5.0 5 38.00 60.00 46.80 8.23 High Dose 7.5 5 44.00 57.00 47.80 5.26

จากตารางท 12 แสดงใหเหนวาหลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วนกลมทดลองมคาเฉลยเวลาในการอยในแขนเปดในอปกรณการทดสอบความวตกกงวลมากกวากลมควบคม

0.00

10.00

20.00

30.00

40.00

50.00

60.00

70.00

80.00

90.00

Group 1 vs 2 Group 1 vs 3 Group 1 vs 4

% O

bjec

t Rec

ogni

tion

Inde

xPost Days-21 Feeding

Group 1 (ควบคม) Group 2 (ขนาดตา), Group 3 (ขนาดปานกลาง), Group 4 (ขนาดสง)

*

****

55

ตารางท 13 แสดงการวเคราะหความแปรปรวนของการทดสอบความวตกกงวลของหนเมาสระหวาง กลมทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน แหลงความแปรปรวน ss df MS F p ระหวางกลม ภายในกลม

2027.082 751.550

3 15

675.694 50.103

13.486** .000

รวม 2778.632 18 **p< .01 จากตารางท 13 การวเคราะหคาเฉลยความแปรปรวนของระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ปรากฏวา แตละกลมแตก ตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 (F=13.486**, p<.00) ซงตองมการทดสอบรายคตอไป นดงตารางท 14 ตารางท 14 คาเฉลย คาเบยงเบนมาตรฐาน และสหสมพนธของระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) ของหนเมาสกลมตาง ๆ หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กลม

M

(Sec)

กลม SD ควบคม ขนาดตา ขนาด

ปานกลาง ขนาดสง

ควบคม 28.400 8.35 - ขนาดตา 57.000 5.50 -28.60** - ขนาดปานกลาง 46.800 8.23 -18.40** 10.20 - ขนาดสง 47.800 5.26 -19.40** 9.20 -1.00 -

*p<.01 จากตารางท 14 การเปรยบเทยบรายคคาเฉลยของระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) แตละกลม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ปรากฏวา กลมควบคมมความวตกกงวลมากกวากลมทดลอง โดยแตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01

56

*p<.05 ภาพท 19 เปรยบเทยบคาเฉลยระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) ระหวางกลมทดลอง กบกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน 3. ผลการทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหว (Motor Control) 3.1 ผลการทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหวดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test การทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหวนจะศกษาพฤตกรรมทงหมด 3 แบบคอ การตกแตงขน (Grooming) การยน 2 ขาหนา (Rearing) และการเลย (Licking) สงเกตพฤตกรรมของหนเมาส หลงไดรบ นามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ระหวางหนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลองคาสถต พนฐานแสดงดงตารางท 15 ตารางท 15 คาสถตพนฐานของการควบคมการเคลอนไหวแบงตามพฤตกรรม 3 แบบ คอ Grooming, Rearing และ Licking จาแนกตามกลมทดลองกบกลมควบคม

การควบคมการเคลอนไหว วดดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test (Counts) Grooming Pre-Scopolamine Post-Scopolamine

Group n min max M n min max M Control 5 2 16 7.20 5 0 4 1.40 Low Dose 2.5 4 1 8 4.25 4 3 8 6.25 Medium Dose 5.0 5 2 6 4.00 5 5 7 4.20 High Dose 7.5 5 1 13 5.60 5 1 7 4.32

0

10

20

30

40

50

60

70

Group 1vs 2 Group 1 vs 3 Group 1 vs 4

Tim

e Sp

ent

Open

Arm

(Sec

)Days-21 Feeding

Group 1 (ควบคม) Group 2 (ขนาดตา), Group 3 (ขนาดปานกลาง), Group 4 (ขนาดสง)

**

** **

57

ตารางท 15 (ตอ)

Rearing Pre-Scopolamine Post-Scopolamine Group n min max M n min max M Control 5 9 23 15.40 5 4 19 13.20 Low Dose 2.5 4 14 25 19.75 4 3 18 11.25 Medium Dose 5.0 5 8 25 14.60 5 3 13 8.40 High Dose 7.5 5 8 25 15.20 5 3 17 11.60

Licking Pre-Scopolamine Post-Scopolamine Group n min max M n min max M Control 5 0 4 2.40 5 0 3 1.40 Low Dose 2.5 4 3 5 4.00 4 5 10 7.25 Medium Dose 5.0 5 4 12 6.20 5 3 11 6.40 High Dose 7.5 5 0 5 2.20 5 0 5 1.40

จากตารางท 15 แสดงใหเหนวา หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วนกอนการเหนยวนาดวยสโคโพลามน กลมทดลองมคาเฉลยพฤตกรรม Grooming นอยกวากลมควบคม กลมทดลองขนาดปานกลางกบขนาดสงมคาเฉลยพฤตกรรม Rearing ไมแตกตางจากกลมควบคม ยกเวน กลมทดลองขนาดตามคาเฉลยพฤตกรรม Rearing มากกวากลมควบคม และ กลมทดลองขนาดตากบขนาดสงมคาเฉลยพฤตกรรม Licking ไมแตกตางจากกลมควบคม ตรงกนขามกบกลมทดลองขนาดปานกลางมคาเฉลยพฤตกรรม Licking มากกวากลมควบคม หลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน กลมทดลองมคาเฉลยพฤตกรรม Grooming มากกวากลมควบคม กลมทดลองมคาเฉลยพฤตกรรม Rearing นอยกวา กลมควบคม และ กลมทดลองขนาดสงมคาเฉลยพฤตกรรม Licking ไมแตกตางจากกลมควบคมตรงกนขามกบขนาดตากบขนาดปานกลางมคาเฉลยพฤตกรรม Licking มากกวากลมควบคม ตารางท 16 การเปรยบเทยบการทดสอบการควบคมการเคลอนไหว ระหวางกลมทดลองกบกลม ควบคมแบงตามพฤตกรรม 3 แบบ คอ Grooming Rearing และ Licking หลงไดรบ นามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน Grooming Rearing Licking Chi-Square 1.262 2.136 8.041* Df 3 3 3 Asymp. Sig. .738 .545 .045

*p<.05 จากตารางท 16 สถต K Independent Sample ปรากฏวา แตละกลมมพฤตกรรม Grooming และ Rearing ไมแตกตางกน สวนพฤตกรรม Licking ปรากฏวา แตละกลมมพฤตกรรม

58

Licking แตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 (𝜒2 = 8.041*, p<.045) ซงตองมการทดสอบรายคดงตารางท 17 ตารางท 17 คาเฉลย และสหสมพนธการทดสอบพฤตกรรม Licking ระหวางกลมทดลองกบกลม ควบคมหลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน

กลม กลม M ควบคม ขนาดตา ขนาดปานกลาง ขนาดสง

ควบคม 2.40 - ขนาดตา 4.00 -1.60 - ขนาดปานกลาง 6.20 -3.80* -2.20 - ขนาดสง 2.20 .200 1.80 4.00* -

*p<.05 จากตารางท 17 การเปรยบเทยบรายคดวยสถต Independent Sample ปรากฏวา หนเมาสกลมทดลองขนาดปานกลางมพฤตกรรม Licking มากกวากลมควบคมกบกลมทดลองขนาดสง มแตก ตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05

ภาพท 20 เปรยบเทยบคาเฉลยจานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Grooming ระหวางกลมทดลอง กบกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน

0

1

2

3

4

5

6

7

8

Group 1 vs 2 Group 1 vs 3 Group 1 vs 4

Coun

ts/ 3

Min

Grooming of Days-21 Feeding

Group 1 (ควบคม) Group 2 (ขนาดตา), Group 3 (ขนาดปานกลาง), Group 4 (ขนาดสง)

59

ภาพท 21 เปรยบเทยบคาเฉลยจานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Rearing ระหวางกลมทดลอง กบกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน

*p<.05 ภาพท 22 เปรยบเทยบคาเฉลยจานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Licking ระหวางกลมทดลอง กบกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน 4. ผลการทดสอบระบบประสาทรบความรสก (Sensory System) 4.1 ผลการทดสอบประสาทรบความรสกดวยอปกรณ Tail Immersion Test โดยใชความรอนเปนตวกระตนใหเกดความเจบปวดทาการทดสอบ โดยใชวธเอาหางหนเมาสจมลงในนาอณหภม 50oC หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ระหวางหนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลอง คาสถตพนฐานแสดงดงตารางท 18

0

2

4

6

8

10

12

14

Group 1 vs 2 Group 1 vs 3 Group 1 vs 4

Coun

ts/3

Min

Rearing of Post-Scopolamine

Group 1 (ควบคม) Group 2 (ขนาดตา), Group 3 (ขนาดปานกลาง), Group 4 (ขนาดสง)

0

1

2

3

4

5

6

7

Group 1 vs 2 Group 1 vs 3 Group 1 vs 4

Coun

ts/3

Min

Licking of Days-21 Feeding

Group 1 (ควบคม) Group 2 (ขนาดตา), Group 3 (ขนาดปานกลาง),Group 4 (ขนาดสง)

*

60

ตารางท 18 คาสถตพนฐานของตอบสนองตอความเจบปวดดวยความรอน จาแนกตามกลมทดลอง กบกลมควบคม

ระบบประสาทรบความรสก วดดวยอปกรณ Tail Immersion Test (Sec) Group n min max M SD Control 5 1.80 4.20 2.40 1.01 Low Dose 2.5 4 1.50 1.80 1.66 .14 Medium Dose 5.0 5 2.00 4.20 3.04 .92 High Dose 7.5 5 1.00 2.40 1.80 .58

จากตารางท 18 แสดงใหเหนวา กลมควบคมมคาเฉลยการตอบสนองตอความเจบปวดมาก กวากลมทดลองขนาดตาและขนาดสง มเฉพาะกลมทดลองขนาดปานกลางเทานน ทมการตอบตอบสนองตอความเจบปวดมากกวากลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ตารางท 19 แสดงการวเคราะหความแปรปรวนของระยะเวลาการตอบสนองตอความเจบปวดดวย ความรอนของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม แหลงความแปรปรวน ss df MS F p ระหวางกลม ภายในกลม

5.626 8.889

3 15

1.875 .593

3.164 .055

รวม 14.514 18 จากตารางท 19 การวเคราะหคาเฉลยความแปรปรวนของระยะเวลาการตอบสนองตอความเจบปวดดวยความรอน หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ปรากฏวา หนเมาสทกกลมมการตอบสนองตอความเจบปวดดวยความรอนไมแตกตางกน

ภาพท 23 เปรยบเทยบคาเฉลยของระยะเวลาทหางของหนเมาสแชอยในนาอน ระหวางกลม ทดลองกบกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

Group 1 vs 2 Group 1 vs 3 Group 1 vs 4

Tim

e Ta

il Im

ersio

n (S

ec)

Tail Immersion of Pre-Scopolamine

Group 1 (ควบคม) Group 2 (ขนาดตา), Group 3 (ขนาดปานกลาง), Group 4 (ขนาดสง)

61

ตอนท 4 ผลการเปรยบเทยบการไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคมทถกเหนยวนาดวยสโคโพลามน 1. ผลการทดสอบการเรยนรและความจา 1.1 ผลการทดสอบการเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ MWM จากคาเฉลยระยะ เวลาการทดสอบการเรยกคนความจาเกากลบคน (Retention Test) โดยการนาแทนใตนาออก หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน หลงจากนนหนเมาสทกกลมถกเหนยวนาใหความ จาเสอมดวยสโคโพลามน ระหวางหนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลอง ดงตารางท 20 ตารางท 20 คาสถตพนฐานการทดสอบการเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ MWM ระหวาง กลมทดลองกบกลมควบคมหลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน

การเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ MWM (Sec) Group n min max M SD Control (Pre-Scopolamine) 5 4.67 20.67 14.53 6.30 Control (Post-Scopolamine) 5 1.33 20.33 11.80 7.64 Low Dose 2.5 4 14.33 21.67 18.33 3.21 Medium Dose 5.0 5 18.00 23.33 21.27 2.18 High Dose 7.5 5 20.33 24.33 22.27 1.77

จากตารางท 20 แสดงใหเหนวา หลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน กลมทดลองมคาเฉลยการทดสอบการเรยนรและความจามากกวากลมควบคม และกลมควบคมมการเรยนรและความจาลดลงหลงเหนยวนาดวยสโคโพลามน

ภาพท 24 คาเฉลยระยะเวลาการทดสอบความจาแบบ Retention ของหนเมาสกลมตาง ๆ หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน

0

5

10

15

20

25

Group 1 (Pre-Scopolamine)

Group 1 (Post-Scopolamine)

Group 2 (Post-Scopolamine)

Group 3 (Post-Scopolamine)

Group 4 (Post-Scopolamine)Re

tent

ion

Tim

e in

Tar

get Z

one

(Sec

)

Group

Retention Time

62

ตารางท 21 การวเคราะหความแปรปรวนของการทดสอบความจาแบบ Retention ของหนเมาส ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาดวยสโคโพลามน แหลงความแปรปรวน ss df MS F p ระหวางกลม ภายในกลม

333.742 296.149

3 15

111.247 19.743

5.635** .009

รวม 629.891 18 *p<.01 จากตารางท 21 การวเคราะหคาเฉลยระยะเวลาความจาแบบ Retention ปรากฏวา หนเมาสแตละกลมไดรบสารทดสอบทตางกน ทาใหหนเมาสแตละกลมมความจาแตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 (F=5.635**, p<.009) ซงตองมการทดสอบรายคตอไปนดงตารางท 22 ตารางท 22 คาเฉลย คาเบยงเบนมาตรฐาน และสหสมพนธของความจาแบบ Retention ของหนเมาส กลมตาง ๆ หลงจากหนเมาสทกกลมถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน กลม

M

(Sec)

กลม SD ควบคม ขนาดตา ขนาด

ปานกลาง ขนาดสง

ควบคม 11.79 7.64 - ขนาดตา 18.33 3.21 -6.534* - ขนาดปานกลาง 21.27 2.18 -9.468** -2.934 - ขนาดสง 22.27 1.77 -10.468** -3.934 -1.000 -

*p<.05, **p<.01 จากตารางท 22 การเปรยบเทยบรายคคาเฉลยของความจาของหนเมาสแตละกลม ปรากฏวา กลมทดลอง มการเรยนรและความจาทมากกวากลมควบคม และแตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 และ p<.01

63

*p<.05, **p<.01 ภาพท 25 เปรยบเทยบคาเฉลยระยะเวลาการทดสอบความจาแบบ Retention ของหนเมาสระหวาง กลมทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน 1.2 ผลการเปรยบเทยบการทดสอบการเรยนรและความจาเกยวกบการจดจาวตถสงของ วดดวยอปกรณ NOR โดยใชคาเฉลยดชนความจา (Recognition Index) ในหนเมาสกลมทดลองกบกลม ควบคม หลงถกเหนยวนาดวยสโคโพลามน แสดงดงตารางท 23 ตารางท 23 คาสถตพนฐานการทดสอบการเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ NOR ระหวางกลม ทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน

การเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ NOR (% Recognition Index) Group n min max M SD Control (Pre-Scopolamine) 5 16.67 53.85 37.01 15.57 Control (Post-Scopolamine) 5 6.67 30.00 20.00 11.05 Low Dose 2.5 4 46.67 65.10 58.82 8.27 Medium Dose 5.0 5 42.00 68.00 55.68 9.55 High Dose 7.5 5 30.00 64.78 48.03 13.21

จากตารางท 23 แสดงใหเหนวา หลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน กลมทดลองมคาเฉลยการทดสอบการเรยนรและความจามากกวากลมควบคม และกลมควบคมมการเรยนรและความจาลดลงหลงเหนยวนาดวยสโคโพลามน

0.00

5.00

10.00

15.00

20.00

25.00

Group 1 vs 2 Group 1 vs 3 Group 1 vs 4Rete

ntio

n Ti

me

in T

arge

t Zon

e (S

ec)

Post-Scopolamine

Group 1 (ควบคม) Group 2 (ขนาดตา) , Group 3 (ขนาดปานกลาง), Group 4 (ขนาดสง)

***

**

64

ภาพท 26 คาเฉลยความสามารถในการจดจาวตถสงของโดยใชคาดชนความจา (Recognition Index) หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน ตารางท 24 แสดงการวเคราะหความแปรปรวนของการทดสอบความสามารถในการจดจาวตถสง ของของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอม ดวยสโคโพลามน แหลงความแปรปรวน ss df MS F p ระหวางกลม ภายในกลม

4505.14 1757.05

3 15

1501.71 117.14

12.82** .000

รวม 6262.19 18 **p< .01 ตารางท 24 การวเคราะหความแปรปรวนของการทดสอบความสามารถในการจดจาวตถสง ของหลงจากหนเมาสทกกลมถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน ปรากฏวา หนเมาสแตละกลมทไดรบนามะละกอสกทตางกน มคาความสามารถในการจดจาวตถสงของแตกตางกนอยางมนย สาคญทางสถตทระดบ p<.01 (F=12.82**, p<.00) ซงตองมการทดสอบรายคตอไปนดงตารางท 25

0

10

20

30

40

50

60

70

Group 1 (Pre-Scopolamine)

Group 1 (Post-Scopolamine)

Group 2 (Post-Scopolamine)

Group 3 (Post-Scopolamine)

Group 4 (Post-Scopolamine)

% R

ecog

nitio

n In

dex

Group

Recognition Index

65

ตารางท 25 คาเฉลย คาเบยงเบนมาตรฐาน และสหสมพนธความสามารถในการจดจาวตถสงของ ของหนเมาสกลมตาง ๆ หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน กลม

M

(Sec)

กลม SD ควบคม ขนาดตา ขนาด

ปานกลาง ขนาดสง

ควบคม 20.00 11.05 - ขนาดตา 58.82 8.27 -38.82** - ขนาดปานกลาง 55.68 9.55 -35.68** 3.13 - ขนาดสง 48.03 13.21 -28.03** 10.79 7.66 -

**p<.01 จากตารางท 25 การเปรยบเทยบรายคคาเฉลยความสามารถในการจดจาวตถสงของของหนเมาสแตละกลมหลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน ปรากฏวา กลมทดลองมความสามารถ ในการจดจาวตถสงของมากกวากลมควบคม โดยแตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01

**p<.01 ภาพท 27 เปรยบเทยบคาเฉลยความสามารถในการจดจาวตถสงของโดยใชคาดชนความจา (Recognition Index) ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน 2. ผลการทดสอบความวตกกงวล (Anxiety) 2.1 ผลการทดสอบความวตกกงวลดวยอปกรณ Elevated Plus Maze (EPM) เปน การทดสอบความวตกกงวลในหนเมาส หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน ระหวางหนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลอง คาสถตพนฐานแสดงดงตารางท 26

0.00

10.00

20.00

30.00

40.00

50.00

60.00

70.00

Group 1 vs 2 Group 1 vs 3 Group 1 vs 4

% O

bjec

t Rec

ogni

tion

Inde

x

Post-Scopolamine

Group 1 (Post-Scopolamine) Group 2 , 3 & 4 (Post-Scopolamine)

** ****

66

ตารางท 26 คาสถตพนฐานการทดสอบความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM ระหวางกลมทดลอง กบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน

ความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM (Sec) Group n min max M SD Control (Pre-Scopolamine) 5 13.00 52.00 28.40 16.77 Control (Post-Scopolamine) 5 17.00 38.00 22.60 8.96 Low Dose 2.5 4 39.00 50.00 46.00 5.23 Medium Dose 5.0 5 36.00 59.00 46.00 9.35 High Dose 7.5 5 47.00 63.00 51.40 6.66

จากตารางท 26 แสดงใหเหนวา หลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน กลมทดลองมคาเฉลยเวลาในการอยในแขนเปดในอปกรณการทดสอบความวตกกงวลมากกวากลมควบคม และกลมควบคมมเวลาฉลยอยในแขนเปดลงหลงเหนยวนาดวยสโคโพลามน

ภาพท 28 คาเฉลยระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) หลงถกเหนยวนาใหความจา เสอมดวยสโคโพลามน

0

10

20

30

40

50

60

Group 1 (Pre-Scpolamine)

Group 1 (Post-Scopolamine)

Group 2 (Post-Scopolamine)

Group 3 (Post-Scopolamine)

Group 4 (Post-Scopolamine)

Tim

e Sp

ent O

pen

Arm

s (Se

c)

Group

Time Spent Open Arms

67

ตารางท 27 แสดงการวเคราะหความแปรปรวนของการทดสอบความวตกกงวลของหนเมาส ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวย สโคโพลามน แหลงความแปรปรวน ss df MS F p ระหวางกลม ภายในกลม

2457.29 930.40

3 15

819.10 62.03

13.21** .00

รวม 3387.69 18 **p< .01 จากตารางท 27 การวเคราะหคาเฉลยความแปรปรวนของระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน ปรากฏวา แตละกลมแตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 (F=13.21, p<.00) ซงตองมการทดสอบรายคตอไปนดงตารางท 28 ตารางท 28 คาเฉลย คาเบยงเบนมาตรฐาน และสหสมพนธของระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) ของหนเมาสกลมตาง ๆ หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน กลม

M

(Sec)

กลม SD ควบคม ขนาดตา ขนาด

ปานกลาง ขนาดสง

ควบคม 22.60 8.96 - ขนาดตา 46.00 5.23 -23.40** - ขนาดปานกลาง 46.00 9.35 -23.40** .00 - ขนาดสง 51.40 6.66 -28.80** -5.40 -5.40 -

**p<.01 จากตารางท 28 การเปรยบเทยบรายคคาเฉลยของระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) แตละกลม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน ปรากฏวา มคาเฉลยเวลาในการอยในแขนเปดในอปกรณการทดสอบความวตกกงวลมากกวากลมควบคม โดยแตกตางอยางมนย สาคญทางสถตทระดบ p<.01

68

**p<.01 ภาพท 29 เปรยบเทยบคาเฉลยระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) ระหวางกลม ทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน 3. ผลการทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหว (Motor Control) 3.1 ผลการทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหวดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test การทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหวนจะศกษาพฤตกรรมทงหมด 3 แบบคอ การตกแตงขน (Grooming) การยน 2 ขาหนา (Rearing) และการเลย (Licking) สงเกตพฤตกรรมของหนเมาส หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน ระหวางหนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลอง คาสถตพนฐานแสดงดงตารางท 15 (หนา 63-64) ตารางท 29 การเปรยบเทยบการทดสอบการควบคมการเคลอนไหว ระหวางกลมทดลองกบกลม ควบคมแบงตามพฤตกรรม 3 แบบ คอ Grooming Rearing และ Licking หลงถก เหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน Grooming Rearing Licking Chi-Square 10.075* 2.254 11.521** df 3 3 3 Asymp. Sig. .018 .521 .009

*p<.05, **p<.01 จากตารางท 29 สถต K Independent Sample ปรากฏวา หนเมาสแตละกลมมพฤตกรรม Rearing ไมแตกตางกน สวนพฤตกรรม Grooming และ Licking ปรากฏวา แตละกลมมพฤตกรรมแตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 (χ2=10.075*, p<.018) และ p<.01 (χ2=11.521**,

0

10

20

30

40

50

60

Group 1 vs 2 Group 1 vs 3 Group 1 vs 4

Tim

e Sp

ent i

n Op

en A

rm (s

ec)

Post-Scopolamine

Group 1 (ควบคม) Group 2 (ขนาดตา), Group 3 (ขนาดปานกลาง), Group 4 (ขนาดสง)

** **

**

69

p<.009) ซงตองมการทดสอบรายคดงตารางท 30 ตารางท 30 คาเฉลย และสหสมพนธการทดสอบพฤตกรรม Grooming ระหวางกลมทดลองกบ กลมควบคมหลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน

กลม M กลม ควบคม ขนาดตา ขนาดปานกลาง ขนาดสง

ควบคม 1.40 - ขนาดตา 6.25 -4.85* - ขนาดปานกลาง 5.80 -4.40** .45 - ขนาดสง 4.20 -2.80 2.05 1.6 -

*p<.05, **p<.01 จากตารางท 30 การเปรยบเทยบรายคดวยสถต Related Sample Test ปรากฏวา หนเมาสกลมทดลองขนาดตา และขนาดปานกลางมพฤตกรรม Grooming มากกวากลมควบคม แตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 และ p<.01 ตารางท 31 คาเฉลย และสหสมพนธการทดสอบพฤตกรรม Licking ระหวางกลมทดลองกบกลม ควบคมหลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน

กลม M กลม ควบคม ขนาดตา ขนาดปานกลาง ขนาดสง

ควบคม 1.40 - ขนาดตา 7.25 -5.85* - ขนาดปานกลาง 6.40 -5.00* .85 - ขนาดสง 1.40 .00 5.85* 5.00* -

*p<.05 จากตารางท 31 การเปรยบเทยบรายคดวยสถต Related Sample Test ปรากฏวา หนเมาสกลมทดลองขนาดตา และขนาดปานกลางมพฤตกรรม Licking มากกวากลมควบคม และกลมทดลองขนาดสง แตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05

70

ภาพท 30 คาเฉลยจานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Grooming ระหวางกลมทดลอง กบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน

*p<.05, **p<.01 ภาพท 31 เปรยบเทยบคาเฉลยจานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Grooming ระหวางกลมทดลอง กบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน

0

1

2

3

4

5

6

7

8

Group 1 (Pre-Scopolamine)

Group 1 (Post-Scopolamine)

Group 2 (Post-Scopolamine)

Group 3 (Post-Scopolamine)

Group 4 (Post-Scopolamine)

Coun

ts/ 3

Min

Group

Grooming

0

1

2

3

4

5

6

7

8

Group 1 vs 2 Group 1 vs 3 Group 1 vs 4

Coun

ts/3

Min

Grooming of Post-Scopolamine

Group1 (ควบคม) Group 2 (ขนาดตา), Group 3 (ขนาดปานกลาง), Group 4 (ขนาดสง)

* **

71

ภาพท 32 คาเฉลยจานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Rearing ระหวางกลมทดลอง กบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน

ภาพท 33 เปรยบเทยบคาเฉลยจานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Rearing ระหวางกลมทดลอง กบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน

02468

1012141618

Group 1 (Pre-Scopolamine)

Group 1 (Post-Scopolamine)

Group 2 (Post-Scopolamine)

Group 3 (Post-Scopolamine)

Group 4 (Post-Scopolamine)

Coun

ts / 3

Min

Group

Rearing

0

2

4

6

8

10

12

14

16

Group 1 vs 2 Group 1 vs 3 Group 1 vs 4

Coun

ts/3

Min

Rearing of Post-Scopolamine

Group 1 (ควบคม) Group 2 (ขนาดตา), Group 3 (ขนาดปานกลาง), Group 4 (ขนาดสง)

72

ภาพท 34 คาเฉลยจานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Licking ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน

**P<.05 ภาพท 35 เปรยบเทยบคาเฉลยจานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Licking ระหวางกลมทดลอง กบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน 4. ผลการทดสอบระบบประสาทรบความรสก (Sensory System) 4.1 ผลการทดสอบประสาทรบความรสกดวยอปกรณ Tail Immersion Test โดยใชความรอนเปนตวกระตนใหเกดความเจบปวดทาการทดสอบโดยใชวธเอาหางหนเมาสจมลงในนาอณหภม 50oC หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน ระหวางหนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลอง คาสถตพนฐานแสดงดงตารางท 32

0

1

2

3

4

5

6

7

8

Group 1 (Pre-Scopolamine)

Group 1 (Post-Scopolamine)

Group 2 (Post-Scopolamine)

Group 3 (Post-Scopolamine)

Group 4 (Post-Scopolamine)

Coun

ts/ 3

Min

Group

Licking

0

1

2

3

4

5

6

7

8

Group 1 vs 2 Group 1 vs 3 Group 1 vs 4

Coun

ts/3

Min

Licking of Post-Scopolamine

Group 1 (ควบคม) Group 2 (ขนาดตา), Group 3 (ขนาดปานกลาง), Group 4 (ขนาดสง)

**

73

ตารางท 32 คาสถตพนฐานของตอบสนองตอความเจบปวดดวยความรอน จาแนกตามกลมทดลอง กบกลมควบคม หลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน

ระบบประสาทรบความรสก วดดวยอปกรณ Tail Immersion Test (Sec) กลม n min max M SD

Control (Pre-Scopolamine) 5 1.80 4.20 2.40 1.01 Control (Post-Scopolamine) 5 1.60 4.40 2.56 1.11 Low Dose 2.5 4 2.00 2.45 2.16 .21 Medium Dose 5.0 5 1.40 1.80 1.48 .18 High Dose 7.5 5 1.60 2.20 1.96 .33

จากตารางท 32 แสดงใหเหนวากลมทดลองกบกลมควบคม มการตอบสนองตอความเจบปวดไมแตกตางกน หลงเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน

ภาพท 36 คาเฉลยของระยะเวลาทหางของหนเมาสแชอยในนาอน ระหวางกลมทดลองกบกลม ควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

Group 1 (Pre-Scopolamine)

Group 1 (Post-Scopolamine)

Group 2 (Post-Scopolamine)

Group 3 (Post-Scopolamine)

Group 4 (Post-Scopolamine)

Resp

onse

Tim

e (S

ec)

Group

Response Time

74

ตารางท 33 แสดงการวเคราะหความแปรปรวนของระยะเวลาการตอบสนองตอความเจบปวดดวย ความรอนของหนเมาสระหวางกลมทดลองกบกลมควบคม หลงถกเหนยวนาให ความจาเสอมดวยสโคโพลามน แหลงความแปรปรวน ss df MS F p ระหวางกลม ภายในกลม

3.011 5.609

3 15

1.004 .374

2.684 .084

รวม 8.62 18 จากตารางท 33 การวเคราะหคาเฉลยความแปรปรวนของระยะเวลาการตอบสนองตอความเจบปวดดวยความรอน หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน ปรากฏวา หนเมาสทกกลมมการตอบสนองตอความเจบปวดดวยความรอนไมแตกตางกน

ภาพท 37 เปรยบเทยบคาเฉลยของระยะเวลาทหางของหนเมาสแชอยในนาอน ระหวางกลม ทดลองและกลมควบคม หลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน ตอนท 5 ผลการเปรยบเทยบการไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กอนกบหลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน 1. ผลการทดสอบการเรยนรและความจา 1.1 ผลการเปรยบเทยบการทดสอบการเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ MWM จากคาเฉลยระยะเวลาการทดสอบการเรยกคนความจาเกากลบคน (Retention Test) โดยการนาแทนใตนาออก กอนกบหลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน ระหวางหนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลอง ดงตารางท 34

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

Group 1 vs 2 Group 1 vs 3 Group 1 vs 4

Resp

onse

Tim

e (S

ec)

Post-Scopolamine

Group 1 (ควบคม) Group 2 (ขนาดตา), Group 3 (ขนาดปานกลาง), Group 4 (ขนาดสง)

75

ตารางท 34 แสดงคาเฉลยระยะเวลา (Sec) การทดสอบความจาแบบ Retention ของหนเมาสกลม ตาง ๆ เปรยบเทยบกอนกบหลงเหนยวนาดวยสโคโพลามน

การเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ MWM (Sec) Pre-Sco.* Post-Sco.* Mean

Diff df t p

กลม M SD M SD 1. Control 14.53 7.44 11.79 7.64 2.74 4 14.09** .000 2. Low Dose 2.5 20.92 4.84 18.33 4.63 2.59 3 12.31** .001 3. Medium Dose 5.0 22.00 2.59 21.27 3.38 .74 4 1.18 .305 4. High Dose 7.5 23.80 4.30 22.27 4.45 1.53 4 3.06* .038

*p<.05, **p<.01, Sco.* = Scopolamine จากตารางท 34 หนเมาสกลมควบคม กลมทดลองขนาดตา และขนาดสง หลงการเหนยวนาความจาเสอม มการเรยนรและความจาลดลงจากกอนเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน แตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 และ p<.05 (t=14.092**, p<.00, t=12.313**, p<.001, t=3.061*, p<.038) และหนเมาสกลมทดลองขนาดปานกลางและขนาดสงมการเรยนรและความจาไมแตกตางจากกอนเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน

*p<.05, **p<.01 ภาพท 38 เปรยบเทยบคาเฉลยระยะเวลาการทดสอบความจาแบบ Retention ของหนเมาส กลมตาง ๆ กอนกบหลงการเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน 1.2 ผลการเปรยบเทยบการทดสอบการเรยนรและความจาเกยวกบการจดจาวตถสงของ วดดวยอปกรณ NOR โดยใชคาเฉลยดชนความจา (Recognition Index) ในหนเมาสกลมทดลองกบกลมควบคม กอนกบหลงถกเหนยวนาดวยสโคโพลามน แสดงดงตารางท 36

0.00

5.00

10.00

15.00

20.00

25.00

30.00

Group 1 Group 2 Group 3 Group 4Rete

ntio

n tim

e in

Tar

get Z

one

(Sec

) Retention Time Pre-Post Inject Scopolamine

Pre- Scopolamine Post- Scopolamine

**

***

76

ตารางท 35 คาดชนความจา (Recognition Index) ของหนเมาสกลมตาง ๆ เปรยบเทยบ กอนกบ หลงเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน

การเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ NOR (% Recognition Index) Pre-Sco.* Post-Sco.* Mean

diff df t p

กลม M SD M SD 1. Control 37.01 15.57 20.00 11.05 17.01 4 6.07** .004 2. Low Dose 2.5 55.23 10.81 58.82 8.27 -3.59 3 -1.74 .180 3. Medium Dose 5.0 76.82 9.34 55.68 9.55 21.13 4 8.78** .001 4. High Dose 7.5 80.96 11.76 48.03 13.21 32.93 4 12.77** .000

*p<.01, Sco.* = Scopolamine จากตารางท 35 แสดงใหเหนวา หลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราว หนเมาสทกกลมมการเรยนรและความจาลดลงจากกอนเหนยวนาดวยสโคโพลามน แตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 (t=6.07**, p<.004, t=8.78**, p<.001, t=12.77**, p<.00) ยกเวน กลมทดลองขนาดตามการเรยนรและความจา กอนกบหลงเหนยวนาไมแตกตางกน

**p<.01 ภาพท 39 เปรยบเทยบคาเฉลยความสามารถในการจดจาวตถสงของโดยใชคาดชนความจา (Recognition Index) ของหนเมาสกลมตาง ๆ กอนกบหลงการเหนยวนาใหความจา เสอมชวคราวดวยสโคโพลามน 2. ผลการทดสอบความวตกกงวล (Anxiety) 2.1 ผลการทดสอบความวตกกงวลดวยอปกรณ Elevated Plus Maze (EPM) กอนกบหลงเหนยวนาดวยสโคโพลามน ระหวางหนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลอง แสดงดงตารางท 36

0.0010.0020.0030.0040.0050.0060.0070.0080.0090.00

100.00

Group 1 Group 2 Group 3 Group 4

% O

bjec

t Rec

ogni

tion

Inde

x

Recognition Index of Pre-Post Scopolamine

Pre-Scopolamine Post-Scopolamine

**

****

77

ตารางท 36 แสดงคาเฉลยของระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) เปรยบเทยบกอน กบหลงถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน

ความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM (Sec) Pre-Sco.* Post-Sco.* Mean

diff df t p

กลม M SD M SD 1. Control 28.40 8.35 22.60 8.96 5.80 4 8.74** .001 2. Low Dose 2.5 57.25 5.50 46.00 5.23 11.25 3 45** .000 3. Medium Dose 5.0 46.80 8.23 46.00 9.35 .80 4 .39 .717 4. High Dose 7.5 47.80 5.26 51.40 6.66 -3.6 4 -5.31** .006

*p<.01, Sco.* = Scopolamine จากตารางท 36 แสดงใหเหนวาหนเมาสกลมทดลองขนาดตาและกลมควบคมมคาเฉลยเวลาในการอยในแขนเปดในอปกรณการทดสอบความวตกกงวลลดลงจากกอนเหนยวนาความจาเสอม แตก ตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 (t=8.74**, p<.001, t=45**, p<.00) หนเมาสกลมทดลองขนาดสงมคาเฉลยเวลาในการอยในแขนเปดในอปกรณการทดสอบความวตกกงวลเพมขนจากกอนเหนยว นาความจาเสอมแตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 (t=-5.31**, p<.006) และหนเมาสกลมทดลองขนาดปานกลางมคาเฉลยเวลาในการอยในแขนเปดในอปกรณการทดสอบความวตกกงวลไมแตกตางจากกอนเหนยวนาความจาเสอม

**p<.01 ภาพท 40 เปรยบเทยบคาเฉลยของระยะเวลาทหนเมาสอยในแขนเปด (Open Arm) ระหวาง หนเมาสกลมตาง ๆ กอนกบหลงการเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน

0

10

20

30

40

50

60

70

Group 1 Group 2 Group 3 Group 4Tim

e Sp

ent i

n Op

en A

rm (S

ec)

Elevated Plus Maze of Pre-Post Scopolamine

Pre Scopolamine Post Scopolamine

**

** **

78

3. ผลการทดสอบการควบคมเคลอนไหว (Motor Control) 3.1 ผลการทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหวดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test การทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหวนจะศกษาพฤตกรรมทงหมด 3 แบบคอ การตกแตงขน (Grooming) การยน 2 ขาหนา (Rearing) และการเลย (Licking) สงเกตพฤตกรรมของหนเมาส กอนกบหลงเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน ระหวางหนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลอง แสดงดงตารางท 37 ตารางท 37 แสดงคาการเปรยบเทยบการทดสอบการควบคมเคลอนไหว โดยสงเกตพฤตกรรม 3 แบบ Grooming, Rearing และ Licking ของหนเมาสกลมทดลองกบกลมควบคม กอนกบหลงการเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน

การควบคมการเคลอนไหว วดดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test (Counts) Grooming Pre-Scopolamine Post-Scopolamine

กลม n M SD n M SD Z p 1. Control 5 7.20 3.56 5 1.40 1.67 -2.032 .042 2. Low Dose 2.5 4 4.25 2.63 4 6.75 2.50 -1.826 .068 3. Medium Dose 5.0 5 4.00 2.35 5 6.40 1.14 -2.060 .039 4. High Dose 7.5 4 5.60 1.82 5 4.20 2.18 -1.890 .059

Rearing Pre-Scopolamine Post-Scopolamine กลม n M SD n M SD Z p

1. Control 5 15.40 4.98 5 13.20 4.09 -2.041 .041 2. Low Dose 2.5 4 20.25 5.68 4 11.25 6.24 -1.841 .066 3. Medium Dose 5.0 5 14.60 6.35 5 8.40 6.89 -2.032 .042 4. High Dose 7.5 4 15.20 7.36 5 11.60 5.81 -2.060 .039

Licking Pre-Scopolamine Post-Scopolamine กลม n M SD n M SD Z p

1. Control 5 2.40 1.67 5 1.40 1.14 -1.890 .059 2. Low Dose 2.5 4 4.25 3.40 4 7.25 2.87 -1.857 .063 3. Medium Dose 5.0 5 6.20 4.60 5 6.40 3.58 .000 1.00 4. High Dose 7.5 4 2.20 1.92 5 1.40 1.52 -1.633 .102

*p<.05 จากตารางท 37 แสดงใหเหนวา กอนกบหลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน การสงเกตพฤตกรรม Grooming ปรากฏวา กลมควบคมมพฤตกรรม Grooming หลงเหนยวนาความจาเสอมนอยกวากอนเหนยวนาความจาเสอม แตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 (Z=-2.032*, p<.042) กลมทดลองขนาดปานกลางมพฤตกรรม Grooming หลงเหนยวนาความจาเสอมมากกวากอนเหนยวนาความจาเสอม แตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 (Z=-2.060*, p<.039) และ

79

กลมทดลองขนาดตาและขนาดสงมพฤตกรรม Grooming กอนกบหลงเหนยวนาความจาเสอมไมแตกตางกน สงเกตพฤตกรรม Rearing ปรากฏวา กลมควบคมกบกลมทดลองมพฤตกรรม Rearing หลงเหนยวนาความจาเสอมนอยกวากอนเหนยวนาความจาเสอม แตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 (Z=-2.041*, p<.041, Z=-2.032*, p<.042, Z=-2.060*, p<.039) ยกเวน กลมทดลองขนาดตามพฤตกรรม Rearing กอนกบหลงเหนยวนาความจาเสอมไมแตกตางกน สงเกตพฤตกรรม Licking ปรากฏวา กลมควบคมกบกลมทดลองมพฤตกรรม Licking กอนกบหลงเหนยวนาความจาเสอมไมแตกตางกน

*p<.05 ภาพท 41 เปรยบเทยบคาเฉลยจานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Grooming ของหนเมาสกลม ตาง ๆ กอนกบหลงการเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน

*p<.05 ภาพท 42 เปรยบเทยบคาเฉลยจานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Rearing ของหนเมาสกลมตาง ๆ กอนกบหลงการเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน

0

1

2

3

4

5

6

7

8

Group 1 Group 2 Group 3 Group 4

Coun

ts/M

in

Grooming Pre-Post Scopolamine

Pre-Scopolamine Post-Scopolamine

*

*

0

5

10

15

20

25

Group 1 Group 2 Group 3 Group 4

Coun

ts/3

Min

Rearing of Pre-Post Scopolamine

Pre-Scopolamine Post-Scopolamine

* * *

80

ภาพท 43 เปรยบเทยบคาเฉลยจานวนครงทหนเมาสทาพฤตกรรม Licking ของหนเมาสกลมตาง ๆ กอนกบหลงการเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน 4. ผลการทดสอบระบบประสาทรบความรสก (Sensory System) 4.1 ผลการทดสอบประสาทรบความรสกดวยอปกรณ Tail Immersion Test โดยใชความรอนเปนตวกระตนใหเกดความเจบปวดทาการทดสอบโดยใชวธเอาหางหนเมาสจมลงในนาอณหภม 50oC กอนกบหลงการเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน ระหวางหนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลอง แสดงดงตารางท 38 ตารางท 38 คาเฉลยของระยะเวลาทหางของหนเมาสแชอยในนาอนเปรยบเทยบ กอนกบหลงการ เหนยวนาดวยสโคโพลามน

ระบบประสาทรบความรสก วดดวยอปกรณ Tail Immersion Test (Sec) Pre-Sco.* Post-Sco.* Mean

diff df t p

กลม M SD M SD 1. Control 2.40 1.01 2.56 1.11 -.16 4 -.78 .477 2. Low Dose 2.5 1.66 .14 2.16 .21 -.50 3 -3.74* .033 3. Medium Dose 5.0 3.04 .92 1.48 .18 1.56 4 4.33* .012 4. High Dose 7.5 1.80 .58 1.96 .33 -.16 4 -.41 .700

*p<.05, Sco.* = Scopolamine จากตารางท 38 แสดงใหเหนวาหนเมาสกลมควบคมและกลมทดลองขนาดสงมการตอบ สนองตอความเจบปวด กอนกบหลงเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามนไมแตกตางกน และหนเมาสกลมทดลองขนาดตา มการตอบสนองตอความเจบปวดลดลงหลงเหนยวนาดวยสโคโพลามนเมอเปรยบเทยบจากกอนเหนยวนาดวยสโคโพลามนแตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ

0

1

2

3

4

5

6

7

8

Group 1 Group 2 Group 3 Group 4

Coun

ts/3

Min

Licking of Pre-Post Scopolamine

Pre-Scopolamine Post-Scopolamine

81

p<.05 (t=-3.74*, p<.033) และขนาดปานกลางมการตอบสนองตอความเจบปวดดขนหลงเหนยวนาดวยสโคโพลามน เมอเปรยบเทยบจากกอนเหนยวนาดวยสโคโพลามนแตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 (t=4.33, p<.012)

*p<.05 ภาพท 44 เปรยบเทยบคาเฉลยของระยะเวลาทหางของหนเมาสแชอยในนาอนของหนเมาสกลม ตาง ๆ กอนกบหลงการเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน จากผลการวจยขางตน หนเมาสกลมทดลองทไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ปรากฏวา มผลตอระบบประสาทในดานการเพมเรยนรและความจาทงในดานการเรยกคนความจาเกากบคน (Retention) และการจดจาวตถสงของ (Object Recognition) นามะละกอสกยงมผลในการลดความวตกกงวล และเพมการควบคมการเคลอนไหวพฤตกรรมทวไป (Stereotype) อกทงนามะละกอสกยงมผลในการปกปองภาวะสมองเสอมระยะแรก ในดานการเรยนรและความจาทงในดานการเรยกคนความจาเกากบคน (Retention) และการจดจาวตถสงของ (Object Recognition) ความวตกกงวล และการควบคมการเคลอนไหวพฤตกรรมทวไป (Stereotype) เมอเปรยบเทยบกบกลมควบ คมทไดรบเฉพาะนากลน ซงตรงกบสมมตฐานงานวจย สวนระบบประสาทรบความรสก ปรากฏวา กอนกบหลงการเหนยวนาไมพบความแตกตางระหวางกลม ซงไมตรงกบสมมตฐานงานวจย

0

0.5

1

1.5

2

2.5

3

3.5

4

Group 1 Group 2 Group 3 Group 4

Resp

onse

Tim

e(Se

c)

Tail Immersion of Pre-Post Scopolamine

Pre-Scopolamine Post-Scopolamine

*

*

บทท 5 สรปและอภปรายผล

งานวจยนมวตถประสงค มวตถประสงค 1) เพอทดสอบผลของการไดรบนามะละกอสกตดตอกน

เปนระยะเวลา 21 วน 2) เพอเปรยบเทยบผลของการไดรบนามะละกอสกตดตอกนเประยะเวลา 21 วน ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคมทถกเหนยวนาดวยสโคโพลามน 3) เพเปรยบเทยบผลของการไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กอนกบหลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน โดยทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง 4 ดาน 1) การเรยนรและความจา (Learning and Memory) 2) ความวตกกงวล (Anxiety) 3) การควบคมการเคลอนไหว (Motor Control) และ 4) ระบบประสาทรบความรสก (Sensory System) ในการวจยใชแบบแผนการทดลองแบบ Experimental Research Utilizing a 2x4 Mixed-factorial Design โดยแบงกลมการทดลองเปน 4 กลม ดงน 1) กลมควบคม (ไดรบนากลน) 2) กลมขนาดตา (นามะละกอสกขนาด 2.5 g/kgBW) 3) กลมขนาดปานกลาง (นามะละกอสกขนาด 5.0 g/kgBW) 4) กลมขนาดสง (นามะละกอสกขนาด 7.5 g/kgBW) โดยทกกลมจะไดรบตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน หลงจากนนทาการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน วนตอมาทาการเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน แลวทาการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน อกครง ระยะเวลาในการทดลองทงหมด 49 วน โดยแบงเปนระยะกอนการทดลอง 18 วน ระยะทดลอง 22 วน ระยะหลงการทดลอง 8 วน สรปผลการวจย 1. เพอทดสอบผลของการไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน โดยทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง 4 ดาน 1.1 ผลการทดสอบการเรยนรและความจา ผลการทดสอบการเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ MWM เปนการเรยนรและความจา เกยวกบทศทางและสถานท ปรากฏวา หนเมาสกลมทดลองมการเรยนรและความจาดกวาหนเมาสกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน แตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 และ p<.01 แสดงวา นามะละกอสกมผลตอระบบประสาทในดานการเรยนรและความจาในหนเมาส ซงตรงกบสมมตฐานการวจย ผลการทดสอบการเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ NOR เปนการเรยนรและความจาดานการจดจาวตถสงของ ปรากฏวา หนเมาสกลมทดลองมการเรยนรและความจาดกวาหนเมาสกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน แตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 และ p<.01 แสดงวา นามะละกอสกมผลตอระบบประสาทในดานการเรยนรและความจาในหนเมาส ซงตรงกบสมมตฐานการวจย 1.2 ผลการทดสอบความวตกกงวล ผลการทดสอบความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM ปรากฏวา หนเมาสกลมทดลองมความวตกกงวลนอยกวาหนเมาสกลมควบคม หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน

83

แตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 แสดงวา นามะละกอสกมผลตอระบบประสาทในดานการลดความวตกกงวล ซงตรงกบสมมตฐานการวจย 1.3 ผลการทดสอบการควบคมการเคลอนไหว โดยศกษาจากพฤตกรรม 3 แบบ คอ การตกแตงขน (Grooming) การยก 2 ขาหนา (Rearing) การเลย (Licking) วดดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test ผลการสงเกตพฤตกรรม Groming, Rearing และ Licking หลงไดรบนามะละกอสกตด ตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ปรากฏวา กลมทดลองกบกลมควบคมมพฤตกรรม Groming และ Rearing ไมแตกตางกน แสดงวา นามะละกอสกไมมผลตอระบบประสาทในดานพฤตกรรม Groming และ Rearing ซงไมตรงกบสมมตฐานการวจย สวนพฤตกรรม Licking ปรากฏวา กลมทดลองมพฤตกรรม Licking มาก กวากลมควบคมแตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 แสดงวา นามะละกอสกมผลตอระบบประสาทในดานพฤตกรรม Licking ซงตรงกบสมมตฐานการวจย 1.4 ผลการทดสอบประสาทรบความรสก ผลการทดสอบประสาทรบความรสก วดดวยอปกรณ Tail Immersion Test การตอบ สนองตอความเจบปวดจาก หลงไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ปรากฏวา หนเมาสกลมทดลองกบกลมควบคม มการตอบสนองตอความเจบปวดไมแตกตางกน แสดงวา นามะละกอสกไมมผลตอระบบประสาทรบความรสก ซงไมตรงกบสมมตฐานการวจย 2. เพอเปรยบเทยบผลของการไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ระหวางกลมทดลองกบกลมควบคมทถกเหนยวนาดวยสโคโพลามนโดยทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง 4 ดาน 2.1 ผลการทดสอบการเรยนรและความจา ผลการทดสอบการเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ MWM เปนการเรยนรและความจาเกยวกบทศทางและสถานท ปรากฏวา หนเมาสกลมทดลองมการเรยนรและความจาดกวาหนเมาสกลมควบคม หลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน แตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 และ p<.01 แสดงวา นามะละกอสกมผลตอการปกปองระบบประสาททเหนยวนาความ จาเสอมดวยสโคโพลามน ในดานการเรยนรและความจาในหนเมาส ซงตรงกบสมมตฐานการวจย ผลการทดสอบการเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ NOR เปนการเรยนรและความจาดานการจดจาวตถสงของ ปรากฏวา หนเมาสกลมทดลองมการเรยนรและความจาดกวาหนเมาสกลมควบคมหลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน แตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 แสดงวา นามะละกอสกมผลตอการปกปองระบบประสาททเหนยวนาความจาเสอมดวย สโคโพลามน ในดานการเรยนรและความจาในหนเมาส ซงตรงกบสมมตฐานการวจย 2.2 ผลการทดสอบความวตกกงวล ผลการทดสอบความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM ปรากฏวา หนเมาสกลมทดลองมความวตกกงวลนอยกวาหนเมาสกลมควบคม หลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน หลงไดรบสารทดสอบตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน แตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 แสดงวา นามะละกอสกมผลตอการปกปองระบบประสาททเหนยวนาความจาเสอมดวยสโคโพลามน ในดานการลดความวตกกงวล ซงตรงกบสมมตฐานการวจย

84

2.3 ผลการทดสอบการควบคมการเคลอนไหว โดยศกษาจากพฤตกรรม 3 แบบ คอ การตกแตงขน (Grooming) การยก 2 ขาหนา (Rearing) การเลย (Licking) วดดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test ผลการสงเกตพฤตกรรม Grooming, Rearing และ Licking หลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน ปรากฏวา กลมทดลองกบกลมควบคมมพฤตกรรม Rearing ไมแตกตางกน แสดงวา นามะละกอสกไมมผลตอการปกปองระบบประสาททเหนยวนาความจาเสอมดวยสโคโพลามนในดานพฤตกรรม Rearing ซงไมตรงกบสมมตฐานการวจย สวนพฤตกรรม Grooming และ Licking ปรากฏวา กลมทดลองมพฤตกรรม Grooming และ Licking มากกวากลมควบคมแตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 แสดงวา นามะละกอสกมผลตอการปกปองระบบประสาททเหนยวนาความจาเสอมดวยสโคโพลามนในดานพฤตกรรม Licking ซงตรงกบสมมตฐานการวจย 2.4 ผลการทดสอบประสาทรบความรสก ผลการทดสอบประสาทรบความรสก วดดวยอปกรณ Tail Immersion Test การตอบสนองตอความเจบปวด หลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลา ปรากฏวา หนเมาสกลมทดลองกบกลมควบคม มการตอบสนองตอความเจบปวดไมแตกตางกน ซงแสดงวา นามะละกอสกไมมผลตอการปกปองระบบประสาททเหนยวนาความจาเสอมดวยสโคโพลามน ในดานระบบประสาทรบความรสก ซงไมตรงกบสมมตฐานการวจย 3. เพอเปรยบเทยบผลของการไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน กอนกบหลงการเหนยวนาดวยสโคโพลามน โดยทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง 4 ดาน 3.1 ผลการทดสอบการเรยนรและความจา ผลการทดสอบการเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ MWM เปนการเรยนรและความจาเกยวกบทศทางและสถานท ปรากฏวา หนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลอง มการเรยนรและความจา กอนกบหลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน แตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 และ p<.01 ยกเวน กลมทดลองขนาดปานกลาง มการเรยนรและความจา กอนกบหลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามนไมแตกตางกน แสดงวา นามะละกอสกขนาดปานกลางมผลตอการปกปองระบบประสาททเหนยวนาความจาเสอมดวยสโคโพลามนมากทสด ซงตรงกบสมมตฐานการวจย ผลการทดสอบการเรยนรและความจา วดดวยอปกรณ NOR เปนการเรยนรและความจาดานการจดจาวตถสงของ ปรากฏวา หนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลอง มการเรยนรและความจากอนกบหลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน แตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 ยกเวน กลมทดลองขนาดตา มการเรยนรและความจา กอนกบหลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามนไมแตกตางกน แสดงวา นามะละกอสกขนาดตามผลตอการปกปองระบบประสาททเหนยวนาความจาเสอมดวยสโคโพลามนมากทสด ซงตรงกบสมมตฐานการวจย 3.2 ผลการทดสอบความวตกกงวล ผลการทดสอบความวตกกงวล วดดวยอปกรณ EPM ปรากฏวา หนเมาสกลมควบคมกบกลมทดลอง มความวตกกงวล กอนกบหลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน แตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 ยกเวน กลมทดลองขนาดปานกลาง มความวตกกงวลกอนกบหลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามนไมแตกตางกน แสดงวา นามะละกอสกขนาดปาน

85

กลางมผลตอการปกปองระบบประสาททเหนยวนาความจาเสอมดวยสโคโพลามนมากทสด ซงตรงกบสมมตฐานการวจย 3.3 ผลการทดสอบการควบคมการเคลอนไหว โดยศกษาจากพฤตกรรม 3 แบบ คอ การตกแตงขน (Grooming) การยก 2 ขาหนา (Rearing) การเลย (Licking) วดดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test ผลการสงเกตพฤตกรรม Grooming, Rearing และ Licking กอนและหลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน ปรากฏวา กลมทดลองกบกลมควบคมมพฤตกรรม Grooming และ Rearing กอนกบหลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราว แตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 ยกเวน กลมทดลองขนาดสงมพฤตกรรม Grooming ไมแตกตางกน แสดงวา นามะละกอสดขนาดสงมผลตอการปกปองระบบประสาททเหนยวนาความจาเสอมดวยสโคโพลามนมากทสด ซงตรงกบสมมตฐานการวจย สวนพฤตกรรม Licking ปรากฏวา กลมทดลองกบกลมควบคมมพฤตกรรม Licking กอนกบหลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราว ไมแตกตางกน 3.4 ผลการทดสอบประสาทรบความรสก ผลการทดสอบประสาทรบความรสก วดดวยอปกรณ Tail Immersion Test การตอบ สนองตอความเจบปวดจาก กอนและหลงการเหนยวนาความจาเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน ปรากฏวา หนเมาสกลมทดลองกบกลมควบคม มการตอบสนองตอความเจบปวดไมแตกตางกน ยกเวน กลมทดลองขนาดปานกลางและขนาดสง กอนกบหลงการเหนยวนาความจาเสอมมการตอบสนองตอความเจบปวดแตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 โดยเฉพาะกลมทดลองขนาดปานกลางมการตอบ สนองตอความรอนไดด แสดงวา นามะละกอสกขนาดปานกลางมผลตอการปกปองระบบประสาททเหนยวนาความจาเสอมดวยสโคโพลามนดทสด ซงตรงกบสมมตฐานการวจย อภปรายผล งานวจยนผวจยไดเลอกทดสอบนามะละกอสกพนธศรสภาทเปนพนธใหมทถกผสมพนธโดยเกษตรกรจงหวดชลบรโดยเปนพนธผสมระหวางมะละกอพนธแขกนวลซงเปนพนธทนยมบรโภคผลดบ และมะละกอฮอลแลนดทเปนพนธทนยมบรโภคผลสก เนองจากมะละกอเปนผลไมทมคณคาทางอาหาร และมประโยชนตอรางกาย จากรายงานการศกษา ปรากฏวา มะละกอเปนพชกลมเดยวกบ แครอท และ มะเขอเทศ ทมระดบของแคโรทนอยดสง (Ralf et al., 2013, p. 490) ซงมรายงานวาเปนสารทเปนประโยชนตอการทางานของสมอง ในมะละกอสก 100 กรม มเบตาแคโรทน 276 ไมโครกรม ไลโคปน 182 ไมโครกรม ลทน และ ซแซนทน 89 ไมโครกรม (USDA Nutrient Database, 2010) จากผลการวเคราะหปรมาณเบตาแคโรทนในมะละกอพนธศรสภา ปรากฏวา มปรมาณเบตาแคโรทนสงถง 326 ไมโครกรม ซงเปนระดบทสงกวาทรายงานใน USDA Nutrient Database (2012) จากปรมาณการตรวจปรากฏระดบของเบตาแคโรทนทมคาสงนน เปนปจจยหนงทจะทาใหเกดการเปลยนแปลงกลไกบางประการทางระบบประสาท ซงจากผลการทดสอบนามะละกอสกทมตอการปกปองระบบประสาทของแบบจาลองการเกดโรคสมองเสอมระยะแรกในสตวทดลองทถกเหนยวนาใหเกดความจาบกพรองดวยสโคโพลามน โดยการทด สอบพฤตกรรมทางระบบประสาทในสตวทดลอง 4 ดาน สามารถอภปรายผลจากพฤตกรรมทางระบบประสาทดงน

86

การเรยนรและความจ า การเรยนรและความจาเกยวกบทศทาง และสถานทในหนเมาส อาย 8 สปดาห ทมสขภาพดหลงจากไดรบการฝกใหวายนาหาแทนใตนาในอปกรณ MWM เปนเวลา 7 วน กอนไดรบนามะละกอสก ปรากฏวา หนเมาสทมสขภาพดทกกลมมเวลาการตอบสนองในการใชเวลาหาแทนใตนาไดเรวขนเมอเทยบจากวนแรก หรออาจกลาวไดวามการจดจาตาแหนงของแทนใตนาดขนจากวนแรก และมคาใกล เคยงกนทกกลมหลงจากนนทาการทดสอบโดยเอาแทนใตนาออก (Retention Test) เปนการทดสอบความจาระยะยาว (Long-term Memory) ปรากฏวา หนเมาสทมสขภาพดทกกลมมความจาตาแหนงทเคยมแทนใตนาไดใกลเคยงกน จงสรปไดวา กอนการใหสารทดสอบหนเมาสทกกลมมความสามารถใน การเรยนร และความจาเกยวกบทศทาง และสถานทใกลเคยงกน หรอไมแตกตางกน หลงจากนนหนเมาสทกกลมจะไดรบนากลน และนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ปรากฏวา หนเมาสทกกลมมคาในการคนหาแทนใตนาไดใกลเคยงกน โดยหนเมาสกลมทไดรบนามะละกอสกขนาด 5.0 g/kg BW และขนาด 7.5 g/kg BW มคาความจาในการคนหาแทนใตนาไดดกวาหนเมาสกลมทไดรบนากลน และกลมทไดรบนามะละกอสกขนาด 2.5 g/kg BW เลกนอย แตเมอทดสอบ Retention Test ปรากฏวา หนเมาสกลมทไดรบนามะละกอสกทกขนาดมคาการจดจาตาแหนงทเคยมแทนใตนาไดดกวาหนเมาสกลมทไดรบนากลนแตกตางกนอยางมนยสาคญทระดบ p<.05 โดยเฉพาะขนาดสง 7.5 g/kg BW มคาการจดจาตาแหนงทเคยมแทนใตนาไดดกวาหนเมาสกลมทไดรบนากลนอยางมนยสาคญทระดบ p<.01 ซงเมอเปรยบเทยบกบหลงกอนปอน และหนเมาสทไดรบนากลนม การจดจาตาแหนงทเคยมแทนใตนาลดลงจากกอนไดรบสารทดสอบตอเนองเปนระยะเวลา 21 วน เมอเทยบกบกลมทไดรบนามะละกอสก และกลมทไดรบนามะละกอสกมการจดจาตาแหนงทเคยมแทนใตนาเพมขน โดยเฉพาะกลมทไดรบนามะละกอสกขนาดสง 7.5 g/kg BW ซงแสดงวานามะละกอสกสามารถเพมความจาระยะยาวเกยวกบทศทางและสถานท วนตอมาทาการเหนยวนาใหหนเมาสความจาเสอมดวยสโคโพลามนขนาด 2.0 mg/kg BW เพอศกษาวานามะละกอสกชวยปกปองระบบประสาทเมอถกเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราว โดยทาการทดสอบดวย Retention Test ปรากฏวา หนเมาสทไดรบนามะละกอสกทกขนาดมการจดจาตาแหนงทเคยมแทนใตนาไดดกวาหนเมาสกลมทไดรบนากลนอยางมนยสาคญทระดบ p<.01 โดยเฉพาะกลมทไดรบนามะละกอขนาด 5.0 g/kg BW และขนาด 7.5 g/kg BW มการจดจาตาแหนงทเคยมแทนใตนาไดดกวาหนเมาสกลมทไดรบนากลนอยางมนยสาคญทระดบ p<.01 ซงมความจาลดลงกอนเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวเลกนอยเมอเทยบกบกลมทไดรบนากลน แตเมอเปรยบเทยบระหวางกลมหนเมาสทไดรบนามะละกอสกในขนาดทตางกน ปรากฏวา มคาการความจาตางกนเลกนอยหรออาจกลาวไดวาไมแตกตางกน ทงกอน และหลงการเหนยวนาใหความจาเสอม อาจเนองมาจากขนาดของนามะละกอสกมขนาดแตกตางกนไมมากพอ ซงสอดคลองกบงานวจยของ Udaya Lakshmi, Divya, and Priyanka (2015) ปรากฏวา สารสกดของเมลดมะละกอขนาด 200 และ 400 mg/kg BW มผลในการยบยง การเหนยวนาใหความจาลดลงดวยสโคโพลามน และยงสามารถชวยลดเอนไซม Acetylcholinesterase ในปรมาณสงทาให Acetycholine สามารถจบกบตวรบมสคารนก (Muscarinic Cholinergic Receptor) ไดเปนปกต เมอทดสอบการเรยนร และ ความจา ดวย MWM ปรากฏวา สารสกดเมลดมะละกอชวยลดเวลาการวายนาหาแทนทอยใตนาเจอเรวขน จากการศกษาของ Obulesua, Muralidhara, and Bramhacharic (2011) ปรากฏวา แคโรทนอยดมบทบาทสาคญในการปกปองการเสอมตาง ๆ ทเกด

87

จากความเครยดออกซเดชนรวมทงโรคทางระบบประสาท แคโรทนนอยดสามารถยบยงเบตาอะไมลอยด (Amyloid beta: Aβ) ทเปนสาเหตของโรคอลซลเมอรได การเรยนรและความจาดานการจดจาวตถสงของทคนเคย หรอสมผสกอนหนาเพยง 10 นาทซงเปนการทดสอบความจาระยะสน (Short-term Memory) ดวยวธ NOR ปรากฏวา หนเมาสสขภาพดเมอไดรบนากลน และนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน โดยกลมทไดรบนากลน และกลมทไดรบนามะละกอสกขนาดตา 2.5 g/kg BW มความสามารถในการแยกแยะวตถทเคยเหน หรอสมผสนอยกวาเมอเปรยบเทยบกบวนแรกทไดรบสารทดสอบ สาหรบกลมทไดรบนามะละกอสกขนาดสง 5.0 g/kg BW และ 7.5 g/kg BW มความสามารถในการแยกแยะวตถทเคยเหน หรอสมผสมากขนเมอเปรยบ เทยบกบวนแรกทไดรบสารทดสอบซงแตกตางอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 และ p<.05 แสดงวา นามะละกอสกมผลเพมความจาดานแยกแยะวตถไดเพมขนเมอเทยบกบกลมทไดรบนากลน ตอมานาหนเมาสทกกลมมาเหนยวนาใหความจาเสอมระยะแรกดวยสโคโพลามน ปรากฏวา หนเมาสกลมทไดรบนามะละกอสกมความสามารถในการแยกแยะวตถทเคยเหน หรอสมผสกอนหนานมากกวากลมทไดรบนากลนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 โดยนามะละกอสกขนาดตามความ สามารถในการปกปองสมองเสอมทเหนยวนาดวยสโคโพลามนไดดกวานามะละกอสกขนาดทสงกวา แสดงวา นามะละกอสกมผลตอการปกปองสมองเสอมชวคราวดวยสโคโพลามน แตเมอเปรยบเทยบระหวางกลมหนเมาสทไดรบนามะละกอสกในขนาดทตางกน ปรากฏวา มคาการความจาดานการแยกแยะวตถสงของตางกนเลกนอย หรออาจกลาวไดวาไมตางกน ทงนอาจเนองมาจากขนาดของนามะละกอสกมขนาดตางกนไมมากพอ ซงสอดคลองกบการทดสอบความจาดวย MWM และสอดคลองกบงานวจยของ นวต เทพาวราพฤกษ และคณะ (2554) ปรากฏวา หนแกเพศผทไดรบนามะมวงสก นามะละกอสก และ นามะพราวออน เทานนทมคาดชนความจาวตถสงของไดดกวากลมทไดรบนากลน หรออาจสรปไดวาหนเมาสกลมทไดรบผลไมเทานนทสามารถแยกแยะวตถทเคยสารวจกอนหนากบวตถใหมไดคอนขางดภายหลงจากการไดรบการปอนนาผลไมตอเนองเปนระยะเวลา 3 เดอน จากการทดสอบผลของนามะละกอสกทมผลตอการเรยนรและความจา สรปไดวานามะละกอสกมผลตอกลไกการเพมการเรยนรและความจาของหนเมาสสขภาพด เนองจากมสารตานอนมลอสระมากมายในนามะละกอสก ซงเกดจากสารตานอนมลอสระกระตนการสงสญญาณภายในเซลล (Cell Signaling) จนสงผลตอการเปลยนแปลงการแสดงออกของยนส (Gene Expression) ในเซลลประสาททาใหเกดการเปลยนแปลงทางโครงสรางของซนแนปส (Synaptic Plasticity) หรอเพมการไหลเวยนเฉพาะท (Spencer, 2009, pp. 1152-1161) และสารตานอนมลอสระในมะละกอสกยงมผลในการปก ปองระบบประสาททถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามนดวยกลไกการยบยงอนมลอสระทเกดจากสโคโพลามน และกลไกยบยงสโคโพลามนในการแยงจบกบตวรบอะเซทลโคลน (Muscarinic Cholinergic Receptor) ในสมองบรเวณ Frontal Cortex และ Hippocampus ทาใหสมองสวนนมปรมาณอะเซทลโคลนในปรมาณเพยงพอจงไมเกดความเสยหายของเซลลประสาท (Klinkenberg & Blokland, 2010, pp. 1307-1350) ความวตกกงวล การทดสอบความวตกกงวลโดยการเหนยวนาใหเกดความวตกกงวลดวยอปกรณ EPM ปรากฏวา หนเมาสสขภาพดหลงไดรบนากลน และนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน หนเมาสกลมทไดรบนากลนอยในแขนเปดทไมมผนงกน นอยกวากลมทไดรบนามะละกอสกแตกตางอยางม

88

นยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 ซงแสดงวา นามะละกอสกมผลในการลดความวตกกงวลในหนเมาสสขภาพด เมอหนเมาสทกกลมถกเหนยวนาใหความจาเสอมชวคราวซงสงผลใหมความวตกกงวลเพม ขนเมอเปรยบเทยบกบหนเมาสกลมทไดรบนากลน ดงนนแสดงวา สโคโพลามนมผลในการเพมความวตกกงวลในหนเมาส เนองจากอยในแขนเปดทไมมผนงกนนอยลง โดยหนเมาสกลมทไดรบนากลน กลมทไดรบนามะละกอทขนาด 2.5 g/kg BW มความวตกกงวลเพมขน ซงแตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 และ p<.01 ตามลาดบ กลมทไดรบนามะละกอสกขนาด 5.0 g/kg BW และ 7.5 g/kg BW มความวตกกงวลเพมขนเลกนอยซงไมแตกตางกนกบกอนเหนยวนาใหความจาเสอม และ หนเมาสทไดรบนามะละกอสกมความวตกกงวลนอยกวากลมทไดรบนากลนซงแตกตางกนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.01 โดยเฉพาะกลมทไดรบนามะละกอสกขนาดสงใหผลในการลดความวตกกงวลดทสด ซงแสดงวานามะละกอสกมผลตอการลดความวตกกงวลในหนเมาสสขภาพด และชวยปกปองไม ใหมความวตกกงวลเพมขนเมอเกดการเหนยวนาใหสมองเสอม ทงนอาจเปนผลจากในนามะละกอสกมสารตานอนมลอสระเปนจานวนมากซงมสวนชวยในการดกจบ (Entrapment) อนมลอสระในเซลลประสาททถกเหนยวนาใหเกดความเครยดออกซเดชน ความวตกกงวลจากอปกรณ EPM และสาร สโคโพลามน จงทาใหหนเมาสกลมทไดรบนามะละกอสกมความวตกกงวลนอยกวากลมทไดรบนากลน ซงสอดคลองกบงานวจยของ Zerihun and Workineh (2013) ปรากฏวา หนเมาสทไดรบสารสกดผลมะละกอ 100 mg/kg มการเพมของการอยในแขนเปดในอปกรณ EPM มากขน และอยในแขนปดลดลง ซงแสดงวาสารสกดผลมะละกอ 100 mg/kg BW มผลในการลดความวตกกงวลในหนเมาสอยางมนย สาคญทางสถต งานวจยของ Kazumasa et al., (2015) ทศกษาในมนษย ปรากฏวา นาผก และ นาผกผลไมรวม มผลในการลดภาวะซมเศรา และลดความวตกกงวลอยางมนยสาคญทางสถตเมอไดรบสารอยางตอเนองเปนระยะเวลา 12 สปดาหในเพศชายและ เพศหญง อาย 25-60 ป การควบคมการเคลอนไหว การควบคมการเคลอนไหวโดยดพฤตกรรมของหนเมาส ซงในการทดสอบนจะเนนพฤตกรรม Rearing เนองจากเปนพฤตกรรมหลกทตองใชกลไกการควบคมการเคลอนไหว ซงเปนการทางานทซบ ซอนของระบบประสาท และความแขงแรงของกลามเนอ ผลการทดสอบพฤตกรรม Rearing ของหนเมาสสขภาพดทไดรบนากลน และนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ปรากฏวา กลมทไดรบนามะละกอสกขนาด 2.5 g/kg BW มพฤตกรรม Rearing มากกวากลมทไดรบนามะละกอสกขนาดทสงกวา และกลมทไดรบนากลนนาอยางมนยสาคญทางสถต ทงนอาจเนองมาจากการออกฤทธของสารสาคญ คอ แคโรทนอยด (Carotenoid) ซงเปนสารตานอนมลอสระทมมากในนามะละกอสกหลงไดรบตอเนองเปนระยะเวลา 21 วน มผลสงเสรมใหในเซลลประสาทมระดบกาบา (Gamma Amino Butyric Acid: GABA) ในสมองอยในระดบสมดลจงทาใหการทางานของระบบประสาทสวนกลางเกดความสมดล ซง กาบาเปนสารสอประสาทชนดยบยงทจะชวยใหสมองเกดความผอนคลายชวยลดความเครยด หรอลดความวตกกงวล (Andrew, Ben, Sarah, Istvan, & Thomas, 2010) เมอเหนยวนาใหสมองของหนเมาสเกดสมองเสอมระยะแรกดวยสโคโพลามน ปรากฏวา หนเมาสทไดรบนามะละกอสกมพฤตกรรม Rearing ไมแตกตางจากกลมทไดรบนากลนหลงจากถกเหนยวนา ซงอาจเปนเพราะสารอนมลอสระในมะละกอมปรมาณไมมากเพยงพอทสามารถชวยฟนฟ หรอปกปองความเสอมสมรรถภาพของรางกายได ซงสอดคลองกบงานวจยของ Ike et al., (2014) ปรากฏวา

89

หนเมาสทไดรบ โสมสกดชนด k-g3 (Ginseol k-g3) ขนาด (12.5, 25, 50, 100 และ 200 mg/kg) และ โสมสกดชนด Rg3 (Ginseol Rg3) ขนาด (20 และ 40 mg/kg) ทง 2 ชนดและทกขนาดเปนระยะ เวลา 6 วน และถกเหนยวนาใหความจาเสอมดวยสโคโพลามน หลงจากนนนาไปทดสอบพฤตกรรมการเคลอนไหวโดยเฉพาะ Rearing ปรากฏวา ไมแตกตางจากกลมควบคม แสดงวา Ginseol k-g3 และ Ginseol Rg3 ไมมผลตอการปกปองระบบประสาทสวนทควบคมการเคลอนไหว งานวจยของ นวต เทพาวราพฤกษ และคณะ (2554) ปรากฏวา หนขาวแกทไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 3 เดอน ทดสอบสมรรถภาพทางกายโดยการไตบนราวไม และผลวดแรงยดเหนยวของอมเทา คหนา ปรากฏวา ไมแตกตางกบกลมควบคม ทงนอาจเปนเพราะโดยธรรมชาตหนแกจะมความแขงแรงของกลามเนอตา และนามะละกอสกไมไดมผลในการชวยฟนฟความเสอมสภาพของรางกายได ระบบประสาทรบความรสก ระบบประสาทรบความรสก (Sensory System) เปนสวนหนงของระบบประสาททตอบสนอง ตอกระบวนการการสรางขอมลความรสกตาง ๆ โดยระบบรบความรสกนนเปนระบบทรางกายสรางขน เพอทาหนาทในการตอบสนองตอสงเราทเขามากระตน โดยเฉพาะตวรบประสาทรบความเจบปวด (Nociceptor Receptor) เปนตวรบการกระตน และตอบสนองตอความรอน (ผาสก มหรรฆานเคราะห, 2556) ผลการทดสอบ Tail Immersion Test หลงจากไดรบสารทดสอบตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วนปรากฏวา หนเมาสทมสขภาพดกลมทไดรบนามะละกอสกมการตอบสนองตอความเจบปวดไมแตกตางกบหนเมาสกลมทไดรบนากลน ซงแสดงวานามะละกอสกไมไดมผลตอการตอบสนองความเจบปวดทเกดจากการเหนยวนาดวยความรอน หลงจากนนทาการเหนยวนาความจาเสอมดวยสโคโพลามนหลงจากไดรบนามะละกอสกตดตอกนเปนระยะเวลา 21 วน ปรากฏวา หนเมาสกลมทไดรบนามะละกอสกมการตอบสนองตอความเจบปวดไดดกวาหนเมาสกลมทไดรบนากลน โดยเฉพาะหนเมาสกลมทไดรบนามะละกอสกขนาด 5.0 g/kg BW ตอบสนองตอความเจบปวดไดดกวาหนเมาสกลมทไดรบนากลนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05 ทงนอาจเนองมาจากกลไกการเหนยวนาดวยสโคโพลามนทาใหเกดความเสยหายทเสนประสาทดานความเจบปวด (Neuropathic Pain) เนองจากมระดบของอนมลอสระทมากเกดจงทาใหระบบประสาทดานความเจบปวดเกดความเสยหายจงตอบสนองตอความเจบปวดไดชาเมอ หนเมาสกลมทไดรบนามะละกอสก ซงมสารตานอนมลอสระจานวนมากจงเขาจบกบอนมลอสระทเกดจากการเหนยวนาดวยสโคโพลามนจงสงผลตอการตอบสนองตอความเจบปวดไดดกวาหนเมาสกลมทไดรบนากลน แตอยางไรกตามยงไมสามารถสรปไดชดเจนเกยวกบกลไกการปกปองการเสอมของเซลลประสาท รบความรสกยงคงตองมการศกษาตอไป ซงสอดคลองกบงานวจยของ Jeong, Sandesh, Jae, ill, Woon, and Jung (2013) ปรากฏวา หนเมาสทไดรบสาร VDDS Component ซงประกอบดวย (Vitamin B1, B2, B3, B5, B6, B7, B9, B12, Vitamin C, CoQ10, Green Tea and Ginkgo Biloba) ตอเนองเปนเวลา 12 วน และเหนยวนาใหสมองเสอมดวยสโคโพลามน มการตอบสนองตอความรอนไดดกวากลมทไดรบนากลนอยางมนยสาคญทางสถตทระดบ p<.05

90

ขอเสนอแนะในการน าไปใช 1. จากผลการวจยแสดงใหเหนวา มะละกอสกมผลตอกลไกการเรยนรและความจาใน

หนเมาส และยงสงผลตอการลดความวตกกงวล ซงจากผลการทดลองดงกลาว อาจใชเปนขอมลทางโภชนาการเพอเปนทางเลอกในการดแลผปวยภาวะสมองเสอมระยะแรก และผปวยภาวะซมเศรา ทงยงเปนทางเลอกในการปกปองภาวะสมองเสอมระยะแรกอกดวย 2. จากผลการวเคราะหสารเบตาแคโรทนในมะละกอสกพนธศรสภา พบวา มปรมาณเบตาแคโรทนมากกวาในมะละกอพนธฮอลแลนด ซงเปนพนธทนยมบรโภคสก และมราคาแพงเมอเทยบกบมะละกอพนธอน ดงนน ขอมลทไดนาจะทาใหมการบรโภคมะละกอพนธศรสภาเพมขน ขอเสนอแนะในการวจยตอไป

1. จากผลการวจยพฤตกรรมทางระบบประสาท เปรยบเทยบระหวางกลมทไดรบนามะละกอสก พบวา ยงไมมความแตกตางระหวางกลมทงน อาจเนองมาจากขนาดของนามะละกอสกทใหมความแตก ตางกนไมมากพอ ดงนน อาจมการเพมขนาดของนามะละกอสกใหตางกนมากกวาน 2. กลมตวอยางทใชในครงนมเฉพาะหนเมาสเพศผ ในการศกษาตอไปควรมหนเมาสเพศเมยเพอจะไดศกษาวา ฮอรโมนเพศมอทธพลหรอไมมตอการปกปองภาวะสมองเสอมดวยมะละกอสก 3. ควรมการวดระดบการเปลยนแปลงของสารชวเคมในเนอเยอสมอง (Brain Tissue) เพอตรวจสอบการเปลยนแปลงของระดบสารสอประสาททสาคญเพอเปนการยนยนผลการทดลองอกครงหนง ในกลไกทอาจจะเกดขนไดในระดบโมเลกล

บรรณานกรม

กรมสขภาพจต กระทรวงสาธารณสข. (2552). เวชศาสตรผสงอาย. กรงเทพฯ: กรมการแพทย. กระทรวงเกษตร และสหกรณ. Thaifruits-Online.com. วนทคนขอมล 15 พฤศจกายน 2557, เขาถง

ไดจาก http://www.thaifruitsonline.com. กมมนต พนธจนดา. (2543). สมองเสอมโรคเรอรง. กรงเทพฯ: โครงการจดพมพคบไฟ. จารพนธ ทองแถม. (2555). พชมหศจรรยโลกวกฤต. กรงเทพฯ: เศรษฐศลป, 467. จนตนาภรณ วฒนธร, สภาพร มชฌมะประ, วภาว บญกวาง และคณะ. (2557). การส ารวจศกยภาพ

ของมะมวงในการปกปอง และเพมประสทธภาพการท างานสมอง. Oxidative Medicine and Cellular Longevity, ID 132097, 7.

จราภรณ นคมทศน. (2556). กจกรรมตานอนมลอสระและปรมาณฟนอลคของผกพนบานบางชนดในอ าเภอลบแล จงหวดอตรดตถ. วารสารการประชมวชาการแหงชาต มหาวทยาลย เกษตรศาสตร วทยาเขตก าแพงแสน, (10), 2280-2287.

เจนจรา จรมย และประสงค สหานาม. (2554). อนมลอสระและสารตานอนมลอสระ: แหลงทมาและกลไกการเกดปฏกรยา. วารสารวชาการมหาวทยาลยราชภฏกาฬสนธ, 1(1), 59.

ชาญชย สาดแสงจนทร. (2556). พรมมสมนไพรเพอสขภาพสมอง. ธรรมศาสตรเวชสาร, 13, 554-559. นนทยา สมภาร, จรญญาพร เนาวบตร, ศภเกต แสนทวสข และอจฉราพร แถวหมอ. (2556). การศกษา

ฤทธตานอนมลอสระของสารสกดผกแพวในหลอดทดลองและในรางกายของหนแรท. ธรรมศาสตรเวชสาร, 14(1), 60-71.

นวต เทพาวราพฤกษ, พรณรนทร เทพาวราพฤกษ, รตตยา สมบตทวกล และสภาพรรณ เอกอฬารพนธ. (2554). โครงการผลบ ารงระบบประสาทของมะมวง มะละกอ และน ามะพราวออนตอความจ าและสมรรถภาพทางกายในหนแก. สนบสนนโดยส านกงานกองทนสนบสนนการวจย(สกว.), 1-92.

ปรชญา แกวแกน, เทอดไทย ทองอน, จนตนาภรณ วฒนธร และคณะ. (2012). ศกยภาพของผลหมอนในการปองกนการตายของเซลลประสาททเหนยวน าโดยภาวะสมองขาดเลอดในโรคหลอดเลอดสมอง. Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine, ID 263520. 9.

พรณรนทร เทพาวราพฤกษ, นวต เทพาวราพฤกษ และสธรา เลศตระกล. (2552). โครงการการทดสอบ ฤทธของสารสกดจากกากชาเขยวตอการเรยนรและความจ า. สนบสนนโดยส านกงานกองทนสนบสนนการวจย (สกว.), 1-120.

พรณรนทร เทพาวราพฤกษ, นวต เทพาวราพฤกษ และสภาพรรณ เอกอฬารพนธ. (2553). โครงการทดสอบฤทธของกลวยในการฟนฟภาวะความจ าบกพรองและฤทธตานความกงวลในหนแรท. สนบสนนโดยส านกงานกองทนสนบสนนการวจย (สกว.), 1-97.

พฒนยา ปรางทพย, เอมอร วสนตวสทธ และแฮรอลด ซ เฟอร. (2553). แคโรทนอยด: โพรวตามนเอ ฤทธในการตานอนมลอสระ และประโยชนเชงสขภาพ. Journal of Nutrition Association of Thailand, 45(1), 153-163.

92

มงคล คงเสน, อจฉรา นยมเดชา, วาฟาอ หาญณรงค และพนม สขจนทร. (2556). การรวบรวมคณสมบตและประโยชนของตนลกใตใบ. Princess of Naradhiwas University Journal, 153-163.

ไมตร สทธจตต, รตนา บรรเจดพงศชย, วรพล คคงวรยพนธ, และคณะ. (2555). อนมลอสระและสารตานอนมลอสระ. สมาคมเพอการวจยอนมลอสระไทย, 17-39, 115.

วรนทร กฤตยาเกยรณ. (2554). ระบบประสาทการรบรความรสกของขอตอในนาฏศลปนไทย. วารสารสถาบนวฒนธรรมและศลปะ, 77-84.

วนย ดะหลน. (2550). เอกสารประกอบการบรรยาย "โภชนาการพนฐานเพอการมสขภาพสมบรณสงสด”, 760.

วระศกด สาม. (2548). แคโรทนอยด: โครงสรางทางเคมและกลไกทมผลตอการท าหนาทของรางกาย.SWU J Pharm Sci. 2005, 10(1), 58-66.

ศรวรรณ ศรบญ และ ชเนตต มลนทางก. (2551). ฐานขอมลประชากร (ฝายวจย และศนยสารสนเทศฯ). จฬาลงกรณมหาวทยาลย. เขาถงไดจาก http://www.cps. chula.ac.th/cps/.

ศนยสตวทดลองแหงชาต มหาวทยาลยมหดล. ต.ศาลายา อ.พทธมณฑล จ.นครปฐม. วนทเขาถง 11 พฤศจกายน 2557 เขาถงไดจาก http://www.nlac.mahidol.ac.th/. nlacth/index.php?option= com_content&view=article&id=93&Itemid=177.

สาธน ธรรมรกษา. (2551). ผลของการฝกโปรแกรมไบโอพคแบครวมกบการฝกสรางจนตนาการตอระดบความวตกกงวลของผปวยทอยในภาวะวตกกงวล, 1-93.

สกญญา เขยวสะอาด. (2555). กะเพรากบการตานอนมลอสระ. วารสารวทยาศาสตรลาดกระบง, 21(2), 54-65.

สธาทพ ภมรประวต. (2552). “มะละกอ ตานอนมลอสระ” นตยสารหมอชาวบาน, เลมท: 360 เดอน/ป: เมษายน 2552 .วนทคนขอมล 11 พฤศจกายน 2558. คอลมน: บทความพเศษ http://www.doctor.or.th /article/detail/6412.

อรรถสทธ เวชชาชวะ. (2550). Mild Cognitive Impairment. วารสารคลนก, 23, 543-552. อรวรรณ ศลปะกจ. (2556). การคดกรองโรคสมองเสอม. วารสารสขภาพจตแหงประเทศไทย, 21(1),

34-47. อาภรณ สวรรณเจษฏาเลศ. (2554). กรมสขภาพจต กระทรวงสาธารณสข. เวชศาสตรผสงอาย,

กรงเทพฯ: กรมการแพทย http://www.dmh.go.th/1667/1667view.asp?id=4311 อาร ตณฑเจรญรตน. (2553). “โรคอลไซเมอร” วารสารศกษาศาสตร มหาวทยาลยนเรศวร, 12(2),

169-182.

Abbasi, E., Nassiri-Asl, M., Sheikhi, M., & Shafiee. M. (2013). “Effects of Vitexin on Scopolamine-Induced Memory Impairment in Rats”. Chinese Journal of Physiology, 56(3), 184-189. DOI: 10.4077/CJP.2013.BAB123.

Alex, E. W., & Kennedy T. D. (2013). An Applied Reference Guide to Research Designs. Arun, K., & Vijay, J. (2010). Effect of Green Tea on Scopolamine-Induced Memory

Impairment in Mice. Pharmacy Research, 3(10), 2359-2361.

93

Attry, D. P., Singh, A. K., Naved, T., & Roy, B. (2012). Effect of Seabuckthorn Extract on Scopolamine Induced Cognitive Impairment. Indian Journal of Experimental Biology, 50(10), 690-695.

Bast, A., Haeren, G., & Doelmen, C. (1991). “Oxidants and Antioxidants: State of Art”. American Journal of Medicine, 91, 2-13.

Blanchard, D. C., Griebel, G., & Blanchard, R. J. (2001). Mouse Defensive Behaviors: Pharmacological and Behavioral Assays for Anxiety and Panic. Neuroscience and Biobehavioral Reviews, 25, 205-218.

Briones, A. M., & Touyz, R. M. (2010). Oxidative Stress and Hypertension. Curr Hypertens Rep, 12, 135–142.

Chen, C. F., Chen, S. M., Chow, S. Y., & Han, P. W. (1981). Protective Effects of Carica papaya Linn on the Exogenous Gastric Ulcer in Rats. The American Journal of Chinese Medicine, 9, 205-212.

Chertkow, H., et al. (2008). Diagnosis and Treatment of Dementia: 3. Mild Cognitive Impairment and Cognitive Impairment Without Dementia. Canadian Medical Association Journal, 178(10), 1273-1285.

Clarkson, A. N., Huang, B. S., MacIsaac, S. E, Mody, I., & Carmichael, S. T. (2010). Reducing Excessive GABA-mediated Tonic Inhibition Promotes Functional Recovery After Stroke. Nuture International Weekly Journal of Science, 468, 305–309.

Dhingra, D., & Kumar, V. (2012). Memory-Enhancing Activity of Palmatine in Mice Using Elevated Plus Maze and Morris Water Maze. Advances in Pharmacological Sciences, e357368. doi:10.1155/2012/357368.

Elisabeth, P., & Rudi, E. (2008). Effect of Scopolamine on Hidden-and Visible-water Maze Learning and Retention Trial Performance in C57BL mice. Proceedingsn of Measuring Behavior, 26-29, 271-272.

Eno, A. E., Owo, O. I., Itam, E. H., & Konya, R. S. (2000). Blood Pressure Depression by the Fruit Juice of Carica papaya (L.) in Renal and DOCA-induced Hypertension in the Rat. Phytother Res, 14, 235-239.

Fan, Y., et al. (2005). Effect of Acidic Oligosaccharide Sugar Chain on Scopolamine-duced Memory Impairment in Rats and its Related Mevhanisms. Neuroscience Letters, 374(3), 222-226.

Frederick, J., Gravetter, L. B., & Forzano. (2012). Research Methods for the Behavioral Sciences (PSY 200 (300) Quantitative Methods in Psychology) (4th ed.). Wadsworth: Nelson Education Ltd.

Gauthier, et al. (2006) Mild cognitive Impairment. 367(9518), 1262-1270.

94

Gressier, B., Lebegue, S., & Brunet, C. (1994). Proxidant Properties of Methotrexate Evatuation and Prevention by an Antioxidant Drug. Archiv der Pharmazie-Chemistry in Life Science, 49, 679-681.

Gurung, S., & Skalko, B. N. (2009). Wound Healing Properties of Carica papaya Latex: in Vivo Evaluation in Mice Burn Model. Journal of Ethnopharmacology, 121, 338-341.

Halliwell, B. (2009). The Wanderings of a Free Radical. Free Radical Biology and Medicine, 46, 531-542.

Hernandez, O. M., et al. (2012). Antioxidant, Antinociceptive, and Anti-inflammatory Effects of Carotenoids Extracted from Dried Pepper (Capsicum annuum L.). Journal of Biomedicine and Biotechnology, 2012, 524019. doi: 10.1155/2012/524019.

Hoge, J., & Kesner, R. P. (2007). Role of CA3 and CA1 Subregions of the Dorsal Hippocampus on Temporal Processing of Objects. Neurobiology Learn Memory, 88, 225–231.

Howe, J. A., & Tanumihardjo, S. A. (2006) Evaluation of Analytical Methods for Carotenoid Extraction from Biofortified Maize (Zea mays sp.). J. Agric. Food Chem, 54(21), 7992–7997. DOI: 10.1021/jf062256f.

Hughes, R. N., Desmond, C. S., & Fisher, L. C. (2004). Room Novelty, Sex, Scopolamine and their Interactions as Determinants of General Activity and Rearing, and Light-dark Preferences in Rats. Behavioral Processes, 67(2), 173-181. doi: 10.1016/j.beproc.2004.03.021.

Imao, K., Wang, H., Komatsu, M., & Hiramatsu, M. (1998). Free Radical Scavenging Activity of Fermented Papaya Preparation and its Effect on Lipid Peroxide Level and Superoxide Dismutase Activity in Iron-induced Epileptic Foci of Rats. Biochemistry and Molecular Biology International, 45, 11-23.

Isobe, K., et al. (2015). “Vegetable Juices Improved Depression and Anxiety in Slightly Depressed Individuals”. Journal of Family Medicine & Community Health, 2(2), 1030.

Jeong, E. J., Lee, K. Y., Kim, S. H., Sung, S. H., & Kim, Y. C., (2008). Cognitive-enhancing and Antioxidant Activities of Iridoid Glycosides from Scrophularia Buergeriana in Scopolamine-treated Mice. European Journal of Pharmacology, 588, 78–84.

John, C. S., & Breitner. (2014). Mild Cognitive Impairment and Progression to Dementia. American Academy of Neurology, 34-35. DOI 10.1212/WNL. 00000000000158.

Joseph, J. A., et al. (1999). Reversals of Age-related Declines in Neuronal Signal Transduction, Cognitive, and Motor Behavioral Deficits with Blueberry, Spinach, or Strawberry Dietary Supplementation. J Neurosci, 19, 8114-8121.

95

Joseph, J. A., Shukitt, H. B., & Lau, F. C. (2007). Fruit Polyphenols and their Effects on Neuronal Signaling and Behavior in Senescence. Annals of the New York Academy of Sciences, 1100, 470-485.

Joseph, J. A., Shukitt, H. B., & Willis, L. M. (2009). Grape Juice, Berries, and Walnuts Affect Brain Aging and Behavior. The Journal of nutrition, 139, 1813-1817.

Kebebew, Z., & Shibeshe, W. (2013). Evalution of Anxiolytic and Sedative of 80% Ethanolic Carica papaya L. (Caricaceae) Pulp Extract in Mice. Journal of Ethnopharmacology, 150(2), 665-671.

Klinkenberg, I. & Blokland, A. (2010). The Validity of Scopolamine as a Pharmacological Model for Cognitive Impairment: A Review of Animal. Behavioral Studies Neuroscience and Biobehavioral, 34(2010), 1307–1350.

Krinsky, N. I. & Johnson, E. J. (2005). Carotenoid Actions and their Relation to Health and Disease. Molecular Aspects of Medicine, 26(6), 459–516.

Krishna, K. L., Paridhavi, M. P., & Jagruti, A. (2008). Review on nutritional, medicinal and Pharmacological Properties of Papaya (Carica Papaya Linn.) Natural Product Radiance, 7(4), 364-373.

Kuhad A., & Chopra. (2007). Lycopene Ameliorates Thermal Hyperalgesia and Cold Allodynia in STZ-induced Diabetic Rat. Indian Journal of Experimental Biology, 46, 108-111.

Lee, M. J., et al. (2013). AMELIORATIVE EFFECT OF NOVEL VITAMIN FORMULA WITH HERBAL EXTRACTS ON SCOPOLAMINE-INDUCED ALZHEIMER’S DISEASE. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research, (6), 175-179.

Marcela, H., et al. (2012). Antioxidant, Antioxidant, Antinociceptive, and Anti-Inflammatory Effects of Carotenoids Extracted from Dried Pepper (Capsicum annuum L.). Journal of Biomedicine and Biotechnology, ID 524019, 10.

Morris, R. G. (1984). Development of a Water-Maze Procedure for Studying Spatial Learning in Rat, J. Neurosci Methods, 11(1), 47-80.

Mumby D. G. (2001). Perspectives on Object-Recognition Memory Following Hippocampal Damage: Lessons from Studies in Rats, Behavior Brain Res, 127(1), 159-181.

Nakabeppu, Y., et al. (2006). “Mutagenesis and Carinogensis Caused by the Oxidation of Nucleie Acids” Journal of Biological Chemistr, 387, 373-382.

Noda, Y., Murakami, S., Mankura, M., & Mori, A. (2008). Inhibitory Effect of Fermented Papaya Preparation on Hydroxyl Radical Generation from Methylguanidine. Journal of Clinical Biochemistry and Nutrition, 43, 185-190.

96

Obulesua, M., Dowlathabadb, M. R., & Bramhacharic, P. V. (2011). Carotenoids and Alzheimer’s Disease: An Insight into Therapeutic Role of Retinoids in Animal Models. Neurochemistry International, 59(5), 535–541.

Oloyede, O., Roos, D., & Rocha, J. (2012). Studies on the Antioxidant Potential of Extracts from Unripe Fruit of Carica papaya. Journal of Life Science, 6, 41-47.

Otsuki, N., et al. (2010). Aqueous Extract of Carica papaya Leaves Exhibits Anti-tumor Activity and Immunomodulatory Effects. Journal of Ethnopharmacology, 127, 760-767.

Pachauria, S. D., et al. (2010). Protective Effect of Fruits of Morinda Citrifolia L. on Scopolamine Induced Memory Impairment in Mice: A Behavioral, Biochemical and Cerebral Blood Flow Study. Journal of Ethnopharmacology, 7132, 1-8.

Pellow, S., Chopin, P., File, S.E., & Briley, M. (1985). Validation of Open: Closed Arm Entriesin an Elevated Plus-maze as a Measure of Anxiety in the Rat. Journal Neurosci, 14, 149–167.

Pena, I. D., et al. (2013). Effect of Ginseol k-g3, an Rg3-enriched Fraction, on Scopolamine-induced Memory Impairment and Learing Deficit in Mice. Journal of Ginseng Research, 38(1), 1-7.

Pepeu, G. (2004). Mild Cognitive Impairment: Animal Models. Dialogues Clin Neurosci, 6, 369-377.

Preventio, N. Y., Klinkenberg, I., & Blokland, A. (2010). The Validity of Scopolamine as a Pharmacological Model for Cognitive Impairment: A Review of Animal Behavioral Studies. Neurosciences & Biobehavior Reviews, 34(8), 1307-1350.

Ramakrishna, S., et al. (2010). Anti-amnesic Activity of Vitexnegundo in Scopolamine Induced Amnesia in Rats. Pharmacology and Pharmacy, 1(1), 1-8.

Rao, A. V., & Rao, L. G. (2007). Carotenoids and Human Health. Pharmacological Research, 55, 207-216.

Riviere, C., et al. (2008). New Polyphenols active on β-amyloid Aggregation. Bioorganic & Medicinal Chermistry Letters, 18, 828-831.

Sadek, K. M. (2012). Antioxidant and Immunostimulant Effect of Carica Papaya Linn. Aqueous Extract in Acrylamide Intoxicated Rats. Academy of Medical Sciences of Bosnia and Herzegovina, 20(3), 180-185.

Sala, A. V. (2005). Indian Medicinal Plants: A Compendium of 500 Species. India: Orient Longman Private Ltd.

Sanchez, M. C., Jimenez, E. A., & Saura, C. J. (2000). “Study of Low-density Lipoprotein Oxidizability Indexes to Measure the Antioxidant Activity of Dietary Polyphenols”. Nutrition Research, 20, 941-953.

97

Schweiggert, R. M., et al. (2013). Carotenoids are more Bioavailable From Papaya than From Tomato and Carrot in Humans: A Randomised Cross-over Study. Br J Nutr, 111(3), 490–498.

Sies, H., Stahl, W., & Sundquist, A., (1992). “Antioxidant Functions of Vitamins, Vitamin E and C, Beta-carotene and other Carotenoids”. Annals of the New York Academy of Sciences, 368, 7-19.

Spencer J. P. (2009). The Impact of Flavonoids on Memory: Physiological and Molecular Considerations. Chem. Soc. Rev, 38, 1152–1161.

Sripanidkulchai, B., Wongpanich, V., Laupattarakasem, P., Suwansaksri, J., & Jirakulsomchok, D. (2001). Diuretic Effects of Selected Thai Indigenous Medicinal Plants in Rats. Journal of Ethnopharmacology, 75, 185-190.

Stepanichev, M., Zdobncva, I., Zarubenko, I., Lazareva, N., & Gulyaeva, N. V. (2006). Differential Effects of Tumor Necrosis Factor-alpha Co-administered with Amyloid Beta-peptide (25-35) on Memory Function and Hippocampal Damage in Rat. Behavioural Brain Research, 175, 352-361.

Sule, Elekwa, & Joeea. (2012). Morphological and Biochemical Effects of Dried Leaves of Carica papaya Linn. (Pawpaw) on the Liver in Wistar Rats. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Sciences, 15(01). 2230-7885.

Udaya, L. P., Divya, A., & Priyanka, R. (2015). A Review on Medicative Plants Touching Memory Loss on Hyoscine Evoked. Plant Biochemistry & Physiology, 3(1), 1-4.

USDA dietary Guidelines for Americans. (2010). Chapter 4 Foods and Nutrients to Increase. Received October 30, 2014. from: http://origin.www.cnpp.usda.gov/ Publications/DietaryGuidelines/2010/PolicyDoc/Chapter4.pdf

Valacchi, G., et al. (2004). In Vivo Ozone Exposure Induces Antioxidant/Stress-related Responses in Murine Lung and Skin. Free Radical Biology and Medicine, 36(5), 673-681.

Valko, M., Leibfritz, D., Moncol, J., Cronin, M. T., Mazur, M., & Telser, J. (2007). Free Radicals and Antioxidants in Normal Physiological Functions and Human Disease. The International Journal of Biochemistry & cell biology, 39(1), 44-84.

Voest, E. E., Vreugdenhil, G., & Marx, J. J. M. (1994). Iron-chelating Agents in Non-iron Overload Conditions. Annals of Internal Medicine, 120(6), 490-499.

World Health Organization (WHO). (2015). Dementia. Received October 30, 2014. from: http://www.who.int/mediacentre/factsheets/fs362/en/

Zhang, J., Mori, A., Chen, Q., & Zhao, B. (2006). Fermented Papaya Preparation Attenuates β-amyloid Precursor Protein: β-amyloid–mediated Copper Neurotoxicity in β-amyloid Precursor Protein and β-amyloid Precursor Protein Swedish Mutation Overexpressing SH-SY5Y Cells. Neuroscience, 143(1), 63-72.

ภาคผนวก

ภาคผนวก ก

แบบบนทกขอมลการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน 1. การเรยนรและความจ าดวยอปกรณ MWM และ NOR

2. ความวตกกงวลดวยอปกรณ EPM 3. การควบคมการเคลอนไหวดวยอปกรณ Exploratory Box Behavior Test 4. ระบบประสาทรบความรสกดวยอปกรณ Tail Immersion Test

100

การเรยนรและความจ า Morris Water Maze

แบบบนทกเวลา (วนาท) การทดสอบการวายน าหาแทนใตน าในอปกรณ MWM ของหนเมาส

กลมท................................................ วนท .......................เดอน.......................พ.ศ...............................

ตวท น าหนก (กรม)

คร งท 1 (วนาท)

คร งท 2 (วนาท)

คร งท 3 (วนาท)

คร งท 4 (วนาท)

1 2 3 4 5 6 7

แบบบนทกเวลา (วนาท) การทดสอบการเรยกคนความจาเกาในอปกรณ MWM ของหนเมาส

กลมท................................................ วนท .......................เดอน....................... พ.ศ............................

ตวท น าหนก (กรม)

คร งท 1 (วนาท)

คร งท 2 (วนาท)

คร งท 3 (วนาท)

คร งท 4 (วนาท)

1 2 3 4 5 6 7

การทดสอบการเรยนรและความจา ในอปกรณ MWM ท งการวายหาแทนใตน า และการเรยกคนความจาเกา ใชเวลาท งหมดตอการทดสอบ 1 คร ง 60 วนาท จะทาการทดสอบ 4 คร งตอหนเมาส 1 ตว โดยการวนรอบการทดสอบแลวหาคาเฉลยเวลาทวายหาแทน และการเรยกคนความจาเกา

101

การเรยนรและความจ า Novel Object Recognition Test

แบบบนทกเวลา (วนาท) การทดสอบการจดจาวตถสงของในอปกรณ NOR ของหนเมาส

กลมท................................................ วนท .......................เดอน.......................พ.ศ.............................

ตวท น าหนก (กรม)

เวลาทสารวจวตถเกา (วนาท)

เวลาทสารวจวตถใหม (วนาท)

1 2 3 4 5 6 7

การทดสอบการจดจาวตถสงของในอปกรณ NOR ของหนเมาส เรมบนทกเวลาเมอหนเมาสใชจมกเขาใกลวตถนอยกวา 2 ซม. ไมจบเวลาทเดนรอบ ๆ หรอนงบนวตถ เวลาทปลอยใหหนสารวจวตถเกา และวตถใหมในชวงการทดสอบ (Testing Phase) ใชเวลาท งหมด 5 นาท

102

ความวตกกงวล

แบบบนทกเวลา (วนาท) การทดสอบความวตกกงวลในอปกรณ EPM ของหนเมาส กลมท................................................ วนท .......................เดอน....................... พ.ศ...........................

ตวท น าหนก (กรม)

เวลาทอยในแขนเปด (Open Arms) (วนาท)

เวลาทอยในแขนปด (Closed Arms) (วนาท)

1 2 3 4 5 6 7

การทดสอบความวตกกงวล โดยปลอยหนเมาสตรงกลางทางเดนรปกากบาท เรมจบเวลาทหนเมาสเดนเขาแตละแขน ท งหมดใชเวลา 3 นาท

103

การควบคมการเคลอนไหว

แบบบนทกจานวนคร งทหนทาพฤตกรรม Grooming Rearing และ Licking

ในอปกรณ Exploratory Box Behavior Test ของหนเมาส กลมท................................................ วนท .......................เดอน.......................พ.ศ.............................

ตวท น าหนก (กรม)

Grooming (จานวนคร ง)

Rearing (จานวนคร ง)

Licking (จานวนคร ง)

1 2 3 4 5 6 7

การทดสอบพฤตกรรม Grooming Rearing และ Licking โดยการสงเกตพฤตกรรมทหนเมาสแสดงในกลองศกษาพฤตกรรม ใชเวลาท งหมด 3 นาท

104

ระบบประสาทรบความรสก

แบบบนทกเวลา (วนาท) การทดสอบการตอบสนองตอความเจบปวด ในอปกรณ Tail Immersion Test ของหนเมาส

กลมท................................................ วนท .......................เดอน....................... พ.ศ............................

ตวท น าหนก (กรม)

คร งท 1 (วนาท)

คร งท 2 (วนาท)

คร งท 3 (วนาท)

คร งท 4 (วนาท)

1 2 3 4 5 6 7

การทดสอบการตอบสนองตอความเจบปวดในอปกรณ Tail Immersion Test โดยการนาหางของหนเมาสแชในน าอนอณหภม 45-50 องศาเซลเซยส เรมจบเวลาต งแตเรมแชหางจนกระท งหนเมาสสะบดหาง ทาการทดสอบท งหมด 4 คร งตอหนเมาส 1 ตว โดยการวนรอบการทดสอบ หาคาเฉลยเวลาทหนเมาสตอบสนองตอความรอน

ภาคผนวก ข

อปกรณทใชในการทดสอบพฤตกรรมทางระบบประสาท 4 ดาน 5 อปกรณ 1. Morris Water Maze Test: MWM

2. Novel Object Recognition Test: NOR 3. Elevated Plus Maze Test: EPM 4. Exploratory Box Behavior Test 5. Tail Immersion Test

106

การเรยนรและความจ า

การเรยนรและความจ า เกยวกบทศทาง และสถานทโดยการวายน า

(Morris Water Maze Test)

ภาพ ข-1 อปกรณทดสอบการเรยนร และความจ าเกยวกบทศทาง และสถานทโดยการวายน (Morris Water Maze Test)

การทดสอบการเรยนรและความจ า เกยวกบทศทาง และสถานท ดวย MWM ท าการแบงอางทรงกลมเปน 4 โซน และตดสญลกษณ (Visual Cue) ทขอบอางทรงกลม ยกเวน โซนทมแทนใตน า (Platform) จากน นปลอยหนเมาสทโซนใดกได ยกเวน โซนทมแทนใตน าจบเวลาทหนเมาสวายหาแทนใตน า และในการทดสอบการดงเอาความจ าเกากลบคน (Retention Test) น าเอาแทนใตน าออกแลวท าการปลอยหนเมาสในโซนใดกได ยกเวน โซนทเคยมแทนใตน าจบเวลาทหนเมาสวายอยในโซนทเคยมแทนใตน าใชเวลาการทดสอบ 60 วนาท

Platform

Visual Cue

107

การเรยนรและความจ า เกยวกบการจดจ าวตถสงของทเคยเหน หรอสมผสกอนหนาเพยง 10 นาท (Novel Object Recognition Test)

ภาพ ข-2 การเรยนรและความจ า เกยวกบการจดจ าวตถสงของทเคยเหน หรอสมผสกอนหนาเพยง 10 นาท แบงการทดสอบเปน 2 ชวง ชวงแรกเปนชวงการฝก (Training Phase) ใหคนเคยกบวตถทมลกษณะเหมอนกนเปนระยะเวลา 5 นาท หลงจากน นน าหนเมาสไปพกในกรงพก 10 นาท ระหวางหนเมาสพกใหท าความสะอาดวตถ และกลองทดสอบ ดวยแอลกอฮอล (Alcohol) เขมขนรอยละ 70 ชวงทดสอบ (Testing Phase) เมอครบ 10 นาท น าหนเมาสตวเดมมาวางตรงกลางวตถเกา และ วตถใหม จบเวลาทหนเมาสสนใจวตถแตละอนในเวลา 5 นาท น าเวลาทหนเมาสสนใจวตถแตละอนมาหาคาดชนความจ า (Recognition Index)

ก.Training Phase ข.Testing Phase

10 min

108

ความวตกกงวล

การเหนยวน าใหหนเมาสมความวตกกงวลดวยอปกรณทางเดนรปกากบาท Elevated Plus Maze Test

ภาพ ข-3 การเหนยวน าใหหนเมาสมความวตกกงวลดวยทางเดนรปกากบาท โดยธรรมชาตหนจะอยในแขนทมผนงก น เมอใดทหนอยในแขนทไมมผนงก นจะรสกกลว วตกกงวล และจะไมเขาแขนทไมมผนงก น ท าการปลอยหนเมาสตรงกลางทางเดนรปกากบาทจบเวลาทหนเมาสเขาแตละแขน ใชเวลาการทดสอบ 3 นาท

109

การควบคมการเคลอนไหว

การสงเกตพฤตกรรมของหนเมาสโดยดจากพฤตกรรม 3 แบบ ไดแก Grooming Rearing และ Licking Exploratory Box Behavior Test

ภาพ ข-4 การสงเกตพฤตกรรมของหนเมาสโดยดจากพฤตกรรม 3 แบบ ไดแก Grooming Rearing และ Licking บนทกจ านวนคร งทหนเมาสท าพฤตกรรมแตละแบบ ใชเวลาในการสงเกตพฤตกรรมของหนเมาสท งหมด 3 นาท

110

ระบบประสาทรบความรสก

การเหนยวน าใหหนเมาสรสกเจบปวดดวยความรอน โดยดเวลาการตอบสนอง (Response time) Tail Immersion Test

ภาพ ข-5 การเหนยวน าใหหนเมาสรสกเจบปวดดวยความรอน โดยดเวลาการตอบสนอง (Response Time) น าหางหนเมาสจมในน าอนอณหภม 45-50 องศาเซลเซยส จบเวลาต งแตจมหางจนกระท งหนเมาสสะบดหาง

ภาคผนวก ค

ตวอยางการค านวณ 1. ตวอยางการค านวณการปอนน ามะละกอสก

2. ตวอยางการค านวณการฉดสารสโคโพลามน 3. ตวอยางการค านวณดชนความจ าดวยอปกรณ NOR

112

ตวอยางการค านวณ

การปอนน ามะละกอสก โดยเทยบน าหนกตวของหนเมาสทก ๆ วนทปอนน ามะละกอสก

กลมท.................2................วนท .......30................เดอน.........ตลาคม...............พ.ศ..........2557.........

ตวท น าหนก (กรม)

น ามะละกอสก (2.5 g/kg BW) (ml)

1 39 0.098 0.1 2 40 0.100 0.1 3 38 0.095 0.1 4 41 0.103 0.1 5 40 0.100 0.1 6 39 0.098 0.1 7 38 0.095 0.1

การคานวณน ามะละกอสก 2.5 g/kg BW

หนเมาสหนก 39 กรม (g) จะไดรบมะละกอสกก กรม (g) ใชวธการเทยบบญญตไตรยางศ น าหนกตว 1000 กรม จะไดรบน ามะละกอสกขนาด 2.5 กรม ถาน าหนกตว 39 กรม จะไดรบน ามะละกอสกขนาด (39 x 2.5)/1000 = 0.1 กรม จากการชงน าหนก น ามะละกอสก 100 กรม (g) จะเทากบ 100 มลลลตร (ml) จงสรปไดวา น ามะละกอสก 0.1 กรม (g) จะเทากบ 0.1 มลลลตร (ml) (หมายเหต: ขนาดของน ามะละกอทหางกนเลกนอย ≤ 0.001 ถอวาไมมผลตอการเกดปฏกรยา)

113

ตวอยางการค านวณ

ปรมาตรในการฉดสโคโพลามน (Scopolamine) 2 mg/kg BW ทชองทอง โดยเทยบกบน าหนกตวของหนเมาสแตละตว

กลมท.................2................วนท .......30................เดอน.........ตลาคม...............พ.ศ..........2557.........

ตวท น าหนก

(กรม) สโคโพลามน

(mg) สโคโพลามน

(ml) 1 39 0.078 0.195≈0.2 2 40 0.080 0.2 3 38 0.076 0.190≈0.2 4 41 0.082 0.195≈0.2 5 40 0.080 0.205≈0.2 6 39 0.078 0.195≈0.2 7 38 0.076 0.190≈0.2

การคานวณสารสโคโพลามน 2 มลลกรมตอกโลกรม

หนเมาสหนก 39 กรม (g) จะไดรบมะละกอสกก กรม (g) ใชวธการเทยบบญญตไตรยางศ น าหนกตว 1000 กรม จะไดรบสโคโพลามน 2 มลลกรม ถาน าหนกตว 39 กรม จะไดรบน ามะละกอสกขนาด (39 x 2)/1000 = 0.078 มลลกรม สโคโพลามนทนามาใชในการทดลองมขนาด 20 มลลกรมตอมลลลตร ตองทาการเจอจางสโคโพลามนในน ากลน 49 มลลลตร ดงน น มสโคโพลามน 20 มลลกรม ในสารละลาย 50 มลลลตร ถาตองการสโคโพลามน 0.078 มลลกรม จะตองดดสารละลายเทากบ (0.078X50)/20 = 0.195 มลลลตร

114

ตวอยางการค านวณดชนความจ า

ในการทดสอบการเรยนรและความจา ดานการจดจาวตถสงของดวยอปกรณ Novel Object Recognition Test

กลมท.................1................วนท .......30................เดอน.........ตลาคม...............พ.ศ..........2557.........

ตวท น าหนก (กรม)

เวลาทสารวจวตถเกา (วนาท)

เวลาทสารวจวตถใหม (วนาท)

1 39 105 52 2 40 95 60 3 38 70 56 4 41 59 90 5 40 50 115 6 39 65 115 7 38 115 60

Object Recognition Index = [TC/ (TA + TC)] x 100

เมอ TA เปนเวลาทหนเมาสสารวจวตถช นเกาในชวง Testing Phase

TC เปนเวลาทหนเมาสสารวจวตถช นใหมในชวง Testing Phase

ตวท 1 Object Recognition Index = [52/ (105 + 52)] x 100 = 33.121

ตวท น าหนก (กรม)

เวลาทสารวจวตถเกา (วนาท)

เวลาทสารวจวตถใหม (วนาท)

ดชนความจา (%Recognition index)

1 39 105 52 33.121 2 40 95 60 38.710 3 38 70 56 44.444 4 41 59 90 60.403 5 40 50 115 69.700 6 39 65 115 63.889 7 38 115 60 34.286

ภาคผนวก ง

ภาพวธการปอนน ามะละกอสกดวยเขมปอนขนาด 1.5 น ว

(Oral Administration by Gavage)

116

การปอนน ามะละกอสกใหหนเมาส

ภาพ ง การปอนน ามะละกอสกใหหนเมาส โดยการปอนทางปากดวยเขมปอน (Oral Administration by Gavage) ขนาด 1.5 น ว

ภาคผนวก จ

การเตรยมน ามะละกอสก

118

การเตรยมน ามะละกอสก

มะละกอทน ำมำทดสอบฤทธแคโรทนอยดเปนมะละกอสกพนธศรสภำ เรมจำกกำรน ำมะละกอสกมำปลอกเปลอกออก ลำงใหสะอำดแลวน ำมำหนเปนชนเลก ๆ น ำมำปนละเอยดในเครองปนน ำผลไม จำกนนน ำเนอมะละกอสกปนเหลวผสมกบน ำกลนในอตรำสวน 3 : 2 โดยเนอมะละกอสกปนเหลว 60 มลลลตร (ml) น ำกลน 40 มลลลตร (ml) โดยหนเมำสกลมท 2, 3 และ 4 จะไดรบน ำมะละกอสกทขนำด 2.5, 5.0, 7.5 g/kg BW ตำมล ำดบ โดยกำรปอนทำงปำกดวยเขมปอน (Oral Administrator by Gavage) ขนำด 1.5 นว ทกวนวนละ 1 ครง เปนระยะเวลำ 21 วน

ก. ข. ภาพ จ มะละกอพนธศรสภำ (Srisupa Papaya) เปนพนธผสมระหวำงมะละกอพนธแขกนวลกบ มะละกอพนธฮอลแลนด ภำพ ก. เปนผลสกของมะละกอพนธศรส ภำพ ข. น ำมะละกอสกพนธศรสภำ

119

ตาราง จ ปรมำตรของน ำมะละกอ (ml) ในกำรปอนหนเมำสโดยเทยบจำกน ำหนกตว (g) ของ หนเมำส

Low Dose 2.5 g/kg Medium Dose 5.0 g/kg High Dose 7.5 g/kg Weight of mice (g)

Volume Papaya

juice (ml)

Weight of mice (g)

Volume Papaya

juice (ml)

Weight of mice (g)

Volume Papaya

juice (ml) 33 0.1 33 0.3 33 0.4 34 0.1 34 0.3 34 0.4 35 0.2 35 0.3 35 0.4 36 0.2 36 0.3 36 0.5 37 0.2 37 0.3 37 0.5 38 0.2 38 0.3 38 0.5 39 0.2 39 0.3 39 0.5 40 0.2 40 0.3 40 0.5 41 0.2 41 0.3 41 0.5 42 0.2 42 0.4 42 0.5 43 0.2 43 0.4 43 0.5 44 0.2 44 0.4 44 0.6 45 0.2 45 0.4 45 0.6 46 0.2 46 0.4 46 0.6

ภาคผนวก ฉ

ผลการวเคราะหสารเบตาแคโรทน

121

ภาคผนวก ช

ใบรบรองการอนมตใหด าเนนการเล ยงและใชสตว (งานวจยภายใตการดแลของ ดร.ปรชญา แกวแกน)

123

124

ประวตยอของผวจย

ชอ-สกล นางสาวฉตราภรณ สวสดยภานนท วน เดอน ปเกด 1 มกราคม 2523 สถานทเกด จงหวดกรงเทพมหานคร สถานทอยปจจบน 306/63 หม 5 ซอย 7 หมบานโกลเดนปารค ต าบลสรศกด อ าเภอศรราชา จงหวดชลบร 20210 ประวตการศกษา พ.ศ. 2548 วทยาศาสตรบณฑต (เคม) มหาวทยาลยรามค าแหง พ.ศ. 2558 วทยาศาสตรมหาบณฑต (การวจยและสถตทางวทยาการปญญา) มหาวทยาลยบรพา ผลงานทางวชาการ Sawatdiyaphanon Chattraporn and Kaewkaen Pratchaya. (2015). Behavioral Effect of Carica papaya Linn. Fruit Juice in Animal Model of Mild Cognitive Impairment Mice. in Burapha University International Conference 2015. “Moving Forward to Prosperous and Sustainable Community”; July 10-12, 2015 Bangsaen Heritage Hotel Chonburi (423-429). Thailand. Burapha University.